ABSTRACT
Introducción: La trombocitemia esencial y la mielofibrosis primaria comparten la presencia de las mutaciones JAK2, CALR y MPL. En total, están presentes en poco más del 90 % de los pacientes con estas enfermedades. Objetivos: Determinar el comportamiento de las mutaciones más frecuentes en los genes MPL y CALR en pacientes cubanos. Métodos: Se realizó un estudio ambispectivo, descriptivo y longitudinal en el Instituto de Hematología e Inmunología de Cuba, entre los años 2010 y 2020. Se incluyeron todos los pacientes con sospecha de trombocitemia esencial y de mielofibrosis primaria con muestras de ADN válidas. Se les identificaron las mutaciones CALR y MPL por PCR en tiempo real. Resultados: De los 53 pacientes estudiados, el 67,9 % fueron diagnosticados con trombocitemia esencial, el 22,6 % con mielofibrosis primaria. En el 90,6 % se pudo detectar alguna de las mutaciones conductoras; el 67,9 % fueron positivos a la mutación JAK2V617F, el 13,2 % a las mutaciones en el gen que codifica para la calreticulina y en el 9,4 % se identificaron mutaciones en el gen MPL. Conclusiones: El comportamiento de las mutaciones conductoras JAK2V617F, CALR y MPL en la muestra de pacientes cubanos con trombocitemia esencial y mielofibrosis primaria estuvo en correspondencia con lo descrito en la mayoría de las investigaciones.
Introduction: Essential thrombocythemia and primary myelofibrosis share the presence of JAK2, CALR and MPL mutations. In total, they comprise slightly more than 90 % of patients with these diseases. Objectives: To determine the behavior of the most frequent mutations in MPL and CALR genes in Cuban patients. Methods: An ambispective, descriptive and longitudinal study was performed at the Institute of Hematology and Immunology of Cuba, between 2010 and 2020. All patients with suspected essential thrombocythemia and primary myelofibrosis with valid DNA samples were included. CALR and MPL mutations were identified by real-time PCR. Results: Of the 53 patients studied, 67.9% were diagnosed with essential thrombocythemia, and 22.6% with primary myelofibrosis. In 90.6% it was possible to detect any of the driver mutations: 67.9% were positive for the JAK2V617F mutation, 13.2% for mutations in the gene coding for calreticulin and in 9.4% mutations in the MPL gene were identified. Conclusions: The behavior of the driver mutations JAK2V617F, CALR and MPL in the sample of Cuban patients with essential thrombocythemia and primary myelofibrosis was in correspondence with what is described in the majority of the investigations.
ABSTRACT
Introducción: La frecuencia de la mutación JAK2V617F se estima entre el 50 y 60 por ciento en pacientes con trombocitemia esencial y mielofibrosis primaria. El 30 por ciento de los pacientes con policitemia vera y mielofibrosis primaria. Entre 2-4 por ciento de los pacientes con trombocitemia esencial presentan pérdida de heterocigosidad. Objetivos: Evaluar la influencia de la carga alélica de la mutación JAK2V617F y su relación con variables clínico-hematológicas en el diagnóstico de estas enfermedades en pacientes cubanos. Métodos: Se realizó un estudio retrospectivo, descriptivo y longitudinal en el Instituto de Hematología e Inmunología entre 2010 y 2020. Se incluyeron todos los pacientes con sospecha de trombocitemia esencial y mielofibrosis primaria con muestras de ADN válidas. Se les cuantificó la carga alélica de la mutación por PCR en tiempo real. Resultados: Se detectó la mutación en 66,7 por ciento de los diagnosticados con trombocitemia esencial y mielofibrosis primaria. El 62,5 por ciento de los pacientes con mielofibrosis primaria fueron homocigotos a la mutación, mientras que en la trombocitemia esencial solo el 20,8 por ciento. La diferencia de medias de cargas alélicas entre ambas enfermedades fue estadísticamente significativa. No se encontraron diferencias significativas en la comparación de las variables clínicas y hematológicas en estas enfermedades ni asociación con la carga alélica con excepción de las plaquetas en la mielofibrosis primaria. Conclusiones: El estudio estuvo limitado por la escasa muestra de pacientes, pero se corresponde con otras investigaciones que sostienen el concepto de que la presentación fenotípica de las neoplasias mieloproliferativasestá influenciada por la carga mutacional del JAK2V617F(AU)
Introduction: The frequency of the JAK2V617F mutation is estimated to be between 50 percent and 60 percent in patients with essential thrombocythemia and primary myelofibrosis. 30 percent of patients with polycythemia vera and primary myelofibrosis and 2-4 percent of patients with essential thrombocythemia show loss of heterozygosity. Objectives: To evaluate the influence of the allelic load of the JAK2V617F mutation in the diagnosis of these diseases in Cuban patients and its relationship with clinical-hematological variables. Methodology: A retrospective, descriptive and longitudinal study was carried out at the Institute of Hematology and Immunology between 2010 and 2020. All patients with suspected essential thrombocythemia and primary myelofibrosis with valid DNA samples were included. The allelic load of the mutation was quantified by real-time PCR. Results: The mutation was detected in 66.7 percent of those diagnosed with essential thrombocythemia and primary myelofibrosis. 62.5 percent of the patients with primary myelofibrosis were homozygous for the mutation, while in essential thrombocythemia only 20.8 percent. The difference in mean allelic loads between both diseases was statistically significant. No significant differences were found in the comparison of clinical and hematological variables in these diseases or association with allelic load, with the exception of platelets in primary myelofibrosis. Conclusions: The study was limited by the small sample of patients, but it corresponds to other investigations that support the concept that the phenotypic presentation of myeloproliferative neoplasms is influenced by the mutational load of JAK2V617F(AU)
Subject(s)
HumansABSTRACT
Introducción: La leucemia promielocítica se considera una enfermedad bien definida por sus peculiares características clínicas, morfológicas, citogenéticas y moleculares. El descubrimiento de los mecanismos oncogenéticos implicados en la génesis de la enfermedad hacen de esta variante de leucemia uno de los modelos más relevantes de investigación traslacional. Objetivo: Caracterizar los transcritos de fusión del gen PML/RARα en pacientes con leucemia promielocítica. Métodos: Se realizó una investigación observacional, ambispectiva, descriptiva, longitudinal, en pacientes con diagnóstico de leucemia promielocítica, en el Instituto de Hematología e Inmunología, entre enero de 2001 y diciembre de 2020. El universo estuvo constituido por 105 pacientes que cumplieron los criterios de inclusión y exclusión. Resultados: No existe relación entre los transcritos y la edad, sexo, color de piel y las características clínicas. La presencia del transcrito de fusión bcr3 se asoció a mayores cifras de hemoglobina y menor valor de plaquetas. La incidencia de recaída no se relacionó con los transcritos de fusión y no se comprobó que existiera influencia de éstos, sobre la supervivencia global en pacientes con leucemia promielocítica. Conclusiones: Las características de los transcritos de fusión del gen PML/RARα son similares a los reportes internacionales, sobre todo en poblaciones de origen latino(AU)
Introduction: Promyelocytic leukemia is considered a well-defined entity due to its peculiar clinical, morphological, cytogenetic and molecular characteristics. The discovery of the oncogenetic mechanisms involved in the genesis of the disease makes this variant of leukemia one of the most relevant models for translational research. Objective: To characterize the fusion transcripts of the PML/RARα gene in patients with promyelocytic leukemia. Methods: An observational, ambispective, descriptive, longitudinal investigation was carried out in patients diagnosed with promyelocytic leukemia at the Institute of Hematology and Immunology, between January 2001 and December 2020. The sample consisted of 105 patients who met the criteria for inclusion and exclusion. Results: There is no relationship between the transcripts and age, sex, skin color and clinical characteristics. The presence of the bcr3 fusion transcript was associated with higher hemoglobin levels and lower platelet counts. The incidence of relapse was not related to fusion transcripts and their influence on overall survival in patients with promyelocytic leukemia was not proven. Conclusions: The fusion transcripts´scharacteristicsof the PML/RARα gene are similar to international reports, especially from populations of Latin origin(AU)
Subject(s)
HumansABSTRACT
Introducción: El estudio de la patogenia molecular de la leucemia promielocítica revolucionó las bases de la medicina personalizada al identificar la oncoproteína PML/RARα como diana de terapias dirigidas al mecanismo oncogenético fundador de la enfermedad. Sin embargo, en las últimas décadas, se realizaron otros descubrimientos que aportan mayor información acerca de su biogénesis y desarrollo y el impacto potencial de los mismos en la implementación de técnicas de diagnóstico y herramientas pronósticas como expresión del rápido perfeccionamiento de la medicina traslacional. Objetivo: Exponer los principales descubrimientos en los mecanismos oncogenéticos y moleculares de actualidad en la leucemia promielocítica. Métodos: Se realizó una búsqueda exhaustiva en bases de datos como Scielo, Pubmed, ScienceDirect, Redalyc, Google académico. Se utilizaron como referencias los artículos actualizados publicados en los últimos 5 años en idioma inglés y español. Se efectuó un análisis y resumen de la bibliografía y se tomaron los aspectos más importantes referidos al tema. Análisis y síntesis de la información: Se abordaron los principales aportes de la biología molecular al conocimiento del origen de ésta enfermedad, más allá del enfoque clásico basado en el gen PML/RARα, así como sus variantes y otros aspectos de interés en su monitorización. Conclusiones: Las características genéticas de esta enfermedad evidencian un paisaje mutacional diferente al de otras neoplasias mieloides malignas y señalan con especial énfasis la importancia de la integración clínico-biológica para facilitar, perfeccionar y desarrollar el proceso de atención integral a los pacientes con hemopatías malignas(AU)
Introduction: The study of the molecular pathogenesis of promyelocytic leukemia revolutionized the foundations of personalized medicine by identifying the PML/RARαoncoprotein as a target for therapies directed at the founding oncogenetic mechanism of the disease. However, in recent decades, other discoveries that provide more information about their biogenesis and development, and their potential impact on the implementation of diagnostic techniques and prognostic tools as an expression of the rapid improvement of translational medicine. Objective: To expose the main discoveries in the current oncogenetic and molecular mechanisms in promyelocytic leukemia. Methods: An exhaustive search was carried out in databases such as Scielo, Pubmed, ScienceDirect, Redalyc, Google Scholar, and updated articles published in the last 5 years in English and Spanish were used as references. An analysis and summary of the bibliography was carried out and the most important aspects related to the subject were taken. Analysis and synthesis of information: the main contributions of molecular biology to the knowledge of the origin of this entity were addressed, beyond the classical approach based on the PML/RARα gene, as well as its variants and other aspects of interest in the monitoring of the illness. Conclusions: The genetic characteristics of this disease show a mutational landscape different from that of other malignant myeloid neoplasms and point out with special emphasis the importance of clinical-biological integration to facilitate, improve and develop the comprehensive care process for patients with malignant blood diseases(AU)
Subject(s)
HumansABSTRACT
Introducción: Las mutaciones del gen que codifica para el factor de la tirosina quinasa 3 (FLT3) son de especial importancia en la leucemia mieloide aguda debido a que sirven de guía para la confirmación del diagnóstico, la estimación del pronóstico y la toma de decisiones terapéuticas. Entre las alteraciones más importantes está la duplicación interna en tándem (FLT3-ITD). Objetivo: Exponer los aspectos más relevantes respecto al biomarcador FLT3-ITD en el contexto de la leucemia mieloide aguda. Métodos: Se realizó una búsqueda de artículos científicos actualizados en los idiomas inglés y español, en PubMed, EMBASE, Google Scholar y SciELO. Se seleccionaron artículos publicados en los últimos cinco años. Se revisaron los aspectos más relevantes sobre el biomarcador en el contexto de la leucemia mieloide aguda, su base biológica, el impacto del tamaño de los fragmentos y la carga alélica en la estimación del pronóstico de los pacientes, las nuevas estrategias terapéuticas y los retos en cuanto a los métodos de laboratorio para su diagnóstico. Análisis y síntesis de la información: Más allá de la positividad o no de dicho biomarcador, el tamaño de la duplicación interna en tándem, así como la carga alélica -determinada por la razón alelo mutado/alelo salvaje-, podrían tener un gran impacto en el pronóstico. Sin embargo, persisten diferencias en los criterios para establecer los algoritmos de predicción del riesgo, el punto de corte a utilizar como referencia y el protocolo de laboratorio específico para un estudio más detallado del biomarcador. Conclusiones: La comunidad científica necesita seguir trabajando en el esclarecimiento de la utilidad práctica de estos parámetros, validándolos en series amplias y diversas epidemiológicamente. Se debe determinar el punto de corte exacto para comparar la razón y estandarizar los métodos de laboratorio más adecuados y factibles para su estudio(AU)
ABSTRACT Introduction: Mutations in the tyrosine kinase 3 gene (FLT3) are of special importance in acute myeloid leukemia because they serve as a guide to confirm the diagnosis, estimate the prognosis, and make therapeutic decisions in the patient. Internal tandem duplication (FLT3-ITD) is the most important alteration of this gene. Objective: To present the most relevant aspects regarding the FLT3-ITD biomarker in the context of acute myeloid leukemia. Methods: a search was carried out for updated scientific articles, in English and Spanish, in PubMed, EMBASE, Google Scholar and SciELO. Articles published in the last five years were selected. The most relevant aspects of the biomarker in the context of acute myeloid leukemia, its biological basis, the impact of the size of the fragments and the allelic load in the estimation of the prognosis of the patients, the new therapeutic strategies and the challenges in regarding the laboratory methods for its diagnosis. Information analysis and synthesis: Beyond the biomarker positivity or not, the size of the ITD, as well as the allelic ratio determined by the mutated allele / wild-type allele, could have a great impact on the prognosis of patients. However, differences persist in the criteria for establishing risk prediction algorithms, the cut-off point to be used as a reference, and the specific laboratory protocol for a more detailed study of the biomarker. Conclusions: The scientific community needs to continue working to clarify the practical utility of these parameters, validating them in broad and epidemiologically diverse series. The exact cut-off point should be determined as a reference to compare the relationship and standardize the most suitable and feasible laboratory methods for its study(AU)
Subject(s)
Humans , Male , Female , Reference Standards , Biomarkers , Leukemia, Myeloid, Acute , Residence CharacteristicsABSTRACT
INTRODUCTION: In several countries, molecular diagnosis of haemophilia A (HA) and B (HB) is hampered by a lack of resources for DNA analysis. The advent of next-generation sequencing (NGS) has enabled gene analysis at a reasonable cost. AIM: Describe a collaboration between Cuban and Spanish researchers to identify candidate variants and investigate the molecular epidemiology of 106 Cuban haemophilia patients using NGS. PATIENTS/METHODS: The molecular analysis protocol included well-established LR-PCR procedures to detect F8 inversions, NGS with a 30-gene panel to sequence F8 and F9, and multiplex ligation-dependent probe amplification to identify large structural variants. RESULTS: One-hundred and thirty-one candidate variants were identified along F8, F9, and VWF; 72 were unique and 28 (39%) had not been previously recorded. Putative variants were identified in 105/106 patients. Molecular characterization enabled confirmation and reclassification of: 90 HA (85%), 15 HB (14%), and one type 2N VWD (1%). Null variants leading to non-production of FVIII or FIX were common in severe HA (64%), moderate HA (74%), and severe HB (60%), whereas missense variants were frequent in mild HA (57%) and moderate or mild HB (83%). Additional variants in VWF were identified in 16 patients. CONCLUSION: This is the first description of the molecular epidemiology of HA and HB in Cuba. Variants identified in index cases will be of value for local implementation of familial studies and prenatal diagnosis using the molecular approaches available in Cuba. The results of this protocolled genetic study improved the accuracy of the clinical diagnosis and will facilitate management of these patients.
Subject(s)
Hemophilia A , Cuba/epidemiology , Factor VIII/genetics , Female , Hemophilia A/diagnosis , Hemophilia A/epidemiology , Hemophilia A/genetics , High-Throughput Nucleotide Sequencing , Humans , Mutation , Pregnancy , TechnologyABSTRACT
Introducción: Las anemias diseritropoyéticas congénitas constituyen un grupo de trastornos hereditarios caracterizados por anemia refractaria, eritropoyesis ineficaz y alteraciones morfológicas de los eritroblastos. La anemia diseritropoyética congénita tipo I es la más frecuente, no obstante, constituye una rara enfermedad con particularidades morfológicas y moleculares. Objetivo: Analizar los aspectos más novedosos en cuanto a la patogenia molecular, el diagnóstico genético y el tratamiento de la anemia diseritropoyética congénita tipo I. Métodos: Se realizó una revisión de la literatura, en inglés y español. Se utilizaron motores de búsqueda como Google académico y Pubmed que permitió el acceso a artículos actualizados del tema. Se hizo un análisis y resumen de la bibliografía revisada. Análisis y síntesis de la información: La anemia diseritropoyética congénita tipo I es una enfermedad hereditaria autosómica recesiva. Se caracteriza por anemia de grado variable, reticulocitopenia, alteraciones morfológicas de la serie roja en la lámina periférica y un número elevado de eritroblastos binucleados conectados por puentes internucleares en el aspirado de médula ósea. Se han identificado múltiples alteraciones moleculares que involucran fundamentalmente a los genes CDAN1 y C15orf41. Las proteínas codificadas por estos genes participan en proceso vitales como el ciclo celular, la reparación del ADN y la transcripción de ARN. Conclusiones: El estudio de las bases moleculares de la anemia diseritropoyética congénita tipo I ha cambiado la perspectiva en el diagnóstico de esta enfermedad. Los protocolos de tratamiento son similares a otras anemias hemolíticas hereditarias aunque se destaca el uso del Interferón-α(AU)
Introduction: Congenital dyserythropoietic anemias belong to a group of hereditary disorders characterized by refractory anemia, ineffective erythropoiesis and morphological alterations of erythroblasts. Congenital dyserythropoietic anemia type I is the most frequent; however, it is a rare disease with morphological and molecular characteristics. Objective: To analyze the most updated aspects regarding molecular pathogenesis, genetic diagnosis and treatment of congenital dyserythropoietic anemia type I. Methods: A review of the literature in English and Spanish was carried out. Search engines such as Google Scholar and Pubmed were used, which allowed access to updated articles on the subject. An analysis and summary of the revised bibliography was carried out. Information analysis and synthesis: Congenital dyserythropoietic anemia type I is an autosomal recessive hereditary disease. It is characterized by anemia of variable degree, reticulocytopenia, morphological alterations of the red series in the peripheral lamina, and high number of binucleated erythroblasts connected by internuclear bridges in the bone marrow aspirate. Multiple molecular alterations have been identified, mainly involving the CDAN1 and C15orf41 genes. The proteins encoded by these genes participate in vital processes, such as the cell cycle, DNA repair, and RNA transcription. Conclusions: The study of the molecular bases of congenital dyserythropoietic anemia type I has changed the perspective concerning the diagnosis of this disease. Treatment protocols are similar to other hereditary hemolytic anemias, although the use of Interferon-α stands out(AU)
Subject(s)
Humans , Homeopathic Pathogenesy/methods , Interferons/therapeutic use , Genetic Diseases, Inborn/epidemiology , Anemia, Dyserythropoietic, Congenital/diagnosis , Anemia, Dyserythropoietic, Congenital/therapyABSTRACT
Introducción: En el Instituto de Hematología e Inmunología se realiza el estudio molecular de las leucemias mieloides agudas (LMA). Para las leucemias mieloides agudas no promielocíticas (LPM) se determinan cuatro biomarcadores: los genes de fusión RUNX1-RUNX1T1 y CBF(-MYH11, la duplicación interna en tándem del gen FLT3 (DIT FLT3) y la mutación A del gen NPM1 (NPM1-A). Objetivo: Determinar la frecuencia de estos cuatro biomarcadores, en pacientes cubanos con leucemias mieloides agudas primaria no promielocíticas. Métodos: Se incluyeron 91 pacientes entre niños y adultos, estudiados en el Instituto durante tres años desde el debut. A partir de ARN de sangre medular se obtuvo ADN complementario por transcripción inversa; se amplificaron los fragmentos correspondientes mediante la reacción en cadena de la polimerasa y el producto se analizó por electroforesis capilar. Resultados: El RUNX1-RUNX1T1 apareció en el 24,2 por ciento, fue más frecuente en los pacientes pediátricos y disminuyó significativamente con la edad. El CBFβ-MYH11 solo se encontró en adultos (4,8 por ciento). La NPM1-A con 41 por ciento fue mayoritaria entre los adultos. La DIT FLT3 se observó en el 21,6 por ciento y no mostró relación con la edad. NPM1-A y DIT FLT3 fueron las aberraciones con mayor presencia simultánea. Conclusiones: Por primera vez se describe la frecuencia de los cuatro biomarcadores moleculares en los pacientes cubanos con leucemias mieloides agudas primaria no promielocíticas; su comportamiento fue similar a lo descrito por otros autores, aunque se encontraron algunas particularidades(AU)
Introduction: At the Institute of Hematology and Immunology, the molecular study of acute myeloid leukemias (AML) is carried out. For nonpromyelocytic acute myeloid leukemias, four biomarkers are determined: the RUNX1-RUNX1T1 and CBF(-MYH11 fusion genes, the internal tandem duplication of the FLT3 gene (DIT FLT3), and the A mutation of the NPM1 gene (NPM1-A). Objective: To determine the frequency of these four biomarkers in Cuban patients with nonpromyelocytic primary acute myeloid leukemias. Methods: 91 patients were included, children and adults, who were studied at the Institute for three years from their disease debut. Complementary DNA was obtained from medullary blood RNA by reverse transcription. The corresponding fragments were amplified by polymerase chain reaction and the product was analyzed by capillary electrophoresis. Results: RUNX1-RUNX1T1 appeared in 24.2 percent; it was more frequent in pediatric patients and decreased significantly with age. CBFβ-MYH11 was found only in adults (4.8 percent). NPM1-A, accounting for 41 percent, represented the majority among adults. FLT3 DIT was observed in 21.6 por ciento and was not related to age. NPM1-A and DIT FLT3 were the disorders with the greatest concurrence. Conclusions: For the first time, the frequency of the four molecular biomarkers is described in Cuban patients with primary non-promyelocytic acute myeloid leukemias. Its characterization was similar to that described by other authors, although some peculiarities were found(AU)
Subject(s)
Humans , Male , Female , Biomarkers , Leukemia, Myeloid, Acute/genetics , Polymerase Chain Reaction , DNA, Complementary , Reverse Transcription , Electrophoresis, Capillary , CubaABSTRACT
Introducción: La leucemia mieloide aguda (LMA) es un grupo heterogéneo de desórdenes clonales con una gran variabilidad en términos de patogénesis, características morfológicas, genéticas e inmunofenotípicas. Las mutaciones en el gen NPM1 representan una de las más comunes en las LMA y está asociada con una respuesta clínica favorable. Por citogenética, la inversión del cromosoma 16 define el subgrupo de las LMA de factor de unión al grupo con un pronóstico favorable. Objetivo: Describir un caso con diagnóstico de LMA en los cuales el estudio molecular del gen NPM1 y de la inv(16) fueron positivos. Caso clínico: A nivel molecular, la hibridación in situ fluorescente fue positivo a la inv(16) y por biología molecular fue positivo tanto a la inv(16) como al gen NPM1-A, elementos de baja frecuencia de aparición. Se le administró a la paciente un esquema de poliquimioterapia no intensiva para mejorarla clínicamente. Después de una mejoría clínica inicial, la paciente comenzó con complicaciones y falleció. Conclusiones: La coexistencia de estas dos mutaciones es muy poco frecuente en pacientes con LMA, y a pesar de ser de buen pronóstico la paciente falleció a los pocos días de tratamiento(AU)
Introduction: Acute myeloid leukemia (AML) is a heterogeneous group of clonal disorders with great variability in terms of pathogenesis, morphological, genetic and immunophenotypic characteristics. NPM1 mutations represent one of the most common in AML and are associated with favorable clinical response. By cytogenetics, chromosome 16 inversion defines, with a favorable prognosis, the core‐binding factor for the subgroup of AMLs Objective: To describe a AML case in which the molecular study of the NPM1 gene and the chromosome 16 inversion were positive. Clinical case: At the molecular level, fluorescent in situ hybridization was positive for chromosome 16 inversion and, by molecular biology, it was positive for both chromosome 16 inversion and for the NPM1-A gene, elements with a low frequency of appearance. The patient was administered a non-intensive combination as part of a chemotherapy regimen to improve her clinical status. After initial clinical improvement, the patient began with complications and died. Conclusions: The coexistence of these two mutations is very rare in patients with AML. Despite presenting a good prognosis, the patient died after a few days of treatment(AU)
Subject(s)
Humans , Female , Chromosomes, Human, Pair 16/genetics , Leukemia, Myeloid, Acute/diagnosis , Mutation/genetics , In Situ Hybridization, Fluorescence/methods , Drug Therapy, Combination , Anaplastic Lymphoma Kinase/geneticsABSTRACT
Introducción: La leucemia mieloide crónica es un desorden clonal maligno de células madres hematopoyéticas pluripotentes que se caracteriza por la presencia del cromosoma Filadelfia, consecuencia de la traslocación cromosómica recíproca entre los brazos largos de los cromosomas 9 y 22. El resultado de esta alteración cromosómica es un gen de fusión que contiene las uniones b2a2 (e13a2) o b3a2 (e14a2). En la mayor parte de los casos, las células de la leucemia mieloide crónica expresan uno de los dos transcritos (b2a2 o b3a2); sin embargo, el 5 por ciento de los pacientes tienen ambos tipos de ARNm como resultado de empalmes alternativos. Se han encontrado otros transcriptos como e19a2, e2a2, e1a3, e6a2, e13a3(b2a3), y e14a3(b3a3), que ocurren con menos frecuencia. Objetivo: Describir el comportamiento de dos pacientes con leucemia mieloide crónica que presentan un trascripto BCR/ABL atípico. Casos clínicos: En el estudio molecular por reacción en cadena de la polimerasa cualitativo realizado a los dos pacientes, se observó un punto de ruptura del gen de fusión BCR/ABL poco frecuente, el cual se correspondía al transcripto e14a3 (b3a3). Estos pacientes iniciaron tratamiento con mesilato de imatinib a dosis de 400 mg diarios. Al primer paciente a los dos meses de tratamiento se le detectó crisis blástica, por lo que se le cambió el tratamiento a nilotinib 400 mg diarios que mantiene hasta la actualidad. La segunda paciente mantuvo igual tratamiento, aunque en ocasiones ha sido necesario incorporar tratamiento citorreductor con hidroxiurea por presentar leucocitosis. Conclusiones: Los pacientes con BCR/ABL a3 presentan un curso más benigno de la enfermedad. Aunque en los pacientes estudiados no se observó una respuesta satisfactoria al tratamiento pues presentaron diversas complicaciones(AU)
Introduction: Chronic myeloid leukemia is a malignant clonal disorder of pluripotent hematopoietic stem cells and characterized by the presence of the Philadelphia chromosome, which is the product of a reciprocal translocation between the long arms of chromosomes 9 and 22. The result of this chromosomal alteration is a fusion gene that contains the e13a2 (b2a2) and e14a2 (b3a2) junctions. In most cases, chronic myeloid leukemia cells express one of the two transcripts (b2a2 or b3a2); however, 5 percent of patients have both types of mRNA, as a result of alternative junctions. Other transcripts have been identified, such as e19a2, e2a2, e1a3, e6a2, e13a3 (b2a3), and e14a3 (b3a3), which occur less frequently. Objective: To describe the behavior of two patients with chronic myeloid leukemia who have an atypical BCR-ABL transcript. Clinical cases: In a qualitative molecular study of polymerase chain reaction carried out with two patients, a BCR-ABL fusion gene breakpoint was observed, which corresponded to the e14a3 (b3a3) transcript. These patients started treatment with imatinib mesylate at a dose of 400mg/d. At two months, the first patient had a diagnose of blast crisis, so the treatment was changed to nilotinib at a dose of 400mg/d, which the patient maintained to date. The second patient maintained the same treatment, although it was sometimes necessary to incorporate cytoreductive treatment with hydroxyurea due to leukocytosis. Conclusions: Patients with BCR-ABL a3 present a more benign evolution of the disease. However, a satisfactory response to treatment was not observed in the patients studied, as long as they presented various complications(AU)
Subject(s)
Humans , Male , Female , Adult , Middle Aged , Leukemia, Myeloid, Chronic, Atypical, BCR-ABL Negative/genetics , CubaABSTRACT
Introducción: Los biomarcadores son útiles en la definición del diagnóstico, pronóstico y seguimiento de múltiples enfermedades. La detección o medición de uno o más biomarcadores específicos representan alteraciones en vías genéticas o epigenéticas que controlan la proliferación, diferenciación o muerte celular. Las neoplasias mieloproliferativas constituyen un grupo fenotípicamente diverso de hemopatías malignas de origen clonal, caracterizadas por una sobreproducción simple o multilineal de los elementos eritroides, mieloides y megacariocíticos; así como de una marcada predisposición a la trombosis, sangramiento y transformación leucémica. Dentro de ellas se incluyen: la policitemia vera, la trombocitemia esencial y la mielofibrosis primaria, conocidas como neoplasias mieloproliferativas clásicas BCR-ABL1 (o cromosoma Philadelfia) negativas. Las mutaciones somáticas en genes como JAK2, MPL y CARL se comportan como mutaciones drivers iniciadoras, responsables del fenotipo mieloproliferativo. Métodos: Se revisaron artículos relacionados publicados en los últimos años, en algunas bases de datos de la Biblioteca Virtual de Salud. En esta revisión se exponen los mecanismos moleculares generales de esas mutaciones y su expresión clínica; se hace referencia a las neoplasias mieloproliferativas triple negativas y sus implicaciones clínicas y se indica el algoritmo diagnóstico propuesto por la Organización Mundial de la Salud que incluye los nuevos biomarcadores. Conclusiones: El estudio molecular proporciona información valiosa para el diagnóstico y seguimiento de las neoplasias mieloprolifrativas, pero no logra diferenciar entre cada una de ellas. Por esto, se requiere de la adecuada aplicación del método clínico para llegar a un diagnóstico certero con ayuda de otros exámenes complementarios(AU)
Introduction: Biomarkers are useful in the definition of diagnosis, prognosis and monitoring of multiple diseases. The detection or measurement of one or more specific biomarkers represents alterations in genetic or epigenetic pathways that control proliferation, differentiation or cell death. The myeloproliferative neoplasms constitute a phenotypically diverse group of malignant hemopathies of clonal origin, characterized by a simple or multilinear overproduction of the erythroid, myeloid and megakaryocytic elements; as well as a marked predisposition to thrombosis, bleeding and leukemic transformation. These include: polycythemia vera, essential thrombocythemia, and primary myelofibrosis, known as classical negative myeloproliferative neoplasms BCR-ABL1 (or Philadelphia chromosome). Somatic mutations in genes such as JAK2, MPL and CARL behave as initiating driver mutations responsible for the myeloproliferative phenotype. Methods: Articles published in the last years were reviewed in some databases of the Virtual Health Library (VHL). In this review we expose the general molecular mechanisms of these mutations and their clinical expression; reference is made to the triple negative myeloproliferative neoplasms and their clinical implications and the diagnostic algorithm proposed by the World Health Organization that includes the new biomarkers is indicated. Conclusions: The molecular study provides valuable information for the diagnosis and monitoring of myeloproliferative neoplasms, but fails to differentiate between each of them. Therefore, the appropriate application of the clinical method is required to arrive at an accurate diagnosis with the help of other complementary tests(AU)
Subject(s)
Humans , Biomarkers, Tumor/genetics , Myelodysplastic-Myeloproliferative Diseases/diagnosis , Algorithms , Molecular Structure , Clinical Diagnosis/diagnosisABSTRACT
Introducción: el gen de fusión RUNX1-RUNX1T codifica para una proteína quimérica con múltiples efectos en la proliferación, diferenciación y viabilidad de las células leucémicas. Objetivo: describir el comportamiento del RUNX1-RUNX1T1 en pacientes cubanos con dicha enfermedad. Método: Para ello se estudió el gen de fusión RUNX1-RUNX1T1 en 251 pacientes con leucemia mieloide aguda, mediante la reacción en cadena de la polimerasa, en el Instituto de Hematología e Inmunología de La Habana, entre los años 2000 y 2016. Resultados: El 20,3 por ciento (51 pacientes) fue positivo para el gen de fusión RUNX1-RUNX1T1, con una edad comprendida entre los 11 meses y los 80 años, media de 26 años. En los pacientes pediátricos la frecuencia del transcrito fue casi el doble de la de los adultos (29,2 por ciento y 15,3 por ciento, respectivamente) (p= 0,009). Mayor cantidad de pacientes masculinos presentaron el gen quimérico. En menores de 25 años hubo una mayor frecuencia del transcrito (p=0,019) con predominio significativo de la mutación en los adolescentes (p=0,027). Cinco pacientes fueron positivos al RUNX1-RUNX1T1 y a la duplicación interna en tándem del gen FLT3 (12,2 por ciento). Ningún paciente positivo al RUNX1-RUNX1T1 presentó el gen de fusión CBFB-MYH11. La mayor asociación estuvo con la mutación A del gen NPM1 para un 25 por ciento. El debut de la enfermedad se caracterizó por anemia moderada (p= 0,024), trombocitopenia severa (p= 0,004) y gran infiltración medular. La mayor discrepancia entre diagnósticos se concentró entre las variantes morfológicas M2 y M3 (p= 0,000). Conclusiones: En pacientes cubanos la leucemia mieloide aguda con gen de fusión RUNX1-RUNX1T1 positivo, tiene un comportamiento similar a lo descrito internacionalmente con algunas particularidadesen las características hematológicas de presentación de la enfermedad. El estudio molecular es imprescindible para definir el diagnóstico, y la estrategia terapéutica en estos pacientes(AU)
Introduction: The RUNX1-RUNX1T fusion gene codes for a chimeric protein with multiple effects on the proliferation, differentiation and viability of leukemic cells. Objective: To describe the behavior of RUNX1-RUNX1T1 in Cuban patients with this disease. Method: The RUNX1-RUNX1T1 fusion gene was studied in 251 patients with acute myeloid leukemia, through the polymerase chain reaction, at the Institute of Hematology and Immunology of Havana, between 2000 and 2016. Results: The 20.3 percent (51 patients) were positive for the RUNX1-RUNX1T1 fusion gene, with an age between 11 months and 80 years, average of 26 years.In pediatric patients, the transcript frequency was almost twice that of adults (29.2 percent and 15.3 percent , respectively) (p= 0.009). More male patients presented the chimeric gene. There was a higher frequency of the transcript in children under 25 years of age (p= 0.019) with a significant predominance of the mutation in adolescents (p= 0.027).Five patients were positive for RUNX1-RUNX1T1 and for internal tandem duplication of the FLT3 gene (12.2 percent ).No patient positive for RUNX1-RUNX1T1 presented the CBFB-MYH11 fusion gene. The greatest association was with the A mutation of the NPM1 gene for 25 percent . The onset of the disease was characterized by moderate anemia (p= 0.024), severe thrombocytopenia (p= 0.004) and extensive bone marrow infiltration. The greatest discrepancy between diagnoses was concentrated between the morphological variants M2 and M3 (p= 0.000). Conclusions: In Cuban patients, acute myeloid leukemia with a positive RUNX1-RUNX1T1 fusion gene has a behavior similar to that described internationally with some peculiarities in the hematological characteristics of the disease presentation.The molecular study is essential to define the diagnosis, and the therapeutic strategy in these patients(AU)
Subject(s)
Humans , Male , Female , Core Binding Factor Alpha 2 Subunit/metabolism , Pathology, Molecular/methods , RUNX1 Translocation Partner 1 Protein/metabolism , Epidemiology, Descriptive , Retrospective Studies , Longitudinal StudiesABSTRACT
Los estudios de citogenética y biología molecular permiten correlacionar la presencia de determinadas anomalías cromosómicas y moleculares con tipos específicos de leucemias y linfomas. Este conocimiento ha hecho posible el perfeccionamiento progresivo del sistema de clasificación de las enfermedades oncohematológicas. Actualmente la presencia de ciertas anomalías citogenéticas o moleculares son suficientes para identificar algunas de estas entidades y en ocasiones, el diagnóstico cambia después de un análisis integrado de la citomorfología con la citogenética y la biología molecular. Este reporte pretende resaltar la importancia del estudio molecular cuando la citomorfología es compleja y propicia diagnósticos erróneos. Mediante la reacción en cadena de la polimerasa, previa reverso-transcripción del ARN aislado de sangre medular, se estudiaron cuatro biomarcadores: los genes de fusión AML1-ETO, BCR-ABL, CBFβ-MYH11 y PML-RARα. Fueron estudiados 14 pacientes con diagnósticos inicial citomorfológico de: leucemia promielocítica (n= 6), leucemia aguda de linaje indefinido (n= 3) y dudoso entre leucemia mieloide crónica en crisis blástica mieloide y leucemia mieloide aguda (LMA) (n= 5). Al culminar la caracterización molecular todos fueron diagnosticados como LMA. Los resultados ilustran la importancia del estudio molecular en la clasificación de las leucemias, lo cual redunda en que el paciente reciba el tratamiento más adecuado y alcance una mejor respuesta.
Cytogenetic and molecular studies have correlated the presence of certain chromosomal and molecular anomalies with leukemia and lymphomas specific types. These evidences have allowed the progressive improvement of the system of classification of the oncohematological entities. Currently, the presence of certain cytogenetic or molecular anomalies is sufficient to identify specific entities and, in some occasions, the diagnostic changes after an integral analysis of cytomorfologic, cytogenetic and molecular studies. T This report aims to highlight the importance of molecular study when cytomorphology is complex and leads to erroneous diagnoses. Through polymerase chain reaction, prior reverse transcription of the RNA isolated from medullary blood, four biomarkers were studied: the fusion genes AML1-ETO, BCR-ABL, CBFβ-MYH11 and PML-RARα. Fourteen patients with initial diagnosis of: promyelocytic leukemia (n= 6), acute leukemia without lineage definition (n= 3) and chronic myeloid leukemia in myeloid blastic crisis or acute myeloid leukemia (AML) (n= 5) were studied. At the end of the molecular characterization all were diagnosed as AML. These results enlightened the role of the molecular studies in the classification of leukemia, which permit the patient receives the more appropriate treatment and achieve a better response.
ABSTRACT
Introducción: el gen de fusión RUNX1-RUNX1T codifica para una proteína quimérica con múltiples efectos en la proliferación, diferenciación y viabilidad de las células leucémicas. Objetivo: describir el comportamiento del RUNX1-RUNX1T1 en pacientes cubanos con dicha enfermedad. Método: Para ello se estudió el gen de fusión RUNX1-RUNX1T1 en 251 pacientes con leucemia mieloide aguda, mediante la reacción en cadena de la polimerasa, en el Instituto de Hematología e Inmunología de La Habana, entre los años 2000 y 2016. Resultados: El 20,3 por ciento (51 pacientes) fue positivo para el gen de fusión RUNX1-RUNX1T1, con una edad comprendida entre los 11 meses y los 80 años, media de 26 años. En los pacientes pediátricos la frecuencia del transcrito fue casi el doble de la de los adultos (29,2 por ciento y 15,3 por ciento, respectivamente) (p= 0,009). Mayor cantidad de pacientes masculinos presentaron el gen quimérico. En menores de 25 años hubo una mayor frecuencia del transcrito (p=0,019) con predominio significativo de la mutación en los adolescentes (p=0,027). Cinco pacientes fueron positivos al RUNX1-RUNX1T1 y a la duplicación interna en tándem del gen FLT3 (12,2 por ciento). Ningún paciente positivo al RUNX1-RUNX1T1 presentó el gen de fusión CBFB-MYH11. La mayor asociación estuvo con la mutación A del gen NPM1 para un 25 por ciento. El debut de la enfermedad se caracterizó por anemia moderada (p= 0,024), trombocitopenia severa (p= 0,004) y gran infiltración medular. La mayor discrepancia entre diagnósticos se concentró entre las variantes morfológicas M2 y M3 (p= 0,000). Conclusiones: En pacientes cubanos la leucemia mieloide aguda con gen de fusión RUNX1-RUNX1T1 positivo, tiene un comportamiento similar a lo descrito internacionalmente con algunas particularidadesen las características hematológicas de presentación de la enfermedad. El estudio molecular es imprescindible para definir el diagnóstico, y la estrategia terapéutica en estos pacientes(AU)
Introduction: The RUNX1-RUNX1T fusion gene codes for a chimeric protein with multiple effects on the proliferation, differentiation and viability of leukemic cells. Objective: To describe the behavior of RUNX1-RUNX1T1 in Cuban patients with this disease. Method: The RUNX1-RUNX1T1 fusion gene was studied in 251 patients with acute myeloid leukemia, through the polymerase chain reaction, at the Institute of Hematology and Immunology of Havana, between 2000 and 2016. Results: The 20.3 percent (51 patients) were positive for the RUNX1-RUNX1T1 fusion gene, with an age between 11 months and 80 years, average of 26 years.In pediatric patients, the transcript frequency was almost twice that of adults (29.2 percent and 15.3 percent , respectively) (p= 0.009). More male patients presented the chimeric gene. There was a higher frequency of the transcript in children under 25 years of age (p= 0.019) with a significant predominance of the mutation in adolescents (p= 0.027).Five patients were positive for RUNX1-RUNX1T1 and for internal tandem duplication of the FLT3 gene (12.2 percent ).No patient positive for RUNX1-RUNX1T1 presented the CBFB-MYH11 fusion gene. The greatest association was with the A mutation of the NPM1 gene for 25 percent . The onset of the disease was characterized by moderate anemia (p= 0.024), severe thrombocytopenia (p= 0.004) and extensive bone marrow infiltration. The greatest discrepancy between diagnoses was concentrated between the morphological variants M2 and M3 (p= 0.000). Conclusions: In Cuban patients, acute myeloid leukemia with a positive RUNX1-RUNX1T1 fusion gene has a behavior similar to that described internationally with some peculiarities in the hematological characteristics of the disease presentation.The molecular study is essential to define the diagnosis, and the therapeutic strategy in these patients(AU)
Subject(s)
Humans , Core Binding Factor Alpha 2 Subunit/metabolism , Pathology, Molecular/methods , RUNX1 Translocation Partner 1 Protein/metabolism , Epidemiology, Descriptive , Retrospective Studies , Longitudinal StudiesABSTRACT
Las leucemias agudas representan un grupo heterogéneo de hemopatías malignas que pueden ser de origen linfoide o mieloide en dependencia del clon celular que da lugar al proceso maligno. Sin embargo, existen casos de leucemias agudas con fenotipo mixto donde coexisten características propias de más de un linaje celular y que se conocen hoy como leucemias agudas de fenotipo mixto. Se presenta el caso de un paciente que se diagnosticó como una leucemia aguda híbrida linfoide B/mieloide mediante citometría de flujo. Se encontró la presencia del gen de fusión E2A-PBX1 que se forma como consecuencia de una traslocación entre los cromosomas 1 y 19. El paciente, un niño de 20 meses de nacido, falleció a los 12 días de iniciados los primeros síntomas clínicos. Se conoce que esta anormalidad cromosómica está asociada a un pronóstico desfavorable, principalmente por la grave afectación del sistema nervioso central como en efecto ocurrió. Hasta donde se alcanzó a revisar, no se encontró un reporte similar en la literatura de una leucemia aguda híbrida linfoide B/mieloide positiva al gen defusión E2A-PBX1(AU)
The acute leukemias are an heterogenous group of malignant hemopathies diseases characterized by excessive proliferation of an inmature cellular clon. Depending of the myeloid or lymphoid origin of such clon, the acute leukemia could be classified in myeloid or lymphoid respectivement. However, there are cases of acute leukemias with mixed phenotype where immunologic markers of more than on elineage are present. In the patient of this report was founded a mixed immunophenotype pattern by flow cytometry and the entity was classified as acute hybrid lymphoid B/ mieloid leukemia. Basedon theinicial diagnostic of acutelymphoidleukemia, the molecular studydiscoveredthepresence of E2A-PBX1 fusion gen. That molecular anomaly is formed as consequence of a traslocation between the1 and 19 chromosomes. The patient, a child of 20 months, died 12 days afte rthe first clynic symptoms begining. E2A-PBX1 fusion gen is associated to unfavorable outcome, mainly because the severe damage at the central nervous system as in fact it occurred. Until it was possible review, no any similar report was founded about a case of acute hybrid lymphoidB/myeloid leukemia positive to the E2A-PBX1 fusion gen(AU)