Comparative analysis of conventional PCR and real-time PCR to diagnose shrimp WSD

The aims of this study were to standard and optimize a qPCR protocol with FAM-BHQ1 probe, and to compare its sensitivity against TaqMan qPCR and PCR methods to diagnose shrimp WSD. The FAM-BHQ1 qPCR presented higher clinical sensitivity and showed to be a robust alternative to detect WSSV in clinical samples.

Associação entre sorologia para Neospora caninum e taxa de prenhez em vacas receptoras de embriões

The association between seropositivity for Neospora caninum and pregnancy rate in cows belonging to a surrogate herd submitted to embryo transfer technology was determined. The serological status was evaluated in 275 heifers, aging from 14 to 20-month-old. For N. caninum serology analysis of a monoclonal competitive ELISA test Kit was used, and 81 animals (29.5%) showed seropositive. Thus, two groups were randomly formed selecting 33 seropositive heifers and other 33 seronegative animals out of the remaining 194 animals. Seronegative animals were followed up by serological analysis until the end of the trial in order to identify persistently infected individuals. The pregnancy rate was 72.7% in the group of N. caninum-positive sera, and, 81.8% in the seronegative group.No significant difference was observed between groups according to Chi-square test. No association between N. caninum seropositivity and pregnancy rates in surrogate heifers was found.

Padronização da técnica de imunoperoxidase para detecção do vírus da diarréia bovina a vírus em cultura de células: Standardization of immunoperoxidase test to detection bovine viral diarrhea virus in cell culture

The aim of this study was to standardize the immunoperoxidase in cell monolayer assay (IPMA) for the etiological diagnosis of bovine viral diarrhea (BVD). The method was standardized in monolayer of primary bovine fetal lung culture inoculated with cytophatic and non-cytophatic classical strains of BVD virus and tested using samples that were considered suspected in the classical technique of viral isolation. The IPMA successfully identified BVD virus and presented better results when heat was used for fixation, BSA 4% solution in PBS was used for blocking and AEC chromogen was used for revelation. Both monoclonal and polycloral antibodies gave good results when used as primary antibodies.

Este estudo teve como objetivo a padronização do ensaio de imunoperoxidase em monocamada de células (IPM) para o diagnóstico etiológico da diarréia bovina a vírus (DBV). O teste foi padronizado em monocamada de cultivo primário de pulmão fetal bovino (PFB) inoculada com as amostras clássicas, citopatogênica (CP) e não citopatogênica (NCP), do vírus da DBV e testado em amostras biológicas suspeitas processadas no teste clássico de isolamento viral (IV). O método de IPM identificou o vírus da DBV, apresentando melhores resultados com a utilização do calor como agente fixador, a soroalbumina bovina a 4% em PBS como bloqueador e a revelação com o cromógeno 3-amino-9-etil-carbazol (AEC). Como anticorpos primários, tanto o anticorpo policlonal como o monoclonal forneceram bons resultados.

Serological surveillance on South American wild canids for Neospora caninum

Esse trabalho objetivou pesquisar anticorpos para Neospora caninum em amostras de soro de canídeos silvestres sul-americanos pela técnica de imunofluorescência indireta (IFI). As amostras foram coletadas de 48 lobos-guará (Chrysocyon brachyurus), provenientes de zoológicos e de vida livre e de dois cachorros-do-mato (Cerdocyon thous). Anticorpos para N. caninum não foram detectados nas amostras testadas.

Distribuição de anticorpos para herpesvírus bovino 1 em rebanhos bovinos

The distribution of neutralizing antibodies to bovine herpesvirus 1 (BHV 1) was studied in 21 beef and dairy cattle herds, in four different age groups. The results were analyzed and related with answers given to a questionnaire proposed to the farmers. The frequency rates of neutralizing antibodies for the BHV 1 were compared according to the dairy or beef herds and age of the animals. The animal husbandry and age influenced the distribution of neutralizing antibodies to this virus.

A distribuição de anticorpos neutralizantes para o herpesvirus bovino 1 (HVB 1) foi estudada em quatro faixas etárias de bovinos, em 21 rebanhos de leite e de corte. Os resultados da sorologia foram analisados e relacionados com as respostas de questionários aplicados aos responsáveis pelos rebanhos. As taxas de freqüência de anticorpos neutralizantes para o HVB 1 foram comparadas segundo a aptidão e a faixa etária. Fatores como tipo de manejo e idade dos animais influenciaram na distribuição de anticorpos para o HVB 1.

Padronização da técnica de imunoperoxidase para detecção do vírus da diarréia bovina a vírus em cultura de células: Standardization of immunoperoxidase test to detection bovine viral diarrhea virus in cell culture

The aim of this study was to standardize the immunoperoxidase in cell monolayer assay (IPMA) for the etiological diagnosis of bovine viral diarrhea (BVD). The method was standardized in monolayer of primary bovine fetal lung culture inoculated with cytophatic and non-cytophatic classical strains of BVD virus and tested using samples that were considered suspected in the classical technique of viral isolation. The IPMA successfully identified BVD virus and presented better results when heat was used for fixation, BSA 4% solution in PBS was used for blocking and AEC chromogen was used for revelation. Both monoclonal and polycloral antibodies gave good results when used as primary antibodies.

Este estudo teve como objetivo a padronização do ensaio de imunoperoxidase em monocamada de células (IPM) para o diagnóstico etiológico da diarréia bovina a vírus (DBV). O teste foi padronizado em monocamada de cultivo primário de pulmão fetal bovino (PFB) inoculada com as amostras clássicas, citopatogênica (CP) e não citopatogênica (NCP), do vírus da DBV e testado em amostras biológicas suspeitas processadas no teste clássico de isolamento viral (IV). O método de IPM identificou o vírus da DBV, apresentando melhores resultados com a utilização do calor como agente fixador, a soroalbumina bovina a 4% em PBS como bloqueador e a revelação com o cromógeno 3-amino-9-etil-carbazol (AEC). Como anticorpos primários, tanto o anticorpo policlonal como o monoclonal forneceram bons resultados.

Ação larvicida de derivados arilsulfonílicos da (+)- cânfora e da (+)- isopinocanfona sobre o carrapato Boophilus microplus

It was investigated the acaricidal activity of (+)- camphor and (+)- isopinocamphone arilsulphonyl derivatives against Boophilus microplus cattle tick. The products were obtained through the camphor and isopinocamphone clorosulfonation. Thirty-three products were submitted to solubilization and tested alone and together, against tick larvae. Ticks were caught in filter paper envelopes impregnated with products, which were incubated under controlled conditions. The average mortality did not reach 5% in all trials, indicating that clorosulfonation is not an appropiate procedure to obtain derivatives with larvicidal effect against B. microplus. The 33 products tested in the biological screening could not be considered as potential acaricides.

Testou-se a atividade larvicida de 33 derivados arilsulfonílicos da (+)-cânfora e da (+)-isopinocanfona no carrapato B. microplus, na busca de princípios ativos menos tóxicos para o seu controle. Os produtos foram obtidos por clorossulfonação da (+)-cânfora e da (+)-isopinocanfona. Eles foram submetidos à solubilização e testados separadamente e em conjunto contra larvas de carrapato encerradas em envelopes contendo papéis impregnados e acondicionadas em estufa climatizada. A mortalidade média não atingiu 5% em todos os testes realizados, indicando que a clorossulfonação não é a rota de síntese mais adequada para a obtenção de derivados sintéticos com efeito larvicida sobre B. microplus. Os 33 produtos testados sob a forma de triagem biológica não podem ser considerados como potenciais acaricidas.

Serological surveillance on South American wild canids for Neospora caninum

Esse trabalho objetivou pesquisar anticorpos para Neospora caninum em amostras de soro de canídeos silvestres sul-americanos pela técnica de imunofluorescência indireta (IFI). As amostras foram coletadas de 48 lobos-guará (Chrysocyon brachyurus), provenientes de zoológicos e de vida livre e de dois cachorros-do-mato (Cerdocyon thous). Anticorpos para N. caninum não foram detectados nas amostras testadas.

Ocorrência de tuberculose em rebanhos bubalinos (Bubalus bubalis var. bubalis-Linneus, 1758) no Município de Parintins, Amazonas

A comparative tuberculinization test was performed in 1303 animals from seven farms and 266 showed positive to the test. Mycobacterium bovis was isolated from a pool of lymphatic nodes from 14 reagents animals using Stonebrink media and confirmed by biochemical tests.

Serological surveillance on South American wild canids for Neospora caninum

Esse trabalho objetivou pesquisar anticorpos para Neospora caninum em amostras de soro de canídeos silvestres sul-americanos pela técnica de imunofluorescência indireta (IFI). As amostras foram coletadas de 48 lobos-guará (Chrysocyon brachyurus), provenientes de zoológicos e de vida livre e de dois cachorros-do-mato (Cerdocyon thous). Anticorpos para N. caninum não foram detectados nas amostras testadas.

Pesquisa de anticorpos para IBR em amostragem de demanda no Estado de Minas Gerais, 1990-1999

A survey of antibody to IBR was performed by serum neutralization test and ELISA in cattle sera supplied on demand sampling in Minas Gerais State, during the period of 1990 to 1999. Out of 5511 tested samples, 3206 (58.2%) were positive and out of 335 evaluated counties, 313 (93.4%) had at least one positive result. It was noted an increasing interest by farmers and practitioners on IBR serological diagnosis since 1995, when the amount of animals and counties submitted to test greatly increased in comparison with past years. The role of serology in adequate diagnosis of IBR is discussed.

Mortalidade por "septicemia dos peixes tropicais" em tilápias criadas em consorciação com suínos

A rural property was observed for one year to obtain seasonal observations of Edwardsiella septicemia in tilapias (Oreochromis sp.) from an integrated fish farm (using pig excrements as food). Fifty tilapias on summer, forty-five on autumn, fifty-five on winter and one hundred and five on spring were collected and evaluated microbiologically for the presence of Edwardsiella tarda. Samples of the external surface (skin, gills and fin), intestines and muscle were analyzed. Fishes were transported alive to the laboratory, and maintained for five days for observation. The external signs observed were opacity of cornea, respiratory difficulty, disordered swimming, nodules on gills, hemorrhagic lesions under the skin and fins and incoordination of the posterior part of the body. In general, after three days of observation, the tilapias died. At necropsy, ascites with the distension of the celomatic cavity, hemorrhagic and necrotic lesions in the liver, spleen and kidneys were found. Hemorrhagic enteritis was observed in the gut tube. Edwardsiella tarda isolated presented the following biochemical profile: negative urea, sucrose, phenylalanine desaminase and malonate utilization, and positive indole, methyl red, H2S, motility, glucose with gas production and lysine decarboxylase. The mortality rates were 69.9% on spring, 63.6% on winter, 48.0% on summer and 40.0% on autumn, highest rates occurring on spring and winter (P 0,05).

Com o objetivo de estudar a variação sazonal da septicemia dos peixes tropicais provocada por Edwardsiella tarda foram observadas 50 tilápias (Oreochromis sp.) no verão, 45 no outono, 55 no inverno e 105 na primavera. Os peixes doentes apresentavam opacidade de córnea, dificuldade respiratória, nado desordenado, nódulos nas brânquias e lesões hemorrágicas na pele e nadadeiras. Após três dias de observação as tilápias morriam naturalmente. Nas necrópsias foi encontrado ascite com distensão da cavidade celomática e lesões hemorrágicas e necróticas no fígado, baço e rins. No interior do tubo digestivo observou-se enterite hemorrágica. Isolou-se Edwardsiella tarda a partir de provas positivas para H2S, lisina, indol, motilidade e glicose com gás. Os índices de mortalidade foram: na primavera 69,9%, no inverno 63,6%, no verão 48,0% e no outono 40,0%.

Mortalidade por "septicemia dos peixes tropicais" em tilápias criadas em consorciação com suínos

A rural property was observed for one year to obtain seasonal observations of Edwardsiella septicemia in tilapias (Oreochromis sp.) from an integrated fish farm (using pig excrements as food). Fifty tilapias on summer, forty-five on autumn, fifty-five on winter and one hundred and five on spring were collected and evaluated microbiologically for the presence of Edwardsiella tarda. Samples of the external surface (skin, gills and fin), intestines and muscle were analyzed. Fishes were transported alive to the laboratory, and maintained for five days for observation. The external signs observed were opacity of cornea, respiratory difficulty, disordered swimming, nodules on gills, hemorrhagic lesions under the skin and fins and incoordination of the posterior part of the body. In general, after three days of observation, the tilapias died. At necropsy, ascites with the distension of the celomatic cavity, hemorrhagic and necrotic lesions in the liver, spleen and kidneys were found. Hemorrhagic enteritis was observed in the gut tube. Edwardsiella tarda isolated presented the following biochemical profile: negative urea, sucrose, phenylalanine desaminase and malonate utilization, and positive indole, methyl red, H2S, motility, glucose with gas production and lysine decarboxylase. The mortality rates were 69.9% on spring, 63.6% on winter, 48.0% on summer and 40.0% on autumn, highest rates occurring on spring and winter (P 0,05).

Com o objetivo de estudar a variação sazonal da septicemia dos peixes tropicais provocada por Edwardsiella tarda foram observadas 50 tilápias (Oreochromis sp.) no verão, 45 no outono, 55 no inverno e 105 na primavera. Os peixes doentes apresentavam opacidade de córnea, dificuldade respiratória, nado desordenado, nódulos nas brânquias e lesões hemorrágicas na pele e nadadeiras. Após três dias de observação as tilápias morriam naturalmente. Nas necrópsias foi encontrado ascite com distensão da cavidade celomática e lesões hemorrágicas e necróticas no fígado, baço e rins. No interior do tubo digestivo observou-se enterite hemorrágica. Isolou-se Edwardsiella tarda a partir de provas positivas para H2S, lisina, indol, motilidade e glicose com gás. Os índices de mortalidade foram: na primavera 69,9%, no inverno 63,6%, no verão 48,0% e no outono 40,0%.

Pesquisa de anticorpos para IBR em amostragem de demanda no Estado de Minas Gerais, 1990-1999

A survey of antibody to IBR was performed by serum neutralization test and ELISA in cattle sera supplied on demand sampling in Minas Gerais State, during the period of 1990 to 1999. Out of 5511 tested samples, 3206 (58.2%) were positive and out of 335 evaluated counties, 313 (93.4%) had at least one positive result. It was noted an increasing interest by farmers and practitioners on IBR serological diagnosis since 1995, when the amount of animals and counties submitted to test greatly increased in comparison with past years. The role of serology in adequate diagnosis of IBR is discussed.

Desempenho do programa BABSIM no estudo epidemiológico de Boophilus microplus (Canestrini, 1889) (Acari: Ixodidae)

Simulation models are useful tools in the analysis of bio-ecological interrelations of ticks. The purpose of the present work was to evaluate the performance of the BABSIM program, in epidemiological studies on B. microplus in the State of Minas Gerais, Brazil. Adjustments were made in the program by comparative analysis of B. microplus population curves observed and simulated in Pedro Leopoldo and São Miguel do Anta, State of Minas Gerais. Two sets of simulation were carried out. One used the original parameters of BABSIM, whereas in the other adjustments were made to the minimum temperature threshold for preoviposition, incubation host-finding and survival rate factors of B. microplus. The adjustments to biological parameters were able to increase the simulated infestation levels of ticks, but unable to improve the prediction of population dynamic in the São Miguel do Anta ecosystem. The simulation results with adjustments and original parameters, showed variability through the years, in comparison to experimental field results of Pedro Leopoldo. Despite the contribution of the simulation results to the analysis of variables determining changes on ticks population size in the studied ecosystems, they showed that BABSIM needs new submodels that represent the interconnection between parasite and ecological conditions. Besides, there is a need to modify the program making possible changes in the animal management within the same year of simulation and, therefore, justifying the population dynamic in different ecosystems with higher accuracy.

Os modelos de simulação são ferramentas úteis na análise das inter-relações bioecológicas dos carrapatos. Partindo dessa premissa, objetivou-se avaliar o desempenho do programa BABSIM como auxiliar no estudo epidemiológico de B. microplus para o Estado de Minas Gerais, validando-se os ajustes no programa pela análise comparativa das curvas populacionais observadas e simuladas em Pedro Leopoldo e São Miguel do Anta, MG. As simulações foram realizadas com o programa BABSIM utilizando-se os parâmetros biológicos originais do programa e com ajustes nas temperaturas mínimas para oviposição e incubação dos ovos, no índice de encontro do hospedeiro pelas larvas, e no índice de sobrevivência dos estádios de vida livre. Os ajustes nos parâmetros biológicos propiciaram aumento na intensidade da carga parasitária, porém não foram suficientes para representar com maior precisão a dinâmica populacional no ecossistema em São Miguel do Anta. As simulações procedidas com os parâmetros biológicos originais e ajustados apresentaram comportamento variável para os diferentes anos em relação aos observados no estudo experimental de Pedro Leopoldo. Apesar de os resultados das simulações terem contribuído para a análise do conjunto de variáveis que interagem para determinar as variações do tamanho das populações de carrapatos nos ecossistemas estudados, eles indicaram, também, a necessidade de introduzir modificações nos submodelos que representam as inter-relações parasito-ambiente antrópico, assim como a necessidade de modificar o programa para permitir alterações de manejo dos animais, dentro de um mesmo ano de simulação, e, dessa maneira, justificar com maior precisão a dinâmica populacional em diferentes tipos de ecossistemas.

HPLC identification of isoniazid residues in bovine milk

The high pressure liquid chromatography (HPLC) was used for the identification of isoniazid (isonicotinic acid hydrazide) in the milk of cattle treated with a dose of 25 mg/kg/day in alternated days. The effect of milk pasteurization on the isoniazid residue concentration was also studied. The drug excretion presented a cyclic variation, with higher levels in the first day after administration (aa), a mean of 1104.48µg/l, and a decrease two days aa, with a mean of 104.12µg/l. Four days after the last administration of the drug it was not possible to identify residues of isoniazid in the milk of treated animals. Body weight and milk yield influenced the amount of the excreted drug, and pasteurization decreased (mean 47.07%) the concentration of isoniazid residue in milk.

Cromatografia líqüida de alta eficiência (HPLC) foi utilizada na identificação de isoniazida (hidrazida do ácido isonicotínico) no leite de bovinos tratados com a dose de 25 mg/kg/dia em dias alternados. Também foi verificado o efeito da pasteurização sobre a concentração residual de isoniazida no leite. A excreção da droga no leite apresentou variação cíclica com picos no primeiro dia após a administração da droga, média de 1104,48µg/l, e queda dois dias após, média de 104,12µg/l. Quatro dias após a última administração da droga não foi mais possível a identificação de resíduos de isoniazida no leite. Observou-se influência do peso corporal e da produção de leite sobre a quantidade da droga excretada. A pasteurização diminuiu, em média 47,07%, a concentração de resíduo de isoniazida no leite.

Desempenho do programa BABSIM no estudo epidemiológico de Boophilus microplus (Canestrini, 1889) (Acari: Ixodidae)

Simulation models are useful tools in the analysis of bio-ecological interrelations of ticks. The purpose of the present work was to evaluate the performance of the BABSIM program, in epidemiological studies on B. microplus in the State of Minas Gerais, Brazil. Adjustments were made in the program by comparative analysis of B. microplus population curves observed and simulated in Pedro Leopoldo and São Miguel do Anta, State of Minas Gerais. Two sets of simulation were carried out. One used the original parameters of BABSIM, whereas in the other adjustments were made to the minimum temperature threshold for preoviposition, incubation host-finding and survival rate factors of B. microplus. The adjustments to biological parameters were able to increase the simulated infestation levels of ticks, but unable to improve the prediction of population dynamic in the São Miguel do Anta ecosystem. The simulation results with adjustments and original parameters, showed variability through the years, in comparison to experimental field results of Pedro Leopoldo. Despite the contribution of the simulation results to the analysis of variables determining changes on ticks population size in the studied ecosystems, they showed that BABSIM needs new submodels that represent the interconnection between parasite and ecological conditions. Besides, there is a need to modify the program making possible changes in the animal management within the same year of simulation and, therefore, justifying the population dynamic in different ecosystems with higher accuracy.

Os modelos de simulação são ferramentas úteis na análise das inter-relações bioecológicas dos carrapatos. Partindo dessa premissa, objetivou-se avaliar o desempenho do programa BABSIM como auxiliar no estudo epidemiológico de B. microplus para o Estado de Minas Gerais, validando-se os ajustes no programa pela análise comparativa das curvas populacionais observadas e simuladas em Pedro Leopoldo e São Miguel do Anta, MG. As simulações foram realizadas com o programa BABSIM utilizando-se os parâmetros biológicos originais do programa e com ajustes nas temperaturas mínimas para oviposição e incubação dos ovos, no índice de encontro do hospedeiro pelas larvas, e no índice de sobrevivência dos estádios de vida livre. Os ajustes nos parâmetros biológicos propiciaram aumento na intensidade da carga parasitária, porém não foram suficientes para representar com maior precisão a dinâmica populacional no ecossistema em São Miguel do Anta. As simulações procedidas com os parâmetros biológicos originais e ajustados apresentaram comportamento variável para os diferentes anos em relação aos observados no estudo experimental de Pedro Leopoldo. Apesar de os resultados das simulações terem contribuído para a análise do conjunto de variáveis que interagem para determinar as variações do tamanho das populações de carrapatos nos ecossistemas estudados, eles indicaram, também, a necessidade de introduzir modificações nos submodelos que representam as inter-relações parasito-ambiente antrópico, assim como a necessidade de modificar o programa para permitir alterações de manejo dos animais, dentro de um mesmo ano de simulação, e, dessa maneira, justificar com maior precisão a dinâmica populacional em diferentes tipos de ecossistemas.

Anticorpos contra o vírus da língua azul em bovinos do sertão da Paraíba

In June of 1997 the prevalence of antibodies to bluetongue virus was between 3.94 and 4.82% in 137 bovine serum samples from 12 herds in Paraiba State, Brazil. This is the first report of antibodies to bluetongue virus in Paraiba State herds.

Desempenho do programa BABSIM no estudo epidemiológico de Boophilus microplus (Canestrini, 1889) (Acari: Ixodidae)

Simulation models are useful tools in the analysis of bio-ecological interrelations of ticks. The purpose of the present work was to evaluate the performance of the BABSIM program, in epidemiological studies on B. microplus in the State of Minas Gerais, Brazil. Adjustments were made in the program by comparative analysis of B. microplus population curves observed and simulated in Pedro Leopoldo and São Miguel do Anta, State of Minas Gerais. Two sets of simulation were carried out. One used the original parameters of BABSIM, whereas in the other adjustments were made to the minimum temperature threshold for preoviposition, incubation host-finding and survival rate factors of B. microplus. The adjustments to biological parameters were able to increase the simulated infestation levels of ticks, but unable to improve the prediction of population dynamic in the São Miguel do Anta ecosystem. The simulation results with adjustments and original parameters, showed variability through the years, in comparison to experimental field results of Pedro Leopoldo. Despite the contribution of the simulation results to the analysis of variables determining changes on ticks population size in the studied ecosystems, they showed that BABSIM needs new submodels that represent the interconnection between parasite and ecological conditions. Besides, there is a need to modify the program making possible changes in the animal management within the same year of simulation and, therefore, justifying the population dynamic in different ecosystems with higher accuracy.

Os modelos de simulação são ferramentas úteis na análise das inter-relações bioecológicas dos carrapatos. Partindo dessa premissa, objetivou-se avaliar o desempenho do programa BABSIM como auxiliar no estudo epidemiológico de B. microplus para o Estado de Minas Gerais, validando-se os ajustes no programa pela análise comparativa das curvas populacionais observadas e simuladas em Pedro Leopoldo e São Miguel do Anta, MG. As simulações foram realizadas com o programa BABSIM utilizando-se os parâmetros biológicos originais do programa e com ajustes nas temperaturas mínimas para oviposição e incubação dos ovos, no índice de encontro do hospedeiro pelas larvas, e no índice de sobrevivência dos estádios de vida livre. Os ajustes nos parâmetros biológicos propiciaram aumento na intensidade da carga parasitária, porém não foram suficientes para representar com maior precisão a dinâmica populacional no ecossistema em São Miguel do Anta. As simulações procedidas com os parâmetros biológicos originais e ajustados apresentaram comportamento variável para os diferentes anos em relação aos observados no estudo experimental de Pedro Leopoldo. Apesar de os resultados das simulações terem contribuído para a análise do conjunto de variáveis que interagem para determinar as variações do tamanho das populações de carrapatos nos ecossistemas estudados, eles indicaram, também, a necessidade de introduzir modificações nos submodelos que representam as inter-relações parasito-ambiente antrópico, assim como a necessidade de modificar o programa para permitir alterações de manejo dos animais, dentro de um mesmo ano de simulação, e, dessa maneira, justificar com maior precisão a dinâmica populacional em diferentes tipos de ecossistemas.

Isolamento e identificação pela imunofluorescência direta e reação em cadeia de polimerase do vírus da artrite-encefalite caprina

This paper describes the isolation of caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV) in Minas Gerais and Pernambuco States, Brazil, using goat synovial membrane (GSM) explants (isolates: BrMg 1-01, BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 and BrPe 1-01) or co-culture of blood mononuclear cells with GSM (BrMg 1-02). The isolates were identified by cytopathic effect (CPE), direct immunofluorescence (DIF) and an improved polimerase chain reaction (PRC) specific to CAEV (strain Cork) genome. It was found isolates of low (BrMg 1-01 and BrMg 1-02) and of high lytic (BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 and BrPe 1-01) phenotypes. The DIF revealed positive results in cells infected by all isolates tested and the reference strains of CAEV (Cork) and visna-maedi (K1514). The used PCR amplified a 286 pb fragment of DNA from cells infected with all isolates and CAEV Cork but not with visna-maedi K1514.

Amostras do vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV) de animais dos estados de Minas Gerais e Pernambuco foram isoladas a partir de explantes de membrana sinovial (MS) (amostras BrMg 1-01, BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 e BrPe 1-01) ou de co-cultivo de leucócitos com MS (BrMg 1-02). As amostras foram identificadas pelo efeito citopático-ECP (formação de sincícios), imunofluorescência direta (IFD) e reação em cadeia de polimerase (PCR) aperfeiçoada para amplificação de parte do gene gag da amostra CAEV Cork. O estudo do ECP revelou a presença de amostras pouco (BrMg 1-01 e BrMg 1-02) ou fortemente indutoras de ECP (BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 e BrPe 1-01). A IFD mostrou resultado positivo em células de todas as monocamadas infectadas pelas amostras isoladas e em células de referência (CAEV Cork e visna/maedi K 1514). A PCR do DNA de células infectadas resultou na amplificação específica de um fragmento de DNA de 286pb da amostras testadas, exceto do visna/maedi K 1514.