Astragalus grahamianus extract: a novel source of bioactive compounds with antioxidant and neuroprotective activities.

The Astragalus grahamianus (AG) Royle ex. Benth is traditionally used for the treatment of various human disorders. The current research work is aimed to explore the neuroprotective anti-Parkinson effects of various fractions of Astragalus grahamianus (A. grahamianus). Fine powder of Astragalus grahamianus was extracted with 70% methanol and then fractionated with various solvents on the basis of polarity. Standard protocols were used to investigate the bioactive constituents present in the various plant fractions. In-vitro antioxidant potential of various fractions was checked using diverse free radicals. In-vivo rats model was used to determined the neuroprotective effects of methanol fraction of A. grahamianus. The results revealed that various fractions of A. grahamianus contain flavonoids, cardiac glycosides, steroids, gums, terpenes, proteins, and carbohydrates except chloroform fraction lake the presence of steroids, cardiac glycosides, gums and saponins, aqueous fraction of steroids, terpenoids, gums and saponins, n-Hexane fraction steroids, carbohydrates, alkaloids, gums and flavonoids. The highest amount of total phenolic contents was found in AGME (32.67 ± 2.3 mg GAE / g). The AGME also showed enhanced free radicals cations potential against DPPH, ABTS and H2O2, respectively. The correlation between AOA (antioxidant activity) and TPC (total phenolic contents) revealed to be substantial. Relative R2 values for ABTS, H2O2, and DPPH activity are 0.9974, 0.9845, and 0.9678, respectively. The in-vivo neuroprotective activities showed significant results. Our findings highlight significant antioxidant, and neuroprotective possessions of AGME attributed to powerful bioactive compounds.

Studying biodiversity of spiders species in seven different localities of Charsadda District, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan / Estudando a biodiversidade de espécies de aranhas em sete localidades diferentes do distrito de Charsadda, Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão

The current research work aims to provide knowledge about the diversity of spiders' fauna and their occurrence throughout the year from District Charsadda Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. Research data were collected from March-2015 to January-2017 from seven different localities of Charsadda District by using the camera, bottle, plastic bags, paraffin films, field book and 70% of ethylene alcohol and 20% of glycerine were used as chemicals. By using special identification keys, spiders were differentiated into families, genera and species. During the study time, a total of 2734 specimens of spiders were collected belonging from 35 genera, 15 families and 44 species were identified. Salticidae was the dominant family according to genera studied plus spiders samples numbers collected with 10 genera and 616 species specimens count. The high occurrence of spiders was studied during July. The result of the current study also shows a reduction of spider's species in December due to lowering the temperature. The current study shows that Salticidae were the dominant family as capered to other species. The occurrence of spiders species greatly depends on changing the weather condition. The present study also shows great fluctuation in spider's occurrence with changing of hot climate to colder during the study duration. Moreover, the wet season plays a great role in spiders' population increase and growth.

O objetivo do presente trabalho de pesquisa é fornecer conhecimento sobre a diversidade da fauna de aranhas e sua ocorrência ao longo do ano no distrito Charsadda Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão. Os dados da pesquisa foram coletados no período de março de 2015 a janeiro de 2017 em sete diferentes localidades do distrito de Charsadda por meio de câmera, garrafa, sacos plásticos, filmes de parafina, livro de campo, e 70% de álcool etílico e 20% de glicerina foram utilizados como produtos químicos. Usando chaves de identificação especiais, as aranhas foram diferenciadas em família, gênero e espécie. Durante o período de estudo foram coletados 2.734 espécimes de aranhas pertencentes a 35 gêneros, 15 famílias e 44 espécies. Salticidae foi a família dominante de acordo com os gêneros estudados mais o número de amostras de aranhas coletadas com 10 gêneros e contagem de 616 espécies. Altas ocorrências de aranhas foram estudadas durante o mês de julho. O resultado do estudo atual também mostra redução das espécies de aranhas no mês de dezembro devido à diminuição da temperatura. O estudo atual mostra que os Salticidae foram a família dominante como alcaparras para outras espécies. A ocorrência de espécies de aranhas depende muito da mudança das condições climáticas. O presente estudo também mostra grande flutuação na ocorrência de aranhas com a mudança do clima quente para mais frio durante a duração do estudo. Além disso, a estação chuvosa desempenha um grande papel no aumento e crescimento da população de aranhas.

Prevalence of intestinal nematodes infection in school children of urban areas of district Lower Dir, Pakistan.

Intestinal parasitism is the main cause of disease all over the world and described as a significant community health problem. The current study intended to find out the occurrence and identification of hazard factors linked with IPIs among 4-12 years aged shool-age children residing in Lower Dir district, Pakistan during 2019 - 2020. A cross-sectional school-based study was conducted using a pre-arranged pre-tested survey. Anthropometric data and stool collection were done to obtain the findings. The direct wet mount preparation in saline/iodine/methods was used for stool examination. Data were investigated using the GraphPad Prism 5. A total of 400 children studied (mean age of 8.6±3.6 years) the total incidence rate for the intestinal parasitic disease was established to be 71.75%. Of the 400 children studied, the overall prevalence rate for intestinal parasitic infections was found to 71.75% Ascaris lumbricoides (33.1%), Trichuris trichiura (1.04%), E. vermicularis (1.39%), Hookworm (19.86%) were identified in children living in the study area. We concluded that there is a mass scale campaigns were required to generate alertness about health and sanitation in children and the need for the development of effective poverty control programs because deworming (killing of worm with drugs) alone is not adequate to control parasitic infections.

Studying biodiversity of spiders species in seven different localities of Charsadda District, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan.

The current research work aims to provide knowledge about the diversity of spiders' fauna and their occurrence throughout the year from District Charsadda Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. Research data were collected from March-2015 to January-2017 from seven different localities of Charsadda District by using the camera, bottle, plastic bags, paraffin films, field book and 70% of ethylene alcohol and 20% of glycerine were used as chemicals. By using special identification keys, spiders were differentiated into families, genera and species. During the study time, a total of 2734 specimens of spiders were collected belonging from 35 genera, 15 families and 44 species were identified. Salticidae was the dominant family according to genera studied plus spiders samples numbers collected with 10 genera and 616 species specimens count. The high occurrence of spiders was studied during July. The result of the current study also shows a reduction of spider's species in December due to lowering the temperature. The current study shows that Salticidae were the dominant family as capered to other species. The occurrence of spiders species greatly depends on changing the weather condition. The present study also shows great fluctuation in spider's occurrence with changing of hot climate to colder during the study duration. Moreover, the wet season plays a great role in spiders' population increase and growth.

Effects of different combinations of N, P and K at different time interval on vegetative, reproductive, yield and quality traits of mango (Mangifera Indica. L) cv. Dusehri / Efeitos de diferentes combinações de N, P e K em diferentes intervalos nas características vegetativas, reprodutivas, produtivas e de qualidade da manga (Mangifera indica. L) cv. Dusehri

The experiment was carried out on mango cv. Dusehri to investigate the effect of N, P and K fertilizers on vegetative, reproductive growth, yield and fruit quality. Eight different fertilizer combinations such as T1 (control), T2 (N), T3 (P), T4 (K), T5 (NP), T6 (NK), T7 (PK) and T8 (NPK) were used. Individual or combine fertilizer application of N (1000 g), P (750 g) and K (750 g) were applied during growing season in February and August. All the treatments significantly influenced on vegetative growth, flowering, fruiting, yield and other physiochemical attributes of mango as compared to control. Least effect was observed with individual fertilizer application while combine fertilizer treatments enhanced most of the investigated parameters. Especially, qualitative traits showed non significant differences between treated and untreated mango trees. However, among the different treatments T8 (NPK) showed significance for fruiting aspects such as maximum size of growth flushes (177.51 mm), total number of panicles/tree (845), total number of flowers/panicle (974), sex ratio (69.18%), fruit retention (13.85%), total number of fruits/tree (379), yield (82 kg/tree), fruit weight (197.5 g), pulp weight (135.5 g) and physiochemical parameters namely TSS (24.53), Vit. C (57.63 mg/100 mL) and total sugar (20.84%). In general, combine application of NPK (T8) were the most effective in enhancing fruiting aspects, yield, physiochemical characteristics as well as improved fruit quality of mango trees.

O experimento foi realizado em manga cv. Dusehri para investigar o efeito dos fertilizantes N, P e K no crescimento vegetativo, reprodutivo, produtividade e de qualidade do fruto. Foram utilizadas oito combinações diferentes de fertilizantes: T1 (controle), T2 (N), T3 (P), T4 (K), T5 (NP), T6 (NK), T7 (PK) e T8 (NPK). Cada tratamento de N(1.000 g), P (750 g) e K (750 g) foi aplicado duas vezes durante a estação de crescimento em fevereiro e agosto. Todos os tratamentos influenciaram significativamente o crescimento vegetativo, floração, frutificação, produtividade e outros atributos físico-químicos da manga em relação ao controle. Menos efeito foi observado com a aplicação individual de fertilizante, enquanto os tratamentos combinados aumentaram a maioria dos parâmetros investigados. Especialmente as características qualitativas mostraram diferenças não significativas entre mangueiras tratadas e não tratadas. No entanto, entre os diferentes tratamentos, T8 (NPK) apresentou significância para aspectos de frutificação, como tamanho máximo de folgas de crescimento (177,51 mm), número total de panículas/árvore (845), número total de flores/panícula (974), razão sexual (69,18%), retenção de frutos (13,85%), número total de frutos/árvore (379), produção (82 kg/árvore), peso do fruto (197,5 g) e peso da polpa (135,5 g), além de parâmetros físico-químicos, como TSS (24,53), vitamina C (57,63 mg/100 mL) e açúcar total (20,84%). Em geral, a aplicação combinada de NPK (T8) foi a mais eficaz no aprimoramento dos aspectos de frutificação, produtividade, características físico-químicas, além da melhoria da qualidade dos frutos das mangueiras.

Studies on the recombinant production and anticancer activity of thermostable L- asparaginase I from Pyrococcus abyssi / Estudos sobre a produção recombinante e atividade anticancerígena da L asparaginase I termoestável de Pyrococcus abyssi

L-Asparaginase catalysing the breakdown of L-Asparagine to L-Aspartate and ammonia is an enzyme of therapeutic importance in the treatment of cancer, especially the lymphomas and leukaemia. The present study describes the recombinant production, properties and anticancer potential of enzyme from a hyperthermophilic archaeon Pyrococcus abyssi. There are two genes coding for asparaginase in the genome of this organism. A 918 bp gene encoding 305 amino acids was PCR amplified and cloned in BL21 (DE3) strain of E. coli using pET28a (+) plasmid. The production of recombinant enzyme was induced under 0.5mM IPTG, purified by selective heat denaturation and ion exchange chromatography. Purified enzyme was analyzed for kinetics, in silico structure and anticancer properties. The recombinant enzyme has shown a molecular weight of 33 kDa, specific activity of 1175 U/mg, KM value 2.05mM, optimum temperature and pH 80°C and 8 respectively. No detectable enzyme activity found when L-Glutamine was used as the substrate. In silico studies have shown that the enzyme exists as a homodimer having Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172, and Lys232 being the putative active site residues. The free energy change calculated by molecular docking studies of enzyme and substrate was found as ∆G – 4.5 kJ/mole indicating the affinity of enzyme with the substrate. IC50 values of 5U/mL to 7.5U/mL were determined for FB, caco2 cells and HepG2 cells. A calculated amount of enzyme (5U/mL) exhibited 78% to 55% growth inhibition of caco2 and HepG2 cells. In conclusion, the recombinant enzyme produced and characterized in the present study offers a good candidate for the treatment of cancer. The procedures adopted in the present study can be prolonged for in vivo studies.

A L-asparaginase, que catalisa a degradação da L-asparagina em L-aspartato e amônia, é uma enzima de importância terapêutica no tratamento do câncer, especialmente dos linfomas e da leucemia. O presente estudo descreve a produção recombinante, propriedades e potencial anticancerígeno da enzima de Pyrococcus abyssi, um archaeon hipertermofílico. Existem dois genes que codificam para a asparaginase no genoma desse organismo. Um gene de 918 bp, que codifica 305 aminoácidos, foi amplificado por PCR e clonado na cepa BL21 (DE3) de E. coli usando o plasmídeo pET28a (+). A produção da enzima recombinante foi induzida sob 0,5mM de IPTG, purificada por desnaturação seletiva por calor e cromatografia de troca iônica. A enzima purificada foi analisada quanto à cinética, estrutura in silico e propriedades anticancerígenas. A enzima recombinante apresentou peso molecular de 33 kDa, atividade específica de 1.175 U / mg, valor de KM 2,05 mM, temperatura ótima de 80º C e pH 8. Nenhuma atividade enzimática detectável foi encontrada quando a L-glutamina foi usada como substrato. Estudos in silico mostraram que a enzima existe como um homodímero, com Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172 e Lys232 sendo os resíduos do local ativo putativo. A mudança de energia livre calculada por estudos de docking molecular da enzima e do substrato foi encontrada como ∆G – 4,5 kJ / mol, indicando a afinidade da enzima com o substrato. Valores de IC50 de 5U / mL a 7,5U / mL foram determinados para células FB, células caco2 e células HepG2. Uma quantidade de enzima (5U / mL) apresentou inibição de crescimento de 78% a 55% das células caco2 e HepG2, respectivamente. Em conclusão, a enzima recombinante produzida e caracterizada no presente estudo é uma boa possibilidade para o tratamento do câncer. Os procedimentos adotados na presente pesquisa podem ser aplicados para estudos in vivo.

Episode of Hepatitis C viral infection in the people of Swat, Pakistan / Episódio de infecção viral por Hepatite C no povo de Swat, Paquistão

Infectious agents cause serious diseases in humans worldwide and are responsible for the high rate of morbidity and mortality. The prevalence and epidemiology of infectious disease (HCV) in the hospital visited patients referred by the physicians through the initial findings and their associated risk factors were studied in Swat. The data of 174 infected patients were collected during the period of 2015 to 2017 from two clinical laboratories of Tehsil Matta Swat. Inform consent form was taken before blood collection. After taking informed consent blood samples were collected and ICT test was performed and then ICT positive cases were conform through PCR. A total of 174 ICT positive samples [106 male and 68 females] were included in this study. Age was considered from 10 to 72 years. Of the 174 ICT strip positive, 99 [63 males, 36 females] were confirmed through PCR. The prevalence rate was recorded 56.89%. I.V/I.M injection was recorded in 100% of the individuals. Visits to the barber shop was reported in (58%) of the individuals, married individuals were (81.0), surgical operation was reported in (44.8%), sharing toothbrush was observed in (29.9%), piercing was reported in (39.7%), family history was reported in (26.4%), dental treatment was observed in (21.8%), jaundice were (13.2%) and tattooing was (1.7%). Blood transfusion, surgical operations, Jaundice, family history and dental treatment were found significant risk factors for acquiring HCV infection. It was concluded that proper implementation of precautionary measures should be needed to control the spread of HCV in far near future.

Agentes infecciosos causam doenças graves em humanos em todo o mundo, e são responsáveis pelo alto índice de morbimortalidade. A prevalência e a epidemiologia das doenças infecciosas no hospital que atendeu pacientes encaminhados pelos médicos por meio dos achados iniciais e seus fatores de risco associados foram estudadas em Peshawar. Os dados de 174 pacientes infectados foram coletados durante o período de 2015 a 2017 oriundos de dois laboratórios clínicos de Tehsil Matta Swat. O formulário de consentimento informado foi obtido antes da coleta de sangue. Após a obtenção do consentimento informado, foram coletadas amostras de sangue e foi realizado o teste ICT e, em seguida, os casos ICT positivos foram confirmados por PCR. Um total de 174 amostras ICT positivas [106 homens e 68 mulheres] foi incluído neste estudo. A idade considerada foi de 10 a 72 anos. Das 174 tiras de ICT positivas, 99 casos [63 homens, 36 mulheres] foram confirmados por PCR. A taxa de prevalência foi de 56,89%. A injeção IV / IM foi registrada em 100% dos indivíduos. A visita à barbearia foi relatada em (58%) dos indivíduos, os números de casados foram (81,0%), e a operação cirúrgica foi relatada em (44,8%), o compartilhamento de escova de dente foi observado em (29,9%), o piercing foi relatado em (39,7%), antecedentes familiares foram relatados em (26,4%), tratamento odontológico em (21,8%), icterícia (13,2%) e tatuagem em (1,7%). Transfusão de sangue, operações cirúrgicas, icterícia, histórico familiar e tratamento odontológico foram fatores de risco significativos para adquirir infecção por Vírus da Hepatite C (VHC). Concluiu-se que a implementação adequada de medidas de precaução deve ser necessária para controlar a propagação do VHC em um futuro próximo.

Comparative analysis of brain in relation to the body length and weight of common carp (Cyprinus carpio) in captive (hatchery) and wild (river system) populations / Análise comparativa do cérebro em relação ao comprimento do corpo e peso da carpa comum (Cyprinus carpio) em populações de cativeiro (incubatório) e selvagem (sistema fluvial)

Cyprinus carpio is the member of family cyprinidae commonly called common carp. This study was aimed to find out the comparison of brain of wild (river system) and captive (hatchery reared) population of common carp. A total of thirty samples (15 from hatchery and 15 from river Swat) were collected. All the specimens were examined in Laboratory of Parasitoloy, Zoology Department, University of Malakand. Findings indicated that wild population were greater in brain size and weight as compared to hatchery reared population. The fish samples collected from captive environment (hatchery) were showing more weight and length as compared to wild population of common carps. The mean value of total weight of hatchery fishes 345±48.68 and the mean value of brain weight of hatchery reared fishes 0.28±0.047. The mean value of wild fish’s total body weight 195.16±52.58 and the mean value of brain weight of wild fishes are 0.45±0.14. Present research calls for the fact that fish in dependent environmental conditions possess brain larger in size as compared to its captive population, it is due to use and disuse of brain in their environmental requirements.

Cyprinus carpio é o membro da família cyprinidae comumente chamada de carpa comum. O objetivo deste estudo foi comparar a população de cérebros de carpa comum selvagem (sistema fluvial) e em cativeiro (criação em incubatório). Um total de trinta amostras (15 do incubatório e 15 do rio Swat) foram coletadas. Todos os espécimes foram examinados no Laboratório de Parasitoloy, Departamento de Zoologia da Universidade de Malakand. Os resultados indicaram que a população selvagem era maior em tamanho e peso do cérebro em comparação com a população criada em incubatório. As amostras de peixes coletadas em ambiente de cativeiro (incubatório) estavam apresentando mais peso e comprimento em comparação com a população selvagem de carpas comuns. O valor médio do peso total dos peixes de incubação 345 ± 48,68 e o valor médio do peso do cérebro de peixes criados em incubadoras 0,28 ± 0,047. O valor médio do peso corporal total dos peixes selvagens 195,16 ± 52,58 e o valor médio do peso do cérebro dos peixes selvagens são 0,45 ± 0,14. A presente pesquisa apela para o fato de que peixes em condições ambientais dependentes possuem cérebros maiores em tamanho em comparação com sua população em cativeiro, isso se deve ao uso e desuso do cérebro em suas necessidades ambientais.

Effects of different combinations of N, P and K at different time interval on vegetative, reproductive, yield and quality traits of mango (Mangifera Indica. L) cv. Dusehri

Abstract The experiment was carried out on mango cv. Dusehri to investigate the effect of N, P and K fertilizers on vegetative, reproductive growth, yield and fruit quality. Eight different fertilizer combinations such as T1 (control), T2 (N), T3 (P), T4 (K), T5 (NP), T6 (NK), T7 (PK) and T8 (NPK) were used. Individual or combine fertilizer application of N (1000 g), P (750 g) and K (750 g) were applied during growing season in February and August. All the treatments significantly influenced on vegetative growth, flowering, fruiting, yield and other physiochemical attributes of mango as compared to control. Least effect was observed with individual fertilizer application while combine fertilizer treatments enhanced most of the investigated parameters. Especially, qualitative traits showed non-significant differences between treated and untreated mango trees. However, among the different treatments T8 (NPK) showed significance for fruiting aspects such as maximum size of growth flushes (177.51 mm), total number of panicles/tree (845), total number of flowers/panicle (974), sex ratio (69.18%), fruit retention (13.85%), total number of fruits/tree (379), yield (82 kg/tree), fruit weight (197.5 g), pulp weight (135.5 g) and physiochemical parameters namely TSS (24.53), Vit. C (57.63 mg/100 mL) and total sugar (20.84%). In general, combine application of NPK (T8) were the most effective in enhancing fruiting aspects, yield, physiochemical characteristics as well as improved fruit quality of mango trees.

Resumo O experimento foi realizado em manga cv. Dusehri para investigar o efeito dos fertilizantes N, P e K no crescimento vegetativo, reprodutivo, produtividade e de qualidade do fruto. Foram utilizadas oito combinações diferentes de fertilizantes: T1 (controle), T2 (N), T3 (P), T4 (K), T5 (NP), T6 (NK), T7 (PK) e T8 (NPK). Cada tratamento de N (1.000 g), P (750 g) e K (750 g) foi aplicado duas vezes durante a estação de crescimento em fevereiro e agosto. Todos os tratamentos influenciaram significativamente o crescimento vegetativo, floração, frutificação, produtividade e outros atributos físico-químicos da manga em relação ao controle. Menos efeito foi observado com a aplicação individual de fertilizante, enquanto os tratamentos combinados aumentaram a maioria dos parâmetros investigados. Especialmente as características qualitativas mostraram diferenças não significativas entre mangueiras tratadas e não tratadas. No entanto, entre os diferentes tratamentos, T8 (NPK) apresentou significância para aspectos de frutificação, como tamanho máximo de folgas de crescimento (177,51 mm), número total de panículas/árvore (845), número total de flores/panícula (974), razão sexual (69,18%), retenção de frutos (13,85%), número total de frutos/árvore (379), produção (82 kg/árvore), peso do fruto (197,5 g) e peso da polpa (135,5 g), além de parâmetros físico-químicos, como TSS (24,53), vitamina C (57,63 mg/100 mL) e açúcar total (20,84%). Em geral, a aplicação combinada de NPK (T8) foi a mais eficaz no aprimoramento dos aspectos de frutificação, produtividade, características físico-químicas, além da melhoria da qualidade dos frutos das mangueiras.

Studies on the recombinant production and anticancer activity of thermostable L- asparaginase I from Pyrococcus abyssi

Abstract L-Asparaginase catalysing the breakdown of L-Asparagine to L-Aspartate and ammonia is an enzyme of therapeutic importance in the treatment of cancer, especially the lymphomas and leukaemia. The present study describes the recombinant production, properties and anticancer potential of enzyme from a hyperthermophilic archaeon Pyrococcus abyssi. There are two genes coding for asparaginase in the genome of this organism. A 918 bp gene encoding 305 amino acids was PCR amplified and cloned in BL21 (DE3) strain of E. coli using pET28a (+) plasmid. The production of recombinant enzyme was induced under 0.5mM IPTG, purified by selective heat denaturation and ion exchange chromatography. Purified enzyme was analyzed for kinetics, in silico structure and anticancer properties. The recombinant enzyme has shown a molecular weight of 33 kDa, specific activity of 1175 U/mg, KM value 2.05mM, optimum temperature and pH 80°C and 8 respectively. No detectable enzyme activity found when L-Glutamine was used as the substrate. In silico studies have shown that the enzyme exists as a homodimer having Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172, and Lys232 being the putative active site residues. The free energy change calculated by molecular docking studies of enzyme and substrate was found as G 4.5 kJ/mole indicating the affinity of enzyme with the substrate. IC50 values of 5U/mL to 7.5U/mL were determined for FB, caco2 cells and HepG2 cells. A calculated amount of enzyme (5U/mL) exhibited 78% to 55% growth inhibition of caco2 and HepG2 cells. In conclusion, the recombinant enzyme produced and characterized in the present study offers a good candidate for the treatment of cancer. The procedures adopted in the present study can be prolonged for in vivo studies.

Resumo A L-asparaginase, que catalisa a degradação da L-asparagina em L-aspartato e amônia, é uma enzima de importância terapêutica no tratamento do câncer, especialmente dos linfomas e da leucemia. O presente estudo descreve a produção recombinante, propriedades e potencial anticancerígeno da enzima de Pyrococcus abyssi, um archaeon hipertermofílico. Existem dois genes que codificam para a asparaginase no genoma desse organismo. Um gene de 918 bp, que codifica 305 aminoácidos, foi amplificado por PCR e clonado na cepa BL21 (DE3) de E. coli usando o plasmídeo pET28a (+). A produção da enzima recombinante foi induzida sob 0,5mM de IPTG, purificada por desnaturação seletiva por calor e cromatografia de troca iônica. A enzima purificada foi analisada quanto à cinética, estrutura in silico e propriedades anticancerígenas. A enzima recombinante apresentou peso molecular de 33 kDa, atividade específica de 1.175 U / mg, valor de KM 2,05 mM, temperatura ótima de 80º C e pH 8. Nenhuma atividade enzimática detectável foi encontrada quando a L-glutamina foi usada como substrato. Estudos in silico mostraram que a enzima existe como um homodímero, com Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172 e Lys232 sendo os resíduos do local ativo putativo. A mudança de energia livre calculada por estudos de docking molecular da enzima e do substrato foi encontrada como G 4,5 kJ / mol, indicando a afinidade da enzima com o substrato. Valores de IC50 de 5U / mL a 7,5U / mL foram determinados para células FB, células caco2 e células HepG2. Uma quantidade de enzima (5U / mL) apresentou inibição de crescimento de 78% a 55% das células caco2 e HepG2, respectivamente. Em conclusão, a enzima recombinante produzida e caracterizada no presente estudo é uma boa possibilidade para o tratamento do câncer. Os procedimentos adotados na presente pesquisa podem ser aplicados para estudos in vivo.

Episode of Hepatitis C viral infection in the people of Swat, Pakistan

ABSTRACT Infectious agents cause serious diseases in humans worldwide and are responsible for the high rate of morbidity and mortality. The prevalence and epidemiology of infectious disease (HCV) in the hospital visited patients referred by the physicians through the initial findings and their associated risk factors were studied in Swat. The data of 174 infected patients were collected during the period of 2015 to 2017 from two clinical laboratories of Tehsil Matta Swat. Inform consent form was taken before blood collection. After taking informed consent blood samples were collected and ICT test was performed and then ICT positive cases were conform through PCR. A total of 174 ICT positive samples [106 male and 68 females] were included in this study. Age was considered from 10 to 72 years. Of the 174 ICT strip positive, 99 [63 males, 36 females] were confirmed through PCR. The prevalence rate was recorded 56.89%. I.V/I.M injection was recorded in 100% of the individuals. Visits to the barber shop was reported in (58%) of the individuals, married individuals were (81.0), surgical operation was reported in (44.8%), sharing toothbrush was observed in (29.9%), piercing was reported in (39.7%), family history was reported in (26.4%), dental treatment was observed in (21.8%), jaundice were (13.2%) and tattooing was (1.7%). Blood transfusion, surgical operations, Jaundice, family history and dental treatment were found significant risk factors for acquiring HCV infection. It was concluded that proper implementation of precautionary measures should be needed to control the spread of HCV in far near future.

RESUMO Agentes infecciosos causam doenças graves em humanos em todo o mundo, e são responsáveis pelo alto índice de morbimortalidade. A prevalência e a epidemiologia das doenças infecciosas no hospital que atendeu pacientes encaminhados pelos médicos por meio dos achados iniciais e seus fatores de risco associados foram estudadas em Peshawar. Os dados de 174 pacientes infectados foram coletados durante o período de 2015 a 2017 oriundos de dois laboratórios clínicos de Tehsil Matta Swat. O formulário de consentimento informado foi obtido antes da coleta de sangue. Após a obtenção do consentimento informado, foram coletadas amostras de sangue e foi realizado o teste ICT e, em seguida, os casos ICT positivos foram confirmados por PCR. Um total de 174 amostras ICT positivas [106 homens e 68 mulheres] foi incluído neste estudo. A idade considerada foi de 10 a 72 anos. Das 174 tiras de ICT positivas, 99 casos [63 homens, 36 mulheres] foram confirmados por PCR. A taxa de prevalência foi de 56,89%. A injeção IV / IM foi registrada em 100% dos indivíduos. A visita à barbearia foi relatada em (58%) dos indivíduos, os números de casados foram (81,0%), e a operação cirúrgica foi relatada em (44,8%), o compartilhamento de escova de dente foi observado em (29,9%), o piercing foi relatado em (39,7%), antecedentes familiares foram relatados em (26,4%), tratamento odontológico em (21,8%), icterícia (13,2%) e tatuagem em (1,7%). Transfusão de sangue, operações cirúrgicas, icterícia, histórico familiar e tratamento odontológico foram fatores de risco significativos para adquirir infecção por Vírus da Hepatite C (VHC). Concluiu-se que a implementação adequada de medidas de precaução deve ser necessária para controlar a propagação do VHC em um futuro próximo.

Comparative analysis of brain in relation to the body length and weight of common carp (Cyprinus carpio) in captive (hatchery) and wild (river system) populations

Abstract Cyprinus carpio is the member of family cyprinidae commonly called common carp. This study was aimed to find out the comparison of brain of wild (river system) and captive (hatchery reared) population of common carp. A total of thirty samples (15 from hatchery and 15 from river Swat) were collected. All the specimens were examined in Laboratory of Parasitoloy, Zoology Department, University of Malakand. Findings indicated that wild population were greater in brain size and weight as compared to hatchery reared population. The fish samples collected from captive environment (hatchery) were showing more weight and length as compared to wild population of common carps. The mean value of total weight of hatchery fishes 345±48.68 and the mean value of brain weight of hatchery reared fishes 0.28±0.047. The mean value of wild fishs total body weight 195.16±52.58 and the mean value of brain weight of wild fishes are 0.45±0.14. Present research calls for the fact that fish in dependent environmental conditions possess brain larger in size as compared to its captive population, it is due to use and disuse of brain in their environmental requirements.

Resumo Cyprinus carpio é o membro da família cyprinidae comumente chamada de carpa comum. O objetivo deste estudo foi comparar a população de cérebros de carpa comum selvagem (sistema fluvial) e em cativeiro (criação em incubatório). Um total de trinta amostras (15 do incubatório e 15 do rio Swat) foram coletadas. Todos os espécimes foram examinados no Laboratório de Parasitoloy, Departamento de Zoologia da Universidade de Malakand. Os resultados indicaram que a população selvagem era maior em tamanho e peso do cérebro em comparação com a população criada em incubatório. As amostras de peixes coletadas em ambiente de cativeiro (incubatório) estavam apresentando mais peso e comprimento em comparação com a população selvagem de carpas comuns. O valor médio do peso total dos peixes de incubação 345 ± 48,68 e o valor médio do peso do cérebro de peixes criados em incubadoras 0,28 ± 0,047. O valor médio do peso corporal total dos peixes selvagens 195,16 ± 52,58 e o valor médio do peso do cérebro dos peixes selvagens são 0,45 ± 0,14. A presente pesquisa apela para o fato de que peixes em condições ambientais dependentes possuem cérebros maiores em tamanho em comparação com sua população em cativeiro, isso se deve ao uso e desuso do cérebro em suas necessidades ambientais.

Episode of Hepatitis C viral infection in the people of Swat, Pakistan / Episódio de infecção viral por Hepatite C no povo de Swat, Paquistão

Infectious agents cause serious diseases in humans worldwide and are responsible for the high rate of morbidity and mortality. The prevalence and epidemiology of infectious disease (HCV) in the hospital visited patients referred by the physicians through the initial findings and their associated risk factors were studied in Swat. The data of 174 infected patients were collected during the period of 2015 to 2017 from two clinical laboratories of Tehsil Matta Swat. Inform consent form was taken before blood collection. After taking informed consent blood samples were collected and ICT test was performed and then ICT positive cases were conform through PCR. A total of 174 ICT positive samples [106 male and 68 females] were included in this study. Age was considered from 10 to 72 years. Of the 174 ICT strip positive, 99 [63 males, 36 females] were confirmed through PCR. The prevalence rate was recorded 56.89%. I.V/I.M injection was recorded in 100% of the individuals. Visits to the barber shop was reported in (58%) of the individuals, married individuals were (81.0), surgical operation was reported in (44.8%), sharing toothbrush was observed in (29.9%), piercing was reported in (39.7%), family history was reported in (26.4%), dental treatment was observed in (21.8%), jaundice were (13.2%) and tattooing was (1.7%). Blood transfusion, surgical operations, Jaundice, family history and dental treatment were found significant risk factors for acquiring HCV infection. It was concluded that proper implementation of precautionary measures should be needed to control the spread of HCV in far near future.

Agentes infecciosos causam doenças graves em humanos em todo o mundo, e são responsáveis pelo alto índice de morbimortalidade. A prevalência e a epidemiologia das doenças infecciosas no hospital que atendeu pacientes encaminhados pelos médicos por meio dos achados iniciais e seus fatores de risco associados foram estudadas em Peshawar. Os dados de 174 pacientes infectados foram coletados durante o período de 2015 a 2017 oriundos de dois laboratórios clínicos de Tehsil Matta Swat. O formulário de consentimento informado foi obtido antes da coleta de sangue. Após a obtenção do consentimento informado, foram coletadas amostras de sangue e foi realizado o teste ICT e, em seguida, os casos ICT positivos foram confirmados por PCR. Um total de 174 amostras ICT positivas [106 homens e 68 mulheres] foi incluído neste estudo. A idade considerada foi de 10 a 72 anos. Das 174 tiras de ICT positivas, 99 casos [63 homens, 36 mulheres] foram confirmados por PCR. A taxa de prevalência foi de 56,89%. A injeção IV / IM foi registrada em 100% dos indivíduos. A visita à barbearia foi relatada em (58%) dos indivíduos, os números de casados foram (81,0%), e a operação cirúrgica foi relatada em (44,8%), o compartilhamento de escova de dente foi observado em (29,9%), o piercing foi relatado em (39,7%), antecedentes familiares foram relatados em (26,4%), tratamento odontológico em (21,8%), icterícia (13,2%) e tatuagem em (1,7%). Transfusão de sangue, operações cirúrgicas, icterícia, histórico familiar e tratamento odontológico foram fatores de risco significativos para adquirir infecção por Vírus da Hepatite C (VHC). Concluiu-se que a implementação adequada de medidas de precaução deve ser necessária para controlar a propagação do VHC em um futuro próximo.

Studies on the recombinant production and anticancer activity of thermostable L- asparaginase I from Pyrococcus abyssi / Estudos sobre a produção recombinante e atividade anticancerígena da L-asparaginase I termoestável de Pyrococcus abyssi

L-Asparaginase catalysing the breakdown of L-Asparagine to L-Aspartate and ammonia is an enzyme of therapeutic importance in the treatment of cancer, especially the lymphomas and leukaemia. The present study describes the recombinant production, properties and anticancer potential of enzyme from a hyperthermophilic archaeon Pyrococcus abyssi. There are two genes coding for asparaginase in the genome of this organism. A 918 bp gene encoding 305 amino acids was PCR amplified and cloned in BL21 (DE3) strain of E. coli using pET28a (+) plasmid. The production of recombinant enzyme was induced under 0.5mM IPTG, purified by selective heat denaturation and ion exchange chromatography. Purified enzyme was analyzed for kinetics, in silico structure and anticancer properties. The recombinant enzyme has shown a molecular weight of 33 kDa, specific activity of 1175 U/mg, KM value 2.05mM, optimum temperature and pH 80°C and 8 respectively. No detectable enzyme activity found when L-Glutamine was used as the substrate. In silico studies have shown that the enzyme exists as a homodimer having Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172, and Lys232 being the putative active site residues. The free energy change calculated by molecular docking studies of enzyme and substrate was found as ∆G ­ 4.5 kJ/mole indicating the affinity of enzyme with the substrate. IC50 values of 5U/mL to 7.5U/mL were determined for FB, caco2 cells and HepG2 cells. A calculated amount of enzyme (5U/mL) exhibited 78% to 55% growth inhibition of caco2 and HepG2 cells. In conclusion, the recombinant enzyme produced and characterized in the present study offers a good candidate for the treatment of cancer. The procedures adopted in the present study can be prolonged for in vivo studies.

A L-asparaginase, que catalisa a degradação da L-asparagina em L-aspartato e amônia, é uma enzima de importância terapêutica no tratamento do câncer, especialmente dos linfomas e da leucemia. O presente estudo descreve a produção recombinante, propriedades e potencial anticancerígeno da enzima de Pyrococcus abyssi, um archaeon hipertermofílico. Existem dois genes que codificam para a asparaginase no genoma desse organismo. Um gene de 918 bp, que codifica 305 aminoácidos, foi amplificado por PCR e clonado na cepa BL21 (DE3) de E. coli usando o plasmídeo pET28a (+). A produção da enzima recombinante foi induzida sob 0,5mM de IPTG, purificada por desnaturação seletiva por calor e cromatografia de troca iônica. A enzima purificada foi analisada quanto à cinética, estrutura in silico e propriedades anticancerígenas. A enzima recombinante apresentou peso molecular de 33 kDa, atividade específica de 1.175 U / mg, valor de KM 2,05 mM, temperatura ótima de 80º C e pH 8. Nenhuma atividade enzimática detectável foi encontrada quando a L-glutamina foi usada como substrato. Estudos in silico mostraram que a enzima existe como um homodímero, com Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172 e Lys232 sendo os resíduos do local ativo putativo. A mudança de energia livre calculada por estudos de docking molecular da enzima e do substrato foi encontrada como ∆G ­ 4,5 kJ / mol, indicando a afinidade da enzima com o substrato. Valores de IC50 de 5U / mL a 7,5U / mL foram determinados para células FB, células caco2 e células HepG2. Uma quantidade de enzima (5U / mL) apresentou inibição de crescimento de 78% a 55% das células caco2 e HepG2, respectivamente. Em conclusão, a enzima recombinante produzida e caracterizada no presente estudo é uma boa possibilidade para o tratamento do câncer. Os procedimentos adotados na presente pesquisa podem ser aplicados para estudos in vivo.

Comparative analysis of brain in relation to the body length and weight of common carp (Cyprinus carpio) in captive (hatchery) and wild (river system) populations / Análise comparativa do cérebro em relação ao comprimento do corpo e peso da carpa comum (Cyprinus carpio) em populações de cativeiro (incubatório) e selvagem (sistema fluvial)

Cyprinus carpio is the member of family cyprinidae commonly called common carp. This study was aimed to find out the comparison of brain of wild (river system) and captive (hatchery reared) population of common carp. A total of thirty samples (15 from hatchery and 15 from river Swat) were collected. All the specimens were examined in Laboratory of Parasitoloy, Zoology Department, University of Malakand. Findings indicated that wild population were greater in brain size and weight as compared to hatchery reared population. The fish samples collected from captive environment (hatchery) were showing more weight and length as compared to wild population of common carps. The mean value of total weight of hatchery fishes 345±48.68 and the mean value of brain weight of hatchery reared fishes 0.28±0.047. The mean value of wild fish's total body weight 195.16±52.58 and the mean value of brain weight of wild fishes are 0.45±0.14. Present research calls for the fact that fish in dependent environmental conditions possess brain larger in size as compared to its captive population, it is due to use and disuse of brain in their environmental requirements.

Cyprinus carpio é o membro da família cyprinidae comumente chamada de carpa comum. O objetivo deste estudo foi comparar a população de cérebros de carpa comum selvagem (sistema fluvial) e em cativeiro (criação em incubatório). Um total de trinta amostras (15 do incubatório e 15 do rio Swat) foram coletadas. Todos os espécimes foram examinados no Laboratório de Parasitoloy, Departamento de Zoologia da Universidade de Malakand. Os resultados indicaram que a população selvagem era maior em tamanho e peso do cérebro em comparação com a população criada em incubatório. As amostras de peixes coletadas em ambiente de cativeiro (incubatório) estavam apresentando mais peso e comprimento em comparação com a população selvagem de carpas comuns. O valor médio do peso total dos peixes de incubação 345 ± 48,68 e o valor médio do peso do cérebro de peixes criados em incubadoras 0,28 ± 0,047. O valor médio do peso corporal total dos peixes selvagens 195,16 ± 52,58 e o valor médio do peso do cérebro dos peixes selvagens são 0,45 ± 0,14. A presente pesquisa apela para o fato de que peixes em condições ambientais dependentes possuem cérebros maiores em tamanho em comparação com sua população em cativeiro, isso se deve ao uso e desuso do cérebro em suas necessidades ambientais.

Effects of different combinations of N, P and K at different time interval on vegetative, reproductive, yield and quality traits of mango (Mangifera Indica. L) cv. Dusehri / Efeitos de diferentes combinações de N, P e K em diferentes intervalos nas características vegetativas, reprodutivas, produtivas e de qualidade da manga (Mangifera indica. L) cv. Dusehri

The experiment was carried out on mango cv. Dusehri to investigate the effect of N, P and K fertilizers on vegetative, reproductive growth, yield and fruit quality. Eight different fertilizer combinations such as T1 (control), T2 (N), T3 (P), T4 (K), T5 (NP), T6 (NK), T7 (PK) and T8 (NPK) were used. Individual or combine fertilizer application of N (1000 g), P (750 g) and K (750 g) were applied during growing season in February and August. All the treatments significantly influenced on vegetative growth, flowering, fruiting, yield and other physiochemical attributes of mango as compared to control. Least effect was observed with individual fertilizer application while combine fertilizer treatments enhanced most of the investigated parameters. Especially, qualitative traits showed nonsignificant differences between treated and untreated mango trees. However, among the different treatments T8 (NPK) showed significance for fruiting aspects such as maximum size of growth flushes (177.51 mm), total number of panicles/tree (845), total number of flowers/panicle (974), sex ratio (69.18%), fruit retention (13.85%), total number of fruits/tree (379), yield (82 kg/tree), fruit weight (197.5 g), pulp weight (135.5 g) and physiochemical parameters namely TSS (24.53), Vit. C (57.63 mg/100 mL) and total sugar (20.84%). In general, combine application of NPK (T8) were the most effective in enhancing fruiting aspects, yield, physiochemical characteristics as well as improved fruit quality of mango trees.

O experimento foi realizado em manga cv. Dusehri para investigar o efeito dos fertilizantes N, P e K no crescimento vegetativo, reprodutivo, produtividade e de qualidade do fruto. Foram utilizadas oito combinações diferentes de fertilizantes: T1 (controle), T2 (N), T3 (P), T4 (K), T5 (NP), T6 (NK), T7 (PK) e T8 (NPK). Cada tratamento de N (1.000 g), P (750 g) e K (750 g) foi aplicado duas vezes durante a estação de crescimento em fevereiro e agosto. Todos os tratamentos influenciaram significativamente o crescimento vegetativo, floração, frutificação, produtividade e outros atributos físico-químicos da manga em relação ao controle. Menos efeito foi observado com a aplicação individual de fertilizante, enquanto os tratamentos combinados aumentaram a maioria dos parâmetros investigados. Especialmente as características qualitativas mostraram diferenças não significativas entre mangueiras tratadas e não tratadas. No entanto, entre os diferentes tratamentos, T8 (NPK) apresentou significância para aspectos de frutificação, como tamanho máximo de folgas de crescimento (177,51 mm), número total de panículas/árvore (845), número total de flores/panícula (974), razão sexual (69,18%), retenção de frutos (13,85%), número total de frutos/árvore (379), produção (82 kg/árvore), peso do fruto (197,5 g) e peso da polpa (135,5 g), além de parâmetros físico-químicos, como TSS (24,53), vitamina C (57,63 mg/100 mL) e açúcar total (20,84%). Em geral, a aplicação combinada de NPK (T8) foi a mais eficaz no aprimoramento dos aspectos de frutificação, produtividade, características físico-químicas, além da melhoria da qualidade dos frutos das mangueiras.

Comparative analysis of brain in relation to the body length and weight of common carp (Cyprinus carpio) in captive (hatchery) and wild (river system) populations / Análise comparativa do cérebro em relação ao comprimento do corpo e peso da carpa comum (Cyprinus carpio) em populações de cativeiro (incubatório) e selvagem (sistema fluvial)

Cyprinus carpio is the member of family cyprinidae commonly called common carp. This study was aimed to find out the comparison of brain of wild (river system) and captive (hatchery reared) population of common carp. A total of thirty samples (15 from hatchery and 15 from river Swat) were collected. All the specimens were examined in Laboratory of Parasitoloy, Zoology Department, University of Malakand. Findings indicated that wild population were greater in brain size and weight as compared to hatchery reared population. The fish samples collected from captive environment (hatchery) were showing more weight and length as compared to wild population of common carps. The mean value of total weight of hatchery fishes 345±48.68 and the mean value of brain weight of hatchery reared fishes 0.28±0.047. The mean value of wild fishs total body weight 195.16±52.58 and the mean value of brain weight of wild fishes are 0.45±0.14. Present research calls for the fact that fish in dependent environmental conditions possess brain larger in size as compared to its captive population, it is due to use and disuse of brain in their environmental requirements.(AU)

Cyprinus carpio é o membro da família cyprinidae comumente chamada de carpa comum. O objetivo deste estudo foi comparar a população de cérebros de carpa comum selvagem (sistema fluvial) e em cativeiro (criação em incubatório). Um total de trinta amostras (15 do incubatório e 15 do rio Swat) foram coletadas. Todos os espécimes foram examinados no Laboratório de Parasitoloy, Departamento de Zoologia da Universidade de Malakand. Os resultados indicaram que a população selvagem era maior em tamanho e peso do cérebro em comparação com a população criada em incubatório. As amostras de peixes coletadas em ambiente de cativeiro (incubatório) estavam apresentando mais peso e comprimento em comparação com a população selvagem de carpas comuns. O valor médio do peso total dos peixes de incubação 345 ± 48,68 e o valor médio do peso do cérebro de peixes criados em incubadoras 0,28 ± 0,047. O valor médio do peso corporal total dos peixes selvagens 195,16 ± 52,58 e o valor médio do peso do cérebro dos peixes selvagens são 0,45 ± 0,14. A presente pesquisa apela para o fato de que peixes em condições ambientais dependentes possuem cérebros maiores em tamanho em comparação com sua população em cativeiro, isso se deve ao uso e desuso do cérebro em suas necessidades ambientais.(AU)

Effects of different combinations of N, P and K at different time interval on vegetative, reproductive, yield and quality traits of mango (Mangifera Indica. L) cv. Dusehri / Efeitos de diferentes combinações de N, P e K em diferentes intervalos nas características vegetativas, reprodutivas, produtivas e de qualidade da manga (Mangifera indica. L) cv. Dusehri

The experiment was carried out on mango cv. Dusehri to investigate the effect of N, P and K fertilizers on vegetative, reproductive growth, yield and fruit quality. Eight different fertilizer combinations such as T1 (control), T2 (N), T3 (P), T4 (K), T5 (NP), T6 (NK), T7 (PK) and T8 (NPK) were used. Individual or combine fertilizer application of N (1000 g), P (750 g) and K (750 g) were applied during growing season in February and August. All the treatments significantly influenced on vegetative growth, flowering, fruiting, yield and other physiochemical attributes of mango as compared to control. Least effect was observed with individual fertilizer application while combine fertilizer treatments enhanced most of the investigated parameters. Especially, qualitative traits showed non significant differences between treated and untreated mango trees. However, among the different treatments T8 (NPK) showed significance for fruiting aspects such as maximum size of growth flushes (177.51 mm), total number of panicles/tree (845), total number of flowers/panicle (974), sex ratio (69.18%), fruit retention (13.85%), total number of fruits/tree (379), yield (82 kg/tree), fruit weight (197.5 g), pulp weight (135.5 g) and physiochemical parameters namely TSS (24.53), Vit. C (57.63 mg/100 mL) and total sugar (20.84%). In general, combine application of NPK (T8) were the most effective in enhancing fruiting aspects, yield, physiochemical characteristics as well as improved fruit quality of mango trees.(AU)

O experimento foi realizado em manga cv. Dusehri para investigar o efeito dos fertilizantes N, P e K no crescimento vegetativo, reprodutivo, produtividade e de qualidade do fruto. Foram utilizadas oito combinações diferentes de fertilizantes: T1 (controle), T2 (N), T3 (P), T4 (K), T5 (NP), T6 (NK), T7 (PK) e T8 (NPK). Cada tratamento de N(1.000 g), P (750 g) e K (750 g) foi aplicado duas vezes durante a estação de crescimento em fevereiro e agosto. Todos os tratamentos influenciaram significativamente o crescimento vegetativo, floração, frutificação, produtividade e outros atributos físico-químicos da manga em relação ao controle. Menos efeito foi observado com a aplicação individual de fertilizante, enquanto os tratamentos combinados aumentaram a maioria dos parâmetros investigados. Especialmente as características qualitativas mostraram diferenças não significativas entre mangueiras tratadas e não tratadas. No entanto, entre os diferentes tratamentos, T8 (NPK) apresentou significância para aspectos de frutificação, como tamanho máximo de folgas de crescimento (177,51 mm), número total de panículas/árvore (845), número total de flores/panícula (974), razão sexual (69,18%), retenção de frutos (13,85%), número total de frutos/árvore (379), produção (82 kg/árvore), peso do fruto (197,5 g) e peso da polpa (135,5 g), além de parâmetros físico-químicos, como TSS (24,53), vitamina C (57,63 mg/100 mL) e açúcar total (20,84%). Em geral, a aplicação combinada de NPK (T8) foi a mais eficaz no aprimoramento dos aspectos de frutificação, produtividade, características físico-químicas, além da melhoria da qualidade dos frutos das mangueiras.(AU)

Studies on the recombinant production and anticancer activity of thermostable L- asparaginase I from Pyrococcus abyssi / Estudos sobre a produção recombinante e atividade anticancerígena da L asparaginase I termoestável de Pyrococcus abyssi

L-Asparaginase catalysing the breakdown of L-Asparagine to L-Aspartate and ammonia is an enzyme of therapeutic importance in the treatment of cancer, especially the lymphomas and leukaemia. The present study describes the recombinant production, properties and anticancer potential of enzyme from a hyperthermophilic archaeon Pyrococcus abyssi. There are two genes coding for asparaginase in the genome of this organism. A 918 bp gene encoding 305 amino acids was PCR amplified and cloned in BL21 (DE3) strain of E. coli using pET28a (+) plasmid. The production of recombinant enzyme was induced under 0.5mM IPTG, purified by selective heat denaturation and ion exchange chromatography. Purified enzyme was analyzed for kinetics, in silico structure and anticancer properties. The recombinant enzyme has shown a molecular weight of 33 kDa, specific activity of 1175 U/mg, KM value 2.05mM, optimum temperature and pH 80°C and 8 respectively. No detectable enzyme activity found when L-Glutamine was used as the substrate. In silico studies have shown that the enzyme exists as a homodimer having Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172, and Lys232 being the putative active site residues. The free energy change calculated by molecular docking studies of enzyme and substrate was found as ∆G 4.5 kJ/mole indicating the affinity of enzyme with the substrate. IC50 values of 5U/mL to 7.5U/mL were determined for FB, caco2 cells and HepG2 cells. A calculated amount of enzyme (5U/mL) exhibited 78% to 55% growth inhibition of caco2 and HepG2 cells. In conclusion, the recombinant enzyme produced and characterized in the present study offers a good candidate for the treatment of cancer. The procedures adopted in the present study can be prolonged for in vivo studies.(AU)

A L-asparaginase, que catalisa a degradação da L-asparagina em L-aspartato e amônia, é uma enzima de importância terapêutica no tratamento do câncer, especialmente dos linfomas e da leucemia. O presente estudo descreve a produção recombinante, propriedades e potencial anticancerígeno da enzima de Pyrococcus abyssi, um archaeon hipertermofílico. Existem dois genes que codificam para a asparaginase no genoma desse organismo. Um gene de 918 bp, que codifica 305 aminoácidos, foi amplificado por PCR e clonado na cepa BL21 (DE3) de E. coli usando o plasmídeo pET28a (+). A produção da enzima recombinante foi induzida sob 0,5mM de IPTG, purificada por desnaturação seletiva por calor e cromatografia de troca iônica. A enzima purificada foi analisada quanto à cinética, estrutura in silico e propriedades anticancerígenas. A enzima recombinante apresentou peso molecular de 33 kDa, atividade específica de 1.175 U / mg, valor de KM 2,05 mM, temperatura ótima de 80º C e pH 8. Nenhuma atividade enzimática detectável foi encontrada quando a L-glutamina foi usada como substrato. Estudos in silico mostraram que a enzima existe como um homodímero, com Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172 e Lys232 sendo os resíduos do local ativo putativo. A mudança de energia livre calculada por estudos de docking molecular da enzima e do substrato foi encontrada como ∆G 4,5 kJ / mol, indicando a afinidade da enzima com o substrato. Valores de IC50 de 5U / mL a 7,5U / mL foram determinados para células FB, células caco2 e células HepG2. Uma quantidade de enzima (5U / mL) apresentou inibição de crescimento de 78% a 55% das células caco2 e HepG2, respectivamente. Em conclusão, a enzima recombinante produzida e caracterizada no presente estudo é uma boa possibilidade para o tratamento do câncer. Os procedimentos adotados na presente pesquisa podem ser aplicados para estudos in vivo.(AU)

Prevalence of intestinal nematodes infection in school children of urban areas of district Lower Dir, Pakistan / Prevalência de infecção por nematoides intestinais em escolares de áreas urbanas do distrito de Lower Dir, Paquistão

Intestinal parasitism is the main cause of disease all over the world and described as a significant community health problem. The current study intended to find out the occurrence and identification of hazard factors linked with IPIs among 4-12 years aged shool-age children residing in Lower Dir district, Pakistan during 2019 - 2020. A cross-sectional school-based study was conducted using a pre-arranged pre-tested survey. Anthropometric data and stool collection were done to obtain the findings. The direct wet mount preparation in saline/iodine/methods was used for stool examination. Data were investigated using the GraphPad Prism 5. A total of 400 children studied (mean age of 8.6±3.6 years) the total incidence rate for the intestinal parasitic disease was established to be 71.75%. Of the 400 children studied, the overall prevalence rate for intestinal parasitic infections was found to 71.75% Ascaris lumbricoides (33.1%), Trichuris trichiura (1.04%), E. vermicularis (1.39%), Hookworm (19.86%) were identified in children living in the study area. We concluded that there is a mass scale campaigns were required to generate alertness about health and sanitation in children and the need for the development of effective poverty control programs because deworming (killing of worm with drugs) alone is not adequate to control parasitic infections.

O parasitismo intestinal é a principal causa de doença em todo o mundo e descrito como um importante problema de saúde comunitária. O presente estudo buscou descobrir a ocorrência e identificação de fatores de risco relacionados a infecções parasitárias intestinais (IPIs) entre crianças em idade escolar de 4 a 12 anos residentes no distrito de Lower Dir, Paquistão durante 2019-2020. Um estudo transversal baseado em escola foi realizado usando uma pesquisa preestabelecida e pré-testada. Dados antropométricos e coleta de fezes foram feitos para obtenção dos achados. A preparação de montagem úmida direta em solução salina/iodo/métodos foi usada para exame de fezes. Os dados foram investigados usando o GraphPad Prism 5. Em um total de 400 crianças estudadas (idade média de 8,6±3,6 anos), a taxa de incidência total da parasitose intestinal foi estabelecida em 71,75%. Das 400 crianças estudadas, a taxa de prevalência global de infecções parasitárias intestinais foi de 71,75%. Ascaris lumbricoides (33,1%), Trichuris trichiura (1,04%), E. vermicularis (1,39%), Ancilostomíase (19,86%) foram identificados em crianças morando na área de estudo. Concluímos que há necessidade de campanhas em massa para gerar alerta sobre saúde e saneamento nas crianças, e a necessidade do desenvolvimento de programas efetivos de controle da pobreza, pois a desparasitação por si só não é adequada para controlar as infecções parasitárias.