Accurate identification of Helicoverpa armigera-Helicoverpa zea hybrids using genome admixture analysis: implications for genomic surveillance.

Helicoverpa armigera, the cotton bollworm moth, is one of the world's most important crop pests, and is spreading throughout the New World from its original range in the Old World. In Brazil, invasive H. armigera has been reported to hybridize with local populations of Helicoverpa zea. The correct identification of H. armigera-H. zea hybrids is important in understanding the origin, spread and future outlook for New World regions that are affected by outbreaks, given that hybridization can potentially facilitate H. zea pesticide resistance and host plant range via introgression of H. armigera genes. Here, we present a genome admixture analysis of high quality genome sequences generated from two H. armigera-H. zea F1 hybrids generated in two different labs. Our admixture pipeline predicts 48.8% and 48.9% H. armigera for the two F1 hybrids, confirming its accuracy. Genome sequences from five H. zea and one H. armigera that were generated as part of the study show no evidence of hybridization. Interestingly, we show that four H. zea genomes generated from a previous study are predicted to possess a proportion of H. armigera genetic material. Using unsupervised clustering to identify non-hybridized H. armigera and H. zea genomes, 8511 ancestry informative markers (AIMs) were identified. Their relative frequencies are consistent with a minor H. armigera component in the four genomes, however its origin remains to be established. We show that the size and quality of genomic reference datasets are critical for accurate hybridization prediction. Consequently, we discuss potential pitfalls in genome admixture analysis of H. armigera-H. zea hybrids, and suggest measures that will improve such analyses.

Assay Optimization Can Equalize the Sensitivity of Real-Time PCR with ddPCR for Detection of Helicoverpa armigera (Lepidoptera: Noctuidae) in Bulk Samples.

Helicoverpa armigera (Hübner) is one of the most important agricultural pests in the world. This historically Old World species was first reported in Brazil in 2013 and has since spread throughout much of South America and into the Caribbean. Throughout North America, H. armigera surveys are ongoing to detect any incursions. Each trap is capable of capturing hundreds of native Helicoverpa zea (Boddie). The two species cannot be separated without genitalic dissection or molecular methods. A ddPCR assay is currently used to screen large trap samples, but this equipment is relatively uncommon and expensive. Here, we optimized a newly designed assay for accurate and repeatable detection of H. armigera in bulk samples across both ddPCR and less costly, and more common, real-time PCR methods. Improvements over previously designed assays were sought through multiple means. Our results suggest bulk real-time PCR assays can be improved through changes in DNA extraction and purification, so that real-time PCR can be substituted for ddPCR in screening projects. While ddPCR remains a more sensitive method for detection of H. armigera in bulk samples, the improvements in assay design, DNA extraction, and purification presented here also enhance assay performance over previous protocols.

Trichogramma pretiosum in field release and under different temperatures in laboratory / Trichogramma pretiosum em liberação no campo e sob diferentes temperaturas em laboratório

This study aimed to evaluate a strain of Trichogramma pretiosum native to the central region of the state Rio Grande do Sul, Brazil, under different temperatures in laboratory and the parasitism of Helicoverpa zea after releases in corn field. Trichogramma pretiosum females were kept at 18, 25 and 30 °C and had their parasitism potential evaluated. Nine plots (400 m2) of maize were installed in randomized blocks under the treatments: 1) staggered release of parasitoids in three different occasions, at three-day intervals; 2) a single release of parasitoids; 3) no release of parasitoids. Ears were collected every four days and the number of caterpillars and eggs of H. zea in the maize silk and the number of damaged ears were estimated. Evaluation started after the tassels growth and ended with the drying of the styles-stigmas. To estimate the grain mass and the ear number and mass, two lines in each plot were delimited and reserved at the end of the cultivation cycle. In laboratory, the highest parasitism rate occurred at 25 °C (35.54%) and the lowest longevity at 30 °C (6.8 days). A total of 1,063 H. zea eggs were collected in the field, 69.52% were parasitized. The mean parasitism rate was higher in T1 (staggered release, 82.77%) than in control (51.87%), but there was no difference in grain yield. Based on the parasitism capacity of the studied strain, it can be potentially used in programs of biological control of H. zea in corn crops of Rio Grande do Sul.(AU)

O estudo objetivou avaliar uma linhagem de Trichogramma pretiosum nativa da região Central do Rio Grande do Sul (Brasil) sob diferentes temperaturas em laboratório, e no parasitismo de Helicoverpa zea após liberações em área de milho. Fêmeas de T. pretiosum foram mantidas a 18, 25 e 30 °C e avaliadas quanto ao potencial de parasitismo. No campo, foram instaladas nove parcelas (400 m2) de milho híbrido em blocos ao acaso, com os seguintes tratamentos: 1) liberação de parasitoides fracionada em três vezes, em intervalos de três dias; 2) liberação em apenas uma ocasião; 3) sem liberação. A cada quatro dias foram coletadas espigas e registrados os danos e o número de lagartas e ovos de H. zea dos estilos-estigmas. A avaliação iniciou durante o pendoamento e estendeu-se até a fase de secagem dos estilos-estigma. Duas linhas em cada parcela foram reservadas para avaliação do número e da massa de espigas e grãos. Em laboratório, o maior percentual de parasitismo foi aos 25 °C (35,54%) e a menor longevidade aos 30 °C (6,8 dias). No campo, foram coletados 1.063 ovos de H. zea, dos quais 69,52% estavam parasitados. O percentual médio de parasitismo foi maior com liberação escalonada de T. pretiosum (82,77%), comparativamente ao controle (51,87%), porém, não houve diferença na produção de grãos. Tendo em vista a capacidade de parasitismo da linhagem avaliada, sugere-se que ela possui potencial para ser utilizada em programas de controle biológico da lagarta da espiga no cultivo de milho no Rio Grande do Sul.(AU)

Trichogramma pretiosum in field release and under different temperatures in laboratory / Trichogramma pretiosum em liberação no campo e sob diferentes temperaturas em laboratório

This study aimed to evaluate a strain of Trichogramma pretiosum native to the central region of the state Rio Grande do Sul, Brazil, under different temperatures in laboratory and the parasitism of Helicoverpa zea after releases in corn field. Trichogramma pretiosum females were kept at 18, 25 and 30 °C and had their parasitism potential evaluated. Nine plots (400 m2) of maize were installed in randomized blocks under the treatments: 1) staggered release of parasitoids in three different occasions, at three-day intervals; 2) a single release of parasitoids; 3) no release of parasitoids. Ears were collected every four days and the number of caterpillars and eggs of H. zea in the maize silk and the number of damaged ears were estimated. Evaluation started after the tassels growth and ended with the drying of the styles-stigmas. To estimate the grain mass and the ear number and mass, two lines in each plot were delimited and reserved at the end of the cultivation cycle. In laboratory, the highest parasitism rate occurred at 25 °C (35.54%) and the lowest longevity at 30 °C (6.8 days). A total of 1,063 H. zea eggs were collected in the field, 69.52% were parasitized. The mean parasitism rate was higher in T1 (staggered release, 82.77%) than in control (51.87%), but there was no difference in grain yield. Based on the parasitism capacity of the studied strain, it can be potentially used in programs of biological control of H. zea in corn crops of Rio Grande do Sul.(AU)

O estudo objetivou avaliar uma linhagem de Trichogramma pretiosum nativa da região Central do Rio Grande do Sul (Brasil) sob diferentes temperaturas em laboratório, e no parasitismo de Helicoverpa zea após liberações em área de milho. Fêmeas de T. pretiosum foram mantidas a 18, 25 e 30 °C e avaliadas quanto ao potencial de parasitismo. No campo, foram instaladas nove parcelas (400 m2) de milho híbrido em blocos ao acaso, com os seguintes tratamentos: 1) liberação de parasitoides fracionada em três vezes, em intervalos de três dias; 2) liberação em apenas uma ocasião; 3) sem liberação. A cada quatro dias foram coletadas espigas e registrados os danos e o número de lagartas e ovos de H. zea dos estilos-estigmas. A avaliação iniciou durante o pendoamento e estendeu-se até a fase de secagem dos estilos-estigma. Duas linhas em cada parcela foram reservadas para avaliação do número e da massa de espigas e grãos. Em laboratório, o maior percentual de parasitismo foi aos 25 °C (35,54%) e a menor longevidade aos 30 °C (6,8 dias). No campo, foram coletados 1.063 ovos de H. zea, dos quais 69,52% estavam parasitados. O percentual médio de parasitismo foi maior com liberação escalonada de T. pretiosum (82,77%), comparativamente ao controle (51,87%), porém, não houve diferença na produção de grãos. Tendo em vista a capacidade de parasitismo da linhagem avaliada, sugere-se que ela possui potencial para ser utilizada em programas de controle biológico da lagarta da espiga no cultivo de milho no Rio Grande do Sul.(AU)

Field Studies on the Horizontal Transmission Potential by Voluntary and Involuntary Carriers of Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus (Baculoviridae).

Horizontal transmission of Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus (HearNPV) has been found to occur through several pathways involving abiotic factors such as soil, wind, and rain, and biotic factors such as predators, parasitoids, and infected hosts. Previous studies examining horizontal transmission through certain biological carriers speculated they were likely not significant in increasing infection rates, however; these studies only focused on a relatively small number of arthropods present within a field setting. This study was conducted to evaluate the horizontal transmission potential of HearNPV by all potential biological carriers when applied as a foliar bioinsecticide or as virus-infected, nonmotile Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae) larvae in a soybean field. Soybean plots were either sprayed with HearNPV or infested with late-stage HearNPV-infected larvae, and sample zones were sampled 3, 7, 10, 14, 17, and 21 days after the infestation, and analyzed for viral presence using PCR. We then identified HearNPV carriers through contamination from the application (involuntary) or through contact with a HearNPV-infected larva (voluntary). Both were confirmed through PCR analysis. Regardless of application technique, on average, HearNPV was capable of disseminating up to 61.0 m in 3 d after inoculation and was found within the sampled canopy 13-21 d after inoculation. Several arthropods were identified as novel carriers of HearNPV. Results from this study indicate that many novel HearNPV carriers are likely important in disseminating HearNPV.

Assessing the Efficacy of Bacillus thuringiensis (Bt) Pyramided Proteins Cry1F, Cry1A.105, Cry2Ab2, and Vip3Aa20 Expressed in Bt Maize Against Lepidopteran Pests in Brazil.

Field studies across four states in maize-producing areas of Brazil were conducted to characterize the efficacy of a new pyramided Bacillus thuringiensis (Bt) Berliner technology in maize, Zea mays L., and compare it to existing single and pyramided commercial Bt technologies, to control Helicoverpa zea Boddie (Lepidoptera: Noctuidae), Elasmopalpus lignosellus Zeller (Lepidoptera: Pyralidae), Agrotis ipsilon (Hufnagel) (Lepidoptera: Noctuidae), and Diatraea saccharalis F. (Lepidoptera: Crambidae). Bt maize expressing Vip3Aa20 protein and pyramided Bt maize expressing proteins Cry1F + Cry1A.105 + Cry2Ab2 + Vip3Aa20 provided excellent protection against kernel feeding by H. zea compared to Bt technologies expressing only Cry1F or Cry1A.105 + Cry2Ab2. Bt maize expressing Cry1F, Cry1A.105 + Cry2Ab2, Cry1F + Cry1A.105 + Cry2Ab2, and Cry1F + Cry1A.105 + Cry2Ab2 + Vip3Aa20 resulted in less than 5% of plants injured by E. lignosellus, significantly less than Bt maize expressing only Vip3Aa20 and a non-Bt maize iso-hybrid with and without a thiamethoxam seed treatment. The highest protection against plant cutting injury caused by A. ipsilon was observed in the pyramid Bt maize technology expressing Cry1F + Cry1A.105 + Cry2Ab2 + Vip3Aa20. However, it did not differ statistically from the Bt maize expressing Vip3Aa20, Cry1F, or Cry1F + Cry1A.105 + Cry2Ab2. All Bt maize hybrids evaluated in our study were highly effective in reducing tunneling injury caused by D. saccharalis. These results show that a new maize technology expressing pyramided Bt proteins Cry1F + Cry1A.105 + Cry2Ab2 + Vip3Aa20 offers a higher level of protection from feeding by the above lepidopteran pest complex compared to maize with a single Bt protein or double pyramided Bt proteins.

Does Bacillus thuringiensis have adverse effects on the host egg location by parasitoid wasps?

ABSTRACT This study investigated the interaction between two pest biological control agents, the parasitoid wasp Trichogramma pretiosum (Hymenoptera: Trichogrammatidae) and the entomopathogen Bacillus thuringiensis (Bacillales: Bacillacea) (Bt). The aim of this study was to evaluate if the presence of Bt (formulated products Agree®, Dipel® and HD1 and HD11 strains) interferes in the oviposition preference of T. pretiosum to eggs of Helicoverpa zea (Lepidoptera: Noctuidae). Using an olfactometry test, the eggs of H. zea were bathed with the commercial formulations, with the Bt suspensions or distilled water, and offered to the parasitoid wasps in order to evaluate parasitism. The results showed that H. zea eggs sprayed with commercial formulations and Bt strains did not interfere in the choice made by the parasitoid. The parasitoid wasp is not able to distinguish between eggs with or without B. thuringiensis treatment, independently of strains suspension or commercial formulations. Therefore, these two control agents may be used together without negative interaction.

Susceptibilities of Geographic Populations of Helicoverpa zea (Lepidoptera: Noctuidae) in Mexico to Bt ∂-Endotoxins Cry1Ac and Cry2Ab: An 18-Yr Study.

An insect resistance monitoring program was developed for Mexico to accommodate the commercial introduction and stewardship of Bt cotton. Between 1998 and 2015, field-collected geographic populations of Helicoverpa zea (Boddie) (Lepidoptera: Noctuidae) were evaluated against Cry1Ac and Cry2Ab proteins of Bacillus thuringiensis Berliner (Bacillales: Bacillaceae) to establish baseline susceptibility data before the commercial use of Bollgard (Cry1Ac) and Bollgard II (Cry1Ac and Cry2Ab) cotton. An annual monitoring program was subsequently established in which a single diagnostic concentration of each Bt protein was used in a diet overlay bioassay. The diagnostic concentration represented the concentration where larvae, evaluated in baseline studies, were reduced in weight by ≥97% relative to untreated controls or failed to molt to third instar after 5 d. In the monitoring study, populations were tested against Cry1Ac from 1998 through 2015, and against Cry2Ab from 2002 through 2004 and again from 2007 through 2015. None of the Cry1Ac-exposed larvae tested during the 18-yr period reached the third larval instar after an exposure of 5 d, and weight reduction relative to untreated control larvae was uniform at about 98-99%. For the 12 yr of Cry2Ab monitoring, no larvae reached third instar, and weight reduction was uniform at >97% relative to controls. These results indicate that H. zea susceptibility to Cry1Ac and Cry2Ab has not changed during the period Bollgard and Bollgard II have been cultivated in Mexico.

Quantificação da proteína Cry1Ab em folhas, caules e grãos de dois híbridos de milho Bt e controle das pragas Spodoptera frugiperda e Helicoverpa zea / Cry1Ab protein quantification in leaves, stems and grains, and effectiveness to control Spodoptera frugiperda and Helicoverpa zea on two hybrids of genetically modified corn

Procedeu-se à avaliação do nível de infestação e respectivos danos associados à presen- ça das lagartas Spodoptera frugiperda e Helicoverpa zea, em dois milhos híbridos geneticamente modificados (OGM), Dekalb DKB390 e Agroceres AG8088, que expressam a proteína Cry1Ab. Foi estabelecido em blocos casualizados, com dois fatores (hibrido e gene cry1Ab), sendo utilizadas como controles os mesmos híbridos sem a proteína Cry1Ab (NOGM). A concentração da proteína Cry1Ab foi determinada pela técnica ELISA em caules, folhas e grãos dos milhos OGM, previamente desidratados por liofilização. A contabilização do número de lagartas de S. frugiperda e danos associados foi realizada aos 15, 22, 29, 36 e 42 dias após a semeadura, segundo uma escala com 5 níveis (0-ausência praga; 5-planta morta). A contabilização do número de lagartas de H. zea e danos associados foi realizada aos 57, 71, 78 e 85 dias após a semeadura, segundo uma escala com 4 níveis (0-ausência praga; 4- o inseto penetrou até o sabugo, não se aprofundando mais que 3 cm). O número de larvas foi contabilizado segundo dois níveis, menores ou iguais a 15mm e maiores de 15mm. Nenhuma aplicação inseticida foi realizada nos talhões com milhos OGM enquanto os talhões com milhos NOGM foram pulverizados com uma aplicação de deltametrina (2,8%) 42 dias após a semeadura. O nível de infestação e danos associados a S. frugiperda foram significativamente menores (p<0,05) nos milhos OGM em comparação com os milhos NOGM. Todavia, o número e danos associados a lagartas de S. frugiperda inferiores a 15 mm, foram superiores no milho OGM DKB390 quando comparado com o milho OGM AG8088. Não se verificaram diferen- ças no nível de infestação por lagartas-do-cartucho e danos associados entre milhos OGM e entre milhos NOGM. Em média, a concentração da proteína associada ao gene cry1Ab foi superior nas folhas e caules em comparação com a concentração presente nos grãos e, em média, superior no milho OGM AG8088 relativamente ao milho OGM DKB390. Não foram encontradas diferenças no nível de danos causados por lagartas de H. zea no milho AG8088 OGM e NOGM, após 71, 78 e 85 dias da semeadura. Conclui-se que embora os milhos OGM tenham sido eficientes na limitação das duas pragas, foram mais eficientes na limitação de S. frugiperda em comparação com H. zea resultado que estará associado à maior concentração da proteína nas folhas (8,062 ug/g de tecido fresco) e caules (5,626 ug/g de tecido fresco), em comparação com a existente no grão (0,372 ug/g de tecido fresco). Por sua vez, o teste ELISA foi eficiente na quantificação da proteína Cry1Ab em tecidos vegetais de milho.(AU)

A study was carried out to evaluate the infestation and associated damages to the presence of the Spodoptera frugiperda and Helicoverpa zea caterpillars, in two genetically modified (GM) corn, Dekalb DKB390 and Agroceres AG8088, expressing the cry1Ab protein. For this objective, an split-splot design with two factors (hybrid x gene) was carried out. Negative controls were made with the same corn hybrids without the gene cry1Ab (NoGM). The concentration of the protein Cry1Ab was determined by the ELISA (enzyme linked immuno sorbent assay) technique in previously dehydrated stems, leaves and grains of GM corns. Caterpillars sampling of S. frugiperda and associated damage survey were accomplished at 15, 22, 29, 36 and 42 days after the sowing, according to a damage scale with 5 levels (0- pest absence to 5- dead plant). Countings of H. zea caterpillars and associated damage were assessed at 57, 71, 78 and 85 days after the sowing, according to a damage scale with 4 levels (0-pest absence curse to 4-gallery in the corn cob minor than 3cm). Sampled caterpillars were divided in two groups, smaller or equal to 15mm and bigger than 15mm. No insecticide application was accomplished in the GM blocks while NoGM blocks were sprayed with deltametrina (2,8%), 42 days after the sowing. The infestation level and associated damage due to S. frugiperda presence was significantly smaller (p < 0,05) in the GM corns in comparison to NoGM corns. Nevertheless, the number and associated damage of S. frugiperda caterpillars, smaller than 15 mm, were superior in the GM DKB390 corn when compared to the GM AG8088 corn. Differences were not observed in the S. frugiperda infestation and associated damage between GM corns and between NoGM corns. On average, the concentration of Cry1Ab protein was significantly superior in leaves and stems in comparison to the grain and, usually, superior in the GM AG8088 corn comparatively to GM DKB390 corn. No differences were found on level damages caused by caterpillars of H. zea in GM and NoGM AG8088 corns, after 71, 78 and 85 days of sowing. In conclusion, GM corns were more efficient in the limitation of S. frugiperda in comparison with H. zea, a result that can be associated to the largest Cry1Ab protein concentration observed in leafs (8.062 ug/g fresh tissue) and stems (5.626 ug/g fresh tissue) in comparison to the existent in the grain (0.372 ug/g fresh tissue). Also, ELISA technique proved to be very efficient in Cry1Ab protein quantification on corn.(AU)

Quantificação da proteína Cry1Ab em folhas, caules e grãos de dois híbridos de milho Bt e controle das pragas Spodoptera frugiperda e Helicoverpa zea / Cry1Ab protein quantification in leaves, stems and grains, and effectiveness to control Spodoptera frugiperda and Helicoverpa zea on two hybrids of genetically modified corn

Procedeu-se à avaliação do nível de infestação e respectivos danos associados à presen- ça das lagartas Spodoptera frugiperda e Helicoverpa zea, em dois milhos híbridos geneticamente modificados (OGM), Dekalb DKB390 e Agroceres AG8088, que expressam a proteína Cry1Ab. Foi estabelecido em blocos casualizados, com dois fatores (hibrido e gene cry1Ab), sendo utilizadas como controles os mesmos híbridos sem a proteína Cry1Ab (NOGM). A concentração da proteína Cry1Ab foi determinada pela técnica ELISA em caules, folhas e grãos dos milhos OGM, previamente desidratados por liofilização. A contabilização do número de lagartas de S. frugiperda e danos associados foi realizada aos 15, 22, 29, 36 e 42 dias após a semeadura, segundo uma escala com 5 níveis (0-ausência praga; 5-planta morta). A contabilização do número de lagartas de H. zea e danos associados foi realizada aos 57, 71, 78 e 85 dias após a semeadura, segundo uma escala com 4 níveis (0-ausência praga; 4- o inseto penetrou até o sabugo, não se aprofundando mais que 3 cm). O número de larvas foi contabilizado segundo dois níveis, menores ou iguais a 15mm e maiores de 15mm. Nenhuma aplicação inseticida foi realizada nos talhões com milhos OGM enquanto os talhões com milhos NOGM foram pulverizados com uma aplicação de deltametrina (2,8%) 42 dias após a semeadura. O nível de infestação e danos associados a S. frugiperda foram significativamente menores (p<0,05) nos milhos OGM em comparação com os milhos NOGM. Todavia, o número e danos associados a lagartas de S. frugiperda inferiores a 15 mm, foram superiores no milho OGM DKB390 quando comparado com o milho OGM AG8088. Não se verificaram diferen- ças no nível de infestação por lagartas-do-cartucho e danos associados entre milhos OGM e entre milhos NOGM. Em média, a concentração da proteína associada ao gene cry1Ab foi superior nas folhas e caules em comparação com a concentração presente nos grãos e, em média, superior no milho OGM AG8088 relativamente ao milho OGM DKB390. Não foram encontradas diferenças no nível de danos causados por lagartas de H. zea no milho AG8088 OGM e NOGM, após 71, 78 e 85 dias da semeadura. Conclui-se que embora os milhos OGM tenham sido eficientes na limitação das duas pragas, foram mais eficientes na limitação de S. frugiperda em comparação com H. zea resultado que estará associado à maior concentração da proteína nas folhas (8,062 ug/g de tecido fresco) e caules (5,626 ug/g de tecido fresco), em comparação com a existente no grão (0,372 ug/g de tecido fresco). Por sua vez, o teste ELISA foi eficiente na quantificação da proteína Cry1Ab em tecidos vegetais de milho.

A study was carried out to evaluate the infestation and associated damages to the presence of the Spodoptera frugiperda and Helicoverpa zea caterpillars, in two genetically modified (GM) corn, Dekalb DKB390 and Agroceres AG8088, expressing the cry1Ab protein. For this objective, an split-splot design with two factors (hybrid x gene) was carried out. Negative controls were made with the same corn hybrids without the gene cry1Ab (NoGM). The concentration of the protein Cry1Ab was determined by the ELISA (enzyme linked immuno sorbent assay) technique in previously dehydrated stems, leaves and grains of GM corns. Caterpillars sampling of S. frugiperda and associated damage survey were accomplished at 15, 22, 29, 36 and 42 days after the sowing, according to a damage scale with 5 levels (0- pest absence to 5- dead plant). Countings of H. zea caterpillars and associated damage were assessed at 57, 71, 78 and 85 days after the sowing, according to a damage scale with 4 levels (0-pest absence curse to 4-gallery in the corn cob minor than 3cm). Sampled caterpillars were divided in two groups, smaller or equal to 15mm and bigger than 15mm. No insecticide application was accomplished in the GM blocks while NoGM blocks were sprayed with deltametrina (2,8%), 42 days after the sowing. The infestation level and associated damage due to S. frugiperda presence was significantly smaller (p < 0,05) in the GM corns in comparison to NoGM corns. Nevertheless, the number and associated damage of S. frugiperda caterpillars, smaller than 15 mm, were superior in the GM DKB390 corn when compared to the GM AG8088 corn. Differences were not observed in the S. frugiperda infestation and associated damage between GM corns and between NoGM corns. On average, the concentration of Cry1Ab protein was significantly superior in leaves and stems in comparison to the grain and, usually, superior in the GM AG8088 corn comparatively to GM DKB390 corn. No differences were found on level damages caused by caterpillars of H. zea in GM and NoGM AG8088 corns, after 71, 78 and 85 days of sowing. In conclusion, GM corns were more efficient in the limitation of S. frugiperda in comparison with H. zea, a result that can be associated to the largest Cry1Ab protein concentration observed in leafs (8.062 ug/g fresh tissue) and stems (5.626 ug/g fresh tissue) in comparison to the existent in the grain (0.372 ug/g fresh tissue). Also, ELISA technique proved to be very efficient in Cry1Ab protein quantification on corn.

Short-term assessment of bt maize on non-target arthropods in Brazil

Although not yet available for cultivation in Brazil, the effect of Bt maize hybrids on natural enemies and soil dwelling arthropods should be assessed prior to its release to growers. Trials were carried out during one growing season in two different locations with the genetically modified maize hybrids 7590-Bt11 and Avant-ICP4, comparing with their respective non-Bt isogenic hybrids. Arthropods were evaluated through direct observation on plants and pitfall traps. In general, no differences were observed between populations of earwig (Dermaptera: Forficulidae), lady beetles (Coleptera: Coccinellidae), minute pirate bug (Coleoptera: Anthocoridae), ground beetles (Carabidae), tiger beetles (Cicindelidae), and spiders (Araneae). There was no difference in egg parasitism of Helicoverpa zea (Boddie) by Trichogramma sp. (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Thus, Bt maize hybrids expressing insecticide proteins Cry1A(b) and VIP 3A do not cause reduction of the main maize dweeling predators and parasitoids.

Embora não haja cultivos comerciais de milho geneticamente modificado no Brasil, o efeito de híbridos de milho Bt sobre inimigos naturais e artrópodos de solo deve ser avaliado antes da liberação aos produtores. Assim, ensaios foram conduzidos durante uma safra em duas localidades. Os híbridos de milho modificado geneticamente 7590-Bt11 e Avant-ICP4 foram comparados com seus respectivos isogênicos não transgênicos. Os artrópodes foram avaliados através de observação direta nas plantas e armadilhas de alçapão. De modo geral, não se observaram diferenças entre as populações de tesourinha (Dermaptera: Forficulidae), joaninhas (Coleptera: Coccinellidae), percevejo-pirata (Coleoptera: Anthocoridae), carabídeos (Carabidae), cicindelídeos (Cicindelidae) e aranhas (Araneae). Também não houve diferença no parasitismo de ovos de Helicoverpa zea (Boddie) por Trichogramma sp. (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Assim, milho geneticamente modificado expressando as proteínas inseticidas Cry1A(b) e VIP 3A não causa redução nas populações dos principais predadores e parasitóides.

Controle biológico das pragas da espiga, sobre parâmetros qualitativos e quantitativos na cultura do milho de safrinha em ubiratã/pr

As pragas que causam prejuízo na fase reprodutiva do milho são as lagartas da espiga (Helicoverpa zea) e do cartucho-do milho (Spodoptera frugiperda) que, através dos orifícios abertos na espigafacilitam a entrada de microrganismos causando grãos ardidos. Os grãos ardidos constituem-se numdos principais problemas de qualidade do milho, devido à possibilidade da presença de micotoxinas,tais como aflatoxinas (Aspergillus flavus e A. parasiticus), ocasionando perdas qualitativas dos grãospela desvalorização do produto e constituindo-se uma ameaça à saúde dos rebanhos e humana. Oobjetivo do trabalho foi avaliar a eficiência do controle biológico das pragas da espiga, na redução dopercentual de grãos ardidos na cultura do milho, utilizando-se o parasitóide Trichogramma pretiosum.A quantificação de incidência de grãos ardidos foi determinada pelo método de separação visual degrãos com sintomas de descoloração, causada por infecção por fungos na lavoura. A menorincidência de grãos ardidos ocorreu na área onde se utilizou controle biológico, atingindo umpercentual de 1,08% (2,73g), apresentando diferença significativa quando comparada com otratamento convencional, isto é, sem liberação de parasitoides teve um leve acréscimo no percentualde grãos ardidos elevando para 1,81% (4,52g).Palavras-Chave: Helicoverpa zea; Spodoptera frugiperda; controle biológico aplicado; Lagarta-da-espigaEVAL

CONTROLE BIOLÓGICO DAS PRAGAS DA ESPIGA, SOBRE PARÂMETROS QUALITATIVOS E QUANTITATIVOS NA CULTURA DO MILHO DE SAFRINHA EM UBIRATÃ/PR

As pragas que causam prejuízo na fase reprodutiva do milho são as lagartas da espiga (Helicoverpa zea) e do cartucho-do milho (Spodoptera frugiperda) que, através dos orifícios abertos na espigafacilitam a entrada de microrganismos causando grãos ardidos. Os grãos ardidos constituem-se numdos principais problemas de qualidade do milho, devido à possibilidade da presença de micotoxinas,tais como aflatoxinas (Aspergillus flavus e A. parasiticus), ocasionando perdas qualitativas dos grãospela desvalorização do produto e constituindo-se uma ameaça à saúde dos rebanhos e humana. Oobjetivo do trabalho foi avaliar a eficiência do controle biológico das pragas da espiga, na redução dopercentual de grãos ardidos na cultura do milho, utilizando-se o parasitóide Trichogramma pretiosum.A quantificação de incidência de grãos ardidos foi determinada pelo método de separação visual degrãos com sintomas de descoloração, causada por infecção por fungos na lavoura. A menorincidência de grãos ardidos ocorreu na área onde se utilizou controle biológico, atingindo umpercentual de 1,08% (2,73g), apresentando diferença significativa quando comparada com otratamento convencional, isto é, sem liberação de parasitoides teve um leve acréscimo no percentualde grãos ardidos elevando para 1,81% (4,52g).Palavras-Chave: Helicoverpa zea; Spodoptera frugiperda; controle biológico aplicado; Lagarta-da-espigaEVAL

Short-term assessment of bt maize on non-target arthropods in Brazil

Although not yet available for cultivation in Brazil, the effect of Bt maize hybrids on natural enemies and soil dwelling arthropods should be assessed prior to its release to growers. Trials were carried out during one growing season in two different locations with the genetically modified maize hybrids 7590-Bt11 and Avant-ICP4, comparing with their respective non-Bt isogenic hybrids. Arthropods were evaluated through direct observation on plants and pitfall traps. In general, no differences were observed between populations of earwig (Dermaptera: Forficulidae), lady beetles (Coleptera: Coccinellidae), minute pirate bug (Coleoptera: Anthocoridae), ground beetles (Carabidae), tiger beetles (Cicindelidae), and spiders (Araneae). There was no difference in egg parasitism of Helicoverpa zea (Boddie) by Trichogramma sp. (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Thus, Bt maize hybrids expressing insecticide proteins Cry1A(b) and VIP 3A do not cause reduction of the main maize dweeling predators and parasitoids.

Embora não haja cultivos comerciais de milho geneticamente modificado no Brasil, o efeito de híbridos de milho Bt sobre inimigos naturais e artrópodos de solo deve ser avaliado antes da liberação aos produtores. Assim, ensaios foram conduzidos durante uma safra em duas localidades. Os híbridos de milho modificado geneticamente 7590-Bt11 e Avant-ICP4 foram comparados com seus respectivos isogênicos não transgênicos. Os artrópodes foram avaliados através de observação direta nas plantas e armadilhas de alçapão. De modo geral, não se observaram diferenças entre as populações de tesourinha (Dermaptera: Forficulidae), joaninhas (Coleptera: Coccinellidae), percevejo-pirata (Coleoptera: Anthocoridae), carabídeos (Carabidae), cicindelídeos (Cicindelidae) e aranhas (Araneae). Também não houve diferença no parasitismo de ovos de Helicoverpa zea (Boddie) por Trichogramma sp. (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Assim, milho geneticamente modificado expressando as proteínas inseticidas Cry1A(b) e VIP 3A não causa redução nas populações dos principais predadores e parasitóides.

Ensacamento de frutos do tomateiro visando ao controle de pragas e à redução de defensivos

The development of fruits in paper bags aims at the control of pests, reduction of pesticide residues and the management of qualitative aspects. This work evaluates the efficacy of paper bags in combination with deodorant tablets and garlic clove on the control of the pest agents Neoleucinodes elegantalis, Helicoverpa zea and Tuta absoluta on bunches of tomatoes. Five treatments were set up: paper bags carrying deodorant tablets, paper bags with garlic cloves, paper bags containing no repellent, control without repellent and control with the insecticide methamidophos. The results were assessed by the number of caterpillars found on the fruits. Fruits protected in wax-paper bags and fruits exposed directly to methamidophos during application were compared in regard to the maximum tolerable residue. The use of paper bags reduced the number of caterpillars of N. elegantalis and H. zea per fruit. Pesticide residues on fruits without bags were six times higher than the maximum tolerable. Fruits within paper bags presented residue levels three times lower than the maximum. The use of paper bags for protection of tomato fruits did not alter fruit characteristics. Considering the costs, the use of paper bags for tomato cropping requires higher initial investment, but it supplies a differential market with higher prices.

O ensacamento de frutos durante o seu desenvolvimento na planta, além do objetivo de controlar pragas pode reduzir resíduos de defensivos e manejar aspectos qualitativos. Com o objetivo de controle das pragas Neoleucinodes elegantalis, Helicoverpa zea e Tuta absoluta e redução de resíduos de inseticidas, pencas de tomates, foram ensacadas com papel-manteiga. Além do efeito do ensacamento, foram testados dois repelentes de insetos. Foram realizados cinco tratamentos. A eficiência do ensacamento e dos repelentes foi verificada por meio do número médio de lagartas encontradas por tratamento. A quantidade de resíduo de metamidofós encontrada nos frutos ensacados e nos frutos expostos diretamente à pulverização foi comparada ao limite máximo permitido. Verificou-se, também, a qualidade dos frutos produzidos pelo método do ensacamento através de análises físico-químicas dos tomates. Os custos do método do ensacamento foram comparados aos do método químico. O ensacamento, associado ou não aos repelentes, reduz o ataque das lagartas N. elegantalis e H. zea aos frutos. Para o controle de T. absoluta é necessária a integração com controle químico nas épocas de maior infestação. Os frutos não ensacados possuíam quantidade de metamidofós seis vezes superiores ao máximo tolerado e os frutos ensacados quantidade três vezes inferiores a este limite. O ensacamento das pencas de tomates não modificou os parâmetros físico-químicos dos frutos produzidos. O método do ensacamento requer maior investimento econômico, porém esse investimento atinge um mercado diferencial, com preços mais elevados.

Ensacamento de frutos do tomateiro visando ao controle de pragas e à redução de defensivos

The development of fruits in paper bags aims at the control of pests, reduction of pesticide residues and the management of qualitative aspects. This work evaluates the efficacy of paper bags in combination with deodorant tablets and garlic clove on the control of the pest agents Neoleucinodes elegantalis, Helicoverpa zea and Tuta absoluta on bunches of tomatoes. Five treatments were set up: paper bags carrying deodorant tablets, paper bags with garlic cloves, paper bags containing no repellent, control without repellent and control with the insecticide methamidophos. The results were assessed by the number of caterpillars found on the fruits. Fruits protected in wax-paper bags and fruits exposed directly to methamidophos during application were compared in regard to the maximum tolerable residue. The use of paper bags reduced the number of caterpillars of N. elegantalis and H. zea per fruit. Pesticide residues on fruits without bags were six times higher than the maximum tolerable. Fruits within paper bags presented residue levels three times lower than the maximum. The use of paper bags for protection of tomato fruits did not alter fruit characteristics. Considering the costs, the use of paper bags for tomato cropping requires higher initial investment, but it supplies a differential market with higher prices.

O ensacamento de frutos durante o seu desenvolvimento na planta, além do objetivo de controlar pragas pode reduzir resíduos de defensivos e manejar aspectos qualitativos. Com o objetivo de controle das pragas Neoleucinodes elegantalis, Helicoverpa zea e Tuta absoluta e redução de resíduos de inseticidas, pencas de tomates, foram ensacadas com papel-manteiga. Além do efeito do ensacamento, foram testados dois repelentes de insetos. Foram realizados cinco tratamentos. A eficiência do ensacamento e dos repelentes foi verificada por meio do número médio de lagartas encontradas por tratamento. A quantidade de resíduo de metamidofós encontrada nos frutos ensacados e nos frutos expostos diretamente à pulverização foi comparada ao limite máximo permitido. Verificou-se, também, a qualidade dos frutos produzidos pelo método do ensacamento através de análises físico-químicas dos tomates. Os custos do método do ensacamento foram comparados aos do método químico. O ensacamento, associado ou não aos repelentes, reduz o ataque das lagartas N. elegantalis e H. zea aos frutos. Para o controle de T. absoluta é necessária a integração com controle químico nas épocas de maior infestação. Os frutos não ensacados possuíam quantidade de metamidofós seis vezes superiores ao máximo tolerado e os frutos ensacados quantidade três vezes inferiores a este limite. O ensacamento das pencas de tomates não modificou os parâmetros físico-químicos dos frutos produzidos. O método do ensacamento requer maior investimento econômico, porém esse investimento atinge um mercado diferencial, com preços mais elevados.

Capacidade de dispersão deTrichogramma pretiosum riley, 1879 para controle de Helicoverpa zea (Boddie, 1850) em milho

The dispersion capacity of Tríchogramma pretiosum Riley, 1879 in relation to Helicoverpa zea (Boddie, 1850) eggs was studied in corn, in two regions, in the State of São Paulo. The dispersion capacity of T. pretiosum 36 hours after release ranged from 80 to 102 m² and an inverse relationship between parasitism and predation occurred for H. zea eggs for both localities studied. The results obtained indicate that releases for controlling H. zea should be made at 100 points/ha.

Estudou-se, em duas localidades do Estado de São Paulo, a capacidade de dispersão de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 na cultura do milho, em relação a ovos de Helicoverpa zea (Boddie, 1850). A dispersão de T. pretiosum, 36 horas após a liberação, foi de 80 a 102 m². Ocorreu uma relação inversa entre parasitismo e predação natural por insetos, nas duas localidades estudadas. Em função dos resultados obtidos, determinou-se que a liberação dos parasitóides, para controle de H. zea, deve ser feita em 100 pontos/ha.

Efeito do número e intervalo entre liberações de Trichogramma pretiosum riley no parasitismo e controle de Helicoverpa zea (boddie), em milho

The effect of the number and interval between releases of Trichogramma pretiosum Riley on parasitism and on the control of Helicoverpa zea (Boddie) was studied in corn. Results indicated an increase of up to 5 times in parasitism of H. zea eggs when 3 releases of 100,000 T. pretiosum adults per ha were made. H. zea damage in corn ears in T. pretiosum release areas was reduced 26%, demonstrating the potential of this parasitoid for the control of this pest.

Estudou-se o efeito do número e intervalo de liberações de Trichogramma pretiosum Riley, no parasitismo e controle de Helicoverpa zea (Boddie) na cultura do milho. Observou-se um incremento de até 5 vezes no parasitismo de ovos quando foram realizadas 3 liberações de 100.000 adultos de T. pretiosum por ha. A redução no dano nas espigas por H. zea em áreas de liberação de T. pretiosum foi de até 26%, mostrando o potencial de controle biológico do parasitóide.

Efeito do número e intervalo entre liberações de Trichogramma pretiosum riley no parasitismo e controle de Helicoverpa zea (boddie), em milho

The effect of the number and interval between releases of Trichogramma pretiosum Riley on parasitism and on the control of Helicoverpa zea (Boddie) was studied in corn. Results indicated an increase of up to 5 times in parasitism of H. zea eggs when 3 releases of 100,000 T. pretiosum adults per ha were made. H. zea damage in corn ears in T. pretiosum release areas was reduced 26%, demonstrating the potential of this parasitoid for the control of this pest.

Estudou-se o efeito do número e intervalo de liberações de Trichogramma pretiosum Riley, no parasitismo e controle de Helicoverpa zea (Boddie) na cultura do milho. Observou-se um incremento de até 5 vezes no parasitismo de ovos quando foram realizadas 3 liberações de 100.000 adultos de T. pretiosum por ha. A redução no dano nas espigas por H. zea em áreas de liberação de T. pretiosum foi de até 26%, mostrando o potencial de controle biológico do parasitóide.

Capacidade de dispersão deTrichogramma pretiosum riley, 1879 para controle de Helicoverpa zea (Boddie, 1850) em milho

The dispersion capacity of Tríchogramma pretiosum Riley, 1879 in relation to Helicoverpa zea (Boddie, 1850) eggs was studied in corn, in two regions, in the State of São Paulo. The dispersion capacity of T. pretiosum 36 hours after release ranged from 80 to 102 m² and an inverse relationship between parasitism and predation occurred for H. zea eggs for both localities studied. The results obtained indicate that releases for controlling H. zea should be made at 100 points/ha.

Estudou-se, em duas localidades do Estado de São Paulo, a capacidade de dispersão de Trichogramma pretiosum Riley, 1879 na cultura do milho, em relação a ovos de Helicoverpa zea (Boddie, 1850). A dispersão de T. pretiosum, 36 horas após a liberação, foi de 80 a 102 m². Ocorreu uma relação inversa entre parasitismo e predação natural por insetos, nas duas localidades estudadas. Em função dos resultados obtidos, determinou-se que a liberação dos parasitóides, para controle de H. zea, deve ser feita em 100 pontos/ha.