Assessment of the hemagglutinating activity of the Porcine orthorubulavirus.

Blue eye disease (BED) in pigs is caused by Porcine orthorubulavirus (PRV) of the Paramyxoviridae family. It is an endemic disease in swine production in the central region of Mexico and causes nervous signs and high mortality in suckling pigs, pneumonia in growing pigs, orchitis in boars and mummification during gestation. PRV hemagglutinates most red blood cells (RBCs) of domestic species. For serological diagnosis, the hemagglutination inhibition test is used, and in this test, guinea pig, bovine and chicken RBCs have been commonly used. In this investigation, hemagglutination with PRV was evaluated using the RBCs of seven domestic species (chicken, bovine, horse, pig, dog, guinea pig and rabbit). In the hemagglutination test, the following parameters were evaluated: temperature (25 °C and 37 °C), bottoms of the wells (V and U), erythrocyte concentration (0.5%, 0.75%, and 1%), and reading time (15, 30, 45, 60 and 90 min). Significant differences (P < 0.001) were found in most of the evaluated treatments. The best hemagglutination results were obtained with chicken, bovine and horse RBCs. The hemagglutination titer is higher (2 dilutions) when using chicken RBCs than when using bovine or horse RBCs. If chicken RBCs are used in the inhibition of hemagglutination, the test will be more sensitive, while it is more specific when bovine or horse RBCs are used. The hemagglutination readings are imprecise when using RBCs from dogs, pigs, guinea pigs and rabbits. RBCs from these species should not be used for the diagnosis or investigation of PRV.

Molecular and serological diagnosis for Leptospira spp. in biological samples of cattle collected during the slaughter line / Diagnóstico molecular e sorológico para Leptospira spp. em amostras biológicas de bovinos coletadas durante a linha de abate / Diagnóstico molecular y serológico para Leptospira spp. en muestras biológicas de bovinos recogidas durante la línea de sacrificio

A leptospirose é considerada uma zoonose bacteriana de importância para a saúde pública. É comum em áreas tropicais, especialmente em países em desenvolvimento com escassos recursos de saúde e saneamento. Este estudo avaliou a presença de Leptospira spp. em bovinos abatidos em frigorífico da região Centro-Oeste de São Paulo, Brasil, e identificou animais positivos tanto por sorologia quanto em análise molecular. Amostras biológicas de sangue, fígado e rins de 150 bovinos foram investigadas pela técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM) e Reação em Cadeia da Polimerase convencional (cPCR). Os resultados sorológicos mostraram que dos 150 animais, 71 (47,3%) foram reagentes. Os resultados moleculares mostraram a presença de Leptospira spp. nos rins de 21 animais (14%), no fígado de 5 animais (3,3%), no fígado e rins em 2 animais (1,3%) e no sangue em 1 animal (0,7%). Esses resultados indicam um alerta sobre a saúde dos bovinos de corte devido à possibilidade desses animais serem fonte de infecção e a importância da característica ocupacional desta doença. Verificou-se também a importância de complementar as técnicas sorológicas e moleculares.

Leptospirosis is considered a bacterial zoonosis of public health importance. It is common in tropical areas, especially in developing countries with scarce health and sanitation resources. This study evaluated the presence of Leptospira spp. in slaughtered bovine in a slaughterhouse in the Midwest region of São Paulo, Brazil, as well as identified positive animals both in serology and by molecular analysis. Biological samples of blood, liver and kidneys from 150 cattle were investigated by the technique of Microscopic Agglutination Test (MAT) and conventional Polymerase Chain Reaction (cPCR). The serological results showed that of the 150 animals, 71 (47.3%) were reactive. The molecular results showed the presence of Leptospira spp. in kidneys of 21 (14%) animals, in liver of five (3.3%) animals, in liver and kidneys in two animals (1.3%) and in blood, in one (0.7%) animal. These results indicate a warning about the health of beef cattle due to the possibility of these animals being the source of infection and the importance of the occupational characteristic of this disease. It was also verified the importance of complementing serological and molecular techniques.

La leptospirosis es considerada una zoonosis bacteriana de importancia en salud pública. Es común en áreas tropicales, especialmente en países en desarrollo con escasos recursos de salud y saneamiento. Este estudio evaluó la presencia de Leptospira spp. en bovinos sacrificados en un matadero de región Centro-Oeste de São Paulo, Brasil, así como animales positivos identificados tanto en serología como por análisis molecular. Se investigaron muestras biológicas de sangre, hígado y riñones de 150 bovinos mediante la técnica de Aglutinación Microscópica (MAT) y Reacción en Cadena de la Polimerasa convencional (cPCR). Los resultados serológicos mostraron que de los 150 animales, 71 (47,3%) fueron reactivos. Los resultados moleculares mostraron la presencia de Leptospira spp. en riñones de 21 (14%) animales, en hígado de cinco (3,3%) animales, en hígado y riñones en dos animales (1,3%) y en sangre, en un (0,7%) animal. Estos resultados indican una alerta sobre la salud de los bovinos de carne debido a la posibilidad de que estos animales sean fuente de infección y la importancia de la característica ocupacional de esta enfermedad. También se verificó la importancia de complementar las técnicas serológicas y moleculares.

Antibodies against Leptospira spp. in bovine serum samples from several Brazilian states analyzed in the period from 2007 to 2015 / [Anticorpos contra Leptospira spp. em amostra de soro bovino de diversos estados brasileiros analisados no período entre 2007 e 2015]

Bovine leptospirosis assumes great economic importance since it affects several production aspects. Therefore, knowledge about the occurrence and distribution of this disease is fundamental to adopt the correct prevention measures. The present study aimed to evaluate the frequency of anti-Leptospira spp. antibodies in 24,483 bovine serum samples received between 2007 to 2015 from 21 Brazilian states. Of these, 8,643 (35.3%) were reagents in the microscopic agglutination test to one or more serovars of Leptospira spp. The most frequent serovars were Wolffi (61.47%), Tarassovi (9.62%) and Pomona (7.20%). Hardjo serovar presented a prevalence of 6.27%. Among the 21 states analyzed, the State of Pernambuco had the highest frequency with 88.24% and the State of São Paulo was the origin of the largest number of analyzed samples (13,838), with a frequency of 31.54% of reagents. The results demonstrate a high exposure to several serovars of Leptospira spp. in bovine species in Brazilian states, showing the importance of adopting prophylactic measures in order to reduce the risk of infection in this specie.(AU)

Com o objetivo de avaliar a frequência de anticorpos anti-Leptospira spp., foram analisadas 24.483 amostras de soro sanguíneo bovino, provenientes de 21 estados brasileiros, recebidas no período de 2007 a 2015. Destas, 8.643 (35,3%) foram reagentes no teste de soroaglutinação microscópica a uma ou mais sorovariedades de Leptospira spp., e as sorovariedades com maior frequência foram Wolffi (61,47%), Tarassovi (9,62%) e Pomona (7,20%). A sorovariedade Hardjo apresentou prevalência de 6,27%. Entre os 21 estados analisados, o estado de Pernambuco apresentou a maior frequência, com 88,24%, e o estado de São Paulo foi a origem do maior número de amostras para análise, 13.838, com frequência de 31,54% de reagentes.(AU)

Epidemiological and clinical characteristics of Trypanosoma cruzi infection in dogs (Canis lupus familiaris) from a Chagas Disease-Endemic Urban Area in Colombia.

In the last few years, an unusual increase in the number of acute Chagas disease outbreaks, presumably due to oral transmission, has been reported in urban areas in Santander, Colombia. Given the importance of dogs (Canis lupus familiaris) as reservoir hosts and sentinels of T. cruzi infection across different regions of America, we carried out a serological and molecular survey on T. cruzi infection in 215 dogs from the metropolitan area of Bucaramanga, Santander. Serological detection was carried out using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), indirect immunofluorescence antibody test (IFAT), and indirect hemagglutination assay (IHA), while molecular detection was done using a nested PCR (nPCR), targeting the microsatellite region of T. cruzi nuclear DNA. Animals were defined as seropositive when at least two of the three serological tests were positive, and only these animals were evaluated with the nPCR. To discriminate DTU TcI from other DTUs, a multiplex PCR was performed in the T. cruzi-positive samples. Additionally, clinical and hematological traits were evaluated in these hosts. The dog sera showed a seropositivity rate of 27.9 % (60/215), of which 43.3 % (26/60) were positive for nPCR. Statistical analysis indicated that T. cruzi seropositive in dogs was associated with specific socioeconomic sectors and a lack of garbage collection in these municipalities. Hematological analyses showed that T. cruzi infection was associated with anemia and platelet alterations but not with alterations of aspartate aminotransferase (ASAT) and creatine kinase myocardial band (CK-MB). The high seroprevalence of infection and active circulation of T. cruzi I (TcI) in dogs reflect the risk of infection to humans in this area, which should be taken into consideration when Chagas disease control programs are implemented. In addition, T. cruzi infection may take a toll on dog health, which should be considered during dog care and management.

Canine trypanosomiasis in an endemic Costa Rican community: Demonstration of the active infection cycle.

A cross-sectional study was conducted to determine the prevalence of canine trypanosomiasis in an endemic community of Costa Rica. The indirect hemagglutination and indirect immunofluorescence assay yielded positive results in 6.4% (20/314) of canine samples analyzed; polymerase chain reaction (PCR) and light microscopy yielded positive results in one dog. Subsequently, a longitudinal study was carried out with 55 negative T. cruzi canines in the cross-sectional study. These dogs were divided into two groups: Group 1, which consisted of 25 individuals that lived in dwellings where triatomines were found in their homes; and Group 2, which consisted of 30 dogs that lived in dwellings where triatomines were not found during the previous study in their homes. Seroconversion occurred in six dogs (10.9%) in Group 1 in the first months of the year (dry season); these dogs remained seropositive until the end of the study. Only one of the six seropositive canines was also found positive once in T. cruzi PCR. The analysis of the amplified T. cruzi sequences of dogs and triatomines showed that all of them belonged to the TcI lineage. It is recommended that residents be made aware of the need to eliminate vectors in their homes and their surroundings.

Detection of Toxoplasma gondii infection in feral wild boars (Sus scrofa) through indirect hemagglutination and PCR / Detecção de infecção por Toxoplasma gondii através da hemaglutinação indireta e PCR em javalis (Sus scrofa) de vida livre

Wild boars (Sus scrofa) have become an important invasive species in all Brazilian regions. Increase in their population causes damage to rural properties, as they invade and destroy crops. To protect their crops and farm animals, producers hunt wild boars and often consume the product without any sanitary control, becoming exposed to various types of pathogens, including Toxoplasma gondii. Sanitary evaluations of these animals are scarce, especially in relation to the protozoan T. gondii. This study aimed to evaluate the occurrence of this pathogen in wild boars in Brazil. We analyzed 122 blood samples from wild boars (blood clots and serum), collected between 2014 and 2016 in five Brazilian states, using polymerase chain reaction (PCR) and indirect hemagglutination (IH) techniques. In total, 33 (27%) samples were positive by at least one test, 16 (13.1%) were positive by PCR, 19 (15.6%) were positive by IH, and only 2 (1.6%) were positive by both tests. The lack of sanitary management of feral animals increases the incidence of infections, and the consumption of raw or inadequately cooked meat may become a potential source of infection for humans in Brazil.(AU)

Os javalis (Sus scrofa) tornaram-se uma importante espécie invasora em todas as regiões do Brasil. Com o aumento de sua população causam danos em propriedades rurais, invadindo e destruindo lavouras. Como alternativa para proteger suas culturas e criações, os produtores os caçam e muitas vezes consomem o produto sem qualquer tipo de controle sanitário, expondo esses consumidores a diversos tipos de patógenos, entre eles o Toxoplasma gondii. Avaliações sanitárias destes animais são escassas, principalmente, em relação ao protozoário T. gondii. Este trabalho teve como objetivo avaliar a ocorrência deste patógeno em javalis de vida livre no Brasil. Foram analisadas 122 amostras de sangue de javalis (coágulos sanguíneos e soro), coletadas entre os anos de 2014 a 2016, de cinco estados do Brasil, através da técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e da técnica de hemaglutinação indireta (HI). No total, 33 (27%) amostras foram positivas em pelo menos um teste, sendo 16 (13,1%) na PCR e 19 (15,6%) na IH e apenas 2 (1,6%) em ambos os testes. A falta de manejo sanitário dos animais ferais aumenta a incidência de possíveis infecções e o consumo da carne crua ou sem cocção adequada pode vir a ser potencial fonte de infecção para humanos.(AU)

Sistema de grupos sanguíneos AB em felídeos neotropicais e compatibilidade com gatos domésticos / AB blood group system in neotropical felids and compatibility with domestic cats

O principal sistema de grupos sanguíneos reconhecido para gatos é o AB. Os felinos apresentam anticorpos naturais contra o antígeno do tipo sanguíneo a que não pertencem, o que torna os testes de compatibilidade e as tipagens sanguíneas importantes na prevenção de reações transfusionais. O objetivo deste estudo foi realizar a tipagem sanguínea de oito gatos-mouriscos (Puma yagouaroundi), oito jaguatiricas (Leopardus pardalis), sete gatos-palheiros (Leopardus colocolo), sete gatos domésticos (Felis catus) da raça Persa e oito gatos domésticos sem raça definida (SRD), bem como realizar testes de compatibilidade entre os tipos sanguíneos iguais das diferentes espécies, para avaliar a possibilidade de transfusões interespecíficas. A técnica empregada para a tipagem foi a hemaglutinação em tubos de ensaio. A ocorrência do tipo sanguíneo tipo A foi de 100% entre as jaguatiricas, os gatos-palheiros e os gatos Persas e de 85,72% entre os gatos SRD. A ocorrência do tipo B foi de 100% nos gatos-mouriscos e de 14,28% nos gatos SRD. Considerando os testes de compatibilidade sanguínea, 87,5% (n=4) das jaguatiricas foram incompatíveis com os gatos domésticos, 100% (n= 6) dos gatos-palheiros foram compatíveis com os gatos domésticos e 100% (n= 4) dos gatos-mouriscos foram incompatíveis com os gatos domésticos do tipo B.(AU)

The blood group system recognized for cats is AB. Antibodies against other blood types occur naturally in cats, which makes the compatibility tests and blood typing important for preventing transfusion reactions. Wild felids need blood transfusions in cases of diseases and when run over on highways. The aim of this study was to perform blood typing of eight jaguarundies (Puma yagouaroundi), eight ocelots (Leopardus pardalis), seven pampas cats (Leopardus colocolo), seven domestic cats (Felis catus) of Persian breed and eight non-pedigree domestic cats (Felis catus), and test compatibility among the different species with the same blood types, to evaluate the possibility of performing interspecific blood transfusions. We conducted the study from August to December. We used haemagglutination in test tubes for typing. The occurrence of blood type A was 100% among ocelots, pampas cats and domestic cats of Persian breed, while non-pedigree domestic cats showed 85.72%. The occurrence of type B was 100% for jaguarundis and 14.28% for non-pedigree domestic cats. Regarding blood compatibility tests, 87.5% (n= 4) of the ocelots were incompatible with domestic cats; 100% (n=6) of the pampas cats were compatible with domestic cats, while 100% (n=4) of the jaguarundis were incompatible with type B domestic cats.(AU)

Sistema de grupos sanguíneos AB em felídeos neotropicais e compatibilidade com gatos domésticos / AB blood group system in neotropical felids and compatibility with domestic cats

O principal sistema de grupos sanguíneos reconhecido para gatos é o AB. Os felinos apresentam anticorpos naturais contra o antígeno do tipo sanguíneo a que não pertencem, o que torna os testes de compatibilidade e as tipagens sanguíneas importantes na prevenção de reações transfusionais. O objetivo deste estudo foi realizar a tipagem sanguínea de oito gatos-mouriscos (Puma yagouaroundi), oito jaguatiricas (Leopardus pardalis), sete gatos-palheiros (Leopardus colocolo), sete gatos domésticos (Felis catus) da raça Persa e oito gatos domésticos sem raça definida (SRD), bem como realizar testes de compatibilidade entre os tipos sanguíneos iguais das diferentes espécies, para avaliar a possibilidade de transfusões interespecíficas. A técnica empregada para a tipagem foi a hemaglutinação em tubos de ensaio. A ocorrência do tipo sanguíneo tipo A foi de 100% entre as jaguatiricas, os gatos-palheiros e os gatos Persas e de 85,72% entre os gatos SRD. A ocorrência do tipo B foi de 100% nos gatos-mouriscos e de 14,28% nos gatos SRD. Considerando os testes de compatibilidade sanguínea, 87,5% (n=4) das jaguatiricas foram incompatíveis com os gatos domésticos, 100% (n= 6) dos gatos-palheiros foram compatíveis com os gatos domésticos e 100% (n= 4) dos gatos-mouriscos foram incompatíveis com os gatos domésticos do tipo B.(AU)

The blood group system recognized for cats is AB. Antibodies against other blood types occur naturally in cats, which makes the compatibility tests and blood typing important for preventing transfusion reactions. Wild felids need blood transfusions in cases of diseases and when run over on highways. The aim of this study was to perform blood typing of eight jaguarundies (Puma yagouaroundi), eight ocelots (Leopardus pardalis), seven pampas cats (Leopardus colocolo), seven domestic cats (Felis catus) of Persian breed and eight non-pedigree domestic cats (Felis catus), and test compatibility among the different species with the same blood types, to evaluate the possibility of performing interspecific blood transfusions. We conducted the study from August to December. We used haemagglutination in test tubes for typing. The occurrence of blood type A was 100% among ocelots, pampas cats and domestic cats of Persian breed, while non-pedigree domestic cats showed 85.72%. The occurrence of type B was 100% for jaguarundis and 14.28% for non-pedigree domestic cats. Regarding blood compatibility tests, 87.5% (n= 4) of the ocelots were incompatible with domestic cats; 100% (n=6) of the pampas cats were compatible with domestic cats, while 100% (n=4) of the jaguarundis were incompatible with type B domestic cats.(AU)

Occurrence of Toxoplasma gondii and risk factors for infection in pigs raised and slaughtered in the Triângulo Mineiro region, Minas Gerais, Brazil / Ocorrência e fatores de risco da infecção por Toxoplasma gondii em suínos criados e abatidos na região do Triângulo Mineiro, Minas Gerais, Brasil

The Triângulo Mineiro region from Minas Gerais state, is an important meat-exporting region of Brazil and data about Toxoplasma gondii infection in pigs raised and slaughtered in this area are scarce. Therefore, the aim of this study was to evaluate the occurrence of T. gondii in swine and establish the risk factors associated with the infection. Samples were collected from 600 pigs raised under intensive system in farms located at three different counties (Carmo do Paranaíba, Patrocínio and Perdizes). The samples were submitted to indirect hemagglutination antibody test with dilution of 1:32 and to indirect immunofluorescence antibody test with a cutoff of 1:64. The occurrence of positive pig was 3.3% (n=20) and 51.8% (n=311) respectively. A significant difference was observed between toxoplasmatic infection and factors such as lineage, animal origin, size of the farm, collective raising with others species, presence of rodents and type of water offered (p≤0.05). There was no difference between gender and the farm goals. The results demonstrated an occurrence of anti-T.gondii antibodies higher than expected for intensive pig raising system on the studied area, which could indicate a possible sanitary management problem on the studied proprieties. Improvements on the raising techniques are necessary to reduce T. gondii infection sources.(AU)

A região do Triângulo Mineiro, no estado de Minas Gerais, é uma importante região exportadora de carne do Brasil e pesquisas sobre a infecção por Toxoplasma gondii em suínos criados e abatidos nesta região são escassos. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de T. gondii nesses animais e estabelecer os fatores de risco associados com a infecção. Foram coletadas amostras de 600 suínos criados sob sistema intensivo, em fazendas localizadas em três municípios diferentes (Carmo do Paranaíba, Patrocínio e Perdizes). As amostras foram submetidas à Hemaglutinação Indireta com diluição de 1:32 e à Reação de Imunofluorescência Indireta com ponto de corte 1:64. A ocorrência de suínos positivos foi de 3,3% (n=20) e 51,8% (n=311), respectivamente. Foi observada diferença significativa entre a infecção toxoplásmica e fatores como linhagem, procedência dos animais, tamanho das propriedades, criação em conjunto com outras espécies, presença de roedores e tipo de água consumida (p≤0,05). Não houve diferenças estatísticas entre o sexo e finalidade de produção em relação à infecção por T. gondii. Os resultados demonstraram uma ocorrência de anticorpos anti-T. gondii superior à esperada em criações intensivas de suínos na região estudada, o que poderia indicar uma possível falha no manejo sanitário das propriedades estudadas. Melhorias nas técnicas de criação são necessárias para redução das fontes de infecção por T. gondii nos rebanhos.(AU)

Occurrence of Toxoplasma gondii and risk factors for infection in pigs raised and slaughtered in the Triângulo Mineiro region, Minas Gerais, Brazil / Ocorrência e fatores de risco da infecção por Toxoplasma gondii em suínos criados e abatidos na região do Triângulo Mineiro, Minas Gerais, Brasil

The Triângulo Mineiro region from Minas Gerais state, is an important meat-exporting region of Brazil and data about Toxoplasma gondii infection in pigs raised and slaughtered in this area are scarce. Therefore, the aim of this study was to evaluate the occurrence of T. gondii in swine and establish the risk factors associated with the infection. Samples were collected from 600 pigs raised under intensive system in farms located at three different counties (Carmo do Paranaíba, Patrocínio and Perdizes). The samples were submitted to indirect hemagglutination antibody test with dilution of 1:32 and to indirect immunofluorescence antibody test with a cutoff of 1:64. The occurrence of positive pig was 3.3% (n=20) and 51.8% (n=311) respectively. A significant difference was observed between toxoplasmatic infection and factors such as lineage, animal origin, size of the farm, collective raising with others species, presence of rodents and type of water offered (p≤0.05). There was no difference between gender and the farm goals. The results demonstrated an occurrence of anti-T.gondii antibodies higher than expected for intensive pig raising system on the studied area, which could indicate a possible sanitary management problem on the studied proprieties. Improvements on the raising techniques are necessary to reduce T. gondii infection sources.(AU)

A região do Triângulo Mineiro, no estado de Minas Gerais, é uma importante região exportadora de carne do Brasil e pesquisas sobre a infecção por Toxoplasma gondii em suínos criados e abatidos nesta região são escassos. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de T. gondii nesses animais e estabelecer os fatores de risco associados com a infecção. Foram coletadas amostras de 600 suínos criados sob sistema intensivo, em fazendas localizadas em três municípios diferentes (Carmo do Paranaíba, Patrocínio e Perdizes). As amostras foram submetidas à Hemaglutinação Indireta com diluição de 1:32 e à Reação de Imunofluorescência Indireta com ponto de corte 1:64. A ocorrência de suínos positivos foi de 3,3% (n=20) e 51,8% (n=311), respectivamente. Foi observada diferença significativa entre a infecção toxoplásmica e fatores como linhagem, procedência dos animais, tamanho das propriedades, criação em conjunto com outras espécies, presença de roedores e tipo de água consumida (p≤0,05). Não houve diferenças estatísticas entre o sexo e finalidade de produção em relação à infecção por T. gondii. Os resultados demonstraram uma ocorrência de anticorpos anti-T. gondii superior à esperada em criações intensivas de suínos na região estudada, o que poderia indicar uma possível falha no manejo sanitário das propriedades estudadas. Melhorias nas técnicas de criação são necessárias para redução das fontes de infecção por T. gondii nos rebanhos.(AU)

Altered indirect hemagglutination method for easy serotyping of Haemophilus parasuis / Método de Hemaglutinação Indireta alterado para facilitar a sorotipificação de Haemophilus parasuis

Glässer's disease is an emergent bacterial disease that affects swine husbandries worldwide causing important economic losses. The aetiological agent, Haemophilus parasuis, is currently divided in fifteen serovars but an increasing number of non-typeable serovars have been reported. Indirect hemagglutination (IHA) is indicated as a serotyping method for H. parasuis. In the present study, we describe an additional step that aims to work around a possible obstacle in the original protocol that may compromise the outcome of this assay. We observed that the choice of anticoagulant for blood collection influences and/or impairs spontaneous adsorption of H. parasuis antigens on sheep red blood cells (SRBCs). However, regardless of the anticoagulant used, chemical treatment of SRBCs with tannic acid induces a stable antigen adsorption (sensitization step). The addition of 1% BSA to SRBCs washing buffer and to antisera dilution augments IHA specificity. Tannic acid treated SRBCs combined with thermo-resistant H. parasuis antigens increases the assay resolution. Thus, our results demonstrate an improvement in the technique of H. parasuis serotyping that will prove valuable to understand Glässer's disease epidemiology and to better characterize serovars involved in outbreaks.(AU)

A Doença de Glässer é uma doença bacteriana emergente que afeta a produção de suínos em todo o mundo e causa importantes perdas econômicas. O agente etiológico, Haemophilus parasuis, é atualmente dividido em quinze sorovares; no entanto, um número crescente de cepas não tipificáveis tem sido relatado. O teste de hemaglutinação indireta (IHA) tem sido utilizado para a sorotipificação de H. parasuis. Neste estudo, descrevemos uma alteração no protocolo original de IHA e que supera uma limitação específica que pode comprometer o uso geral deste ensaio. Descobrimos que o tipo de anticoagulante utilizado para coletar os eritrócitos ovinos (SRBCs) pode comprometer a adsorção espontânea dos antígenos do H. parasuis. Por outro lado, o tratamento químico dos SRBCs com ácido tânico promove uma adsorção antigênica estável (passo de sensibilização) e independente do anticoagulante utilizado. O uso de 1% de BSA durante as lavagens dos SRBCs e na diluição dos antissoros incrementa a especificidade da IHA e, a combinação dos SRBCs tratados quimicamente com antígenos de H. parasuis termo-resistentes aumentam a resolução da IHA. Nossos resultados destacam uma melhoria na principal técnica de sorotipificação de H. parasuis, que auxiliará diretamente no entendimento da epidemiologia da Doença de Glässer e na caracterização dos sorovares envolvidos em surtos da doença.(AU)

Altered indirect hemagglutination method for easy serotyping of Haemophilus parasuis / Método de Hemaglutinação Indireta alterado para facilitar a sorotipificação de Haemophilus parasuis

Glãsser's disease is an emergent bacterial disease that affects swine husbandries worldwide causing important economic losses. The aetiological agent, Haemophilus parasuis, is currently divided in fifteen serovars but an increasing number of non-typeable serovars have been reported. Indirect hemagglutination (IHA) is indicated as a serotyping method for H. parasuis. In the present study, we describe an additional step that aims to work around a possible obstacle in the original protocol that may compromise the outcome of this assay. We observed that the choice of anticoagulant for blood collection influences and/or impairs spontaneous adsorption of H. parasuis antigens on sheep red blood cells (SRBCs). However, regardless of the anticoagulant used, chemical treatment of SRBCs with tannic acid induces a stable antigen adsorption (sensitization step). The addition of 1% BSA to SRBCs washing buffer and to antisera dilution augments IHA specificity. Tannic acid treated SRBCs combined with thermo-resistant H. parasuis antigens increases the assay resolution. Thus, our results demonstrate an improvement in the technique of H. parasuis serotyping that will prove valuable to understand Glãsser's disease epidemiology and to better characterize serovars involved in outbreaks.(AU)

A Doença de Glãsser é uma doença bacteriana emergente que afeta a produção de suínos em todo o mundo e causa importantes perdas econômicas. O agente etiológico, Haemophilus parasuis, é atualmente dividido em quinze sorovares; no entanto, um número crescente de cepas não tipificáveis tem sido relatado. O teste de hemaglutinação indireta (IHA) tem sido utilizado para a sorotipificação de H. parasuis. Neste estudo, descrevemos uma alteração no protocolo original de IHA e que supera uma limitação específica que pode comprometer o uso geral deste ensaio. Descobrimos que o tipo de anticoagulante utilizado para coletar os eritrócitos ovinos (SRBCs) pode comprometer a adsorção espontânea dos antígenos do H. parasuis. Por outro lado, o tratamento químico dos SRBCs com ácido tânico promove uma adsorção antigênica estável (passo de sensibilização) e independente do anticoagulante utilizado. O uso de 1% de BSA durante as lavagens dos SRBCs e na diluição dos antissoros incrementa a especificidade da IHA e, a combinação dos SRBCs tratados quimicamente com antígenos de H. parasuis termo-resistentes aumentam a resolução da IHA. Nossos resultados destacam uma melhoria na principal técnica de sorotipificação de H. parasuis, que auxiliará diretamente no entendimento da epidemiologia da Doença de Glãsser e na caracterização dos sorovares envolvidos em surtos da doença.(AU)

Viral type characterization and clinical aspects of canine parvovirus in naturally infected dogs in São Paulo State, Brazil / Caracterização viral e aspectos clínicos de parvovirose em cães naturalmente infectados no Estado de São Paulo

Since the first isolation of canine parvovirus type 2 (CPV-2) in late 70's new virus types as CPV-2a and CPV-2b have been emerged and becoming prevalent in natural canine population and more recently, a third subtype was identified , CPV-2c. The main purpose of this study was to detect and characterize canine parvovirus currently present in Central-West region of São Paulo state, in Brazil. Fecal samples were collected of vaccinated and non-vaccinated dogs, clinically suspected of having CPV infection brought to the Infectious Diseases Service, Veterinary Hospital of FMVZ-UNESP. All samples (n=30) were screening for canine parvovirus through hemagglutination test and those resulting as positive (n=20) were submitted to PCR and the products were subsequently sequenced for subtype characterization. Results were tested for association with age, hematological values, viral hemagglutination titers in the feces, vaccination status and survival. Leukopenia was found in all animals, death occurred in 30% of unvaccinated dogs and in 42% of vaccinated ones. In a total of 20 positive sequenced samples, 18 were classified as CPV-2b, one as CPV-2c, and one as CPV-2a, being CPV2a and CPV2c detected in unvaccinated puppies. Compared to the reference samples amino acid change at position 426 in those circling virus was identified. The study results demonstrate the predominance of CPV-2b and the presence of CPV-2a and CPV-2c in naturally infected, vaccinated and unvaccinated dogs in in São Paulo region.(AU)

Desde o primeiro isolamento do parvovirus canino tipo 2 (CPV-2) no final dos anos 70 novos subtipos virais como CPV-2a e CPV-2b surgiram e foram se tornando prevalentes na população canina; posteriormente um terceiro subtipo foi identificado, CPV- 2-C. O principal objetivo deste estudo foi detectar e caracterizar os subtipos de parvovírus canino atualmente presente na região Centro-Oeste do Estado de São Paulo-Brasil. Amostras de fezes foram coletadas de cães vacinados e não vacinados, atendidos no Serviço de Enfermidades Infecciosas dos Animais, Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, com suspeita clínica parvovirose . Todas as amostras (n = 30) foram submetidas teste de hemaglutinação para parvovirus canino e as positivas (n = 20) submetidas a PCR; os produtos amplificados foram subsequentemente sequenciados para caracterização do subtipo viral. Os resultados foram associados com a idade, os valores hematológicos, os títulos de hemaglutinação viral nas fezes, estado de vacinação e sobrevivência. A leucopenia foi encontrada em todos os animais; Obito foi observado em 30% dos cães não vacinados e 42% dos vacinados. Em um total de 20 amostras positivas sequenciadas, 18 foram classificadas como CPV-2b, uma como CPV-2c, e uma como CPV-2a. CPV 2a e CPV2c foram detectados em filhotes não vacinados. Em comparação com a amostra de referência foi evidenciada uma mudança de aminoácido na posição 426 nas amostras virais circulantes. Os resultados do estudo demonstram a predominância de CPV-2b e a presença de CPV-2a e CPV-2c em cães naturalmente infectados, vacinados e não vacinados na região de São Paulo.(AU)

Viral type characterization and clinical aspects of canine parvovirus in naturally infected dogs in São Paulo State, Brazil / Caracterização viral e aspectos clínicos de parvovirose em cães naturalmente infectados no Estado de São Paulo

Since the first isolation of canine parvovirus type 2 (CPV-2) in late 70s new virus types as CPV-2a and CPV-2b have been emerged and becoming prevalent in natural canine population and more recently, a third subtype was identified , CPV-2c. The main purpose of this study was to detect and characterize canine parvovirus currently present in Central-West region of São Paulo state, in Brazil. Fecal samples were collected of vaccinated and non-vaccinated dogs, clinically suspected of having CPV infection brought to the Infectious Diseases Service, Veterinary Hospital of FMVZ-UNESP. All samples (n=30) were screening for canine parvovirus through hemagglutination test and those resulting as positive (n=20) were submitted to PCR and the products were subsequently sequenced for subtype characterization. Results were tested for association with age, hematological values, viral hemagglutination titers in the feces, vaccination status and survival. Leukopenia was found in all animals, death occurred in 30% of unvaccinated dogs and in 42% of vaccinated ones. In a total of 20 positive sequenced samples, 18 were classified as CPV-2b, one as CPV-2c, and one as CPV-2a, being CPV2a and CPV2c detected in unvaccinated puppies. Compared to the reference samples amino acid change at position 426 in those circling virus was identified. The study results demonstrate the predominance of CPV-2b and the presence of CPV-2a and CPV-2c in naturally infected, vaccinated and unvaccinated dogs in in São Paulo region.(AU)

Desde o primeiro isolamento do parvovirus canino tipo 2 (CPV-2) no final dos anos 70 novos subtipos virais como CPV-2a e CPV-2b surgiram e foram se tornando prevalentes na população canina; posteriormente um terceiro subtipo foi identificado, CPV- 2-C. O principal objetivo deste estudo foi detectar e caracterizar os subtipos de parvovírus canino atualmente presente na região Centro-Oeste do Estado de São Paulo-Brasil. Amostras de fezes foram coletadas de cães vacinados e não vacinados, atendidos no Serviço de Enfermidades Infecciosas dos Animais, Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, com suspeita clínica parvovirose . Todas as amostras (n = 30) foram submetidas teste de hemaglutinação para parvovirus canino e as positivas (n = 20) submetidas a PCR; os produtos amplificados foram subsequentemente sequenciados para caracterização do subtipo viral. Os resultados foram associados com a idade, os valores hematológicos, os títulos de hemaglutinação viral nas fezes, estado de vacinação e sobrevivência. A leucopenia foi encontrada em todos os animais; Obito foi observado em 30% dos cães não vacinados e 42% dos vacinados. Em um total de 20 amostras positivas sequenciadas, 18 foram classificadas como CPV-2b, uma como CPV-2c, e uma como CPV-2a. CPV 2a e CPV2c foram detectados em filhotes não vacinados. Em comparação com a amostra de referência foi evidenciada uma mudança de aminoácido na posição 426 nas amostras virais circulantes. Os resultados do estudo demonstram a predominância de CPV-2b e a presença de CPV-2a e CPV-2c em cães naturalmente infectados, vacinados e não vacinados na região de São Paulo.(AU)

Domestic cats blood types frequency from Pará state, Brazil / Frequência dos tipos sanguíneos de gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil

In domestic cats, blood group AB consists of three blood types A, B and AB. A preliminary identification by typing technique is essential to minimize the occurrence of transfusion reactions and neonatal isoerythrolysis. Therefore, the aim of this study was to determine the frequency of blood types and estimate the probability of random transfusion reactions in domestic cats from Pará state, Brazil. Two-hundred thirty five animals were examined in Belém and Castanhal municipalities. Blood samples were collected by puncture of the cephalic or jugular vein, stored in EDTA tubes and refrigerated until analysis. The hemagglutination and reverse typing techniques were used to confirm the blood types of cats. Type A is the most frequently detected (98.3%), followed by type AB (1.28%) and B (0.42%). Likelihood of adverse reactions in random transfusion was 2.09%, with 1.67% mild to moderate and 0.42% potentially fatal. The results showed a higher frequency of A blood type and that the frequency of AB type was higher than B type. In conclusion, to know the frequency of the blood types according to geographic region minimizes the risk of transfusion reactions.

Em felinos domésticos, o grupo sanguíneo AB é constituído por três tipos de sangue A, B e AB. A identificação prévia, por meio da técnica de tipagem, é essencial para minimizar a ocorrência de reações transfusionais e isoeritrólise neonatal. Este estudo teve por objetivos determinar a frequência dos tipos sanguíneos e estimar a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias em gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil. Foram utilizados 235 animais domiciliados nos municípios de Belém e Castanhal. As amostras de sangue foram coletadas por punção da veia cefálica ou jugular, armazenadas em tubos com EDTA e refrigeradas até as análises. As técnicas de hemaglutinação e tipagem reversa foram utilizadas para confirmar os tipos sanguíneos dos felinos. O tipo A foi ao mais detectado (98,3%), seguido pelo tipo AB (1,28%) e B (0,42%). A probabilidade de ocorrência de reações adversas em transfusões aleatórias foi de 2,09%, sendo 1,67% leves a moderadas e 0,42% potencialmente fatais. Os resultados encontrados demonstram que na população de felinos estudada há uma maior frequência de gatos do tipo A e que a frequência do tipo AB foi maior que o tipo B. Em conclusão, conhecer a frequência dos tipos sanguíneos de acordo com a região geográfica minimiza o risco de reações transfusionais.

Domestic cats blood types frequency from Pará state, Brazil / Frequência dos tipos sanguíneos de gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil

In domestic cats, blood group AB consists of three blood types A, B and AB. A preliminary identification by typing technique is essential to minimize the occurrence of transfusion reactions and neonatal isoerythrolysis. Therefore, the aim of this study was to determine the frequency of blood types and estimate the probability of random transfusion reactions in domestic cats from Pará state, Brazil. Two-hundred thirty five animals were examined in Belém and Castanhal municipalities. Blood samples were collected by puncture of the cephalic or jugular vein, stored in EDTA tubes and refrigerated until analysis. The hemagglutination and reverse typing techniques were used to confirm the blood types of cats. Type A is the most frequently detected (98.3%), followed by type AB (1.28%) and B (0.42%). Likelihood of adverse reactions in random transfusion was 2.09%, with 1.67% mild to moderate and 0.42% potentially fatal. The results showed a higher frequency of A blood type and that the frequency of AB type was higher than B type. In conclusion, to know the frequency of the blood types according to geographic region minimizes the risk of transfusion reactions.(AU)

Em felinos domésticos, o grupo sanguíneo AB é constituído por três tipos de sangue A, B e AB. A identificação prévia, por meio da técnica de tipagem, é essencial para minimizar a ocorrência de reações transfusionais e isoeritrólise neonatal. Este estudo teve por objetivos determinar a frequência dos tipos sanguíneos e estimar a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias em gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil. Foram utilizados 235 animais domiciliados nos municípios de Belém e Castanhal. As amostras de sangue foram coletadas por punção da veia cefálica ou jugular, armazenadas em tubos com EDTA e refrigeradas até as análises. As técnicas de hemaglutinação e tipagem reversa foram utilizadas para confirmar os tipos sanguíneos dos felinos. O tipo A foi ao mais detectado (98,3%), seguido pelo tipo AB (1,28%) e B (0,42%). A probabilidade de ocorrência de reações adversas em transfusões aleatórias foi de 2,09%, sendo 1,67% leves a moderadas e 0,42% potencialmente fatais. Os resultados encontrados demonstram que na população de felinos estudada há uma maior frequência de gatos do tipo A e que a frequência do tipo AB foi maior que o tipo B. Em conclusão, conhecer a frequência dos tipos sanguíneos de acordo com a região geográfica minimiza o risco de reações transfusionais.(AU)

Prevalência de anticorpos contra arbovírus da família Bunyaviridae em búfalos de água / Prevalence of arbovirus antibodies against the family Bunyaviridae in water buffaloes

The State of Pará comprises 26% of Brazilian Amazon region where a large diversity of arboviruses has been described. This study sought to assess the prevalence and distribution of haemagglutination-inhibition antibodies against antigens of nine different types of arbovirus of the Bunyaviridae family, where eight were Orthobunyavirus: Guaroa virus, Maguari virus, Tacaiuma virus, Utinga virus, Belem virus, Caraparu virus, Oropouche virus and Catu virus, and one Phlebovirus: Icoaraci virus in sera samples of water buffaloes in Pará State, Brazil. For all Arboviruses investigated there were antibodies, with the exception of Belem virus. Antibodies to Maguari virus were more prevalent (7.33%). The water buffaloes of the present study showed variable levels of antibodies in monotypic and heterotypic reactions that may indicate there are movements from most bunyavirus studied in domestic buffaloes in the state of Pará, and the Maguari virus presents the largest circulation. Therefore, further studies are needed to investigate the role of water buffalo in the maintenance and dispersal of arboviruses, as well as whether these viruses can cause disease in that species, especially in cases of birth defects and abortions.(AU)

O Estado do Pará corresponde a 26% da Amazônica brasileira, onde uma grande quantidade de Arbovírus tem sido descrito. O presente trabalho teve como objetivo determinar a prevalência de anticorpos detectados pela técnica de inibição de hemaglutinação contra nove tipos diferentes de arbovírus da família Bunyaviridae, sendo oito do gênero Orthobunyavirus: vírus Guaroa, vírus Maguari, vírus Tacaiuma, vírus Utinga, vírus Belem, vírus Caraparu, vírus Oropouche e vírus Catu e um do gênero Phlebovirus: vírus Icoaraci, em soros de búfalos de água no Estado do Pará, Brasil. Para todos os Arbovírus investigados houve presença de anticorpos, com exceção do vírus Belém. Anticorpos para o vírus Maguari foram mais prevalentes (7,33%). O rebanho bubalino do presente estudo mostrou variáveis níveis de anticorpos em reações heterotípicas e monotípicas podendo indicar que há circulação da maioria dos bunyavírus estudados em búfalos domésticos no estado do Pará, e que o vírus Maguari é o de maior circulação. Por isso, são necessários outros estudos para investigar o papel dos búfalos de água na manutenção e dispersão de arbovírus, assim como se esses vírus podem causar enfermidades na referida espécie, principalmente, em casos de defeitos congênitos e abortamentos.(AU)

Prevalência de anticorpos contra arbovírus da família Bunyaviridae em búfalos de água / Prevalence of arbovirus antibodies against the family Bunyaviridae in water buffaloes

The State of Pará comprises 26% of Brazilian Amazon region where a large diversity of arboviruses has been described. This study sought to assess the prevalence and distribution of haemagglutination-inhibition antibodies against antigens of nine different types of arbovirus of the Bunyaviridae family, where eight were Orthobunyavirus: Guaroa virus, Maguari virus, Tacaiuma virus, Utinga virus, Belem virus, Caraparu virus, Oropouche virus and Catu virus, and one Phlebovirus: Icoaraci virus in sera samples of water buffaloes in Pará State, Brazil. For all Arboviruses investigated there were antibodies, with the exception of Belem virus. Antibodies to Maguari virus were more prevalent (7.33%). The water buffaloes of the present study showed variable levels of antibodies in monotypic and heterotypic reactions that may indicate there are movements from most bunyavirus studied in domestic buffaloes in the state of Pará, and the Maguari virus presents the largest circulation. Therefore, further studies are needed to investigate the role of water buffalo in the maintenance and dispersal of arboviruses, as well as whether these viruses can cause disease in that species, especially in cases of birth defects and abortions.

O Estado do Pará corresponde a 26% da Amazônica brasileira, onde uma grande quantidade de Arbovírus tem sido descrito. O presente trabalho teve como objetivo determinar a prevalência de anticorpos detectados pela técnica de inibição de hemaglutinação contra nove tipos diferentes de arbovírus da família Bunyaviridae, sendo oito do gênero Orthobunyavirus: vírus Guaroa, vírus Maguari, vírus Tacaiuma, vírus Utinga, vírus Belem, vírus Caraparu, vírus Oropouche e vírus Catu e um do gênero Phlebovirus: vírus Icoaraci, em soros de búfalos de água no Estado do Pará, Brasil. Para todos os Arbovírus investigados houve presença de anticorpos, com exceção do vírus Belém. Anticorpos para o vírus Maguari foram mais prevalentes (7,33%). O rebanho bubalino do presente estudo mostrou variáveis níveis de anticorpos em reações heterotípicas e monotípicas podendo indicar que há circulação da maioria dos bunyavírus estudados em búfalos domésticos no estado do Pará, e que o vírus Maguari é o de maior circulação. Por isso, são necessários outros estudos para investigar o papel dos búfalos de água na manutenção e dispersão de arbovírus, assim como se esses vírus podem causar enfermidades na referida espécie, principalmente, em casos de defeitos congênitos e abortamentos.