Asunto(s)
Anticuerpos Monoclonales/inmunología , Citometría de Flujo/normas , Inmunofenotipificación/normas , Leucemia Linfocítica Crónica de Células B/diagnóstico , Humanos , Leucemia Linfocítica Crónica de Células B/sangre , Leucemia Linfocítica Crónica de Células B/patología , Masculino , Persona de Mediana Edad , Patología Molecular/normas , Patología Molecular/tendenciasRESUMEN
Multiparameter flow cytometry is a highly sensitive, fast, and specific diagnostic technology with a wide range of applicability in hematology. Although well-established eight-color immunophenotyping panels are already available, most Brazilian clinical laboratories are equipped with four-color flow cytometer facilities. Based on this fact, the Brazilian Group of Flow Cytometry (Grupo Brasileiro de Citometria de Fluxo, GBCFLUX) for standardization of clinical flow cytometry has proposed an antibody panel designed to allow precise diagnosis and characterization of acute leukemia (AL) within resource-restricted areas. Morphological analysis of bone marrow smears, together with the screening panel, is mandatory for the primary identification of AL. The disease-oriented panels proposed here are divided into three levels of recommendations (mandatory, recommendable, and optional) in order to provide an accurate final diagnosis, as well as allow some degree of flexibility based on available local resources and patient-specific needs. The proposed panels will be subsequently validated in an interlaboratory study to evaluate its effectiveness on the diagnosis and classification of AL. (Assoc editor comm. 2).
Asunto(s)
Biomarcadores de Tumor/inmunología , Citometría de Flujo/normas , Inmunofenotipificación/normas , Leucemia Mieloide Aguda/diagnóstico , Linfocitos/inmunología , Células Mieloides/inmunología , Leucemia-Linfoma Linfoblástico de Células Precursoras/diagnóstico , Anticuerpos/química , Antígenos CD/genética , Antígenos CD/inmunología , Biomarcadores de Tumor/genética , Brasil , Color , Análisis Citogenético , Citometría de Flujo/métodos , Colorantes Fluorescentes , Humanos , Inmunofenotipificación/métodos , Leucemia Mieloide Aguda/genética , Leucemia Mieloide Aguda/inmunología , Leucemia Mieloide Aguda/patología , Linfocitos/clasificación , Linfocitos/patología , Células Mieloides/clasificación , Células Mieloides/patología , Guías de Práctica Clínica como Asunto , Leucemia-Linfoma Linfoblástico de Células Precursoras/genética , Leucemia-Linfoma Linfoblástico de Células Precursoras/inmunología , Leucemia-Linfoma Linfoblástico de Células Precursoras/patologíaRESUMEN
Currently, multiparameter flow cytometry immunophenotyping is the selected method for the differential diagnostic screening between reactive lymphocytosis and neoplastic B-cell chronic lymphoproliferative disorders (B-CLPD). Despite this, current multiparameter flow cytometry data analysis approaches still remain subjective due to the need of experienced personnel for both data analysis and interpretation of the results. In this study, we describe and validate a new automated method based on vector quantization algorithms to analyze multiparameter flow cytometry immunophenotyping data in a series of 307 peripheral blood (PB) samples. Our results show that the automated method of analysis proposed compares well with currently used manual approach and significantly improves semiautomated approaches and, that by using it, a highly efficient discrimination with 100% specificity and 100% sensitivity can be made between normal/reactive PB samples and cases with B-CLPD based on the total B-cell number and/or the sIgkappa+/sIglambda+ B-cell ratio. In addition, the method proved to be able to detect the presence of pathologic neoplastic B-cells even when these are present at low frequencies (<5% of all lymphocytes in the sample) and in poor-quality samples enriched in 'noise' events.
Asunto(s)
Citometría de Flujo/métodos , Citometría de Flujo/normas , Inmunofenotipificación/métodos , Inmunofenotipificación/normas , Leucemia de Células B/diagnóstico , Linfocitosis/diagnóstico , Artefactos , Diagnóstico Precoz , Citometría de Flujo/estadística & datos numéricos , Humanos , Inmunofenotipificación/estadística & datos numéricos , Leucemia de Células B/sangre , Subgrupos Linfocitarios , Linfocitosis/sangre , Tamizaje Masivo/métodos , Tamizaje Masivo/normas , Tamizaje Masivo/estadística & datos numéricos , Variaciones Dependientes del Observador , Reproducibilidad de los Resultados , Sensibilidad y EspecificidadRESUMEN
Las neoplasias de células plasmáticas resultan de la expansión de un clon de células B que secreta inmunoglobulinas, conocido como componente monoclonal o componente M. Las neoplasias malignas incluyen al mieloma múltiple y la macroglobulinemia de Waldenström, y la condición premaligna comprende las gammapatías monoclonales de significado incierto (MGUS). El MGUS presenta un componente monoclonal sin evidencia de mieloma múltiple, macroglobulinemia de Waldenström, amiloidosis primaria u otros desórdenes. El diagnóstico se basa en la combinación de características patológicas, radiológicas y clínicas. Aproximadamente el 25% de las gammapatías monoclonales de significado incierto desarrollarán mieloma múltiple, amiloidosis sistémica, macroglobulinemia o enfermedades linfoproliferativas malignas, indicando que sería una condición premielomatosa. El objetivo del presente trabajo es establecer la utilidad clínica de la inmunofenotipificación por citometría de flujo (CF) y la detección de clonalidad por biología molecular. Se estudiaron 32 pacientes, siete con diagnóstico de mieloma múltiple y veinticinco con gammapatía monoclonal em estudio, los cuales fueron divididos en cuatro grupos basados en los datos clínicos y los resultados de CF. Em el grupo de pacientes con CF no diagnóstica, se realizó la detección de los rearreglos de los genes de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR), detectándose monoclonalidad en el 59% de los casos. El estudio de los rearreglos de los genes de las cadenas pesadas de las IgH mediante PCR incrementa la sensibilidad de detección de monoclonalidad.
Asunto(s)
Persona de Mediana Edad , Anciano de 80 o más Años , Humanos , Masculino , Femenino , Médula Ósea/patología , Reordenamiento Génico/genética , Fragmentos de Inmunoglobulinas/genética , Inmunofenotipificación/normas , Paraproteinemias/genética , Reacción en Cadena de la Polimerasa/normas , Biopsia con Aguja Fina , Mieloma Múltiple/genética , Mieloma Múltiple/patología , Paraproteinemias/patología , Sensibilidad y EspecificidadRESUMEN
Las neoplasias de células plasmáticas resultan de la expansión de un clon de células B que secreta inmunoglobulinas, conocido como componente monoclonal o componente M. Las neoplasias malignas incluyen al mieloma múltiple y la macroglobulinemia de Waldenstr÷m, y la condición premaligna comprende las gammapatías monoclonales de significado incierto (MGUS). El MGUS presenta un componente monoclonal sin evidencia de mieloma múltiple, macroglobulinemia de Waldenstr÷m, amiloidosis primaria u otros desórdenes. El diagnóstico se basa en la combinación de características patológicas, radiológicas y clínicas. Aproximadamente el 25% de las gammapatías monoclonales de significado incierto desarrollarán mieloma múltiple, amiloidosis sistémica, macroglobulinemia o enfermedades linfoproliferativas malignas, indicando que sería una condición premielomatosa. El objetivo del presente trabajo es establecer la utilidad clínica de la inmunofenotipificación por citometría de flujo (CF) y la detección de clonalidad por biología molecular. Se estudiaron 32 pacientes, siete con diagnóstico de mieloma múltiple y veinticinco con gammapatía monoclonal em estudio, los cuales fueron divididos en cuatro grupos basados en los datos clínicos y los resultados de CF. Em el grupo de pacientes con CF no diagnóstica, se realizó la detección de los rearreglos de los genes de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR), detectándose monoclonalidad en el 59% de los casos. El estudio de los rearreglos de los genes de las cadenas pesadas de las IgH mediante PCR incrementa la sensibilidad de detección de monoclonalidad. (AU)