Validation of the mindray BC6000 hematology analyzer for erythroblast counting in peripheral blood / Validação do analisador hematológico Mindray BC6000 para a contagem de eritroblastos em sangue periférico

ABSTRACT Introduction Differential counting of erythroblasts in blood samples by hematology analyzers still has limitations. Technological advances in blood count equipment have proposed the fully automated counting of these cells, however, not without its validation. Objective Validate the automated count of erythroblasts in peripheral blood in the Mindray BC6000 hematology analyzer and verify the existence of correlation of the maturation stages of erythroblasts with the equipment's graphics. Material and Methods Prospective study with peripheral blood samples from the Clinical Pathology Laboratory Dr Paulo C. Azevedo, regardless of age and gender, to validate the erythroblast count in the Mindray BC6000 hematology analyzer compared to the manual method (gold standard), in the period of June 2019 to December 2020. Results Seventeen peripheral blood samples were analyzed from newborns (09/17 - 52.3%) and from patients older than 2 years (08/17 - 47.7%) who had more than 18% of erythroblasts after morphological analysis of the sample. Statistical analysis of erythroblast counts by the two methodologies showed that the Mindray BC6000 hematological counter has good reproducibility, precision and linearity. There was no correlation between the maturation stages of erythroblasts and the equipment graphics. Conclusion The proposed validation showed that the Mindray BC6000 hematological counter has good analytical performance for counting erythroblasts in peripheral blood. However, there is no correlation between the maturation stages of erythroblasts with the graphics generated by the equipment.

RESUMO Introdução A contagem diferencial de eritroblastos em amostras de sangue por analisadores de hematologia ainda apresenta limitações. Os avanços tecnológicos nos equipamentos de hemograma têm proposto a contagem totalmente automatizada dessas células, porém, não sem sua validação. Objetivo Validar a contagem automatizada de eritroblastos no sangue periférico no analisador hematológico Mindray BC6000 e verificar a existência de correlação dos estágios de maturação dos eritroblastos com os gráficos do equipamento. Material e Métodos Estudo prospectivo com amostras de sangue periférico do Laboratório de Patologia Clínica Dr. Paulo C. Azevedo, independente de idade e sexo, para validação da contagem de eritroblastos no analisador hematológico Mindray BC6000 em comparação ao método manual (padrão ouro), no período de junho de 2019 a dezembro de 2020. Resultados Foram analisadas 17 amostras de sangue periférico de recém-nascidos (17/09 - 52,3%) e de pacientes maiores de 2 anos (17/08 - 47,7%) que apresentavam mais de 18% de eritroblastos após análise morfológica da amostra. A análise estatística das contagens de eritroblastos pelas duas metodologias mostrou que o contador hematológico Mindray BC6000 tem boa reprodutibilidade, precisão e linearidade. Não houve correlação entre os estágios de maturação dos eritroblastos e os gráficos do equipamento. Conclusão A validação proposta mostrou que o contador hematológico Mindray BC6000 apresenta bom desempenho analítico para contagem de eritroblastos em sangue periférico. Porém, não há correlação entre os estágios de maturação dos eritroblastos com os gráficos gerados pelo equipamento.

Estimating biological reference intervals for cell blood counts in a dog population / Estimación de los intervalos biológicos de referencia para conteos celulares sanguíneos en una población de perros / Estimando intervalos de referência biológica para contagens de células sanguíneas em uma população de cães

Abstract Background: The results from automated equipment and peripheral blood smears allow correlating clinical data with cellular blood counts (CBC), generating information on pathologies of hematological and non-hematological origin in dogs. Objective: To describe qualitative and quantitative magnitudes of CBC in healthy donor dogs of a blood- bank in Medellín (Colombia). Methods: A descriptive-prospective study was carried out from 146 records of CBC results from a blood-bank. The samples were processed by automated equipment, and trained personnel performed the observation of peripheral blood smears to collect qualitative information. Variables such as age, sex, breed, quantitative results, and observations of the peripheral blood smears were considered. For the definition of biological intervals (BIs), the mean and two standard deviations were used for the data with a normal distribution. Otherwise, the 2.5th and 97.5th percentiles were used. Results: The size, granularity, and cytoplasmic vacuoles in monocytes and polymorphonuclear eosinophils, as well as the presence of Barr chromatin and occasional circulating erythroblasts, were remarkable findings to the peripheral blood smear. With the standardization of data obtained from dogs of large and giant breeds, the present work provides BIs for some of the CBC data in the studied population. Conclusion: The findings of the present study allow approximations to the definition of alterations in blood cells and their counts, which can guide the veterinarian towards an early diagnosis in dogs.

Resumen Antecedentes: Los datos obtenidos de equipos automatizados y extendidos de sangre periférica permiten correlacionar la clínica y los resultados del hemograma, generando información de interés sobre patologías de origen hematológico y no hematológico en perros. Objetivo: Describir las magnitudes cualitativas y cuantitativas del hemograma en perros sanos, donantes de un banco de sangre en Medellín (Colombia). Métodos: Se realizó un estudio descriptivo-prospectivo a partir de 146 registros de resultados de hemograma remitidos por un banco de sangre. Las muestras fueron procesadas por un equipo automatizado y personal entrenado realizó la observación del extendido de sangre periférica para la colección de información de corte cualitativo. Variables como edad, sexo, raza, resultados cuantitativos de las muestras y observaciones al extendido de sangre periférica fueron consideradas. Para la definición de intervalos biológicos (IBs) se utilizaron la media y dos desviaciones estándar para los datos con distribución normal. De lo contrario, se utilizaron los percentiles 2,5 y 97,5. Resultados: El tamaño, granularidad y vacuolas citoplasmáticas en monocitos y polimorfonucleares eosinófilos, así como la presencia de Cromatina de Barr y eritroblastos circulantes ocasionales fueron hallazgos llamativos al extendido de sangre periférica. Con la normalización de los datos para caninos de razas grandes y gigantes, el presente trabajo aporta IBs para algunos de los datos del hemograma en la población estudiada. Conclusión: Los hallazgos del presente estudio permiten aproximaciones a la definición de alteraciones en las células hemáticas y sus conteos, que pueden orientar al médico veterinario hacia un diagnóstico temprano en perros.

Resumo Antecedentes: As informações obtidas de equipamentos automatizados e esfregaços de sangue periférico permitem correlacionar os resultados clínicos e de hemogramas, gerando informações interessantes sobre patologias de origem hematológica e não hematológica em cães. Objetivo: Descrever as magnitudes qualitativa e quantitativa do hemograma em cães saudáveis, doadores de um banco de sangue em Medellín (Colômbia). Métodos: Foi realizado um estudo descritivo-prospectivo a partir de 146 registros de resultados de hemograma encaminhados por um banco de sangue. As amostras foram processadas por uma equipe automatizada e pessoal treinado observou o esfregaço de sangue periférico para a coleta de informações qualitativas. Foram consideradas variáveis como idade, sexo, raça, resultados quantitativos das amostras e observações do esfregaço de sangue periférico. Para a definição de intervalos biológicos (IBs), foram utilizados a média e dois desvios-padrão para os dados com distribuição normal. Caso contrário, foram utilizados os percentis 2,5 e 97,5. Resultados: O tamanho, a granularidade e os vacúolos citoplasmáticos dos monócitos e das células polimorfonucleares dos eosinófilos, bem como a presença da cromatina de Barr e ocasionais eritroblastos circulantes foram achados marcantes na disseminação do sangue periférico. Com a normalização dos dados para cães de raças grandes e gigantes, o presente trabalho fornece IBs para alguns dos dados de hemograma na população estudada. Conclusão: Os achados do presente estudo permitem aproximações à definição de alterações nas células sanguíneas e suas contagens, o que pode orientar o médico veterinário responsável pelo diagnóstico precoce em cães.

Leukoerythroblastic reaction associated with COVID-19 infection. Case report / [Reacción leucoeritroblástica asociada a infección por COVID-19. Reporte de caso]

Introduction: COVID-19 disease is an acute viral pneumonia with multiple extrapulmonary manifestations, including certain hematological alterations. The leukoerythroblastic reaction or leukoerythroblastosis is defined by the presence in peripheral blood of nucleated erythroid cells and immature myeloids. Among its most frequent causes is medullary invasion by solid tumors and hematological neoplasms, so the recognition and consequent study of this reaction is extremely important. To date, only a single case of COVID-19 disease associated with a leukoerythroblastic reaction has been reported worldwide in adult patients. Methodology: In the following manuscript we describe the presence of leukoerythroblastosis in a male hospitalized for COVID-19, in which multiple causes were ruled out. Results: The patient had resolution of the leukoerythroblatosis as his respiratory symptoms resolved. Conclusion: The COVID-19 disease could be a new known cause of a leukoerythroblastic reaction, although we believe that a greater number of reported cases is necessary to affirm that the association was not random.

Introducción: La enfermedad COVID-19 es una neumonía viral aguda con múltiples manifestaciones extrapulmonares dentro de las cuales se incluyen ciertas alteraciones hematológicas. La reacción leucoeritroblástica o leucoeritroblastosis se define por la presencia en sangre periférica de células eritroides nucleadas y mieloides inmaduras. Dentro de sus causas más frecuentes se encuentra la invasión medular por tumores sólidos y neoplasias hematológicas, por lo que el reconocimiento y consecuente estudio de dicha reacción es sumamente importante. Hasta el momento sólo se ha reportado a nivel mundial un único caso de enfermedad COVID-19 asociado a reacción leucoeritroblástica en pacientes adultos. Metodología: En el siguiente manuscrito describimos la presencia de leucoeritroblastosis en un masculino internado por COVID-19, en el cual se descartaron múltiples causas secundarias.. Resultados: El paciente presentó resolución de la leucoeritroblatosis a medida que sus síntomas respiratorios se resolvieron. Conclusión: La enfermedad COVID-19 podría ser una nueva causa conocida de reacción leucoeritroblástica aunque creemos necesario un mayor número de casos reportados para afirmar que la asociación no fue al azar

Diagnóstico presuntivo de histoplasmosis en un frotis sanguíneo / Presumptive diagnosis of histoplasmosis in a blood smear / Diagnóstico presuntivo de histoplasmose em um esfregaço de sangue

Se comunica el diagnóstico de un caso de histoplasmosis asociada al SIDA a partir de la microscopía de un extendido hemático realizado en oportunidad del procesamiento de una muestra enviada al laboratorio para un estudio hematológico. El extendido, fijado con metanol y teñido con solución de Giemsa al 10% reveló, con objetivo de 100X, estructuras levaduriformes de 2-4 µ de diámetro dentro de las células leucocitarias sanguíneas, con la típica tinción en casquete y la presencia de un halo claro periférico, que caracterizan microscópicamente a Histoplasma capsulatum. Luego, para confirmar el hallazgo micológico, se procedió a teñir el mismo preparado con la técnica de Grocott, la cual puso de manifiesto levaduras de color pardo, dentro de los leucocitos sanguíneos. El paciente, deteriorado clínica e inmunológicamente (<50 linfocitos T CD4+/µL), falleció al día siguiente de efectuado el diagnóstico, a pesar de las medidas terapéuticas tomadas. Este hallazgo pone de manifiesto la necesidad de contar, en un Centro de Referencia de Enfermedades Infecciosas, con operadores entrenados para reconocer estructuras microbianas de importancia diagnóstica en extendidos hemáticos, aún en el Laboratorio General. El diagnóstico inmediato de ésta y otras infecciones graves, como el paludismo, a partir de estas muestras permite instalar un tratamiento etiológico y mejorar las posibilidades de éxito terapéutico.

A case of AIDS-associated histoplasmosis diagnosed by microscopy from a blood smear performed during a hematologic study was reported. The smear, fixed with methanol and stained with 10% Giemsa solution, revealed with a 100X objective, 2-4 µ-diameter yeast - like structures within the leuMicrobiología contakocytes, showing a typical staining in cap and a peripheral clear halo, characteristic of Histoplasma capsulatum. To confirm the mycological finding, the same smear was stained with the Grocott technique, showing brownish yeasts in the leucocytes. The patient, clinically deteriorated and with advanced immunological disorder (<50 T CD4+ lymphocytes/µL), died the next day after the diagnosis was made, in spite of the established treatments. This finding highlights the need to have operators trained in the recognition of microbiological structures of diagnostic importance in hematological smears in a Reference Center of Infectious Diseases, and even in the General Laboratory. The immediate diagnosis of this and other serious infections, as Malaria, enables the etiologic treatment and increases the possibilities of therapeutic success.

Comunica-se o diagnóstico de um caso de histoplasmose associada à AIDS, de uma microscopia de extensão sanguínea realizada por ocasião do processamento de uma amostra enviada ao laboratório para um estudo hematológico. A extensão, fixada com metanol e corada com solução de Giemsa a 10%, revelou com objetivo de 100X, estruturas leveduriformes de 2-4 µ diâmetro dentro de células leucocitárias do sangue, com a típica coloração em tampão e a presença de um halo claro periférico, os quais caracterizam microscopicamente a Histoplasma capsulatum. Em seguida, para confirmar o achado micológico, foi corada a mesma preparação com a técnica de Grocott, que mostrou leveduras de cor parda, dentro dos leucócitos sanguíneos. O paciente clínica e imunologicamente deteriorado (<50 células T CD4+/ µL) morreu um dia após o diagnóstico, apesar das medidas terapêuticas adotadas. Este achado evidencia a necessidade de contar, em um Centro de Referência para Doenças Infecciosas, com operadores treinados para reconhecer estruturas microbianas de importância diagnóstica em extensões sanguíneas, mesmo no Laboratório Geral. O diagnóstico imediato desta e de outras infecções graves como a Malária, a partir de uma extensão sanguínea torna possível instalar um tratamento etiológico e melhorar as chances de êxito terapêutico.

Diagnóstico presuntivo de histoplasmosis en un frotis sanguíneo / Presumptive diagnosis of histoplasmosis in a blood smear / Diagnóstico presuntivo de histoplasmose em um esfregaþo de sangue

Se comunica el diagnóstico de un caso de histoplasmosis asociada al SIDA a partir de la microscopía de un extendido hemático realizado en oportunidad del procesamiento de una muestra enviada al laboratorio para un estudio hematológico. El extendido, fijado con metanol y teñido con solución de Giemsa al 10% reveló, con objetivo de 100X, estructuras levaduriformes de 2-4 A de diámetro dentro de las células leucocitarias sanguíneas, con la típica tinción en casquete y la presencia de un halo claro periférico, que caracterizan microscópicamente a Histoplasma capsulatum. Luego, para confirmar el hallazgo micológico, se procedió a teñir el mismo preparado con la técnica de Grocott, la cual puso de manifiesto levaduras de color pardo, dentro de los leucocitos sanguíneos. El paciente, deteriorado clínica e inmunológicamente (<50 linfocitos T CD4+/AL), falleció al día siguiente de efectuado el diagnóstico, a pesar de las medidas terapéuticas tomadas. Este hallazgo pone de manifiesto la necesidad de contar, en un Centro de Referencia de Enfermedades Infecciosas, con operadores entrenados para reconocer estructuras microbianas de importancia diagnóstica en extendidos hemáticos, aún en el Laboratorio General. El diagnóstico inmediato de ésta y otras infecciones graves, como el paludismo, a partir de estas muestras permite instalar un tratamiento etiológico y mejorar las posibilidades de éxito terapéutico.(AU)

A case of AIDS-associated histoplasmosis diagnosed by microscopy from a blood smear performed during a hematologic study was reported. The smear, fixed with methanol and stained with 10% Giemsa solution, revealed with a 100X objective, 2-4 A-diameter yeast - like structures within the leuMicrobiología contakocytes, showing a typical staining in cap and a peripheral clear halo, characteristic of Histoplasma capsulatum. To confirm the mycological finding, the same smear was stained with the Grocott technique, showing brownish yeasts in the leucocytes. The patient, clinically deteriorated and with advanced immunological disorder (<50 T CD4+ lymphocytes/AL), died the next day after the diagnosis was made, in spite of the established treatments. This finding highlights the need to have operators trained in the recognition of microbiological structures of diagnostic importance in hematological smears in a Reference Center of Infectious Diseases, and even in the General Laboratory. The immediate diagnosis of this and other serious infections, as Malaria, enables the etiologic treatment and increases the possibilities of therapeutic success.(AU)

Comunica-se o diagnóstico de um caso de histoplasmose associada O AIDS, de uma microscopia de extensÒo sanguínea realizada por ocasiÒo do processamento de uma amostra enviada ao laboratório para um estudo hematológico. A extensÒo, fixada com metanol e corada com soluþÒo de Giemsa a 10%, revelou com objetivo de 100X, estruturas leveduriformes de 2-4 A diÔmetro dentro de células leucocitárias do sangue, com a típica coloraþÒo em tampÒo e a presenþa de um halo claro periférico, os quais caracterizam microscopicamente a Histoplasma capsulatum. Em seguida, para confirmar o achado micológico, foi corada a mesma preparaþÒo com a técnica de Grocott, que mostrou leveduras de cor parda, dentro dos leucócitos sanguíneos. O paciente clínica e imunologicamente deteriorado (<50 células T CD4+/ AL) morreu um dia após o diagnóstico, apesar das medidas terapÛuticas adotadas. Este achado evidencia a necessidade de contar, em um Centro de ReferÛncia para Doenþas Infecciosas, com operadores treinados para reconhecer estruturas microbianas de importÔncia diagnóstica em extens§es sanguíneas, mesmo no Laboratório Geral. O diagnóstico imediato desta e de outras infecþ§es graves como a Malária, a partir de uma extensÒo sanguínea torna possível instalar um tratamento etiológico e melhorar as chances de Ûxito terapÛutico.(AU)