ABSTRACT
In the semiarid of the state of Paraíba, the anti-rabies vaccination is not common, most of the local inhabitants who deal with the animals do not know the incidence of the disease in the region. In this study, samples of foxes (Pseudalopex vetulus), insectivorous bats (Molossus molossus), raccoons (Procyon cancrivorous) and domestic animals brains were submitted to the diagnosis of rabies, by using the direct fluorescent antibody technique (d-FAT) and mouse inoculation test (MIT). Of the 581 examined materials, 50 (8.60 %) were positive for d-FAT and 47 (8.09 %) for MIT. From the positive samples for rabies, RNAs were extracted and transformed to cDNA, at the Laboratory of Rabies/Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia/USP, SP. The phylogenetic characterization of the N gene was performed at the Universidade de São Paulo, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal, Universidade Nihon, Faculdade de Ciências Bioresource, Fujisawa, Kanagawa, Japão. Based on the results of genotyping and phylogenetic analyzes, it is concluded that the epidemiology of rabies is complex in the semiarid of Paraíba, with different viral variants being maintained in domestic dogs, foxes, insectivorous bats and vampire bats. All the isolates examined belong to the genotype I of the genus Lyssavirus and it is possible to state that in the region, foxes are important sylvatic reservoirs of the rabies virus.
No semiárido do Estado da Paraíba, a vacinação antirrábica não é comum, a maioria dos habitantes locais que lidam com os animais não conhece a incidência da doença na região. Neste estudo, amostras do cérebro de raposas (Pseudalopex vetulus), de morcegos insetívoros (Molossus molossus), de guaxinins (Procyon cancrivorous) e de animais domésticos foram submetidas ao diagnóstico da raiva, pela técnica de imunofluorescência direta (IFD) e inoculação intracerebral em camundongos (ICC). Dos 581 materiais examinados, 50 (8,60%) foram positivos para IFD e 47 (8,09%) para o ICC. Das amostras positivas para raiva, os RNAs foram extraídos e transformados em DNA, no Laboratório de Raiva/Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia/USP, SP. A caracterização filogenética do gene N foi realizada no Centro de Investigação Veterinária, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal, Faculdade de Ciências Bioresource, Nihon University, Fujisawa, Kanagawa, Japão. Com base nos resultados das análises filogenéticas e genotipagem, conclui-se que a epidemiologia da raiva é complexa no semiárido da Paraíba, com diferentes variantes virais sendo mantidas em cães domésticos, raposas, morcegos insetívoros e morcegos hematófagos. Todos os isolados analisados pertencem ao genótipo I do gênero Lyssavirus, e é possível afirmar que, na região, as raposas são importantes reservatórios silvestres do vírus da raiva.
ABSTRACT
In the semiarid of the state of Paraíba, the anti-rabies vaccination is not common, most of the local inhabitants who deal with the animals do not know the incidence of the disease in the region. In this study, samples of foxes (Pseudalopex vetulus), insectivorous bats (Molossus molossus), raccoons (Procyon cancrivorous) and domestic animals brains were submitted to the diagnosis of rabies, by using the direct fluorescent antibody technique (d-FAT) and mouse inoculation test (MIT). Of the 581 examined materials, 50 (8.60 %) were positive for d-FAT and 47 (8.09 %) for MIT. From the positive samples for rabies, RNAs were extracted and transformed to cDNA, at the Laboratory of Rabies/Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia/USP, SP. The phylogenetic characterization of the N gene was performed at the Universidade de São Paulo, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal, Universidade Nihon, Faculdade de Ciências Bioresource, Fujisawa, Kanagawa, Japão. Based on the results of genotyping and phylogenetic analyzes, it is concluded that the epidemiology of rabies is complex in the semiarid of Paraíba, with different viral variants being maintained in domestic dogs, foxes, insectivorous bats and vampire bats. All the isolates examined belong to the genotype I of the genus Lyssavirus and it is possible to state that in the region, foxes are important sylvatic reservoirs of the rabies virus.
No semiárido do Estado da Paraíba, a vacinação antirrábica não é comum, a maioria dos habitantes locais que lidam com os animais não conhece a incidência da doença na região. Neste estudo, amostras do cérebro de raposas (Pseudalopex vetulus), de morcegos insetívoros (Molossus molossus), de guaxinins (Procyon cancrivorous) e de animais domésticos foram submetidas ao diagnóstico da raiva, pela técnica de imunofluorescência direta (IFD) e inoculação intracerebral em camundongos (ICC). Dos 581 materiais examinados, 50 (8,60%) foram positivos para IFD e 47 (8,09%) para o ICC. Das amostras positivas para raiva, os RNAs foram extraídos e transformados em DNA, no Laboratório de Raiva/Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia/USP, SP. A caracterização filogenética do gene N foi realizada no Centro de Investigação Veterinária, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Saúde Animal, Faculdade de Ciências Bioresource, Nihon University, Fujisawa, Kanagawa, Japão. Com base nos resultados das análises filogenéticas e genotipagem, conclui-se que a epidemiologia da raiva é complexa no semiárido da Paraíba, com diferentes variantes virais sendo mantidas em cães domésticos, raposas, morcegos insetívoros e morcegos hematófagos. Todos os isolados analisados pertencem ao genótipo I do gênero Lyssavirus, e é possível afirmar que, na região, as raposas são importantes reservatórios silvestres do vírus da raiva.
ABSTRACT
ABSTRACT Rotavirus is the main cause of diarrhea in young animals of several species. They are classified as a genus within the virus family Reoviridae. Rotaviruses have a segmented genome made up of a double-stranded RNA. It is divided into 11 segments and surrounded by a triple protein capsid. In this study, Rotavirus was detected by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) in feces samples of 80-day-old goats during a diarrhea outbreak in a milk-producing herd. The samples electrophoretic pattern, called cap01/2007, was characterized as Group A rotavirus. A 20% fecal suspension in buffer TRIS 0.1M pH 7.3 was filtered and treated with crystalline trypsin in a 5 mg/mL concentration for viral isolation. Caprine sample Cap01/2007 was inoculated in MA-104 cells (Rhesuss kidneys) with a 48-hour growth. Two treatments (T1 and T2) were tested. In T1, maintenance medium without trypsin was added (Dulbecco-MEM) after adsorption (buffer at 37º C for 1h) the inoculum was maintained. In treatment T2, the previous procedure without the inoculum was performed. Cytopathic effect was observed in the first passage for both treatments (T1 and T2) with 48h inoculation, and viral isolation was then confirmed by PAGE. Migration design remained unchanged after 3 successive passages. This is the first report of isolation of caprine rotavirus in Brazil.
RESUMO Rotavírus é a principal causa de diarreia em animais jovens de várias espécies. Os rotavirus estão classificados na família Reoviridae e contêm um genoma formado por 11 segmentos de RNA de cadeia dupla, envolvidos em três camadas proteicas. Neste estudo, foi detectado rotavírus pela eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) em amostras de fezes de caprinos, com 80 dias de idade, durante surto de diarreia em um rebanho leiteiro. O perfil eletroforético das amostras, denominadas cap01/2007 e cap02/2007, foi caracterizado no PAGE como sendo de rotavírus do grupo A. Para o isolamento viral, suspensão fecal a 20% em tampão tris 0,1M pH 7,3 foi filtrada e tratada com tripsina cristalina na concentração de 5mg/mL. A amostra caprina cap01/2007 foi inoculada em cultura de células MA104 (Rim de Macaco Rhesus). Foram testados dois tratamentos (T1 e T2): após adsorção (estufa 37º C por uma hora) adicionou-se meio de manutenção (Dulbecco-MEM) sem tripsina, mantendo o inóculo (T1). No tratamento 2 (T2), foi realizado o mesmo pro cedimento anterior, porém o inóculo foi dispensado. O efeito citopático foi observado na primeira passagem para ambos os tratamentos (T1 e T2) com 48 horas de inoculação e o isolamento viral foi confirmado no PAGE. O perfil de migração manteve-se inalterado após três passagens sucessivas. Este é o primeiro relato de isolamento de rotavírus em caprinos no Brasil.
ABSTRACT
ABSTRACT An epidemiological survey of all cases of bovine rabies that occurred in Mato Grosso, Brazil, during the years 1996 to 2006 was conducted by way of the analysis of the epidemic curve, by calculating the sum, average, standard deviation, maximum and minimum values of the occurrence of rabies in three ecosystems; statistical analysis between the actual cattle in the three biomes of the state and the number of cases of rabies cattle; and the seasonal distribution and disease situation in the state in relation to the national scene. The data were organized by taking into account the month and year of occurrence of rabies and the geographic region of the origin of the material. The different cities involved were classified according to their location in regions of Cerrado, the Pantanal and the Amazon. It was found that the variation in the number of positive cases of the disease has been increasing in recent years, with the largest number of cases occurring in the Cerrado biome, which showed a trend of annual increase. Beginning in the year 2004 the Cerrado ecosystem passed from the situation of enzootic to epizootic, making it evident that the main bovine rabies problem in the state of Mato Grosso is situated in the Cerrado biome.
RESUMO Um levantamento epidemiológico de todos os casos de raiva bovina ocorridos no Estado de Mato Grosso durante os anos de 1996 a 2006 foi realizado pela análise da curva epidêmica, por meio do cálculo do somatório, média, desvio padrão, valores máximos e mínimos da ocorrência de casos de raiva nos três ecossistemas; análise estatística entre o efetivo bovino nos três biomas do estado e o número de casos de raiva bovina; a distribuição sazonal e a situação da doença no estado em relação ao panorama nacional. Para organização dos dados, levou-se em consideração o mês e o ano de ocorrência da raiva e a região geográfica de origem do material. Os diferentes municípios envolvidos foram classificados conforme sua localização nas regiões de Cerrado, Pantanal e Amazônia. Constatou-se que a variação no número de casos positivos da enfermidade tem sido crescente nos últimos anos, sendo que o maior número de casos deu-se no bioma Cerrado, que apresentou uma tendência de aumento anual. A partir do ano de 2004, o ecossistema Cerrado passou da situação de enzootia para epizootia, ficando pois, evidente que o principal problema de raiva em bovinos no Estado de Mato Grosso está situado no bioma Cerrado.
ABSTRACT
ABSTRACT A total of 53 rabies virus (RV) isolates originating from cattle in the state of Mato Grosso, Brazil, were genetically characterized. Partial nucleoprotein gene sequences of these isolates were phylogenetically and geographically analyzed. Cattle isolates, which clustered with the vampire bat related RV group, were further subdivided into 7 subgroups. These subgroups were distributed widely in lowland regions, with some subgroups separated from each other by small mountains and hydrographical features. These results indicate that cattle rabies is derived from several regionally-defined variants, which suggests that its geographical distribution is related to that of the vampire bat population.
RESUMO Foram caracterizados, geneticamente e geograficamente, o sequenciamento parcial da nucleoproteína (gene N) de 53 isolados do vírus da raiva (VR) originários do Estado de Mato Grosso, Brasil. Os isolados de bovinos, que se encontravam no grupo do VR relacionado a morcegos hematófagos, foram posteriormente subdivididos em sete subgrupos genéticos. Estes subgrupos foram distribuídos em regiões de terras planas, com alguns subgrupos separados por formações de pequenas montanhas e hidrografia. Estes resultados indicam que a raiva em bovinos é derivada de diversas variantes regionalmente definidas, o que sugere que sua distribuição geográfica está relacionada as populações de morcegos hematófagos.