Performance of rapid tests for canine visceral leishmaniasis diagnosis in Argentina.

To diagnose dogs infected by Leishmania infantum rK39 rapid diagnosis test is widely used in the Americas, while dual path platform (DPP) was recently adopted by Brazil. In this study we assessed the performance of rK39-RDT and DPP tests in recent urban transmission scenarios of Argentina. The sensitivity and specificity were evaluated with a sera panel and field samples, taken as true infected those from parasitological and/or PCR positive tests. Since none of these tests can be taken as a gold standard, the performance was also evaluated using Latent Class Analysis, a statistical modeling technique which allows to estimating sensitivity and specificity defining a latent class variable as the reference standard. The sensitivity of both tests in the panel was around 92% (symptomatic dogs 96%, asymptomatic 83%), while the sensitivity in field samples of rK39-RDT was 77%, and DPP 98% (mean in symptomatic dogs 89%, asymptomatic 82%). The specificity was similar for both tests and samples, around 98%. Therefore, these tests are acceptable for program dog population-based studies, as spatial stratification, focus intervention and follow up, and they could be used for individual screening and confirmation of clinical presumptive diagnosis in polysymptomatic dogs. The inability to discriminate between immunity and actual infectiousness suggest that a combination with other non-immunological based tests will be required for highly sensitive/specific diagnosis in order to targeting control measures in individual reservoirs from public health perspective, as for individual management from animal health perspective.

Para diagnosticar perros infectados por Leishmania infantum, en las Américas se utiliza ampliamente la prueba rápida rK39, mientras que DPP fue adoptado recientemente por Brasil. En este estudio se evaluó el desempeño de las pruebas rK39-RDT y DPP en escenarios de transmisión urbana reciente en Argentina. La sensibilidad y especificidad se evaluaron con un panel de sueros y muestras de campo, considerando muestras infectadas verdaderas aquellas con pruebas parasitológicas y/o de PCR positivas. Como ninguna de estas pruebas puede considerarse estándar de oro, el desempeño también se evaluó mediante análisis de clases latentes, una técnica de modelado estadístico que permite estimar sensibilidad y especificidad definiendo una variable de clase latente como estándar. La sensibilidad de ambas pruebas en el panel fue de alrededor del 92% (perros sintomáticos 96%, asintomáticos 83%), mientras que la sensibilidad en muestras de campo fue rK39-RDT: 77%, y DPP 98% (media en perros sintomáticos 89%, asintomáticos 82%). La especificidad fue similar para ambas pruebas y muestras, cerca de 98%. Por lo tanto, estas pruebas son aceptables para estudios programáticos caninos de base-poblacional, como estratificación espacial, intervención de foco y seguimiento, y podrían utilizarse para el tamizaje individual y la confirmación del diagnóstico clínico presuntivo en perros poli-sintomáticos. La incapacidad de discriminar entre inmunidad e infectividad real sugiere que se requerirá una combinación con otras pruebas, de base no inmunológica, para un diagnóstico suficientemente sensible/específico que permita definir las medidas de control en reservorios individuales, tanto para salud pública, como para la gestión individual en salud animal.

Performance of rapid tests for canine visceral leishmaniasis diagnosis in Argentina

To diagnose dogs infected by Leishmania infantum rK39 rapid diagnosis test is widely used in the Americas, while dual path platform (DPP) was recently adopted by Brazil. In this study we assessed the performance of rK39-RDT and DPP tests in recent urban transmission scenarios of Argentina. The sensitivity and specificity were evaluated with a sera panel and field samples, taken as true infected those from parasitological and/or PCR positive tests. Since none of these tests can be taken as a gold standard, the performance was also evaluated using Latent Class Analysis, a statistical modeling technique which allows to estimating sensitivity and specificity defining a latent class variable as the reference standard. The sensitivity of both tests in the panel was around 92% (symptomatic dogs 96%, asymptomatic 83%), while the sensitivity in field samples of rK39-RDT was 77%, and DPP 98% (mean in symptomatic dogs 89%, asymptomatic 82%). The specificity was similar for both tests and samples, around 98%. Therefore, these tests are acceptable for program dog population-based studies, as spatial stratification, focus intervention and follow up, and they could be used for individual screening and confirmation of clinical presumptive diagnosis in polysymptomatic dogs. The inability to discriminate between immunity and actual infectiousness suggest that a combination with other non-immunological based tests will be required for highly sensitive/specific diagnosis in order to targeting control measures in individual reservoirs from public health perspective, as for individual management from animal health perspective.

Para diagnosticar perros infectados por Leishmania infantum, en las Américas se utiliza ampliamente la prueba rápida rK39, mientras que DPP fue adoptado recientemente por Brasil. En este estudio se evaluó el desempeño de las pruebas rK39-RDT y DPP en escenarios de transmisión urbana reciente en Argentina. La sensibilidad y especificidad se evaluaron con un panel de sueros y muestras de campo, considerando muestras infectadas verdaderas aquellas con pruebas parasitológicas y/o de PCR positivas. Como ninguna de estas pruebas puede considerarse estándar de oro, el desempeño también se evaluó mediante análisis de clases latentes, una técnica de modelado estadístico que permite estimar sensibilidad y especificidad definiendo una variable de clase latente como estándar. La sensibilidad de ambas pruebas en el panel fue de alrededor del 92% (perros sintomáticos 96%, asintomáticos 83%), mientras que la sensibilidad en muestras de campo fue rK39-RDT: 77%, y DPP 98% (media en perros sintomáticos 89%, asintomáticos 82%). La especificidad fue similar para ambas pruebas y muestras, cerca de 98%. Por lo tanto, estas pruebas son aceptables para estudios programáticos caninos de base-poblacional, como estratificación espacial, intervención de foco y seguimiento, y podrían utilizarse para el tamizaje individual y la confirmación del diagnóstico clínico presuntivo en perros poli-sintomáticos. La incapacidad de discriminar entre inmunidad e infectividad real sugiere que se requerirá una combinación con otras pruebas, de base no inmunológica, para un diagnóstico suficientemente sensible/específico que permita definir las medidas de control en reservorios individuales, tanto para salud pública, como para la gestión individual en salud animal.

Leishmaniasis visceral: contribución a su control mediante el fortalecimiento del diagnóstico del reservorio canino en Posadas, Misiones, Argentina / Visceral leishmaniasis: control contribution by strengthening the diagnosis of dog reservoir in the city of Posadas, Misiones, Argentina

INTRODUCCION: La leishmaniasis visceral (LV) es una enfermedad emergente en Argentina. En 2006 se describió el primer caso autóctono en Posadas (Misiones), ciudad que se convirtió en epicentro de la LV.OBJETIVO: Determinar la prevalencia de la LV canica (LVC) y fortalecer su diagnóstico en Posadas.METODOS: Con un criterio entomológico, la ciudad de Posadas se dividió en islas de alta densidad (IAD) e islas de baja densidad (IBD) de flebótomos. Se seleccionó, de forma arbitraria y mediante imágenes satelitales, la manzana situada más al norte y más al sur de cada IAD e IBD. Se realizó un diseño observacional prospectivo, y se estudió a todos los perros de las manzanas seleccionadas. Se consideró un N inicial de 400 animales para detectar una diferencia de al menos 7% con una potencia de 0,90 y un nivel de 0,05 respecto de la prevalencia global supuesta del 20%. Se tomaron muestras de sangre, punción de ganglios linfáticos y raspado de piel. El estudio incluyó además un test serológico rápido (rK39 canino) y frotis de las muestras para búsqueda parasitológica, que se procesaron y evaluaron en el Instituto Municipal de Salud Animal de Posadas y en el Instituto Nacional de Parasitología Fatala Chabén.RESULTADOS: De los 182 animales evaluados, 33 fueron positivos para LVC, con una prevalencia global del 18,1%. En IAD la prevalencia fue 22% y en IBD, 13,4%. Los estudios parasitológicos fueron positivos en el 10% de los caninos en IAD y 1,2% en IBD. La LVC fue asintomática u oligosintomática, con una presentación más frecuente en IAD. La rK39 tuvo una sensibilidad del 90,3% y una especificidad del 98,9%.CONCLUSIONES: El análisis serológico con antígeno rK39 fue siempre más sensible que la búsqueda parasitológica para el diagnóstico. La LVC parece tener menor prevalencia en relación con estudios previos, quizás debido a diferentes medidas de control realizadas en el Municipio de Posadas.

INTRODUCCION: Visceral leishmanisis (VL) is an emerging disease in Argentina. The first autochthonous case was described in 2006 in a chld from Posadas (Misiones), the city which turned out to be the focus of VL.OBJECTIVE: To determine the prevalence of canine VL (CVL) and improve its diagnosis in Posadas.METHODS: According to entomological criteria, Posadas was divided in high density islands (HDI) and low density islands (LDI) of sandfly. Randomly and with satellite images, the northernmost and southernmost blocks of each HDI and LDI were selected. A prospective, experimental design was performed, studying all the dogs in the selected blocks. There was an initial sample of 400 animals to detect a difference of at least 7%, with a power of 0.90 and a level of 0.05, compared to the supposed prevalence of 20%. Blood samples were taken, with puncture of lymph nodes and skin scraping. The study also included a (canine rK39) rapid test for serological assessment adn sample smears for parasitological search. Samples were processed and evaluated in the Posadas institute of animal health (I.MU.S.A) and the Fatala Chabén National Institute of Parasitology.RESULTS: CVL was assessed in 33/182 animals with an overall prevalence of 18.1%. In HDI, the prevalence was 22%; in LDI, it was 13.4%. Parasitological studies were positive in 10% (HDI) and 1.2% (LDI). The CVL had a nonspecific clinical presentation; canines were asimptomatic or oligosymptomatic, with a higher trend in HDI. The rK39 had a sensitivity of 90.3% and a specificity of 98.9%.CONCLUSIONS: The antigen rK39 was always more sensitive than the search for parasites for the diagnosis of CVL. The disease appears to be less prevalent comapring to previous studies, perhaps due to different control measures performed in the Municipality of Posadas.

Leishmaniasis visceral: contribución a su control mediante el fortalecimiento del diagnóstico del reservorio canino en Posadas, Misiones, Argentina / Visceral leishmaniasis: control contribution by strengthening the diagnosis of dog reservoir in the city of Posadas, Misiones, Argentina

INTRODUCCION: La leishmaniasis visceral (LV) es una enfermedad emergente en Argentina. En 2006 se describió el primer caso autóctono en Posadas (Misiones), ciudad que se convirtió en epicentro de la LV.OBJETIVO: Determinar la prevalencia de la LV canica (LVC) y fortalecer su diagnóstico en Posadas.METODOS: Con un criterio entomológico, la ciudad de Posadas se dividió en islas de alta densidad (IAD) e islas de baja densidad (IBD) de flebótomos. Se seleccionó, de forma arbitraria y mediante imágenes satelitales, la manzana situada más al norte y más al sur de cada IAD e IBD. Se realizó un diseño observacional prospectivo, y se estudió a todos los perros de las manzanas seleccionadas. Se consideró un N inicial de 400 animales para detectar una diferencia de al menos 7% con una potencia de 0,90 y un nivel de 0,05 respecto de la prevalencia global supuesta del 20%. Se tomaron muestras de sangre, punción de ganglios linfáticos y raspado de piel. El estudio incluyó además un test serológico rápido (rK39 canino) y frotis de las muestras para búsqueda parasitológica, que se procesaron y evaluaron en el Instituto Municipal de Salud Animal de Posadas y en el Instituto Nacional de Parasitología Fatala Chabén.RESULTADOS: De los 182 animales evaluados, 33 fueron positivos para LVC, con una prevalencia global del 18,1%. En IAD la prevalencia fue 22% y en IBD, 13,4%. Los estudios parasitológicos fueron positivos en el 10% de los caninos en IAD y 1,2% en IBD. La LVC fue asintomática u oligosintomática, con una presentación más frecuente en IAD. La rK39 tuvo una sensibilidad del 90,3% y una especificidad del 98,9%.CONCLUSIONES: El análisis serológico con antígeno rK39 fue siempre más sensible que la búsqueda parasitológica para el diagnóstico. La LVC parece tener menor prevalencia en relación con estudios previos, quizás debido a diferentes medidas de control realizadas en el Municipio de Posadas.

INTRODUCCION: Visceral leishmanisis (VL) is an emerging disease in Argentina. The first autochthonous case was described in 2006 in a chld from Posadas (Misiones), the city which turned out to be the focus of VL.OBJECTIVE: To determine the prevalence of canine VL (CVL) and improve its diagnosis in Posadas.METHODS: According to entomological criteria, Posadas was divided in high density islands (HDI) and low density islands (LDI) of sandfly. Randomly and with satellite images, the northernmost and southernmost blocks of each HDI and LDI were selected. A prospective, experimental design was performed, studying all the dogs in the selected blocks. There was an initial sample of 400 animals to detect a difference of at least 7%, with a power of 0.90 and a level of 0.05, compared to the supposed prevalence of 20%. Blood samples were taken, with puncture of lymph nodes and skin scraping. The study also included a (canine rK39) rapid test for serological assessment adn sample smears for parasitological search. Samples were processed and evaluated in the Posadas institute of animal health (I.MU.S.A) and the Fatala Chabén National Institute of Parasitology.RESULTS: CVL was assessed in 33/182 animals with an overall prevalence of 18.1%. In HDI, the prevalence was 22%; in LDI, it was 13.4%. Parasitological studies were positive in 10% (HDI) and 1.2% (LDI). The CVL had a nonspecific clinical presentation; canines were asimptomatic or oligosymptomatic, with a higher trend in HDI. The rK39 had a sensitivity of 90.3% and a specificity of 98.9%.CONCLUSIONS: The antigen rK39 was always more sensitive than the search for parasites for the diagnosis of CVL. The disease appears to be less prevalent comapring to previous studies, perhaps due to different control measures performed in the Municipality of Posadas.