Single-cell profiling reveals a memory B cell-like subtype of follicular lymphoma with increased transformation risk.

Follicular lymphoma (FL) is an indolent cancer of mature B-cells but with ongoing risk of transformation to more aggressive histology over time. Recurrent mutations associated with transformation have been identified; however, prognostic features that can be discerned at diagnosis could be clinically useful. We present here comprehensive profiling of both tumor and immune compartments in 155 diagnostic FL biopsies at single-cell resolution by mass cytometry. This revealed a diversity of phenotypes but included two recurrent patterns, one which closely resembles germinal center B-cells (GCB) and another which appears more related to memory B-cells (MB). GCB-type tumors are enriched for EZH2, TNFRSF14, and MEF2B mutations, while MB-type tumors contain increased follicular helper T-cells. MB-type and intratumoral phenotypic diversity are independently associated with increased risk of transformation, supporting biological relevance of these features. Notably, a reduced 26-marker panel retains sufficient information to allow phenotypic profiling of future cohorts by conventional flow cytometry.

Single Cell Phenotypic Profiling of 27 DLBCL Cases Reveals Marked Intertumoral and Intratumoral Heterogeneity.

Diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) is the most common histologic subtype of non-Hodgkin lymphoma and is notorious for its clinical heterogeneity. Patient outcomes can be predicted by cell-of-origin (COO) classification, demonstrating that the underlying transcriptional signature of malignant B-cells informs biological behavior in the context of standard combination chemotherapy regimens. In the current study, we used mass cytometry (CyTOF) to examine tumor phenotypes at the protein level with single cell resolution in a collection of 27 diagnostic DLBCL biopsy specimens from treatment naïve patients. We found that malignant B-cells from each patient occupied unique regions in 37-dimensional phenotypic space with no apparent clustering of samples into discrete subtypes. Interestingly, variable MHC class II expression was found to be the greatest contributor to phenotypic diversity. Within individual tumors, a subset of cases showed multiple phenotypic subpopulations, and in one case, we were able to demonstrate direct correspondence between protein-level phenotypic subsets and DNA mutation-defined subclones. In summary, CyTOF analysis can resolve both intertumoral and intratumoral heterogeneity among primary samples and reveals that each case of DLBCL is unique and may be comprised of multiple, genetically distinct subclones. © 2019 International Society for Advancement of Cytometry.

Eltrombopag inhibits the proliferation of leukemia cells via reduction of intracellular iron and induction of differentiation.

Eltrombopag (EP) is a small-molecule, nonpeptide thrombopoietin receptor (TPO-R) agonist that has been approved recently for the treatment of thrombocytopenia in patients with chronic immune thrombocytopenic purpura. Prior studies have shown that EP stimulates megakaryopoiesis in BM cells from patients with acute myeloid leukemia and myelodysplastic syndrome, and the results also suggested that it may inhibit leukemia cell growth. In the present study, we studied the effects of EP on leukemia cell proliferation and the mechanism of its antiproliferative effects. We found that EP leads to a decreased cell division rate, a block in G(1) phase of cell cycle, and increased differentiation in human and murine leukemia cells. Because EP is species specific in that it can only bind TPO-R in human and primate cells, these findings further suggested that the antileukemic effect is independent of TPO-R. We found that treatment with EP leads to a reduction in free intracellular iron in leukemic cells in a dose-dependent manner. Experimental increase of intracellular iron abrogated the antiproliferative and differentiation-inducing effects of EP, demonstrating that its antileukemic effects are mediated through modulation of intracellular iron content. Finally, determination of EP's antileukemic activity in vivo demonstrated its ability to prolong survival in 2 mouse models of leukemia.

Evaluación de la tolerancia a anestésicos locales en pacientes con antecedentes de alergia a medicamentos: experiencia en 153 casos / Allergy to local anesthetics: evaluation of 153 cases

Estudiamos 153 pacientes que consultaron por necesitar aplicarse un anestésico local (AL) para intervenciones médico-quirúrgicas u odontológicas y que referían antecedentes de reacciones alérgicas a anestésicos locales y otros medicamentos. Dividimos a los pacientes en 4 grupos. Grupo 1 (n=20): antecedentes de reacciones alérgicas o pseudoalérgicas definidas a un anestésico local. Grupo 2 (n=2): antecedentes de reacciones alérgicas definidas a más de un anestésico local. Grupo 3 (n=48): antecedentes de reacciones dudosas a uno o más anestésicos locales. Grupo 4 (n=83): antecedentes de reacciones alérgicas o pseudoalérgicas a otros medicamentos. En todos los pacientes efectuamos a Prueba de Provocación Progresiva Controlada (PPPC). En el grupo 1 utilizamos un AL alternativo. En el grupo 2 utilizamos un AL sin conseravadores. En el grupo 3 y en grupo 4 utilizamos indistintamente el mismo AL o uno alternativo. En los 2 pacientes del grupo 2 efectuamos previamente a la PPPC el Test de Degranulación de Basófilos Humanos (RDBH) con anestésicos con y sin conservadores y con metilparabeno. A su vez afectuamos prick test, intradermorreacción y prueba del parche con metilparabeno. Los AL locales utilizados fueron: lidocaína, bupivacaína, carticaína y prilocaína. Los resultados fueron los siguientes: 150 pacientes toleraron el AL mediante la PPPC. Tres pacientes presentaron reacciones adversas. Dos pacientes, uno del grupo 3 y uno del grupo 4 presentaron reacciones alérgicas o pseudosalérgicas que cedieron con antihistamínicos y corticoides. Las pruebas cutáneas fueron negativas en ambos casos. En el paciente del grupo 4 efectuamos TDBH con lidocaína sin conservadores que fue positivo y TDBH con metilparabeno que fue negativo. Un paciente del grupo 3 presentó reacción tóxica por intolerancia a la lidocaína. Los 3 pacientes toleraron un anestésico local alternativo mediante la PPPC. En 2 pacientes demostramos que las reacciones adversas relatadas en los antecedentes se debieron a los parabenos, ya que el TDBH fue positivo para el metilparabeno y negativo para los anestésicos y los pacientes toleraron luego el AL sin conservadores. Las pruebas cutáneas con metilparabeno fueron negativas. En ningún caso observamos reacción cruzada entre AL del grupo amida. Concluímos lo siguiente: 1) La PPPC es un método seguro y efectivo para prevenir las reacciones alérgicas o pseudoalérgicas a AL. 2) Las pruebas cutáneas no tienen valor para el diasgnóstico y la prevención de estas

Evaluación de la tolerancia a anestésicos locales en pacientes con antecedentes de alergia a medicamentos: experiencia en 153 casos / Allergy to local anesthetics: evaluation of 153 cases

Estudiamos 153 pacientes que consultaron por necesitar aplicarse un anestésico local (AL) para intervenciones médico-quirúrgicas u odontológicas y que referían antecedentes de reacciones alérgicas a anestésicos locales y otros medicamentos. Dividimos a los pacientes en 4 grupos. Grupo 1 (n=20): antecedentes de reacciones alérgicas o pseudoalérgicas definidas a un anestésico local. Grupo 2 (n=2): antecedentes de reacciones alérgicas definidas a más de un anestésico local. Grupo 3 (n=48): antecedentes de reacciones dudosas a uno o más anestésicos locales. Grupo 4 (n=83): antecedentes de reacciones alérgicas o pseudoalérgicas a otros medicamentos. En todos los pacientes efectuamos a Prueba de Provocación Progresiva Controlada (PPPC). En el grupo 1 utilizamos un AL alternativo. En el grupo 2 utilizamos un AL sin conseravadores. En el grupo 3 y en grupo 4 utilizamos indistintamente el mismo AL o uno alternativo. En los 2 pacientes del grupo 2 efectuamos previamente a la PPPC el Test de Degranulación de Basófilos Humanos (RDBH) con anestésicos con y sin conservadores y con metilparabeno. A su vez afectuamos prick test, intradermorreacción y prueba del parche con metilparabeno. Los AL locales utilizados fueron: lidocaína, bupivacaína, carticaína y prilocaína. Los resultados fueron los siguientes: 150 pacientes toleraron el AL mediante la PPPC. Tres pacientes presentaron reacciones adversas. Dos pacientes, uno del grupo 3 y uno del grupo 4 presentaron reacciones alérgicas o pseudosalérgicas que cedieron con antihistamínicos y corticoides. Las pruebas cutáneas fueron negativas en ambos casos. En el paciente del grupo 4 efectuamos TDBH con lidocaína sin conservadores que fue positivo y TDBH con metilparabeno que fue negativo. Un paciente del grupo 3 presentó reacción tóxica por intolerancia a la lidocaína. Los 3 pacientes toleraron un anestésico local alternativo mediante la PPPC. En 2 pacientes demostramos que las reacciones adversas relatadas en los antecedentes se debieron a los parabenos, ya que el TDBH fue positivo para el metilparabeno y negativo para los anestésicos y los pacientes toleraron luego el AL sin conservadores. Las pruebas cutáneas con metilparabeno fueron negativas. En ningún caso observamos reacción cruzada entre AL del grupo amida. Concluímos lo siguiente: 1) La PPPC es un método seguro y efectivo para prevenir las reacciones alérgicas o pseudoalérgicas a AL. 2) Las pruebas cutáneas no tienen valor para el diasgnóstico y la prevención de estas

Angiodema hereditario (AEH): acción del danazol sobre el C4 y C1INH funcional

Sobre 51 pacientes diagnosticados con AEH, se tomaron cuatro pacientes que no hubieron tenido tratamiento androgénico anterior, lo que determino una población heterogénea. Se evaluó el C4, CH50, C1NH funcional y antigénico, CIC (complejos inmunes circulantes), el día uno o basal. Se indica 400 mg/día de Ladogal (Danazol) y se extrae muestra de sangre los días 4, 7, 10, 14, y se mide cada uno de los parámetros iniciales, para valorar los efectos de la droga sobre cada uno de ellos. Al día 14, desaparecen los CIC, se incrementa el C4 y CH50, mientras que el C1NH, antigénico y funcional no varía en forma significativa. Por ello, consideramos que el Ladogal, actúa incrementando el C4 y CH50, aclarando el plasma de CIC y/o enzimas activantes del C1 y Factor Hageman. Simultaneamente estimula la síntesis del C1NH, que no se pone en evidencia, hasta que no desaparezca la activación. Proponemos el esquema de 14 días de 400 mg/día de Ladogal, seguidos de cúatro días de descanso, en pacientes Tipo I y II de AEH