ABSTRACT
In this study, gilthead sea bream (Sparus aurata) fast muscle myoblasts were stimulated with two pro-growth treatments, amino acids (AA) and insulin-like growth factor 1 (Igf-1), to analyze the transcriptional response of mRNAs, microRNAs (miRNAs) and long non-coding RNAs (lncRNAs) and to explore their possible regulatory network using bioinformatic approaches. AA had a higher impact on transcription (1795 mRNAs changed) compared to Igf-1 (385 mRNAs changed). Both treatments stimulated the transcription of mRNAs related to muscle differentiation (GO:0042692) and sarcomere (GO:0030017), while AA strongly stimulated DNA replication and cell division (GO:0007049). Both pro-growth treatments altered the transcription of over 100 miRNAs, including muscle-specific miRNAs (myomiRs), such as miR-133a/b, miR-206, miR-499, miR-1, and miR-27a. Among 111 detected lncRNAs (>1 FPKM), only 30 were significantly changed by AA and 11 by Igf-1. Eight lncRNAs exhibited strong negative correlations with several mRNAs, suggesting a possible regulation, while 30 lncRNAs showed strong correlations and interactions with several miRNAs, suggesting a role as sponges. This work is the first step in the identification of the ncRNAs network controlling muscle development and growth in gilthead sea bream, pointing out potential regulatory mechanisms in response to pro-growth signals.
Subject(s)
Antifibrinolytic Agents , MicroRNAs , RNA, Long Noncoding , Sea Bream , Animals , Amino Acids , Sea Bream/genetics , RNA, Long Noncoding/genetics , Insulin-Like Peptides , Insulin-Like Growth Factor I/genetics , MicroRNAs/genetics , Myoblasts , RNA, Messenger/genetics , SarcomeresABSTRACT
MicroRNAs are small regulatory molecules that control gene expression. An emerging property of muscle miRNAs is the cooperative regulation of transcriptional and epitranscriptional events controlling muscle phenotype. miR-155 has been related to muscular dystrophy and muscle cell atrophy. However, the function of miR-155 and its molecular targets in muscular dystrophies remain poorly understood. Through in silico and in vitro approaches, we identify distinct transcriptional profiles induced by miR-155-5p in muscle cells. The treated myotubes changed the expression of 359 genes (166 upregulated and 193 downregulated). We reanalyzed muscle transcriptomic data from dystrophin-deficient patients and detected overlap with gene expression patterns in miR-155-treated myotubes. Our analysis indicated that miR-155 regulates a set of transcripts, including Aldh1l, Nek2, Bub1b, Ramp3, Slc16a4, Plce1, Dync1i1, and Nr1h3. Enrichment analysis demonstrates 20 targets involved in metabolism, cell cycle regulation, muscle cell maintenance, and the immune system. Moreover, digital cytometry confirmed a significant increase in M2 macrophages, indicating miR-155's effects on immune response in dystrophic muscles. We highlight a critical miR-155 associated with disease-related pathways in skeletal muscle disorders.
Subject(s)
MicroRNAs , Muscular Dystrophy, Duchenne , Humans , Muscle, Skeletal/metabolism , MicroRNAs/genetics , MicroRNAs/metabolism , Muscle Fibers, Skeletal/metabolism , Cell Differentiation/genetics , Muscular Dystrophy, Duchenne/geneticsABSTRACT
As miopatias em equinos são classificadas de acordo com aspectos clínicos, morfológicos e moleculares, em três grandes grupos: não associadas ao exercício, associadas ao exercício e devido alteração da condução elétrica do sarcolema. Apesar dos avanços no diagnóstico, a literatura ainda relata surtos de miopatia em equinos sem etiologia esclarecida em diversos países. O objetivo desse estudo foi descrever as alterações histológicas e histoquímicas de biópsias musculares de equinos acometidos por miopatia. Sete equinos da raça Quarto de Milha, com 18-24 meses de idade, apresentaram sinais clínicos de miopatia. Dentre esses animais, cinco apresentaram sinais subagudos leves a moderados e dois apresentaram sinais hiperagudos severos e decúbito lateral. Foram realizadas biópsias musculares utilizando a técnica percutânea, por agulha tipo Bergström, no músculo glúteo médio em todos os animais acometidos. As amostras foram processadas por meio de técnicas histológicas (HE, Tricrômio de Gomori modificado) e histoquímicas (PAS, NADH, ATPase). Nos quadros clínicos mais leves, a principal alteração encontrada foi a presença de fibras vermelhas rajadas do tipo I e IIA, que estão associadas às alterações do metabolismo oxidativo e das funções mitocondriais, como ocorrem nas miopatias mitocondriais. Também foram observadas fibras atróficas do tipo I e IIA, além da presença de agregados subsarcolemais. Nos quadros mais severos o tecido muscular apresentou infiltrado inflamatório, aumento de colágeno, fagocitose, necrose, calcificação e regeneração muscular. Diante dos achados morfológicos, da resposta à terapia com vitamina E e Se e da baixa mortalidade quando comparado aos relatos de miopatia atípica, conclui-se que esse surto foi desencadeado por lesões mitocondriais, caracterizadas pelas fibras musculares vermelhas rajadas, possivelmente devido uma quebra da homeostase de vitamina E e Se, sendo compatível com o diagnóstico de miopatia nutricional.
Equine myopathies are classified according clinic, morphologic and molecular features in three groups: Non-exertional, exertional, and abnormal muscle membrane conduction. In spite the advances in diagnostic, the literature has reported outbreaks of equine myopathy without clear etiology in several countries. The aim of this study was to describe the histological and histochemical findings of muscle biopsies in an outbreak of equine myopathy. Seven 18 to 24-month-old Quarter horses showed clinical signs of myopathy. Five horses presented mild clinical signs and two horses had severe clinical signs with recumbency. Muscle biopsies were obtained from gluteal medium muscle by percutaneous technique with Bergstrom needle in all affected horses. Muscle samples were processed by histological (HE, modified gomori-trichrome) and histochemical (PAS, NADH, ATPase) technics. In animals with mild clinical signs, ragged red fibers type I and IIA, related to the oxidative metabolism dysfunction of mitochondria, was the main abnormality found. Muscle fiber atrophy and presence of subsarcolemmal aggregates in type I and IIA muscle fibers were also observed. More severe affected horses presented inflammatory infiltrate, proliferation of collagen, phagocytosis, necrosis and calcification. Based on the morphological findings, vitamin E therapy response associated with the low mortality when compared with atypical myopathy reports, We concluded that this outbreak was triggering for mitochondrial lesions, characterized by ragged red muscle fibers, probably due a breakdown homeostasis in vitamin E and Se, being compatible with nutritional myopathy diagnosis.
ABSTRACT
JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: A miostatina, também conhecida como fator de crescimento e diferenciação-8 (GDF-8), regula o crescimento de músculos esqueléticos durante o desenvolvimento embrionário e na vida adulta. Foi descoberta em pesquisas para identificar novos membros da superfamília fator transformador do crescimento-Beta (TGF-Beta) de fatores de diferenciação e crescimento celular. Os objetivos deste estudo consistiram em descrever o histórico e as características da miostatina, resumo de estudos sobre mecanismo de ação em condições fisiológicas e patológicas, por meio de estudos em humanos e modelos experimentais em animais, bem como as perspectivas futuras de utilização terapêutica de antagonistas da miostatina. CONTEÚDO: Estudos sobre os efeitos da miostatina mostraram correlação negativa entre sua expressão e massa muscular, sugerindo que possa estar envolvida na indução de hipotrofia e inibição do crescimento da musculatura esquelética. O mecanismo de ação da miostatina também foi avaliado, experimentalmente, em várias doenças como insuficiência cardíaca, neoplasias, cirrose, distrofias musculares, uremia e denervação. Os resultados sugerem que amiostatina exerce ações relevantes na redução da musculatura esquelética associada a estas condições. Também em humanos, os estudos realizados com indivíduos saudáveis e em pacientes com doenças crônicas reforçam este conceito. Entre as perspectivas para o futuro, ainda em fase de investigação experimental, há possibilidades terapêuticas que permitam antagonizar a ação da miostatina e reverter ou impedir a perda de massa muscular associada a doenças crônicas. Entre elas incluem-se anticorpos monoclonais anti-miostatina, propeptídeo da miostatina resistente à clivagem, forma solúvel do receptor activina tipo IIB e folistatina...
BACKGROUND AND OBJECTIVES: Myostatin, or GDF-8 (growth and differentiation factor-8), regulates muscle growth during development and adult life. Myostatin was originally identified in a screen for novel members of the transforming growth factor-Beta (TGF-Beta) superfamily of growth and differentiation factors. In this short review we describe myostatin characteristics, summary of studies on myostatin during physiological and pathological settings in human and experimental animal?s studies and future directions on myostatin antagonism.CONTENTS: Studies about the myostatin effects have shown a negative correlation between myostatin expression and muscle mass suggesting its involvement on muscle growth inhibition and atrophy. Myostatin has also been experimentally evaluated in several diseases such as heart failure, cancer, cirrhosis, muscular dystrophy, uremia, and denervation. The results suggest that myostatin can play an important role on chronic disease-associated skeletal muscle wasting. Although human studies are sparse, evaluation performed in healthy individuals and chronically diseased patients reinforces this hypothesis. Considering future perspectives, there is therapeutic potential to inhibit myostatin activity and treat or prevent muscle loss associated with chronic diseases. This includes myostatin neutralizing antibodies, protease resistant form of the myostatin propeptide, soluble version of the activin RIIB receptor, and follistatin. CONCLUSION: Experimental studies validate myostatin inhibition as a therapeutic approach to muscular dystrophy and chronic disease-associated muscle wasting.
Subject(s)
Chronic Disease , Muscle Development , Muscle, Skeletal , Muscular DystrophiesABSTRACT
OBJETIVO: Analisar o comportamento mecânico do terço proximal do fêmur de ratos submetidos ao treinamento aeróbio e resistido crônicos. MÉTODOS: Ratos Wistar machos (80 dias, 300 a 350 g) foram divididos em 3 grupos (n=8 por grupo): Treinamento aeróbio/8 semanas (TA), Treinamento resistido/8 semanas (TR) e controle/8 semanas (CO). Ao término do período de treinamento os animais foram sacrificados e o fêmur direito coletado. Para análise do comportamento mecânico do fêmur foram realizados ensaios de flexo-compressão. RESULTADOS: O treinamento resistido ocasionou redução significante da força máxima (Fmáx) do fêmur. Por outro lado, promoveu um aumento (23,7 por cento) relevante, porém não significante, da deformação da força máxima (DFmáx). O treinamento aeróbio não afetou a Fmáx, porém promoveu uma redução (26,6 por cento) considerável, também não significante, da DFmáx. CONCLUSÕES: Os resultados demonstram que o treinamento resistido e aeróbio, promoveram redução da Fmáx e da DFmáx óssea, respectivamente. Os dados evidenciam uma ação diferencial de ambos os modelos de treinamento físico sobre as propriedades mecânicas do fêmur de ratos.
OBJECTIVE: To analyze the mechanical behavior of rat femur proximal thirds submitted to chronic aerobic and resistance training. METHODS: Male Wistar rats (80 days of age, weighing 300 to 350 g) were divided into 3 groups (n=8 per group): control (CO), aerobic training (TA) and resistance training (TR). At the end of the training, the animals were euthanized and the right femur was collected. Flexion-compression tests were carried out to analyze the mechanical behavior of the femurs. RESULTS: The resistance training promoted a significant reduction in maximum force (Fmáx) of the femur. However, it also promoted a relevant increase (23.7 percent), though without statistical significance, in maximum force deformation (DFmáx). The aerobic training did not affect maximum force, however, it caused a considerable reduction in DFmáx (26.6 percent), though this was also not statistically significant. CONCLUSIONS: The results show that resistance and aerobic training promoted a reduction in the Fmáx and DFmáx, respectively. The data showed a different response of both physical training models on the mechanical properties of the rat femurs.
Subject(s)
Animals , Male , Rats , Physical Conditioning, Animal/methods , Femur , Femur/physiology , Resistance Training , Biomechanical Phenomena , Rats, WistarABSTRACT
The aim of this work was to evaluate the morphological and growth characteristics of skeletal muscle tissue in pirarucu (Arapaima gigas) using alevins (50 days old) and juveniles (1 year old). Muscle samples were collected from dorsal, lateral cranial, and lateral caudal regions, and then frozen in liquid nitrogen. Histological frozen sections (10 µm) were stained with HE and Gomori Trichrome for morphological analysis, and NADH-TR to evaluate muscle fiber oxidative metabolism. Morphometric analysis samples were obtained from dorsal and lateral cranial regions, and smallest diameter white fibers were measured. White dorsal muscle was thicker and two muscle fiber compartments were identified in the lateral cranial region: red (superficial) and white (deep) muscle. Hyperplasia muscle growth predominated in alevins and hypertrophy in juveniles.
O objetivo deste trabalho foi avaliar as características morfológicas e de crescimento do músculo estriado esquelético no pirarucu (Arapaima gigas). Foram utilizados animais em duas fases de crescimento: alevinos, com 50 dias de idade, e juvenis, com um ano de idade. Após eutanásia dos animais, fragmentos musculares das regiões dorsal, lateral cranial e lateral caudal foram coletados e congelados em nitrogênio líquido. Cortes histológicos (10 µm) foram submetidos às colorações HE e Tricrômico de Gomori, para a análise morfológica, e NADH-TR, para a análise do metabolismo oxidativo das fibras musculares. Foi calculado o menor diâmetro das fibras musculares brancas nas regiões dorsal e lateral cranial. A musculatura dorsal branca mostrou-se mais desenvolvida e, na musculatura lateral, observaram-se compartimentos distintos: superficial vermelho e profundo branco. Nos alevinos, o crescimento muscular ocorreu predominantemente por hiperplasia das fibras e, nos juvenis, predominou o crescimento muscular por hipertrofia.
ABSTRACT
The effects of inclusion of whole yeast, autolyzed yeast and yeast cell wall on hematological parameters and gut villus perimeter were evaluated in juvenile Nile tilapia, after 80 experimental days. Isoproteic (32.0% DP) and isoenergetic (3200 kcal DE kg-1) practical diets were supplemented with three levels of whole yeast or autolyzed yeast (1.0, 2.0 and 3.0%) and three levels of yeast cell wall (0.1, 0.2 and 0.3%), plus a control diet (with no test microingredients). Red blood cell count, hemoglobin concentration, total plasmatic protein, hematocrit percentage, mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin concentration and gut villus perimeter were evaluated. Variations on hematological parameters in animals fed diets with whole yeast; autolyzed yeast and yeast cell wall were observed to be within normal ranges for this species. There was significant influence (p
Os efeitos da inclusão de levedura íntegra, levedura autolisada e parede celular para juvenis da tilápia do Nilo sobre parâmetros hematológicos e perímetro das vilosidades intestinais foram avaliados após 80 dias de experimento. Foram utilizadas rações práticas isoprotéicas (32,0% PD) e isoenergéticas (3.200 kcal ED kg-1 de ração) suplementadas com três níveis de levedura íntegra ou autolisada (1,0; 2,0 e 3,0%) e três níveis de parede celular (0,1; 0,2 e 0,3%), além de uma ração controle, isenta destes microingredientes. Foram avaliados a contagem de eritrócitos, taxa de hemoglobina, proteína plasmática total, porcentagem de hematócrito, volume globular médio, concentração de hemoglobina globular média e o perímetro das vilosidades intestinais. Constatou-se que as variações nos parâmetros hematológicos dos animais alimentados com levedura íntegra, levedura autolisada e parede celular estão dentro da faixa de normalidade para a espécie. Houve influência significativa (p 0,05) dos diferentes níveis de levedura e derivados sobre o perímetro das vilosidades intestinais. Pode-se concluir que o período experimental e os níveis adotados neste estudo para levedura íntegra, levedura autolisada e parede celular não provocam alterações prejudiciais nos padrões hematológicos de tilápia do Nilo e podem ser utilizados com segurança para comporem rações para esta espécie e que a suplementa
ABSTRACT
Mediante o emprego de técnicas anatômicas, histológicas e morfométricas, os autores estudaram o número e o diâmetro das fibras mielínicas do nervo para o músculo pectíneo do gato, o qual é constituído por cinco fascículos de fibras nervosas. Após originar o ramo que inerva o músculo pectíneo, nervo safeno apresenta quatro fascículos de fibras nervosas. O nervo motor do músculo pectíneo apresenta, em média, 262 fibras mielínicas com diâmetro entre 0,42µm a a 7,65 µm,sendo o diâmetro médio de 4,4µm
Subject(s)
Animals , Male , Cats , Nerve Fibers, Myelinated/ultrastructure , Muscles/innervationABSTRACT
Técnicas morfológicas e histoquímicas foram utilizadas no estudo do número e diâmetro das fibras mielínicas do ramo nervoso para o músculo pectíneo do gato. O número, as características metabólicas e contráteis das fibras deste músculo e o tamanho das unidades motoras foram também estudadas. O nervo para o músculo pectíneo possui 1 cm de comprimento por lmm de diâmetro. Está constituído por três fascículos de diferentes diâmetros, os quais estao envoltos por tecido conjuntivo frouxo contendo numerosos adipócitos. O ramo nervoso possui, em média, 262,2 fibras mielínicas com diâmetros variando de O,42 a 7,65mum, além de numerosas fibras amielínicas. O número médio de unidades motoras é 131,1 e o tamanho médio das unidades motoras é 113,7. O músculo pectíneo possui em média 14 911,6 fibras musculares arranjadas em três populaçoes: SO (Slow Oxydative), FOG (Fast Oxydative Glycolitic) e FG (Fast Glycolitic) com distribuiçao variável no músculo. Os três fascículos de fibras do nervo penetram o músculo em três pontos distintos, e esta característica parece estar fortemente relacionada às diferentes populaçoes de fibras no músculo.