ABSTRACT
Antecedentes: Las muestras de orina que con frecuencia son utilizadas para análisis clínicos, toxicológicos o tets de control de dopaje, pueden verse mezcladas de forma inconsciente o manipuladas intencionalmente. Objetivos: Disponer de una técnica que permita asegurar la identidad de las muestras de orina. Se propone la identificación del donante a partir de la comparación de perfiles genéticos en muestras de orina y sangre. Comparamos dos métodos de extracción de DNA nuclear. Material y métodos: Extracción de DNA a partir de dos métodos, el protocolo Master Diagnostica (VITRO, S.A.) y el método automático MagNa Pure® de Roche. Se establece los perfiles genéticos según el AmpFlSTR® Identifiler® PCR Amplification Kit (Applied Biosystems). Resultados: Se obtuvo 100 % de concordancias entre los perfiles de los dos tipos de muestras. Conclusiones: Tanto de forma manual como automática se puede obtener DNA a partir de muestras de orina. Ambos métodos son válidos, si bien con el manual, se obtiene mayor cantidad de DNA. Se puede identificar al donante de una muestra de orina comparando los perfiles genéticos de la orina y de la sangre. La extracción del DNA de la orina y su posterior almacenamiento a -80ºC permite el establecimiento del perfil genético a posteriori sin alteraciones (AU)
SUMMARY: Antecedents: Urine samples that are often utilized for clinical, toxicological or doping control tests can be mistaken involuntarily or intentionally tampered with. Objective: To make available a technique that ensures the identity of urine samples. We propose the identification of the donor through genetic profiling in blood and urine samples. Two methods of nuclear DNA extraction are compared. Material and methods: DNA is extracted by two methods, the method of Master Diagnostica (VITRO S.A.) and the automatic method MagNa Pure® of Roche. The genetic profiles are established utilizing the AmpFlSTR® Identifiler® PCR Amplification Kit (Applied Biosystems). Results: The correspondence between the profiles of both types of samples was 100%. Conclusions: DNA can be obtained from urine samples manually or automatically. Both methods are valid although the manual method yields more DNA. The donor of a urine sample can be identified comparing the genetic profiles of urine and blood. The extraction of DNA from urine and its subsequent storage at -80ºC allows for establishing later a genetic profile without alterations (AU)
Subject(s)
Humans , DNA/urine , Sequence Analysis, DNA/methods , Patient Identification Systems/organization & administration , DNA Fingerprinting/methods , Genetic Privacy/organization & administration , Specimen Handling/methodsABSTRACT
Hasta hace poco, la identificación de los restos de las personas desaparecidas se basaban en comparar la información que se tenía de esas personas antes y después de la desaparición o la catástrofe. Hoy en día se ha introducido el análisis del ADN para la completa y fiable identidad de dichas personas. La variabilidad del genoma y la identificación de esa variabilidad a través del estudio de diversos polimorfismos (RFLP, SN P, etc) hacen que cada individuo se pueda separar de su semejante con un alto grado de fiabilidad (99999 %) y al mismo tiempo se uede seguir su linaje. E stas técnicas han sido sometidas a procesos de validación y están altamente automatizadas. E l sistema «AmpFlSTR® Identifiler PCR A mplification Kit» junto con el equipo «ABI Prism® 3130 G enetic A nalyzer» de A pplied Biosystems permiten la identificación de 15 loci más un marcador de sexo (amelogenina). El sistema CODIS está constituido por 13 STRs de los 15 que analiza este kit (AU)
Until recently the identification of human remains was based on comparing the data available of the missing persons before and after their disappearance or the disaster. N owadays DNA analysis allows complete and reliable identification. T he variability of the genome and theidentification of that variability through the study of different polymorphisms (RFLP, SN P, etc) facilitate the differentiation of individuals with a high degree of reliability (99.999 %) and simultaneously follow their lineage. T hese techniques have been validated and are highlyautomated. T he system «AmpFlSTR® I dentifiler PCR A mplification Kit», together with the «ABI Prism® 3130 G enetic A nalyzer» of A pplied Biosystems, allows the identification of 15 loci and one sex marker (amelogenin). T he CODIS system is integrated by 13 STR s among the 15 analyzed by this kit (AU)