Comparative sperm recovery rate after density gradient centrifugation with two media for in vitro fertilization.

OBJECTIVE: To compare the efficacy of two density gradient centrifugation media for retrieving spermatozoa from semen samples by evaluating the total motile sperm count (TMSC) and the percentage recovery. METHODS: Twenty-two men with different sperm counts participated in the study. The samples were divided into two equal aliquots and processed using the commercial ISolate Sperm Separation Medium (Irvine Scientific, United States) and the GV Gradiente (IngáMed, Brazil). After separation, samples were counted and evaluated for motile sperm recovery. RESULTS: The mean TMSC in the fresh sample was 19.65±21.08 million/mL. After the ISolate separation the TMSC was 6.71±7.29 million/mL, and for the GV Gradiente it was 6.27±6.82 million/mL. The percentage of motile spermatozoa recovered was 36.47%±21.61 for ISolate and 35.22%±21.24 for the GV Gradiente (p>0.05). The samples from 6 oligospermic patients (27%) were evaluated separately and the TMSC for ISolate was 4.83±2.92 million/mL, and for the GV Gradiente, it was 4.16±3.12 million/mL (p=0.54). When evaluating only normospermic patient samples, the TMSC for ISolate was 9.05±7.29 million/mL, and for the GV Gradiente, it was 8.47±6.79 million/mL (p=0.83). CONCLUSIONS: There was no statistical difference in retrieving motile sperm using the GV Gradiente and the ISolate Separation Medium.

Timed intercourse in association with controlled ovarian hyperstimulation as the first-line treatment of couples with unexplained subfertility.

OBJECTIVE: To report on the pregnancy outcomes of timed intercourse (TI) with controlled ovarian hyperstimulation (COH) as the first-line treatment of unexplained subfertility, and provide some evidence on the factors involved. METHODS: The records of couples treated between January 2016 and March 2019 were retrospectively analyzed. Couples were selected for TI based on standard infertility evaluation. Semen analysis by swim-up was conducted and the total motile sperm count (TMSC) obtained. The main outcome measured was the clinical pregnancy rates. Data were analyzed with t test, Pearson's Chi-squared test, and the Wald test for logistic regression with p≤0.05. RESULTS: The records of 275 couples (449 cycles) were included in the analysis. Patients underwent TI up to six attempts. Patient- and cycle-based pregnancy rates were 18.55% and 13.14%, respectively. Eight patients got pregnant twice, resulting in a cumulative pregnancy rate of 21.4%. Women that did not get pregnant demonstrated a statistically higher mean age value than women who did (p=0.0186). Logistic regression indicated that for every year added to the woman's age, the chances of pregnancy reduced by 6.45%, and for cycles with TMSC ≥ 5 million, the chances of pregnancy were 1.91 times higher when compared to TMSC < 5 million. CONCLUSIONS: TI with COH should be considered as the first-line treatment for selected couples with unexplained subfertility before more traumatic and costly IVF treatments were considered. The findings can assist doctors to conduct a more educated counselling concerning the chances patients have to get pregnant with TI.

Efficacy of a modified transvaginal ultrasound-guided fresh embryo transfer procedure.

OBJECTIVE: To present a modified transvaginal ultrasound (TVUS) guided embryo transfer (ET) procedure and analyze its efficacy in comparison with conventional transabdominal ultrasound (TAUS) guided ET in an unselected population of Brazilian women. METHODS: This retrospective observational case-control study involved 447 fresh ET cycles, 221 guided by TVUS (Group 1), conducted between June 2016 and February 2019, and 226 by TAUS (Group 2), conducted between July 2012 and December 2015. Pregnancy rate was the main endpoint. Groups were compared using the Z test at a level of significance of 95% (p≤0.05). RESULTS: Patient age ranged from 21 and 48 years; mean age was 37.7 years in Group 1 and 38 years in Group 2. Overall, patients that underwent TVUS-guided fresh ET demonstrated significantly higher pregnancy rates than their counterparts that underwent TAUS-guided fresh ET (p=0.0107). TVUS-guided fresh ET also yielded significantly higher pregnancy rates in the subgroups of women aged 36-39 years (p=0.0037) and ≥ 40 years (p=0.0025). However, no significant pregnancy rate difference was observed in women aged ≤ 35 years (p=0.0905). CONCLUSIONS: The results suggested that TVUS-guided fresh ET was at least as effective as TAUS-guided fresh ET in the studied sample. Pending further prospective studies to better ascertain the effect of TVUS-guided ET, the technique presented deserves consideration since it can offer better visualization, more comfort to patients, and requires only one operator, without negatively affecting pregnancy results.

Vitrification technique for female germinative tissue cryopreservation and banking.

OBJECTIVE: To report on a device designed for the vitrification of germinative tissue, and a systematic vitrification/warming protocol. METHODS: We obtained six fragments of cortical germinative tissue from a human ovary. We randomly chose two fragments and sent them to histological analysis. We vitrified four test samples and stored them for one week in liquid nitrogen (LN), and warmed one week later. We sent the vitrified/warmed fragments to the pathology laboratory, where they analyzed them morphologically under an optical microscope (10-40X). They analyzed the nuclear and cytoplasmic characteristics of the follicular cells, luteal layer, and stroma. The primordial and primary follicles in the fresh and vitrified/warmed fragments were counted and compared with the Mann-Whitney test (p<0.05). RESULTS: There were ovarian follicles in different phases of maturation in both fresh and vitrified/warmed fragments, with a predominance of healthy-looking primordial and primary follicles. In the test fragments, the fusocellular architecture supporting the stromal cells exhibited some foci of edema, and were associated with cells with hydropic degeneration, with cytoplasmic fragmentation and eosinophilia. However, there were no signs of tissue necrosis or autolysis. There was no statistically significant difference between the number of follicles found in the control and test tissue fragments (p>0.05). CONCLUSIONS: There were no significant morphological changes between fresh and vitrified/warmed germinative tissue. The vitrification device and protocol tested were effective in the preservation of human follicles, and should be considered for the banking germinative tissue for the restoration of fertility of women who are submitted to life-saving sterilizing treatments.

Fetal hydrocephalus.

INTRODUCTION: Hydrocephalus is the most frequent and devastating illness affecting a fetus. The development of both ultrasonography and magnetic resonance, associated with laboratorial tests, has greatly facilitated its diagnosis. MATERIALS AND METHODS: In the Fetal Medicine Service of the Federal University of São Paulo and in the Santa Joana/Pro-Matre Paulista Hospital Complex, in São Paulo, SP, Brazil, repeated cephalocenteses, ventricular-amniotic shunting, and neuroendoscopy were used to treat 57 fetuses with hydrocephalus, all of them at a gestational age under 32 weeks. Another eight fetuses had myelomeningocele and underwent correctional open surgery to prevent hydrocephalus. RESULTS: Thirty-nine patients were followed up for a period longer than 3 years and had their intelligence coefficient assessed: 26 of them were considered normal (IQ above 70); six had mild or moderate handicaps (IQ from 35 to 70), and seven were severely handicapped (IQ below 35). Out of the eight patients operated for correction of myelomeningocele, only two came to require shunting. There were no cases of maternal morbidity, and no infectious condition was observed in any of the patients subjected to intrauterine treatment. CONCLUSION: Selected cases of isolated, evolutive, non-destructive hydrocephaly diagnosed before 32 gestational weeks may benefit from fetal neurosurgical procedures. With the accuracy improvement of diagnoses, the number of patients fitting into that group has become very small.

Embryo development and gestation using fresh and vitrified oocytes.

BACKGROUND: The objective of this study was to compare the gestational results obtained with vitrified/thawed oocytes by a novel vitrification method (Vitri-ingá) to results obtained with fresh oocytes. METHODS: A total of 125 IVF-ET procedures carried out over 2008 were analysed, in which 79 patients received embryos from fresh oocytes (Group 1), and 46 patients received embryos from vitrified/thawed oocytes using Vitri-ingá (Group 2). Fresh and vitrified/thawed oocytes were fertilized and embryos were transferred. Fertilization, pregnancy and implantation rates were compared. RESULTS: Vitrified oocytes presented a survival rate of 84.9%. Fertilization, pregnancy and implantation rates showed no statistically significant differences between fresh and cryopreserved/thawed groups (81.3, 51.9, 21.3% and 80.8, 45.6 and 14.9%, respectively). Only the average number of blastomeres in Group 1 (6.86 +/- 2.07) was significantly higher than in Group 2 (6.35 +/- 2.26; P = 0.010). CONCLUSIONS: Despite some differences in the patient groups, the clinical results of this study demonstrated that the Vitri-ingá method preserves the potential of human vitrified oocytes for fertilization and further development.

Estudo comparativo da viabilidade de ovário criopreservado por congelamento lento e vitrificação em ratas / Comparative study of ovarian cryopreservation by slow freezing and vitrification in mice

INTRODUÇÃO: A criopreservação de células e tecidos germinativos objetiva proteger o potencial fértil em pacientes submetidas a tratamentos que induzam à infertilidade. Objetivo: Comparar congelamento lento e vitrificação de tecido ovariano e verificar o tipo folicular com maior viabilidade no tecido criopreservado. MATERIAL E MÉTODOS: 58 ratas tiveram seus ovários ressecados, dissecados e fragmentados e divididos em dois grupos: A (27 ratas): criopreservados por congelamento lento; e B (31 ratas) - vitrificados. As amostras foram submetidas à avaliação histológica geral pela coloração com H/E, e à avaliação imunohistoquímica com anti-Ki-67. RESULTADOS: Para análise estatística, os testes paramétricos Qui-quadrado de Student e o teste não-paramétrico de Wilcoxon, com nível de significância de 5% (p menor que 0,05). No momento 0 todas as amostras de ambos os grupos apresentaram histologia normal. Após a criopreservação, todas as amostras do Grupo A apresentaram alterações histológicas em diferentes níveis e, em 55,6% dos fragmentos houve sinais de necrose. Das amostras do Grupo B, 22,6% apresentaram alterações histológicas reversíveis e não houve necrose. A análise imunohistoquímica demonstrou que, na comparação entre os momentos, com relação à positividade para o Ki-67 em folículos primordiais, somente foi observada diferença significativa para o Grupo B. No momento 1, o Grupo B apresentou diferença significativa para a marcação em folículos primordiais (p igual a 0,026) e probabilidade limítrofe em folículos primários (p igual a 0,082). CONCLUSÃO: A vitrificação demonstrou menor grau de degeneração tissular e maior índice de viabilidade folicular. Folículos primordiais são os que apresentam maior viabilidade após a criopreservação

Marcador KI-67 como índice preditivo da viabilidade de ovário criopreservado por congelamento lento e vitrificação em ratas / Ki-67 marker used as a predictive index of the viability of cryopreserved ovaries through slow freezing and vitrification in rats

Avaliar duas técnicas de criopreservação de tecido ovariano: congelamento lento e vitrificação, por meio de marcação imunohistoquímica com anticorpo primário anti ki 67 e verificar o tipo folicular mais resistente à criopreservação. 58 ratas foram submetidas à ooforectomia bilateral e divididas em dois grupos: A: 27 ratas cujos fragmentos ovarianos foram criopreservados com a técnica de congelamento lento e B: 31 ratas cujas secções ovarianas foram criopreservadas por vitrificação. Amostras do tecido foram submetidas à avaliação imunohistoquímica com e observaram-se células foliculares positivas para o marcador. Analisaram-se os fragmentos no momento 0 (dia da ooforectomia) como controle e no 43 dia após esse procedimento, momento 1. Na comparação significativa para marcação em folículos primário e secundário, para ambos os grupos. Na comparação entre os grupos não foi observada diferença significativa no momentoO. No momento 1, o Grupo B apresentou diferença significativa para a marcação em folículos primordiais (p=0,026), ou seja, houve um número maior de amostras Ki67 positivas nesse grupo. A marcação com Ki67 demonstrou que, embora ambos os métodos de congelamento ovariano resultem em tecidos potencialmente viáveis, a vitrificação manteve maior número de folículos primordiais potencialmente funcionantes, podendo ser considerada melhor técnica de criopreservação de tecido ovariano do que o congelamento lento, em ratas. Os folículos primordiais são os que melhor resistem ao processo de criopreservação, tanto por congelamento lento como por vitrificação.

Aspectos histológicos do ovário de coelhas após criopreservação / Histological aspects of rabbit ovarian tissue after cryopreservation

OBJETIVO: avaliar a preservação folicular e as características celulares do tecido ovariano criopreservado, em coelhas. MÉTODOS: fez-se, sob anestesia, a ooforectomia direita de dez coelhas brancas, adultas. Dissecou-se o ovário mantendo-se o córtex com espessura de 1,5 milímetros. Fragmentou-se o tecido em pequenas secções, algumas para o estudo histológico de controle e outras destinadas à criopreservação pelo protocolo de congelamento lento. Passadas seis semanas efetuou-se o descongelamento e fez-se a avaliação histológica. As amostras do controle e do experimento, após processamento, foram coradas pela hematoxilina-eosina para identificação dos aspectos histológicos e submetidas à técnica imuno-histoquímica utilizando-se o PCNA (proliferating cell nuclear antigen) para a avaliação da viabilidade celular. Utilizaram-se os testes não paramétricos "comparação entre duas proporções" e Mann-Whitney e o teste paramétrico t de Student. RESULTADOS: observou-se que no tecido criopreservado só persistiram oócitos primordiais. Entre as alterações reversíveis identificaram-se: vacuolização citoplasmática em todas as amostras (p=0,039), lise estromal em 50 por cento (p=0,648) e oócitos com contornos irregulares em 80 por cento (p=0,007). Encontraram-se alterações irreversíveis como degeneração hialina e picnose em 30 por cento das amostras (p=0,210). A análise imuno-histoquímica demonstrou os folículos, em diferentes estágios de desenvolvimento, no tecido não congelado e folículos primordiais no tecido criopreservado com positividade para o PCNA, indicando a presença de DNA ativo. CONCLUSAO: no tecido ovariano criopreservado sobrevivem apenas os folículos primordiais; existem alterações histológicas reversíveis (vacuolização citoplasmática, lise estromal, fragmentação das células da granulosa e oócitos com contornos irregulares); alterações irreversíveis, em níveis não significantes (degeneração hialina e picnose) e presença de PCNA positivo em todos os folículos.

A bovine protocol for training professionals in preimplantation genetic diagnosis using polymerase chain reaction.

OBJECTIVE: To develop a bovine protocol for training in preimplantation genetic diagnosis (PGD) using PCR. DESIGN: Randomized study. SETTING: Human reproduction PCR laboratory. PATIENT(S): Cow ovaries obtained from slaughterhouses. INTERVENTION(S): The ovaries were punctured and the oocytes were matured and submitted to in vitro fertilization. On the third day after fertilization, the embryos were biopsied and 1-2 blastomeres removed. A blastomere and the rest of the embryo were submitted to PCR for sex determination. MAIN OUTCOME MEASURE(S): Establishment of a possible training protocol. RESULT(S): A total of 50 embryos and 50 biopsied blastomeres were submitted to DNA amplification for sexing. Of the 50 embryos, 41 (82%) achieved successful DNA amplification and 9 (18%) did not. Of the 50 biopsies, 31 (62%) amplified and 19 (38%) did not. In 27 (65.9%) of the 41 embryos with DNA amplification, sex was identified as female and in 14 (34.1%) as male. In 40 cases (80%) amplification and sex determination were successful in both embryos and blastomeres. Sex was identical in all these cases. CONCLUSION(S): This training model seems to be useful in identifying mistakes and difficulties and improving the professional's performance in the various stages of preimplantation genetic diagnosis.

Recovery of natural fertility after grafting of cryopreserved germinative tissue in ewes subjected to radiotherapy.

OBJECTIVE: To recover natural fertility of ewes that were subjected to ovarian failure induced by radiotherapy with an autologous orthotopic graft of cryopreserved germinative tissue. DESIGN: Experimental surgery study. SETTING: University hospital unit. ANIMAL(S): Adult ewes. INTERVENTION(S): Four ewes were submitted to right oophorectomy and posterior dissecting and freezing of the germinative tissue. Afterward, they were administered radiotherapy to induce infertility on the remaining left ovary. Later, two of the ewes had the thawed fragments of the right ovary injected inside the cortex of the irradiated left ovary in a "sowing" procedure that eliminated the need for sutures. MAIN OUTCOME MEASURE(S): Recovery of fertility in ewes after transplantation of germinative tissue into the ovary destroyed by radiotherapy. RESULT(S): The ewes were housed with fertile rams. Six months following the grafting, the rams impregnated the transplanted ewes. More than 2 years after radiotherapy, the nongrafted (control) ewes have not become pregnant. CONCLUSION(S): Intracortical grafting of the germinative tissue circumvents the obstacle of vascular anastomosis with autologous ovarian implants. Patients could benefit from the subcortical grafting of germinative tissue in one of the ovaries, recovering fertility after radiotherapy treatment for malignancy.

PCR em embriöes bovinos: proposiçäo de modelos de treinamento / PCR in bovine embryos: proposition for a training model

Objetivo: Desenvolver um protocolo animal de treinamento para equipe interessada em adquirir conhecimentos e destreza técnica no manuseio de embrioes com finalidade de realizar diagnóstico pré-implantaçao através da técnica de reaçao em cadeia da polimerase (PCR). Métodos: Realizamos procedimentos, com retirada dos ovários de vacas em abatedouro, sem qualquer critério de escolha das mesmas. Os ovários após serem assépticamente retirados foram levados em cuba estéril para laboratório de fertilizaçao. Os folículos com diâmetro inferior à 8 mm foram puncionados com seringa descartável de 10 ml e agulha 21 G. Os ovócitos retirados do líquido folicular sob microscópio estereoscópio foram lavados em soluçao salina tamponada (D-PBS) e transferidos para placas "Nunc" contendo meio de cultura para maturaçao. Os ovócitos obtidos, separados para o estudo após 24 horas de maturaçao, foram fertilizados com aproximadamente 1.000.000/ml de espermatozóides e mantidos em cultivo em meio de fertilizaçao. Após fertilizados, foram transferidos para placas de co-cultura com células vero, e mantidos em incubadora com 5 por cento de C02, 20 por cento de oxigênio e 75 por cento de nitrogênio a 37º C e umidade de 90 por cento, por cinco dias. Após este período, separamos os embrioes com 8 ou mais blastômeros, aleatoriamente, em dois grupos. Um deles foi mantido em cultivo com o mesmo meio e mesmas condiçoes para servir como grupo controle, o outro foi submetido à biópsia. Após abertura da zona pelúcida, retiramos 1 ou 2 blastômeros dos embrioes, com a utilizaçao de microscópio invertido e equipamento de micromanipulaçao. Em seguida à biópsia, os embrioes permaneceram em co-cultura por mais três dias. Ao final deste tempo, avaliamos o desenvolvimento comparativamente com o grupo controle. Foi realizado estudo morfológico dos embrioes até o estágio de blastocisto ou extrusao da zona pelúcida (hatching), identificando o fenômeno de cavitaçao e estreitamento da zona pelúcida, e contagem do número de células através de coloraçao específica para núcleos com o intuito de comprovar a inocuidade da biópsia. Cinqüenta embrioes e seus blastômeros biopsiados foram submetidos a reaçao em cadeia da polimerase para identificaçao do sexo. Resultados: Dos 57 embrioes biopsiados, 40 atingiram o estágio de blastocisto, (70,2 por cento) e em 11 foi observado o "hatching" (27,5 por cento). Nos embrioes co-cultivados para controle foram obtidos...(au)

Cultura de embriöes até o estágio de blastocisto: comparaçäo entre o uso de meios seqüenciais e de co-cultura / Embryo culture to blastocyst stage: comparison using sequential medium and coculture

Objetivos: comparar o desenvolvimento embrionário entre o uso de dois métodos diferentes de cultura (meio seqüencial ou co-cultura em células Vero). Métodos: foram incluídas 110 pacientes que tiveram ovócitos aspirados e submetidos à fertilizaçäo in-vitro. Metade das pacientes teve seus embriöes cultivados juntamente com células Vero e a outra metade em meio seqüencial G1:2/G2:2. Os embriöes foram transferidos no dia 5 pós-fertilizaçäo, após avaliaçäo morfológica, verificando-se a taxa de blastulaçäo. A gravidez foi definida por meio de ultra-sonografia, verificando-se batimento cardíaco após a 13ª semana pós-transferência. Resultados: a taxa de blastocistos expandidos encontrada em nosso estudo foi de 15,9 por cento e 14 por cento com células Vero e G1:2/G2:2, respectivamente. Com células Vero 36,0 por cento das pacientes engravidaram com taxa de implantaçäo de 18,9 por cento. Quando se utilizou G1:2/G2:2 as taxas de gravidez e implantaçäo foram 28,9 por cento e 14,9, por cento, respectivamente. Em apenas 17 casos obtiveram-se blastocistos após co-cultivo em células Vero, apresentando 76,5 por cento de taxa de gravidez e 63,0 por cento de implantaçäo. Quando o cultivo foi em G1/G2 21 pacientes apresentaram blastocistos e as taxas de gravidez e implantaçäo foram de 57,1 e 76,0 por cento, respectivamente. Conclusäo: näo houve diferença significativa entre as taxas de gravidez ou implantaçäo nos 2 tipos de cultivo. Nos casos em que blastocistos expandidos foram transferidos, as taxas de implantaçäo e gravidez aumentaram com ambos os tipos de cultivo. Nestas pacientes, independente do tipo de cultivo utilizado, um número maior de ovócitos foi obtido, o que nos leva a pensar que näo apenas as condiçöes de cultura influenciam as taxas de implantaçäo e gravidez, mas a qualidade dos óvulos também é importante, pois as "boas respondedoras" tiveram melhores resultados.

Avaliaçäo do desenvolvimento de embriões bovinos pós-biópsia: um modelo para treinamento / Evaluation of the post-biopsy development of bovine embryos: proposal of a training model

Objetivo: montar um protocolo animal para estudo e treinamento em biópsia embrionária. Métodos: ovários de vaca obtidos em abatedouro eram transportados ao laboratório onde os oócitos aspirados eram maturados. Posteriormente eram submetidos à fertilizaçäo in vitro. No dia 5 pós fertitizaçäo, os embriões eram biopsiados, com a abertura da zona pelúcida realizada mediante lâmina de corte ajustada ao microscópio óptico. Após abertura da zona pelúcida 1 ou 2 blastômeros eram removidos dos embriões. Após a biópsia, os embriões permaneciam em co-cultivo por mais três dias. Ao final deste tempo, o desenvolvimento dos embriões era avaliado e comparado ao do grupo controle por meio de estudo morfológico e contagem do número de células, usando coloraçäo específica para núcleos. Resultados: dos 57 embriões biopsiados, 40 atingiram o estágio de blastocisto (70,2 por cento) e em 11 foi observado o "hatching" (27,5 por cento). No grupo controle obtiveram-se 42 blastocistos (73,7 por cento) e, destes, 11 chegaram a "hatching" (26,2 por cento). Após contagem do número de células, observou-se que näo houve diferença estatisticamente significante entre os 2 grupos. Conclusäo: podemos verificar por meio dos resultados que o protocolo proposto foi tecnicamente viável, além de fornecer bom número de embriões, pela facilidade de obtençäo de oócitos bovinos, podendo ser adotado para treinamento

Co-cultura de embriões humanos em células vero e transferência em fase de blastocisto / Human embryo coculture in vero cells and blastocyst stage transfer

Objetivos: determinar se o dia da transferência ou o estágio em que o embriäo é transferido interferem nas taxas de gravidez e implantaçäo. Métodos: cento e sete pacientes tiveram seus oócitos aspirados e submetidos à fertilizaçäo in vitro. Os embriões foram co-cultivados em células Vero e transferidos no dia 3 ou dia 5 pós-fertilizaçäo, após avaliaçäo morfológica. Resultados: a taxa de implantaçäo dos embriões transferidos no dia 5 foi significativamente maior que quando os embriões eram transferidos no dia 3, mas as taxas de gravidez näo variaram. Observou-se uma diferença significativa nas taxas de gravidez quando se comparou o estágio em que o embriäo era transferido, obtendo-se 70,6 por cento de gravidez quando se transferiram blastocistos expandidos e 20 por cento e 10,5 por cento quando eram transferidos blastocistos iniciais ou mórulas, respectivamente. Conclusões: as taxas de implantaçäo e gravidez säo significativamente aumentadas quando se transferem embriões em estágio de blastocisto expandido, mas os meios e condições de cultura de que dispomos no momento ainda säo insuficientes para nos fornecer uma taxa satisfatória de embriões neste estágio

Controle de qualidade e treinamento técnico com embriöes bovinos para laboratórios de FIV / IVF laboratory quality control and staff training through the development of bovine embryos

Com o intuito de investigar um controle de qualidade eficiente e de baixo custo para o laboratório de fertilizaçäo in vitro (FIV), além de treinar adequadamente o pessoal envolvido no trabalho, desemnvolvemos uma técnica de controle de qualidade através de embriöes bovinos. Seiscentos e vinte e dois oócitos bovinos foram aspirados de ovários de vaca, retirados imediatamente após a morte em frigorífico. Observou-se que, após a fertilizaçäo in vitro, 373 oócitos apresentavam divisäo em diversos estágios de desenvolvimento até mórula. Comparando-se com o controle de qualidade através de embriöes de camundongo, que é o método adotado internacionalmente nos laboratórios de FIV, observou-se eficácia similar, além de menor custo com relaçäo às técnicas e condiçöes de cultura

Colheita de oócitos em ambulatório / Oocyte recovery in outpatients

Estimated 14 oocytes recoveries in 12 patients between 22 to 38 years of age and 45 to 75Kg weight has been done with endovaginal ultrasound. Local paracervial anesthesia using 400mg of xylocaine 2 per cent without vasoconstrictor and induction and maintenance with propofol (Diprivan) IV 110 to 250mg were performed; in two patients 50 mg of tiophental was used too. Seven patients used clomiphene citrate, HMG and HCG, and seven patients used leuprolide acetate, HMG and HCG. There was not ever more than two hours.