Relationship between non-enzymatic glycosylation and changes in serum insulin-like growth factor-1 (IGF-1) and IGF-binding protein-3 levels in patients with type 2 diabetes mellitus.

The possible occurrence of increased non-enzymatic glycosylation of serum insulin-like growth factor binding protein-3 (IGFBP-3) in vivo and the changes that would simultaneously occur in serum levels of IGFBP-3 and insulin-like growth factor-1 (IGF-I) were investigated. We measured levels of IGF-I and IGFBP-3 and the degree of glycation of total serum protein and IGFBP-3, in serum samples obtained from patients with poorly controlled non-insulin-dependent diabetes (type 2) and from age-matched non-diabetic controls. Type 2 diabetic patients had significantly higher glycated serum protein (GlyP) levels. GlyP significantly correlated with age in the control (r = 0.315, P<0.05) but not in the type 2 diabetes group. Control and diabetic subjects had comparable serum IGF-I levels and in both groups IGF-I levels tended to decrease with age (r = -0.567, P<0.001 and r = -0.465, P<0.05 for control and type 2 diabetic subjects, respectively). In the type 2 diabetes group, IGF-I levels showed a negative correlation with serum GlyP values (r = -0.476, P<0.05). Type 2 diabetic and control patients had comparable serum IGFBP-3 levels, which were significantly higher in diabetic patients in the older age subgroups. A negative correlation was found between IGFBP-3 levels and age in the control (r = -0.705, P<0.001) and in the type 2 diabetes groups (r = -0.463, P<0.05). A significant negative correlation was found between IGFBP-3 levels and GlyP in control (r = -0.449, P<0.002) but not in type 2 diabetic subjects. The mean glycated IGFBP-3 (GlyIGFBP-3) levels were higher in the oldest type 2 diabetic patients. In these patients, GlyIGFBP-3 was negatively associated with IGF-I levels (r = -0.447, P<0.05). The IGF-I/IGFBP-3 molar ratio was significantly reduced in the 46-60-year-old type 2 diabetic group, whereas the IGF-I/IGFBP-3 ratio was positively and significantly correlated with GlyP levels only in the control group (r = 0.489, P<0.01). Our results show that: a) increased non-enzymatic glycosylation of IGFBP-3 occurs in vivo; and b) this effect is accompanied by an increase in IGFBP-3 levels. These results suggest that the IGF-I/IGFBP-3 system is another target for the metabolic derangements of type 2 diabetes. Its alterations might play a role in diabetic complications.

Evaluación de la presencia de autoanticuerpos anti-insulina en población general y otra con alta incidencia de los haplotipos HLA DR4 y DQW3 / Evaluation of the presence of anti-insulin autoantibodies in the general population and in a population with high incidence of haplotypes HLA DR4 y DQW3

La diabetes mellitus tipo 1 (insulinodependiente) es una enfermedad autoinmune en la cual, previo a sus manifestaciones clínicas, suelen detectarse marcadores tales como autoanticuerpos anti-insulina (IAA), anti-islote pancreático (ICA) y contra la enzima glutámico decarboxilasa (anti GAD) de las células insulares. Además, existen factores predisponentes para su padecimiento como ciertos haplotipos HLA. En este trabajo se determinó un valor de corte para los valores de IAA a partir del cual se consideró como positiva su presencia, evalúandose luego una población de personas no diabéticas, no obesas y sin antecedentes de diabetes. Paralelamente se estudiaron muestras de sangre obtenidas de dos poblaciones diferentes: una de 678 personas provenientes de la población general y otra formada por 196 personas procedentes de diferentes tribus de la Provincia de Formosa. También se determinó la correlación entre los IAA y el serotipo HLA. Los resultados indican que el 1.8 de la población presentó valores superiores a los obtenidos en la población control, porcentaje que se elevó al 7.11 en la población indígena, la cual posee una elevada frecuencia de los haplotipos HLA DR4 y DQW3. Además se observó que en la población general los valores menores de IAA correspondieron a los haplotipos DR1, DQW1, DR4 y DQW3, mientras que los mayores lo hicieron a los haplotipos DR4, DQW3 y DR7. Estos resultados, que conforman la mayor casuística argentina de IAA, permiten definir valores de corte útiles para su diagnóstico en nuestro medio y confirman en nuestra población la correlación descripta en otros países y poblaciones entre IAA

Evaluación de la presencia de autoanticuerpos anti-insulina en población general y otra con alta incidencia de los haplotipos HLA DR4 y DQW3 / Evaluation of the presence of anti-insulin autoantibodies in the general population and in a population with high incidence of haplotypes HLA DR4 y DQW3

La diabetes mellitus tipo 1 (insulinodependiente) es una enfermedad autoinmune en la cual, previo a sus manifestaciones clínicas, suelen detectarse marcadores tales como autoanticuerpos anti-insulina (IAA), anti-islote pancreático (ICA) y contra la enzima glutámico decarboxilasa (anti GAD) de las células insulares. Además, existen factores predisponentes para su padecimiento como ciertos haplotipos HLA. En este trabajo se determinó un valor de corte para los valores de IAA a partir del cual se consideró como positiva su presencia, evalúandose luego una población de personas no diabéticas, no obesas y sin antecedentes de diabetes. Paralelamente se estudiaron muestras de sangre obtenidas de dos poblaciones diferentes: una de 678 personas provenientes de la población general y otra formada por 196 personas procedentes de diferentes tribus de la Provincia de Formosa. También se determinó la correlación entre los IAA y el serotipo HLA. Los resultados indican que el 1.8 de la población presentó valores superiores a los obtenidos en la población control, porcentaje que se elevó al 7.11 en la población indígena, la cual posee una elevada frecuencia de los haplotipos HLA DR4 y DQW3. Además se observó que en la población general los valores menores de IAA correspondieron a los haplotipos DR1, DQW1, DR4 y DQW3, mientras que los mayores lo hicieron a los haplotipos DR4, DQW3 y DR7. Estos resultados, que conforman la mayor casuística argentina de IAA, permiten definir valores de corte útiles para su diagnóstico en nuestro medio y confirman en nuestra población la correlación descripta en otros países y poblaciones entre IAA (AU)

Microalbuminuria: estudio comparativo de métodos de valoración semicuantitativo y cuantitativo / Microalbuminuria: a comparative study of semiquantitative and quantitative methods

Se valoró microalbuminuria (MA), simultáneamente con una tira reactiva (TR), semicuantitativa, un método inmunoturbidimétrico (IT), cuantitativo y el readioinmunoanálisis (RIA). El objetivo fue validar los métodos ensayados y verificar la influencia del tiempo y forma de recolección de la muestra. TR mostró buena concordancia para ocho observadores en 11 muestras de concentración entre 5-100 mg/L. Los CV intra e interensayo fueron: IT=4,7 y 4,9 ; RIA=6,6 y 9. Se hallaron los siguientes coeficientes de correlación (n=130):r=0.83,p<10-6(TA vs RIA y TR vs IT) y r=0.93, p<1-6(IT vs RIA). TR sería adecuado para la determinación semicuantitativa rápida de MA. Permitiría seleccionar con relativa especificidad y buena sensibilidad (falsos positivos 23 y falsos negativos 2, pacientes que luego podrían estudiarse con técnicas cuantitativas de mayor exactitud. IT tiene alta precisión y exactitud y su correlación con RIA es altamente significativa. En relación con la muestra de orina, la más conveniente sería la de 24 h, especialmente para los diabéticos. Ni la temperatura ni el recipiente de recolección afectan el resultado

Microalbuminuria: estudio comparativo de métodos de valoración semicuantitativo y cuantitativo / Microalbuminuria: a comparative study of semiquantitative and quantitative methods

Se valoró microalbuminuria (MA), simultáneamente con una tira reactiva (TR), semicuantitativa, un método inmunoturbidimétrico (IT), cuantitativo y el readioinmunoanálisis (RIA). El objetivo fue validar los métodos ensayados y verificar la influencia del tiempo y forma de recolección de la muestra. TR mostró buena concordancia para ocho observadores en 11 muestras de concentración entre 5-100 mg/L. Los CV intra e interensayo fueron: IT=4,7 y 4,9 ; RIA=6,6 y 9. Se hallaron los siguientes coeficientes de correlación (n=130):r=0.83,p<10-6(TA vs RIA y TR vs IT) y r=0.93, p<1-6(IT vs RIA). TR sería adecuado para la determinación semicuantitativa rápida de MA. Permitiría seleccionar con relativa especificidad y buena sensibilidad (falsos positivos 23 y falsos negativos 2, pacientes que luego podrían estudiarse con técnicas cuantitativas de mayor exactitud. IT tiene alta precisión y exactitud y su correlación con RIA es altamente significativa. En relación con la muestra de orina, la más conveniente sería la de 24 h, especialmente para los diabéticos. Ni la temperatura ni el recipiente de recolección afectan el resultado (AU)

Decreased Ca2(+)-ATPase activity after glycosylation of erythrocyte membranes in vivo and in vitro.

Erythrocyte membranes drawn from diabetic patients with poor metabolic control have increased protein glycosylation and decreased Ca2(+)-ATPase activity. A significant relationship was found between these two parameters. Similar results were obtained when protein glycosylation and Ca2(+)-ATPase activity were measured in membranes from normal erythrocytes preincubated with glucose. In this condition, both parameters showed a clear time and dose dependence. Incubation of erythrocyte membranes instead of intact erythrocytes with glucose and glucose-6-phosphate strongly suggests that only the glycosylation of the membrane inner-surface proteins can affect Ca2(+)-ATPase activity. The simultaneous presence of 10 mM glucose and 5 mM ATP in the incubation medium did not affect the degree of erythrocyte membrane protein glycosylation but significantly blocked the inhibitory effect of glucose on Ca2(+)-ATPase activity. However, 5 mM ATP only partially blocked the inhibitory effect of 100 mM glucose, suggesting a competitive mechanism of glucose and ATP for the enzyme active site. Our results show that glycosylation of erythrocyte membrane proteins significantly inhibits Ca2(+)-ATPase activity. This effect could contribute to the development of the capillary closure process observed in diabetic patients. Furthermore, it could represent an index of a general impairment of enzyme function arising in cells chronically exposed to high glucose levels.