ABSTRACT
A brucelose é uma doença infecto-contagiosa, de caráter zoonótico e de grande importância tanto em produção animal, quanto na saúde pública. É causada por bactérias do gênero Brucella, que provocam orquites e epididimites uni ou bilaterais em touros, podendo levar a sub-fertilidade e a esterilidade. Machos bovinos assintomáticos tornam-se importantes disseminadores desta doença nos rebanhos. Desta forma objetivou-se avaliar o protocolo de extração de DNA de Brucella spp em sêmen in natura bovino, submetendo-os aos testes diagnósticos PCR (protocolo Lise Enzimática por Proteinase e Fenol: Clorofórmio PK), Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e Sêmem Plasma Aglutinação (SPA), de 33 touros utilizados em monta natural. O protocolo PK foi eficaz na extração de DNA de Brucella spp. Dos 33 touros testados, oito foram reagentes na PCR (24,24%), seis (18,18%) reagentes na SPA, e dos 23 animais com amostra de soro sanguíneo, um (4%) foi reagente para o AAT. Apenas um animal foi reagente na SPA e no AAT, e não reagente na PCR. Por outro lado sete animais apresentaram-se com sêmem reagente na PCR, e negativos nos testes de SPA e AAT. Portanto os resultados indicam a necessidade de associação de testes laboratoriais diretos, como a PCR, com os testes indiretos AAT e SPA, para um diagnóstico mais adequado de brucelose, quando forem utilizadas amostras de sêmen bovino.
Brucellosis is an infectious disease of zoonotic character and great importance in animal production, as well as a public health matter. It is caused by bacteria of the genus Brucella, which cause unilateral or bilateral epididymitis and orchitis in bulls and can lead to sub-fertility and sterility. Asymptomatic bulls become important disseminators of the disease in herds. Therefore, this study evaluates the extraction protocol of DNA of Brucella spp. from bovine semen in natura. The semen samples of 33 bulls used for natural mating underwent PCR diagnostic tests (Lise Enzyme protocol by Proteinase and Phenol:Chloroform-PK), Buffered Acidified Antigen (AAT) and Semen plasma agglutination (SPA). The PK protocol was effective in the extraction of Brucella spp. Of the 33 bulls tested, eight were positive to PCR (24.24%), six (18.18%) to the SPA reagent, and from the 23 animals with blood serum sample, one (4%) was positive for AAT. Only one animal was positive in SPA and AAT, and not reactive in PCR. On the other hand, seven animals had semen reactive in PCR, and negative tests for SPA and AAT. Therefore, the results indicate the need for association of direct laboratory tests, such as PCR, with indirect tests AAT and SPA, for a more accurate diagnosis of brucellosis, when using samples of bovine semen.
Subject(s)
Animals , Cattle , Brucellosis, Bovine/classification , Brucellosis, Bovine/diagnosis , Brucellosis, Bovine/prevention & control , Veterinary Public Health , SemenABSTRACT
A brucelose é uma doença infecto-contagiosa, de caráter zoonótico e de grande importância tanto em produção animal, quanto na saúde pública. É causada por bactérias do gênero Brucella, que provocam orquites e epididimites uni ou bilaterais em touros, podendo levar a sub-fertilidade e a esterilidade. Machos bovinos assintomáticos tornam-se importantes disseminadores desta doença nos rebanhos. Desta forma objetivou-se avaliar o protocolo de extração de DNA de Brucella spp em sêmen in natura bovino, submetendo-os aos testes diagnósticos PCR (protocolo Lise Enzimática por Proteinase e Fenol: Clorofórmio – PK), Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e Sêmem Plasma Aglutinação (SPA), de 33 touros utilizados em monta natural. O protocolo PK foi eficaz na extração de DNA de Brucella spp. Dos 33 touros testados, oito foram reagentes na PCR (24,24%), seis (18,18%) reagentes na SPA, e dos 23 animais com amostra de soro sanguíneo, um (4%) foi reagente para o AAT. Apenas um animal foi reagente na SPA e no AAT, e não reagente na PCR. Por outro lado sete animais apresentaram-se com s&am
ABSTRACT
A brucelose é uma doença infecto-contagiosa, de caráter zoonótico e de grande importância tanto em produção animal, quanto na saúde pública. É causada por bactérias do gênero Brucella, que provocam orquites e epididimites uni ou bilaterais em touros, podendo levar a sub-fertilidade e a esterilidade. Machos bovinos assintomáticos tornam-se importantes disseminadores desta doença nos rebanhos. Desta forma objetivou-se avaliar o protocolo de extração de DNA de Brucella spp em sêmen in natura bovino, submetendo-os aos testes diagnósticos PCR (protocolo Lise Enzimática por Proteinase e Fenol: Clorofórmio – PK), Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e Sêmem Plasma Aglutinação (SPA), de 33 touros utilizados em monta natural. O protocolo PK foi eficaz na extração de DNA de Brucella spp. Dos 33 touros testados, oito foram reagentes na PCR (24,24%), seis (18,18%) reagentes na SPA, e dos 23 animais com amostra de soro sanguíneo, um (4%) foi reagente para o AAT. Apenas um animal foi reagente na SPA e no AAT, e não reagente na PCR. Por outro lado sete animais apresentaram-se com s&am
ABSTRACT
A brucelose é uma doença infecto-contagiosa, de caráter zoonótico e de grande importância tanto em produção animal, quanto na saúde pública. É causada por bactérias do gênero Brucella, que provocam orquites e epididimites uni ou bilaterais em touros, podendo levar a sub-fertilidade e a esterilidade. Machos bovinos assintomáticos tornam-se importantes disseminadores desta doença nos rebanhos. Desta forma objetivou-se avaliar o protocolo de extração de DNA de Brucella spp em sêmen in natura bovino, submetendo-os aos testes diagnósticos PCR (protocolo Lise Enzimática por Proteinase e Fenol: Clorofórmio PK), Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) e Sêmem Plasma Aglutinação (SPA), de 33 touros utilizados em monta natural. O protocolo PK foi eficaz na extração de DNA de Brucella spp. Dos 33 touros testados, oito foram reagentes na PCR (24,24%), seis (18,18%) reagentes na SPA, e dos 23 animais com amostra de soro sanguíneo, um (4%) foi reagente para o AAT. Apenas um animal foi reagente na SPA e no AAT, e não reagente na PCR. Por outro lado sete animais apresentaram-se com sêmem reagente na PCR, e negativos nos testes de SPA e AAT. Portanto os resultados indicam a necessidade de associação de testes laboratoriais diretos, como a PCR, com os testes indiretos AAT e SPA, para um diagnóstico mais adequado de brucelose, quando forem utilizadas amostras de sêmen bovino.(AU)
Brucellosis is an infectious disease of zoonotic character and great importance in animal production, as well as a public health matter. It is caused by bacteria of the genus Brucella, which cause unilateral or bilateral epididymitis and orchitis in bulls and can lead to sub-fertility and sterility. Asymptomatic bulls become important disseminators of the disease in herds. Therefore, this study evaluates the extraction protocol of DNA of Brucella spp. from bovine semen in natura. The semen samples of 33 bulls used for natural mating underwent PCR diagnostic tests (Lise Enzyme protocol by Proteinase and Phenol:Chloroform-PK), Buffered Acidified Antigen (AAT) and Semen plasma agglutination (SPA). The PK protocol was effective in the extraction of Brucella spp. Of the 33 bulls tested, eight were positive to PCR (24.24%), six (18.18%) to the SPA reagent, and from the 23 animals with blood serum sample, one (4%) was positive for AAT. Only one animal was positive in SPA and AAT, and not reactive in PCR. On the other hand, seven animals had semen reactive in PCR, and negative tests for SPA and AAT. Therefore, the results indicate the need for association of direct laboratory tests, such as PCR, with indirect tests AAT and SPA, for a more accurate diagnosis of brucellosis, when using samples of bovine semen.(AU)
Subject(s)
Animals , Cattle , Brucellosis, Bovine/classification , Brucellosis, Bovine/diagnosis , Brucellosis, Bovine/prevention & control , Veterinary Public Health , SemenABSTRACT
Toxoplasmosis and neosporosis have been recognized as economically important diseases with considerable impact on the livestock industry. Considering the scarce information on the occurrence of Toxoplasma gondii and Neospora caninum infections in sheep from Uberlândia, Minas Gerais State, Brazil, this study aimed to investigate the frequency of antibodies against these parasites in sheep sera from this region by using different serological methods. A total of 155 sheep serum samples were analyzed by the indirect fluorescence antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of IgG against T. gondii and N. caninum. Seroreactivity by IFAT showed 80% of samples with titers between 512 and 2048 for T. gondii (cutoff ≥ 64) and 78% presenting titers between 50 and 200 for N. caninum (cutoff ≥ 50). Seroreactivity by ELISA showed 75% of samples with ELISA index (EI) between 2.0 and 3.0 for T. gondii (cutoff ≥ 1.3) and 54% presenting EI between 1.3 and 2.0 for N. caninum (cut off ≥ 1.3). Discordant results by both tests were analyzed by immunoblot, resulting in a total seropositivity of 61% for T. gondii and 23% for N. caninum, with 41% to T. gondii only, 3% to N. caninum only, and 20% to both parasites. There was a significant positive association between seropositivity to T. gondii and age over one year (P<0.001), but such association was not found for N. caninum infection. In conclusion, as T. gondii and N. caninum infections are simultaneously present in sheep flocks of this region, it should be emphasized the importance to carry out a regular monitoring of Toxoplasma infection due to its high prevalence, its zoonotic potential and induction of reproductive disorders leading to economic losses. For neosporosis, sheep farmers should be instructed about the presence of the parasite in the flock, its risk factors and potential abortifacient role in sheep. Differential flock management could be valuable tool to establish the association of serological positivity and reproductive disease induced by N. caninum in sheep.