Evaluation of bursal lymphoid depletion: comparison between the conventional histology method and digital lymphocyte depletion evaluation system / Avaliação da depleção linfóide bursal: comparação entre a histologia convencional e o sistema de avaliação digital da depleção linfocitária

Fifty-five bursa of Fabricius (BF) were evaluated by optical microscopy for three different avian histopathologists (H1, H3 and H4) to determine the degree of lymphoid depletion. One histologist evaluated the same slides at two different times (H1 and H2) with four-months interval between the observations. The same BFs were evaluated using the system of Digital Lymphocyte Depletion Evaluation (ADDL), being performed by three differents operators of the system, not histopathologists. The results showed was a significant difference between the histopathologists and between the scores established by the same expert (H1 and H2). However, there were not significant differences between the scores with the ADDL system, obtained using ADDL. The results make clear the fragility of the subjective lymphocyte depletion score classification by the traditional histologic method, while the ADDL system proves to be more appropriated for the assessment of the lymphoid loss in the BF.(AU)

Cinquenta e cinco bursas de Fabricius (BF) foram avaliadas através da microscopia óptica por três diferentes histopatologistas aviários (H1, H3 e H4) para determinar o grau de depleção linfóide. Um histopatologista avaliou as amostras em dois momentos distintos (H1 e H2) com quatro meses de intervalo entre as observações. As mesmas BF foram avaliadas utilizando-se o sistema de Avaliação Digital da Depleção Linfocitária (ADDL), sendo realizadas por três diferentes operadores do sistema, não histopatologistas. Os resultados mostraram diferenças significativas entre os histopatologistas e entre um mesmo histopatologista (H1 e H2). Contudo, não houve diferenças significativas entre os escores obtidos utilizando-se ADDL. Estes resultados caracterizam a fragilidade da classificação subjetiva em escores de depleção linfóide, enquanto o sistema ADDL prova ser um sistema robusto de avaliação da perda linfocitária na BF.(AU)

Evaluation of follicular lymphoid depletion in the Bursa of Fabricius: an alternative methodology using digital image analysis and artificial neural networks / Avaliação da depleção linfóide folicular da Bursa de Fabricius: uma metodologia alternativa utilizando análise digital de imagem e redes neurais artificiais

Fifty Bursa of Fabricius (BF) were examined by conventional optical microscopy and digital images were acquired and processed using Matlab® 6.5 software. The Artificial Neuronal Network (ANN) was generated using Neuroshell® Classifier software and the optical and digital data were compared. The ANN was able to make a comparable classification of digital and optical scores. The use of ANN was able to classify correctly the majority of the follicles, reaching sensibility and specificity of 89 percent and 96 percent, respectively. When the follicles were scored and grouped in a binary fashion the sensibility increased to 90 percent and obtained the maximum value for the specificity of 92 percent. These results demonstrate that the use of digital image analysis and ANN is a useful tool for the pathological classification of the BF lymphoid depletion. In addition it provides objective results that allow measuring the dimension of the error in the diagnosis and classification therefore making comparison between databases feasible.(AU)

Cinquenta Bursa de Fabrícius (BF) foram examinadas através de microscopia óptica convencional e imagens digitais foram obtidas e processadas através do software Matlab® 6.5. Redes Neurais Artificiais (ANN) foram geradas com a utilização do software Neuroshell® Classifier, e os dados das análises óptica e digital foram comparados. A ANN classificou corretamente a maioria dos folículos, atingindo sensibilidade e especificidade de 89 por cento e 96 por cento, respectivamente. Quando os folículos foram agrupados de forma binária houve um aumento da sensibilidade para 90 por cento e obteve-se um valor máximo para a especificidade de 92 por cento. Estes resultados demonstram que o uso da análise digital de imagem associada à ANNé uma ferramenta bastante útil para a classificação patológica da depleção linfóide da BF. Além disso, fornece resultados objetivos que permitem medir a dimensão do erro classificatório, tornando possível a comparação entre distintos bancos de dados.(AU)

Evaluation of follicular lymphoid depletion in the Bursa of Fabricius: an alternative methodology using digital image analysis and artificial neural networks / Avaliação da depleção linfóide folicular da Bursa de Fabricius: uma metodologia alternativa utilizando análise digital de imagem e redes neurais artificiais

Fifty Bursa of Fabricius (BF) were examined by conventional optical microscopy and digital images were acquired and processed using Matlab® 6.5 software. The Artificial Neuronal Network (ANN) was generated using Neuroshell® Classifier software and the optical and digital data were compared. The ANN was able to make a comparable classification of digital and optical scores. The use of ANN was able to classify correctly the majority of the follicles, reaching sensibility and specificity of 89 percent and 96 percent, respectively. When the follicles were scored and grouped in a binary fashion the sensibility increased to 90 percent and obtained the maximum value for the specificity of 92 percent. These results demonstrate that the use of digital image analysis and ANN is a useful tool for the pathological classification of the BF lymphoid depletion. In addition it provides objective results that allow measuring the dimension of the error in the diagnosis and classification therefore making comparison between databases feasible.

Cinquenta Bursa de Fabrícius (BF) foram examinadas através de microscopia óptica convencional e imagens digitais foram obtidas e processadas através do software Matlab® 6.5. Redes Neurais Artificiais (ANN) foram geradas com a utilização do software Neuroshell® Classifier, e os dados das análises óptica e digital foram comparados. A ANN classificou corretamente a maioria dos folículos, atingindo sensibilidade e especificidade de 89 por cento e 96 por cento, respectivamente. Quando os folículos foram agrupados de forma binária houve um aumento da sensibilidade para 90 por cento e obteve-se um valor máximo para a especificidade de 92 por cento. Estes resultados demonstram que o uso da análise digital de imagem associada à ANNé uma ferramenta bastante útil para a classificação patológica da depleção linfóide da BF. Além disso, fornece resultados objetivos que permitem medir a dimensão do erro classificatório, tornando possível a comparação entre distintos bancos de dados.

Prevalence of antibodies against chicken anaemia virus (CAV) in broiler breeders in Southern Brazil / Prevalência de anticorpos contra o vírus da anemia das galinhas (CAV) em matrizes de corte no Sul do Brasil

A doença clínica causada pelo vírus da anemia das galinhas (CAV) ocorre quando os pintos são infectados durante as primeiras duas semanas de vida e pode ser prevenida se as matrizes transferirem anticorpos suficientes para a sua progênie. Em vista disso, este estudo foi realizado visando determinar a prevalência de anticorpos contra o CAV em alguns lotes de matrizes pesadas no Brasil. Buscou-se ainda verificar em que fase da vida as reprodutoras seriam infectadas e quais seriam os títulos de anticorpos nessas aves. Um total de 1709 amostras de soro de 64 lotes de reprodutoras não vacinadas e 12 lotes de reprodutoras vacinadas contra o CAV foram analisados por ELISA. Todos os lotes de aves não vacinadas apresentaram anticorpos. Dentre esses, 89 por cento dos indivíduos foram positivos, 52 por cento com títulos de anticorpos capazes de conferir proteção a sua progênie contra o CAV. Igualmente, todos os lotes de matrizes vacinadas apresentaram anticorpos contra o CAV em títulos considerados protetores para a progênie. Conclui-se que a vacinação das reprodutoras parece capaz de conferir proteção aos pintinhos contra doença associada ao CAV. (AU)

Chicks infected during the first two weeks of life with chicken anaemia virus (CAV) manifest clinical disease that can be avoided if the breeder hens transfer enough antibodies to their progeny. The objective of the present work was to establish the prevalence and titer of anti-CAV antibodies in some Brazilian broiler hen breeder flocks and verify in which phase of life the birds were infected. A total of 1,709 serum samples from 12 broiler hen flocks vaccinated against CAV and 64 unvaccinated flocks were analyzed for CAV antibodies with an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). All non-vaccinated breeder flocks were found to be infected with CAV, with 89% of the hens tested presenting antibodies, 52% of these with titers considered high enough to protect their progeny against CAV infection. Likewise, all vaccinated hens had antibody titer to CAV capable of conferring protection to their progeny. Thus, vaccination of hens seems capable of conferring protection to chicks against clinically apparent CAV-associated disease.

Prevalence of antibodies against chicken anaemia virus (CAV) in broiler breeders in Southern Brazil

A doença clínica causada pelo vírus da anemia das galinhas (CAV) ocorre quando os pintos são infectados durante as primeiras duas semanas de vida e pode ser prevenida se as matrizes transferirem anticorpos suficientes para a sua progênie. Em vista disso, este estudo foi realizado visando determinar a prevalência de anticorpos contra o CAV em alguns lotes de matrizes pesadas no Brasil. Buscou-se ainda verificar em que fase da vida as reprodutoras seriam infectadas e quais seriam os títulos de anticorpos nessas aves. Um total de 1709 amostras de soro de 64 lotes de reprodutoras não vacinadas e 12 lotes de reprodutoras vacinadas contra o CAV foram analisados por ELISA. Todos os lotes de aves não vacinadas apresentaram anticorpos. Dentre esses, 89 por cento dos indivíduos foram positivos, 52 por cento com títulos de anticorpos capazes de conferir proteção a sua progênie contra o CAV. Igualmente, todos os lotes de matrizes vacinadas apresentaram anticorpos contra o CAV em títulos considerados protetores para a progênie. Conclui-se que a vacinação das reprodutoras parece capaz de conferir proteção aos pintinhos contra doença associada ao CAV.

Presence of avipoxvirus DNA in avian dermal squamous cell carcinoma.

Dermal squamous cell carcinoma (DSCC; avian keratoacanthoma) is a neoplastic skin lesion of broiler chickens of unknown aetiology. In previous studies, the possibility of the involvement of pox viruses in the cause of DSCC was considered. In this work, a sensitive and specific nested polymerase chain reaction (PCR) protocol was developed that could amplify a 419 base pair DNA fragment of fowlpox virus with a detection limit of less than one infectious unit. Fowlpox virus DNA was always detected in skin samples with fowlpox lesions while it was not detected in samples of unrelated diseases such as cowpox, Marek's disease or infectious laryngotracheitis. Some macroscopically normal skin samples from vaccinated and non-vaccinated birds also produced PCR-positive results, corroborating previous studies on the possibility that a latent or chronic form of fowlpox occurs. Fowlpox virus DNA was consistently detected from DSCC skin lesions, and this finding is discussed.