Pathology, microbiology, and molecular evaluation of tissues from equids serologically positive for Burkholderia mallei in Midwestern Brazil / Avaliação patológica, microbiológica e molecular em amostras de tecidos de equídeos sorologicamente positivos para Burkholderia mallei no Centro-Oeste do Brasil

Glanders is a disease caused by the bacterium Burkholderia mallei that primarily affects horses, mules and donkeys. The disease can cause lesions in the skin, lungs and several other organs. However, it often manifests as an asymptomatic disease. In Brazil, serological tests of high sensitivity and specificity are used to assist in the detection of antibodies against B. mallei and to contribute to the control of the disease. However, due to the mandatory euthanasia of seroreactive animals, equids with positive serology for B. mallei and asymptomatic generated great conflicts between breeders, veterinarians and diagnostic laboratories. This study clarifies the limitations of complementary diagnostic tests for detecting B. mallei. It describes the clinical, morphological and laboratory findings in 24 equines from different municipalities in the Mato Grosso State, Brazil, which reacted to the complement fixation test and were positive in the western blotting test for glanders. Data and tissue samples were collected from 24 horses for histological, microbiological and molecular analysis. In 23 horses, no clinical signs, morphological alterations, microbiological isolation, or molecular detection would characterize B. mallei infection. On the other hand, samples from an asymptomatic horse without lesional alterations showed sequence amplification compatible with B. mallei in the PCR. Considering that the infection by B. mallei is subject to the application of animal sanitary defense measures and that, by international requirement and national legislation, the serological results are tools that should support the sanitation procedures for the error of the bacteria in the Mato Grosso State, Brazil.

Mormo é uma enfermidade causada pela bactéria Burkholderia mallei que acomete primariamente cavalos, mulas e burros. A doença pode causar lesões na pele, pulmões e em diversos outros órgãos, entretanto frequentemente manifesta-se como uma enfermidade assintomática. No Brasil são utilizados testes sorológicos de elevada sensibilidade e especificidade para auxiliar na detecção de anticorpos contra B. mallei e contribuir para controle da doença. Porém, devido à obrigatoriedade da eutanásia de animais sororeagentes, os equídeos com sorologia positiva para B. mallei e assintomáticos geraram grandes embates entre criadores, médicos-veterinários e laboratórios de diagnóstico. Este trabalho esclarece as limitações dos testes diagnósticos complementares para detecção de B. mallei e descreve os achados clínicos, morfológicos e de exames laboratoriais em 24 equídeos, procedentes de diferentes municípios do estado de Mato Grosso, Brasil, que reagiram ao teste de fixação de complemento e foram positivos no teste de "western blotting" para mormo. Foram colhidos dados e amostras de tecidos de 24 equídeos para análise histológica, microbiológica e molecular. Em 23 equídeos não existiam sinais clínicos, alterações morfológicas, isolamento microbiológico ou detecção molecular que caracterizassem infecção por B. mallei. Por outro lado, amostras de um cavalo assintomático e sem alterações lesionais apresentaram amplificação de sequência compatível com B. mallei na PCR. Considerando que a infecção por B. mallei é passível da aplicação de medidas de defesa sanitária animal e que por exigência internacional e da legislação nacional, os resultados sorológicos são ferramentas que devem amparar os procedimentos de saneamento para erradicação da bactéria no estado de Mato Grosso, Brasil.

Evaluation of dot-blot test for serological diagnosis of bovine brucellosis

Abstract The objective of this study was to standardize and validate the dot-blot test for the serological diagnosis of bovine brucellosis, compare the results with those found in the 2-mercaptoethanol (2-ME) and complement fixation test (CF), and estimate the relative sensitivity and specificity of the dot-blot compared to these tests. Fifty bovine blood serum samples were used for the test standardization, and 1315 samples were used for evaluation and comparison between the tests; the results were compared using the Kappa indicator. At the end of standardization, it was established as optimal for the antigen obtained from Brucella abortus B19 after passing through a microorganism rupture process, the blood serum samples diluted at 1:100, and the conjugate at 1:30,000. The comparison of the dot-blot results with 2-ME showed Kappa index of 0.9939, sensitivity of 99.48%, and specificity 99.91%, with CF, Kappa index of 0.8226, sensitivity 100% and specificity 95.32%. Using the combination of the test results 2-ME and CF to establish the true condition of the animal, the dot-blot showed relative sensitivity of 100%, and relative specificity of 99.91%. The evaluated test proved to be effective and reliable, besides being easy to handle and interpret the results.

Evaluation of dot-blot test for serological diagnosis of bovine brucellosis

The objective of this study was to standardize and validate the dot-blot test for the serological diagnosis of bovine brucellosis, compare the results with those found in the 2-mercaptoethanol (2-ME) and complement fixation test (CF), and estimate the relative sensitivity and specificity of the dot-blot compared to these tests. Fifty bovine blood serum samples were used for the test standardization, and 1315 samples were used for evaluation and comparison between the tests; the results were compared using the Kappa indicator. At the end of standardization, it was established as optimal for the antigen obtained from Brucella abortus B19 after passing through a microorganism rupture process, the blood serum samples diluted at 1:100, and the conjugate at 1:30,000. The comparison of the dot-blot results with 2-ME showed Kappa index of 0.9939, sensitivity of 99.48%, and specificity 99.91%, with CF, Kappa index of 0.8226, sensitivity 100% and specificity 95.32%. Using the combination of the test results 2-ME and CF to establish the true condition of the animal, the dot-blot showed relative sensitivity of 100%, and relative specificity of 99.91%. The evaluated test proved to be effective and reliable, besides being easy to handle and interpret the results.(AU)

Evaluation of dot-blot test for serological diagnosis of bovine brucellosis.

The objective of this study was to standardize and validate the dot-blot test for the serological diagnosis of bovine brucellosis, compare the results with those found in the 2-mercaptoethanol (2-ME) and complement fixation test (CF), and estimate the relative sensitivity and specificity of the dot-blot compared to these tests. Fifty bovine blood serum samples were used for the test standardization, and 1315 samples were used for evaluation and comparison between the tests; the results were compared using the Kappa indicator. At the end of standardization, it was established as optimal for the antigen obtained from Brucella abortus B19 after passing through a microorganism rupture process, the blood serum samples diluted at 1:100, and the conjugate at 1:30,000. The comparison of the dot-blot results with 2-ME showed Kappa index of 0.9939, sensitivity of 99.48%, and specificity 99.91%, with CF, Kappa index of 0.8226, sensitivity 100% and specificity 95.32%. Using the combination of the test results 2-ME and CF to establish the true condition of the animal, the dot-blot showed relative sensitivity of 100%, and relative specificity of 99.91%. The evaluated test proved to be effective and reliable, besides being easy to handle and interpret the results.

Brucella spp. in equines slaughtered in the south region of Brazil / Anticorpos contra Brucella spp. em equídeos da região Sul do Brasil abatidos em matadouro-frigorífico

Bacteria of the genus Brucella are widespread in many countries. These microorganisms can infect humans and many wild and domestic animal species. These bacteria have zoonotic potential, and can cause economic and public health problems since they can be transmitted by direct contact with sick animals, through consumption of contaminated milk, raw meat and its derivatives (Soares et al., 2015). Brucellosis is considered a chronic evolving disease, unusual in horses, predominantly caused by Brucella abortus. However, it is not characterized by reproductive disorders in horses, but primarily by abscess in the cervical region, bursa, tendons, and joints. Transmission is likely to occur via ingestion of contaminated water and pastures, especially in areas endemic for bovine brucellosis (Ribeiro et al., 2008). The slaughterhouse is a strategic point for obtaining information about the animal and animal products, edible or not. This study investigated the presence of anti-Brucella spp. immunoglobulins in the serum samples from horses slaughtered in a slaughterhouse in southern Brazil, to estimate the frequency of Brucella spp. antibodies and determine the spatial distribution of the cases.(AU)

Objetivou-se investigar a presença de imunoglobulinas anti-Brucella spp. em amostras de soros sanguíneos de equídeos abatidos em matadouro-frigorífico, sob Serviço de Inspeção Federal, localizado na região Sul do Brasil. Utilizaram-se 767 amostras de sangue de equídeos adultos abatidos no período de abril a maio de 2013. Os animais foram provenientes de 45 municípios dos estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina e Paraná. Para diagnóstico, foram utilizados os testes do antígeno acidificado tamponado (AAT), sendo os resultados positivos confirmados pelos testes de polarização fluorescente (TPF), reação de fixação de complemento (RFC) e 2-mercaptoetanol (2-ME). Foram sororreagentes no AAT 65 (8,47%) animais. Destes, apenas dois (3,07%) foram positivos também na RFC e três (4,62%) animais foram positivos no TPF. Apesar da baixa frequência de animais positivos para Brucella spp., pode-se afirmar que a infecção em equinos está presente na área estudada, o que é demonstrado pela presença de animais sororreatores. No âmbito da saúde animal, pública e ocupacional, sugere-se a atenção a essa doença, visando diminuir o risco de infecção.(AU)

Brucella spp. in equines slaughtered in the south region of Brazil / Anticorpos contra Brucella spp. em equídeos da região Sul do Brasil abatidos em matadouro-frigorífico

Bacteria of the genus Brucella are widespread in many countries. These microorganisms can infect humans and many wild and domestic animal species. These bacteria have zoonotic potential, and can cause economic and public health problems since they can be transmitted by direct contact with sick animals, through consumption of contaminated milk, raw meat and its derivatives (Soares et al., 2015). Brucellosis is considered a chronic evolving disease, unusual in horses, predominantly caused by Brucella abortus. However, it is not characterized by reproductive disorders in horses, but primarily by abscess in the cervical region, bursa, tendons, and joints. Transmission is likely to occur via ingestion of contaminated water and pastures, especially in areas endemic for bovine brucellosis (Ribeiro et al., 2008). The slaughterhouse is a strategic point for obtaining information about the animal and animal products, edible or not. This study investigated the presence of anti-Brucella spp. immunoglobulins in the serum samples from horses slaughtered in a slaughterhouse in southern Brazil, to estimate the frequency of Brucella spp. antibodies and determine the spatial distribution of the cases.(AU)

Objetivou-se investigar a presença de imunoglobulinas anti-Brucella spp. em amostras de soros sanguíneos de equídeos abatidos em matadouro-frigorífico, sob Serviço de Inspeção Federal, localizado na região Sul do Brasil. Utilizaram-se 767 amostras de sangue de equídeos adultos abatidos no período de abril a maio de 2013. Os animais foram provenientes de 45 municípios dos estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina e Paraná. Para diagnóstico, foram utilizados os testes do antígeno acidificado tamponado (AAT), sendo os resultados positivos confirmados pelos testes de polarização fluorescente (TPF), reação de fixação de complemento (RFC) e 2-mercaptoetanol (2-ME). Foram sororreagentes no AAT 65 (8,47%) animais. Destes, apenas dois (3,07%) foram positivos também na RFC e três (4,62%) animais foram positivos no TPF. Apesar da baixa frequência de animais positivos para Brucella spp., pode-se afirmar que a infecção em equinos está presente na área estudada, o que é demonstrado pela presença de animais sororreatores. No âmbito da saúde animal, pública e ocupacional, sugere-se a atenção a essa doença, visando diminuir o risco de infecção.(AU)

Human FcRn can mediate the transport across intestinal mucosal barrier and prolong the half-life of rabbit IgG in vivo

FcRn (neonatal Fc receptor) plays an important role in IgG transportation, antigen presentation and signal transmission. In this study, the complement fixation test and flow cytometry test were performed to verify whether the heterologous antibody could be transmitted to the serum or leukocyte with FcγR (Fc gamma receptor) across the intestinal mucosa. The results showed that rabbit anti-bovine IgG could be detected in both the serum and the leukocytes, which indicated that the heterologous antibody could transport across the intestinal mucosa to enter the blood and be effectively delivered to the leukocytes with FcγR. In addition, the results also showed that the rabbit anti-bovine IgG still could be detected in the leukocyte group (P=0.044<0.05) after 21 days. It indicated that the rabbit IgG could exist in the body for a long term (up to 21 days) after being transported to the cells containing FcγR.

Prevalência de anticorpos contra Chlamydophila abortus em ovinos da região de Londrina, Paraná, Brasil / Prevalence of antibodies to Chlamydophila abortus in ovines in the Londrina area of Paraná state, Brazil

O objetivo deste trabalho foi estimar a prevalência de anticorpos anti-Chlamydophila abortus em ovinos de propriedades localizadas na região de Londrina, estado do Paraná. A prova de fixação de complemento foi realizada em 267 amostras de soro sanguíneo de ovinos adultos, provenientes de oito propriedades e foram considerados positivos os soros com títulos ? 32. Em sete (87,50%) propriedades foram detectados 19 (7,11%) animais positivos, sendo 17 com títulos de 32, um com 64 e outro com 128. Nestas propriedades, os sinais clínicos descritos foram abortamentos, natimortalidade, nascimento de crias fracas e repetição de cio. A elevada frequência de propriedades com pelo menos um animal positivo e a ocorrência de 19 (7,11%) animais positivos na prova de fixação de complemento sugerem a presença de Chlamydophila abortus nos animais das propriedades estudadas. (AU)

The aim of this paper was to estimate the prevalence of antibodies to Chlamydophila abortus in ewes from the Londrina region of Paraná state. Blood samples from 267 adult ewes from eight herds were submitted to complement fixation testing. Tests were considered positive when the titers ? 32. Nineteen animals (7.11%) in 7 (87.50%) herds tested positive for antibodies against C. abortus. The titers were 32 in 17 animals and were 64 and 128 in the other two animals. The clinical signs recorded were abortion, stillbirth, weak newborns and heat repetition. The high frequency of herds with at least one positive animal and a seroprevalence of 7.11% suggest the presence of Chlamydophila abortus in the animals of studied herds.(AU)

Prevalência de anticorpos contra Chlamydophila abortus em ovinos da região de Londrina, Paraná, Brasil / Prevalence of antibodies to Chlamydophila abortus in ovines in the Londrina area of Paraná state, Brazil

O objetivo deste trabalho foi estimar a prevalência de anticorpos anti-Chlamydophila abortus em ovinos de propriedades localizadas na região de Londrina, estado do Paraná. A prova de fixação de complemento foi realizada em 267 amostras de soro sanguíneo de ovinos adultos, provenientes de oito propriedades e foram considerados positivos os soros com títulos ? 32. Em sete (87,50%) propriedades foram detectados 19 (7,11%) animais positivos, sendo 17 com títulos de 32, um com 64 e outro com 128. Nestas propriedades, os sinais clínicos descritos foram abortamentos, natimortalidade, nascimento de crias fracas e repetição de cio. A elevada frequência de propriedades com pelo menos um animal positivo e a ocorrência de 19 (7,11%) animais positivos na prova de fixação de complemento sugerem a presença de Chlamydophila abortus nos animais das propriedades estudadas.

The aim of this paper was to estimate the prevalence of antibodies to Chlamydophila abortus in ewes from the Londrina region of Paraná state. Blood samples from 267 adult ewes from eight herds were submitted to complement fixation testing. Tests were considered positive when the titers ? 32. Nineteen animals (7.11%) in 7 (87.50%) herds tested positive for antibodies against C. abortus. The titers were 32 in 17 animals and were 64 and 128 in the other two animals. The clinical signs recorded were abortion, stillbirth, weak newborns and heat repetition. The high frequency of herds with at least one positive animal and a seroprevalence of 7.11% suggest the presence of Chlamydophila abortus in the animals of studied herds.

A comparison of two agar gel immunodiffusion methods and a complement fixation test for serologic diagnosis of Brucella ovis infection in experimentally infected rams / Comparação entre dois métodos de imunodifusão em gel de Agar e um método de fixação de complemento para o diagnóstico sorológico da infecção por Brucella ovis em carneiros experimentalmente infectados

A infecção por Brucella ovis é considerada uma das principais causas de epididimite e infertilidade em carneiros, resultando em falhas reprodutivas e perdas econômicas significativas em rebanhos ovinos ao redor do mundo. O estudo teve o objetivo de avaliar três testes sorológicos disponíveis para o diagnóstico da brucelose ovina por B. ovis, utilizando 181 soros ovinos. Amostras de soro provenientes de carneiros experimentalmente infectados foram coletadas ao longo de 192 dias pós-infecção (n=117) e durante o período pré-infecção (n=9). Adicionalmente, amostras de soro foram obtidas de ovinos provenientes de um rebanho livre para B. ovis (n=55). As técnicas de imunodifusão em gel de agar (IDGA), utilizando dois antígenos disponíveis comercialmente, e de fixação de complemento foram comparadas (FC). Foram obtidos resultados de sensibilidade especificidade semelhantes para ambos os métodos de IDGA e ainda, a técnica de IDGA foi mais eficiente do que a da FC para o diagnóstico sorológico da infecção por B. ovis.

Pesquisa de anticorpos anti-Brucella abortus e anti-Brucella ovis em ovinos no município de Uberlândia, MG / Research of Brucella abortus and Brucella ovis antibodies in sheep of Uberlândia county, MG, Brazil

The first epidemiologic inquiry to Brucella abortus (B. abortus) and Brucella ovis (B. ovis) was carried out in sheep from Uberlândia county, MG. A total of 334 blood serum samples of sheep from both sexes and different ages and breeds were collected in 12 farms. An epidemiologic questionnaire was applied for each farm. Tests for B. abortus and B. ovis antibodies were Buffered Acidified Antigen and Complement Fixation, respectively. None of the sheep was reactive to B. abortus and B. ovis; however, the adoption of sanitary measures is important to avoid the introduction of infections caused by these bacteria.

Pesquisa de anticorpos anti-Brucella abortus e anti-Brucella ovis em ovinos no município de Uberlândia, MG / Research of Brucella abortus and Brucella ovis antibodies in sheep of Uberlândia county, MG, Brazil

The first epidemiologic inquiry to Brucella abortus (B. abortus) and Brucella ovis (B. ovis) was carried out in sheep from Uberlândia county, MG. A total of 334 blood serum samples of sheep from both sexes and different ages and breeds were collected in 12 farms. An epidemiologic questionnaire was applied for each farm. Tests for B. abortus and B. ovis antibodies were Buffered Acidified Antigen and Complement Fixation, respectively. None of the sheep was reactive to B. abortus and B. ovis; however, the adoption of sanitary measures is important to avoid the introduction of infections caused by these bacteria.(AU)

A comparison of two agar gel immunodiffusion methods and a complement fixation test for serologic diagnosis of Brucella ovis infection in experimentally infected rams / Comparação entre dois métodos de imunodifusão em gel de Agar e um método de fixação de complemento para o diagnóstico sorológico da infecção por Brucella ovis em carneiros experimentalmente infectados

A infecção por Brucella ovis é considerada uma das principais causas de epididimite e infertilidade em carneiros, resultando em falhas reprodutivas e perdas econômicas significativas em rebanhos ovinos ao redor do mundo. O estudo teve o objetivo de avaliar três testes sorológicos disponíveis para o diagnóstico da brucelose ovina por B. ovis, utilizando 181 soros ovinos. Amostras de soro provenientes de carneiros experimentalmente infectados foram coletadas ao longo de 192 dias pós-infecção (n=117) e durante o período pré-infecção (n=9). Adicionalmente, amostras de soro foram obtidas de ovinos provenientes de um rebanho livre para B. ovis (n=55). As técnicas de imunodifusão em gel de agar (IDGA), utilizando dois antígenos disponíveis comercialmente, e de fixação de complemento foram comparadas (FC). Foram obtidos resultados de sensibilidade especificidade semelhantes para ambos os métodos de IDGA e ainda, a técnica de IDGA foi mais eficiente do que a da FC para o diagnóstico sorológico da infecção por B. ovis.(AU)

Prevalência e fatores de risco associados à infecção por Chlamydophila abortus em granjas suinícolas tecnificadas no estado de Alagoas, Brasil / Prevalence and risk factors associated with infection by Chlamydophila abortus in commercial pig farms in the state of Alagoas, Brazil

Objetivou-se com este estudo calcular a prevalência e identificar os fatores de risco associados à infecção por Chlamydophila abortus em suínos criados em granjas tecnificadas no Estado de Alagoas, Brasil. Para compor a amostra do estudo foram utilizados 342 suínos, sendo 312 matrizes e 30 varrões oriundos de sete granjas de ciclo completo e distribuídas em cinco municípios do Estado de Alagoas. O diagnóstico sorológico da infecção por C. abortus foi realizado através da microtécnica de Fixação do Complemento (RFC). A análise dos fatores de risco foi realizada por meio da aplicação de questionários investigativos, constituídos por perguntas objetivas referentes ao criador, às características gerais da propriedade, ao manejo produtivo, reprodutivo e sanitário. Observou-se prevalência de 10,5% (36/342) de suínos soropositivos para a infecção por C. abortus, com 85,8% das granjas analisadas com animais positivos. As variáveis que demonstraram associação significativa foram: utilização de bebedouros comuns para jovens e adultos (p=0,024;OR=10,83; IC=1,36–86,03) e método de cobertura de monta natural associada à inseminação artificial (p=0,05; OR=7,62; IC=1,00-58,31). Relata-se a primeira ocorrência de anticorpos anti-C. abortus em suínos no Brasil. Fatores como a introdução de reprodutores nos plantéis e a forma de fornecimento de água foram evidenciados como facilitadores da infecção das matrizes neste estudo. Dessa forma, medidas de controle da infecção devem ser enfocadas nesse aspecto para evitar a disseminação do agente nas granjas suinícolas e em outros plantéis da região.

The objective of this study was to determine the prevalence and identify risk factors associated with Chlamydophila abortus infection in commercial swine farms on the state of Alagoas, Brazil. To compose the study sample 342 pigs were used, with 312 sows and 30 boars from seven swine farms and distributed in five districts of the Alagoas. The serological diagnosis of infection by C. abortus was performed by fixation of complement microtechnique (RFC). The analysis of risk factors were performed by the application of research questionnaires, consisting of objective questions relating to the designer, the general characteristics of the property, the production, reproductive and health management. I was observed a prevalence of 10.5% (36/342) of pigs seropositive for infection by C. abortus with 85.8% of farms with positive animals analyzed. The variables that showed significant association were use of common drinker for young and adults pigs (p=0.024, OR=10.83, CI=1.36-86.03) and associated the natural mount with artificial insemination (p=0.05, OR=7.62, CI=1.00-58.31). This work reports the first occurrence of anti-C. abortusin pigs in Brazil. Factors as the introduction of boars in herds and the form of water supply were seen as facilitators of infection on sows in this study. Thus measures of infection control should be focused on this aspect to prevent the spread of the agent in pig farms and other herds in the region.

Prevalência e fatores de risco associados à infecção por Chlamydophila abortus em granjas suinícolas tecnificadas no Estado de Alagoas, Brasil / Prevalence and risk factors associated with infection by Chlamydophila abortus in commercial pig farms in the state of Alagoas, Brazil

Objetivou-se com este estudo calcular a prevalência e identificar os fatores de risco associados à infecção por Chlamydophila abortus em suínos criados em granjas tecnificadas no Estado de Alagoas, Brasil. Para compor a amostra do estudo foram utilizados 342 suínos, sendo 312 matrizes e 30 varrões oriundos de sete granjas de ciclo completo e distribuídas em cinco municípios do Estado de Alagoas. O diagnóstico sorológico da infecção por C. abortus foi realizado através da microtécnica de Fixação do Complemento (RFC). A análise dos fatores de risco foi realizada por meio da aplicação de questionários investigativos, constituídos por perguntas objetivas referentes ao criador, às características gerais da propriedade, ao manejo produtivo, reprodutivo e sanitário. Observou-se prevalência de 10,5% (36/342) de suínos soropositivos para a infecção por C. abortus, com 85,8% das granjas analisadas com animais positivos. As variáveis que demonstraram associação significativa foram: utilização de bebedouros comuns para jovens e adultos (p=0,024;OR=10,83; IC=1,36–86,03) e método de cobertura de monta natural associada à inseminação artificial (p=0,05; OR=7,62; IC=1,00-58,31). Relata-se a primeira ocorrência de anticorpos anti-C. abortus em suínos no Brasil. Fatores como a introdução de reprodutores nos plantéis e a forma de fornecimento de água foram evidenciados como facilitadores da infecção das matrizes neste estudo. Dessa forma, medidasde controle da infecção devem ser enfocadas nesse aspecto para evitar a disseminação do agente nas granjas suinícolas e em outros plantéis da região.(AU)~ipt

The objective of this study was to determine the prevalence and identify risk factors associated with Chlamydophila abortus infection in commercial swine farms on the state of Alagoas, Brazil. To compose the study sample 342 pigs were used, with 312 sows and 30 boars from seven swine farms and distributed in five districts of the Alagoas. The serological diagnosis of infection by C. abortus was performed by fixation of complement microtechnique (RFC). The analysis of risk factors were performed by the application of research questionnaires, consisting of objective questions relating to the designer, the general characteristics of the property, the production, reproductive and health management. I was observed a prevalence of 10.5% (36/342) of pigs seropositive for infection by C. abortus with 85.8% of farms with positive animals analyzed. The variables that showed significant association were use of common drinker for young and adults pigs (p=0.024, OR=10.83, CI=1.36-86.03) and associated the natural mount with artificial insemination (p=0.05, OR=7.62, CI=1.00-58.31). This work reports the first occurrence of anti-C. abortusin pigs in Brazil. Factors as the introduction of boars in herds and the form of water supply were seen as facilitators of infection on sows in this study. Thus measures of infection control should be focused on this aspect to prevent the spread of the agent in pig farms and other herds in the region.(AU)

Prevalence of bovine brucellosis among milk suppliers of a dairy industry in Itirapuã, São Paulo, Brazil / Prevalência de brucelose bovina entre rebanhos fornecedores de leite de um laticínio em Itirapuã, São Paulo

The aim of this study was to verify the prevalence of bovine brucellosis among milk suppliers of a dairy industry located in Itirapuã, São Paulo, Brazil, and to analyze the risk factors eventually associated with the occurrence of brucellosis among the herds involved in the study. A voluntary sample of 813 animals from 37 herds whose owners agreed to participate in the study was obtained among a population of 942 adult cattle from 55 herds located in the municipalities of Itirapuã and Patrocínio Paulista. A questionnaire about risk factors that could be associated with the prevalence rates was applied. Serum samples from all 813 animals were collected and tested by the rose Bengal plate test (RBPT); positive samples were then tested by the complement fixation test (CFT). Of the 813 serum samples, 26 (3.2%) tested positive in the serial application of RBPT and CFT, and of the 37 herds, 12 (32.4%) had at least one positive animal. Factors that showed association with the prevalence rate were number of animals in the herd, lack of vaccination with strain B19 and frequent introduction of animals.

O estudo teve por objetivo determinar a prevalência da brucelose bovina entre fornecedores de leite de um laticínio situado no Município de Itirapuã, Estado de São Paulo, e analisar fatores de risco eventualmente associados à ocorrência de brucelose nos rebanhos estudados. De uma população de 942 bovinos adultos distribuídos em 55 rebanhos, situados nos municípios de Itirapuã e de Patrocínio Paulista, foi obtida uma amostra voluntária composta por 813 animais, distribuídos em 37 rebanhos cujos proprietários aceitaram participar do estudo. Foi aplicado um questionário, para a obtenção de informações sobre fatores que pudessem estar associados às taxas de prevalência. Foram colhidas amostras de soro sanguíneo de todos os animais, as quais foram submetidas ao teste do antígeno acidificado tamponado (AAT), e as amostras positivas nesse teste foram submetidas à reação de fixação de complemento (RFC). Das 813 amostras de soro sanguíneo colhidas, 26 (3,2%) resultaram positivas na aplicação em série dos testes de triagem (AAT) e confirmatório (RFC), e das 37 propriedades estudadas, 12 (32,4%) apresentaram pelo menos um animal positivo. Os fatores que se mostraram associados à ocorrência de brucelose foram número de animais no rebanho, não utilização da vacina B19 e compra frequente de animais.

Prevalência de anticorpos contra os agentes da maedi-visna e clamidofilose em ovinos no município de Uberlândia, MG / Prevalence of antibodies against the agents of maedi-visna and chlamydophilosis in sheep from Uberlândia county, MG, Brazil

Objetivou-se com este estudo realizar o primeiro inquérito soro-epidemiológico para o vírus da maedi-visna e Chlamydophila spp. em 12 rebanhos de ovinos do Município de Uberlândia, MG. Foram utilizadas 334 amostras de soro sanguíneo de ovinos e aplicou-se um inquérito epidemiológico a cada propriedade. Os testes realizados para a pesquisa de anticorpos contra o vírus da maedi-visna e Chlamydophila spp. foram imunodifusão em gel de ágar (IDGA) e reação de fixação do complemento (RFC), respectivamente. Não foram detectados ovinos reagentes para maedi-visna. Verificou-se uma prevalência de 3,3% para Chlamydophila spp., com títulos variando de 32 a 64. Não houve diferença estatística significativa (p > 0,05) para os fatores de risco analisados. Ressalta-se a importância dos sistemas de vigilância epidemiológica para atuar no controle dessas infecções, evitando a introdução do vírus da maedi-visna e uma maior propagação da Chlamydophila spp. neste município.

The aim of this study was to carry out the first investigation into the serological prevalence of maedi-visna virus and Chlamydophila spp. on 12 sheep breeding farms in Uberlândia County, MG, Brazil. A total of 334 blood serum samples were used and an epidemiological survey was completed by each farm. The tests to detect maedi-visna and Chlamydophila spp. antibodies were an agar gel immunodiffusion (AGID) and a complement fixation test (CFT), respectively. None of the sheep were reactive to maedi-visna. The detection of antibodies against Chlamydophila spp. was 3.3%, with titers varying from 32 to 64. There was no statistically significant difference (p > 0.05) in regard to the risk factors analyzed. The importance of epidemiological surveillance systems to aid in the control of these infections is emphasized, in order to avoid the introduction of maedi-visna virus and a wider spread of Chlamydophila spp. in this county.

PREVALÊNCIA DE ANTICORPOS CONTRA OS AGENTES DA MAEDI-VISNA E CLAMIDOFILOSE EM OVINOS NO MUNICÍPIO DE UBERLÂNDIA, MG

ABSTRACT The aim of this study was to carry out the first investigation into the serological prevalence of maedi-visna virus and Chlamydophila spp. on 12 sheep breeding farms in Uberlândia County, MG, Brazil. A total of 334 blood serum samples were used and an epidemiological survey was completed by each farm. The tests to detect maedi-visna and Chlamydophila spp. antibodies were an agar gel immunodiffusion (AGID) and a complement fixation test (CFT), respectively. None of the sheep were reactive to maedi-visna. The detection of antibodies against Chlamydophila spp. was 3.3%, with titers varying from 32 to 64. There was no statistically significant difference (p > 0.05) in regard to the risk factors analyzed. The importance of epidemiological surveillance systems to aid in the control of these infections is emphasized, in order to avoid the introduction of maedi-visna virus and a wider spread of Chlamydophila spp. in this county.

RESUMO Objetivou-se com este estudo realizar o primeiro inquérito soro-epidemiológico para o vírus da maedi-visna e Chlamydophila spp. em 12 rebanhos de ovinos do Município de Uberlândia, MG. Foram utilizadas 334 amostras de soro sanguíneo de ovinos e aplicou-se um inquérito epidemiológico a cada propriedade. Os testes realizados para a pesquisa de anticorpos contra o vírus da maedi-visna e Chlamydophila spp. foram imunodifusão em gel de ágar (IDGA) e reação de fixação do complemento (RFC), respectivamente. Não foram detectados ovinos reagentes para maedi-visna. Verificou-se uma prevalência de 3,3% para Chlamydophila spp., com títulos variando de 32 a 64. Não houve diferença estatística significativa (p > 0,05) para os fatores de risco analisados. Ressalta-se a importância dos sistemas de vigilância epidemiológica para atuar no controle dessas infecções, evitando a introdução do vírus da maedi-visna e uma maior propagação da Chlamydophila spp. neste município.

Ocorrência e fatores de risco para Chlamydophilaabortus em ovinos e caprinos no estado de Pernambuco: [revisão] / Occurrence and risk factors for Chlamydophilaabortus infection in sheep and goats in Pernambuco: [revision]

Objetivou-se com este estudo identificar os fatores de risco associados à infecção por Chlamydophila abortus em caprinos e ovinos nas regiões do Litoral/ Zonada Mata e Agreste do Estado de Pernambuco. Foram colhidas 290 amostras de soros para pesquisa de anticorpos contra clamídia em 12 propriedades. Para identificar os fatores de risco foram aplicados questionários junto aos proprietários. A freqüência de animais soro-reagentes nos rebanhos estudados foi de 10,3%, sendo 12,0% para caprinos e 8,1% para ovinos, identificando-se 11/12 (91,6%) focos da infecção. Registra-se a primeira ocorrência de anticorpos anti-C. abortus em caprinos no estado de Pernambuco e em ovinos no Brasil. Os fatores derisco associados à infecção em caprinos foram a raça (OR=9,10) e o manejo intensivo (OR=6,41) e para ovinosnão foram encontradas associações significativas para nenhum fator analisado. Concluiu-se que a infecção porChlamydophila sp. encontra-se disseminada em criações de caprinos e ovinos da Zona da Mata e Agreste do Estado de Pernambuco. Medidas de controle devem ser implantadas nos criatórios estudados, enfocando principalmente os fatores de risco identificados neste estudo para reduzir a possibilidade de infecção por este agente.

The study aimed to identify risk factors associated with Chlamydophila abortus infection in sheep and goats from the Litoral/Zona da Mata and Agreste region of Pernambuco state, Brazil. Serum samples (n=290) were analyzed to detect Chlamydophila spp. antibodies in 12 farms. Questionnaires were applied to identify risk factors. Frequency ofserum-reactive animals were 10.3% (12.0% in ewes and 8.1% in goats) and 1/12 (91.6%) infection focuses were identified. This is the first report on anti-Chlamydophhila abortus antibodies in goats and sheep in Pernambuco and Brazil, respectively. Risk factorsassociated with goat infection were breed (OR=9.10) and management (OR=6.41). No significant associations in any of the analyzed factors were found for sheep. In summary, Chlamydophila sp. infection is disseminated in sheep and goat herds in the region. Control measures should be established, focusing primarily risk factor identified in this study, to reduce the possibility of infection by the agent.

Evaluación entre cuatro técnicas serológicas para el diagnóstico de infecciones causadas por brucella abortus en bovinos

ABSTRACT Serum samples from 200 vaccinated adult bovine females from two herds were analyzed by buffered antigen acidified plate test (AAT) (Rose Bengal Plate Test), indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISAI), 2-mercaptoethanol test (2-ME) and complement fixation test (FC). For ELISAI, the fixed value of 45 percent positivity (PP) was used. Group A was composed of 100 animals, with description of reproductive disturbances compatible with brucellosis and reagent to the AAT. Group B was composed of 100 animals serologically free of B. abortus for at least two years. Additionally, all serum samples were tested using the AAT, the 2-ME and the FC to confirm negative status. The combination of two tests, FC and 2ME was used as the gold standard. The relative sensitivity and specificity and the Kappa were calculated for each test. The result of kappa for 2-ME in relation to the FC and of the AAT and the ELISAI in relation to the gold standard was, respectively, 0.78, 0.86 And 0.84. The relative sensitivities (Sr) were, respectively, 84.1% (53/63), 100% (53/53) and 98.1% (52/53), and the relative specificities (Er) were 93.3% (111/119), 90.1% (100/111) and 90.1% (100/111). For comparison between the ELISAI and the AAT, there was obtained a Kappa of 0.91, Sr of 93% (93/100) and Er of 98% (98/100). Conclusions: 1 The option of constituting the gold standard based on at least two tests was the most suitable for this study; 2 The ELISAI resulted in values of Sr and Er similar to the AAT. Therefore, the AAT and the ELISAI are good for screening in regard to the diagnosis of brucellosis.

RESUMO O estudo objetivou comparar o desempenho do teste mercaptoetanol (2-ME) com o teste fixação de complemento (FC) e os testes antígeno acidificado tamponado (AAT) e ELISA indireto (ELISAI) frente ao gold standard, para o sorodiagnóstico da brucelose em bovinos. Também se comparou o ELISAI com o AAT. Foram processadas 200 amostras de soro de fêmeas bovinas adultas de dois rebanhos, denominados grupos A e B. O grupo A foi composto de 100 fêmeas vacinadas contra brucelose, com histórico de problemas reprodutivos compatíveis com a doença e reatoras ao AAT. O grupo B foi composto de 100 fêmeas vacinadas e não reatoras ao AAT por mais de dois anos. Todos os soros foram submetidos aos quatro testes. Foi empregado, como gold standard, a combinação do FC com o 2ME. O índice Kappa foi usado como medida de concordância e seu resultado, para o 2-ME, o AAT e o ELISAI foi de, respectivamente, 0,78, 0,86 e 0,84. As sensibilidades relativas (Sr) foram de, respectivamente, 84,1%, 100% y 98,1% e as especificidades relativas (Er), 93,3%, 90,9% e 90,1%. Entre o ELISAI e o AAT, obteve-se Kappa de 0,91, Sr de 93% e Er de 98%. Conclusões: 1-A opção de se contituir o gold standard baseado em dois testes foi a mais adequada para este estudo; 2-Os valores de Sr e Er do ELISAI foram semelhantes aos do AAT. 3-O AAT e o ELISAI mostraram ser testes muito sensíveis e de boa especificidade e, portanto, adequados para serem usados como triagem no diagnóstico da brucelose.