Evaluación de los efectos mutagénicos/antimutagénicos de Luehea divaricata en ratones / Evaluation of the mutagenic / antimutagenic effects of Luehea divaricata in mice

La Luehea divaricata Mart. conocida popularmente en el Paraguay como "ka´aovetî o ka´aovetîpytâ", es una planta nativa de la región utilizada como fitoterápico. El objetivo de este trabajo fue el de investigar el efecto protector del extracto acuoso de las hojas de L. divaricata frente al quimioterápico ciclofosfamida, en médula ósea de ratones. Los animales fueron divididos en 4 grupos de 5 animales cada uno; el Grupo I, control negativo, que recibió 200 µL de agua, vía oral; el Grupo II, que recibió 200 µL del extracto acuoso de L. divaricata; el Grupo III, que recibió 200 µL del extracto acuoso de L. divaricata y ciclofosfamida, 50 mg/Kg de peso de animal y el Grupo IV, fue el control positivo, recibió ciclofosfamida 50mg/Kg/peso de animal. El extracto acuoso de L. divaricata fue administrado por vía oral y el tratamiento se administró por 48h, la ciclofosfamida fue administrada por vía intraperitoneal 24h antes del sacrifico del animal .Se extrajo la médula ósea de los animales y se realizó el ensayo de micronúcleo en todas las muestras. Los resultados indicaron que el extracto acuoso de L. divaricata no presentó actividad mutagénica, cuando combinado con el agente mutagénico induce una reducción de hasta 49% en la frecuencia de micronúcleos, al ser comparado con el tratamiento con ciclofosfamida, sugiriendo un potencial efecto protector frente a agentes tóxicos.

The Luehea divaricata Mart. is a plant native, popularly known in Paraguay as "ovetîka'a”or “ovetîka'aPytá" of the region used as herbal medicines. The aim of this study was toinvestigate the protective effect of aqueous extract from the leaves of L. divaricata versuscyclophosphamide chemotherapy. The animals were divided in 4 groups and each grouphave 5 animals, Group I, negative control, which received 200 uL of water, orally; Group II,which received 200 uL of aqueous extract of L. divaricata; Group III, which received 200 uLof the aqueous extract of L. divaricata and cyclophosphamide, 50 mg / kg animal weight;Group IV, positive control, cyclophosphamide received 50mg / kg / animal weight. Theaqueous extract of L. divaricata was orally administered and the treatment wasadministered for 48 hs, cyclophosphamide was administered intraperitoneal and had 24hours of treatment. Bone marrow of the animals is removed and micronucleus assay wasperformed on all samples. The results indicated that aqueous extract of L. divaricata showedno mutagenic activity and when combined with the mutagen agent induces a reduction ofup to 41% in the frequency of micronucleus, when compared to treatment withcyclophosphamide, suggesting a potential protective effect against toxic agents.

Tribulus terrestris hydroalcoholic extract effect on cisplatin-induced apoptosis in mice kidney / Efecto del extracto hidroalcohólico de Tribulus terrestris sobre la apoptosis Inducida por cisplatino en el riñón de ratones

Cisplatin (EBEWE Pharma, Unterach, Austria) is an anti-cancer drug used in chemotherapy. One of the limiting major side effects of cisplatin is nephrotoxicity. Tribulus terrestris (TT) has been used as an synthetic or herbal protective agents for kidney disorders. The present study amid to investigate the Tribulus terrestris Hydroalcoholic extract effect on cisplatin-induced apoptosis in mice kidney. Male adult mice (n= 30) were divided into control group and 4 experimental groups (n= 6). Control group received saline, the first experimental group received cisplatin (5.5 mg/kg) and other three experimental groups received cisplatin (5.5 mg/kg) and different doses of hydroalcoholic extact of TT (100, 300 and 500 mg/kg i.p) respectively. The kidneys were removed after 4 days of injections, and TUNEL assay on mice's kidneys were performed. Weights of body and kidneys and apoptotic index were assessed. Data analysis was performed using one-way ANOVA followed by Tukey's post hoc test. The results showed that cisplatin lead to a reduction in the weight of body and kidney (P <0.01), and increased apoptotic index significantly compared to the control group (P <0.001), while in treated groups with TT, the weights of body and kidney were significantly higher compared with cisplatin group, but apoptotic index did not show significant differences. These parameters reached normal range after administration of fruit extracts of TT for 4 days. The study demonstrates that extract of TT could have protective effect on cisplatin- induced apoptosis of kidney. This may be related to the presence of antioxidant components acting via a multitude of central and peripheral mechanisms.

El cisplatino (EBEWE Pharma, Unterach, Austria) es un medicamento contra el cáncer utilizado en quimioterapia. Uno de los principales efectos secundarios limitantes del cisplatino es la nefrotoxicidad. Tribulus terrestris (TT) ha sido utilizado como agente protector sintético o herbal para los trastornos renales. El objetivo fue investigar el efecto del extracto hidroalcohólico de TT sobre la apoptosis inducida por cisplatino en el riñón de ratones. Se utilizaron ratones adultos machos (n= 30), que fueron divididos en 4 grupos, un control y tres grupos experimentales (n= 6). El grupo control recibió solución salina; el primer grupo experimental recibió cisplatino (5,5 mg/kg) y los otros tres grupos experimentales recibieron cisplatino (5,5 mg/kg) con diferentes dosis de extracto hidroalcohólico de TT (100, 300 y 500 mg/kg vía ip) respectivamente. Los riñones fueron retirados después de 4 días de aplicadas las inyecciones, y se realizó el ensayo TUNEL en los riñones. Se evaluó el peso corporal de los ratones, el peso de los riñones y el índice de apoptosis. El análisis de datos se realizó mediante ANOVA de un factor seguido por la prueba post hoc de Tukey. Los resultados mostraron que el cisplatino con plomo provocó una reducción en el peso corporal y el riñón (P <0,01) y un aumento significativo del índice de apoptosis en comparación con el grupo control (P <0,001), mientras que en los grupos tratados con TT, los pesos corporales y de los riñones fueron significativamente mayores en comparación con el grupo de cisplatino, pero el índice de apoptosis no mostró diferencias significativas. Estos parámetros alcanzaron niveles normales después de la administración de extracto de TT durante 4 días. El estudio demuestra que el extracto de TT podría tener un efecto protector sobre la apoptosis inducida por cisplatino en el riñón, que podría estar relacionado con la presencia de componentes antioxidantes que actúan a través de múltiples mecanismos centrales y periféricos.

Efecto protector del extracto acuoso de las hojas de Peumus boldus Boldo en la toxicidad hepática inducida por rifampicina en ratas Holtzman hembra / Protective effect of aqueous extract of the leaves of Peumus boldus, Boldo, in liver toxicity induced by rifampicin in female Holtzman rats

Objetivo: Determinar el efecto protector del extracto acuoso de las hojas de Peumus boldus "Boldo" en la toxicidad hepática inducida por rifampicina en ratas Holtzman hembra. Materiales y métodos: Se realizó un estudio experimental completo. Se adquirieron 24 ratas Holtzman hembra, y fueron divididas, aleatoriamente, en 4 grupos: A (control), B (rifampicina 100 mg/kg), C (silimarina 200 mg/kg y rifampicina 100 mg/kg) y D (boldo 160 mg/kg y rifampicina 100 mg/kg). Dicho protocolo se realizó por 14 días. Se analizaron variables clínica, bioquímicas (se realizó perfil hepático antes y después del experimento) y morfológica. Se compararon las medias de los grupos mediante la prueba de Kruskall Wallis y se consideró significativo p<0,05. Resultados: Al finalizar el experimento, las ratas del grupo B perdieron más peso (16,41+/-17,94 gr), tuvieron mayor elevación de bilirrubinas totales (0,25+/-0,13), bilirrubina directa (0,21+/-0,12), TGP (48,83+/-17,72) y sus hígados fueron más congestivos, pesaron y midieron más. Las proteínas totales (0,66+/-0,38) y albúmina (0,33+/-0,35) del grupo B fueron menores comparado con los grupos C y D. No se halló diferencia significativa en cuanto a la bilirrubina indirecta, globulina y TGP. Los hígados del grupo B mostraron mayores cambios histopatológicos (5,33+/-0,51) en comparación con los demás grupos. Conclusiones: el extracto acuoso de las hojas de Peumus boldus posee efecto protector en la toxicidad hepática inducida por rifampicina en ratas Holtzman hembra.

Objective: To determinate the protective effect the aqueous extract of the leaves of Peumus boldus "Boldo" on rifampicin-induced liver toxicity in female Holtzman rats. Materials and methods: A complete experimental study was conducted 24 female Holtzman rats were used. They were divided in 4 groups: A (control), B (rifampicin 100 mg/kg), grupo C (silimarina 200 mg/kg and rifampicin 100 mg/kg) y D (boldo 160 mg/kg and rifampicin 100 mg/kg). Rifampicin was administrated one hour after treatment in groups C and D. This protocol was carried out for 14 days. Clinical, biochemical (liver function test were performed before and after the experiment) and morphological variables were analyzed. Means were compared using the Kruskall Wallis test and results were considered significant when p<0.05. Results: At the end of the experiment, rats from group B were the ones who lost more weight, (16.41+/-17.94 g), showed grater elevation of total bilirubin (0.25+/-0.13), direct bilirubin (0.21+/-0.12), TGP (48.83+/-17.72), and whose livers were found to be more congestive, were bigger and weighed more. Whereas leaves of total proteins (0.66+/-0.38) and albumin (0.33+/-0.35) in group B were lower than in other groups. No significant difference was found in levels of indirect bilirubin, globulin and TGO. More intense morphological changes were found in livers of the group B (5.33+/-0.51) compared with other groups. Conclusions: After analyzing clinical, biochemical and morphological parameter, it can be concluded that the aqueous extract of leaves of Peumus boldus has protective effect on rifampicin-induced liver toxicity in female Holtzman rats.

Efecto protector del extracto acuoso de las hojas de Peumus boldus Boldo en la toxicidad hepática inducida por isoniazida en ratas Holtzman hembra / Protective effect of aqueous extract of the leaves of Peumus boldus, Boldo, in liver toxicity induced by isoniazid in female Holtzman rats

Objetivo: Determinar el efecto protector del extracto acuoso de las hojas de Peumus boldus "Boldo" en la toxicidad hepática inducida por isoniazida en ratas Holtzman hembra. Materiales y métodos: se utilizaron 24 ratas Holtzman hembra, divididas en 4 grupos: A (control), B (isoniazida 50 mg/kg), grupo C (silimarina 200 mg/kg e isoniazida 50 mg/kg) y D (boldo 160 mg/kg e isoniazida 50 mg/kg). Dicho protocolo se siguió por 14 días. Se determinó el efecto protector mediante análisis clínico, bioquímico y morfológico. Se presentan los datos con sus medias y desviaciones estándares. Se compararon las medias de los grupos experimentales mediante la prueba de Kruskall-Wallis, considerándose significativo un p<0.05. Resultados: se halló que el grupo B disminuyó más de peso (16,41+/-17,94 gr), presentó mayor elevación de bilirrubinas totales (0,25+/-0,13), bilirrubina directa (0,2+/-0,11), TGO (51.83+/-18.55) y TGP (29+/-13,72), en comparación con el grupo A, C y D. Se halló también menor elevación de proteínas totales (0,49+/-0,62) y albuminas (0,33+/-0,35) en el grupo B, en comparación con los demás grupos. No se halló diferencia significativa entre los grupos en cuanto a la variación de bilirrubina indirecta (p=0,104) y globulinas (p=0,144). Los hígados del grupo B mostraron un aspecto congestivo, fueron más grandes y pesaron más; y mostraron mayor vacuolización perinuclear, congestión sinusoidal y desorganización de la arquitectura celular. Según la escala de Dalaklioglu et. al., el grupo B presentó mayor daño (5,83+/-0,75) en comparación con los grupos A (0,33+/-0,51), C (2,5+/-1) y D (0,83+/-O,4). Conclusiones: El extracto acuoso de Peumus boldus posee efecto protector en la toxicidad hepática inducida por isoniazida en ratas Holtzman hembra, evidenciado mediante parámetros clínicos, bioquímicos y morfológicos.

Objective: To determinate the protective effect the aqueous extract of the leaves of Peumus boldus "Boldo" on isonizaid-induced liver toxicity in female Holtzman rats. Materials and methods: 24 female Holtzman rats were used. They were divided, randomly, in 4 groups: A (control), B (isoniazida 50 mg/kg), group C (silimarina 200 mg/kg and isoniazida 50 mg/kg) y D (boldo 160 mg/kg and isoniazida 50 mg/kg). This protocol was followed, daily for 14 days. Before and after the experiment, biochemical analyzes were made. The protector effect was determinate by clinical, biochemical and morphological analyzes. Data is presented in its mean and standard deviation. Means were compared using the Kruskall Wallis test and results were considered significant when p<0.05. Results: Rats of group B decreased more in weight (16.41+/-17.94 g), showed higher elevation in total bilirrubins (0.25+/-0.13), direct bilirrubin (0.2+/-0.11), TGO (51.83+/-18.55) and TGP (29+/-13.72), compared with groups A, C and D. Also, total proteins (0.49+/-0.62) and albumin (0.33+/-0.35) were lower in rats of group B, compared with the other groups. No significant difference was found in indirect bilirrubin and globulins. Livers of group B were more congestive, bigger and heavier than the other groups. Also, they showed more perinuclear vacuolization, sinusoidal congestion and disarrangement of cellular arquitecture. According to Dalaklioglu et al. scale, group B showed to be more damaged (5.83+/-0.75) than groups A (0.33+/-0.51), C (2.5+/-1) and D (0.83+/-0.4). Conclusions: The aqueous extract of Peumus boldus has protective effect on isoniazid-induced liver toxicity in female Holtzman rats, evidenced by clinical, biochemical and morphological parameters.