Soroprevalência de Anticorpos anti-Toxoplasma gondii em Amostras de Gestantes no Pré-Natal / Seroprevalence of Anti-Toxoplasma Gondii Antibodies in Samples of Pregnant Women in The Prenatal Care

Avaliar o perfil sorológico para toxoplasmose emamostragem de gestantes no pré-natal da região NoroestePaulista. Metodologia: Estudo retrospectivo e descritivoexploratório com abordagem quantitativa e qualitativa,realizado no período entre abril e agosto de 2013. Foramanalisados 186 prontuários de gestantes. Os dados dosprontuários foram coletados através de questionáriopadronizado pela equipe do estudo. Resultados: A média deidade das pacientes foi de 33 anos (dp ± 4,33). O pré-natal foiiniciado no primeiro trimestre por 87,63% das gestantes e93% eram primigestas. Enzyme Linked Fluorescent Assay foi atécnica laboratorial empregada na sorologia paratoxoplasmose. Foi identificada imunidade para o Toxoplasmagondii em 25,27% das gestantes, 73,65% tinham sorologianegativa e 1,08% tiveram sorologia positiva para os anticorposda classe IgM. No grupo sororreagente, 47 gestantes forampositivas somente para dosagem de anticorpos da classe IgG.Uma gestante teve sorologia positiva para os anticorpos dasclasses IgM (1,04) e IgG (700,0 UI/ml). A elevada avidez dosanticorpos IgG de 89% indica infecção há mais de três meses.Conclusão: A soronegatividade descrita na maioria dosprontuários estudados alerta sobre a importância daconscientização dessas mulheres para os riscos de contatocom o protozoário durante a gestação e reforça a necessidadedos exames diagnósticos para a toxoplasmose. Contudo, osresultados sororreagentes não garantem proteção total duranteo período gestacional, em decorrência da variabilidade decepas e virulência do Toxoplasma gondii...

The aim of this study was to evaluate the serologicalprofile for toxoplasmosis in pregnant women of the Northwestregion of São Paulo. Material and Methods: This was anexploratory descriptive study with quantitative and qualitativeapproaches, carried out between April and August 2013. Weanalyzed 186 medical records of pregnant women, which werecollected using a standardized questionnaire by the study team.Results: The mean age of the patients was 33 years (SD ±4.33). The prenatal care was initiated in the first quarter by87.63% of pregnant women and 93% were primigravidae. Thelaboratory technique used in the serology for toxoplasmosiswas the Enzyme Linked Fluorescent Assay. Immunity toToxoplasma gondii was identified in 25.27% of pregnant women,73.65% had negative serology and 1.08% had positive serologyfor IgM antibodies. Of the seropositive women, 47 were positiveonly for IgG antibodies. One pregnant woman was seropositivefor IgM (1.04) and IgG (700.0 IU/ml). The elevated IgG avidityof 89% indicates infection for more than three months.Conclusion: The seronegative results described in most of themedical records alert about the importance of awareness ofthese women to the risks of contact with the protozoan duringpregnancy. These findings reinforce the need for diagnostictests for toxoplasmosis. However, seropositive results do notguarantee full protection during pregnancy due to thevariability of strains and virulence of Toxoplasma gondii...

[Blood mesenchymal stem cell culture from the umbilical cord with and without Ficoll-Paque density gradient method]. / Cultivo de células mesenquimais do sangue de cordão umbilical com e sem uso do gradiente de densidade Ficoll-Paque.

OBJECTIVES: Implantation of cell separation and mesenchymal stem cell culture techniques from human umbilical cord blood with and without using the Ficoll-Paque gradient density method (d=1.077 g/ml). METHODS: Ten samples of the umbilical cord blood obtained from full-term deliveries were submitted to two different procedures of mesenchymal stem cell culture: a) Method without the Ficoll-Paque density gradient, which concentrates all nucleated cells; b) Method with the Ficoll-Paque density gradient, which selects only low-density mononuclear cells. Cells were initially plated into 25 cm(2) cultures flasks at a density of 1 x 10(7) nucleated cells/cm(2) and 1 x 10(6) mononuclear cells/cm(2). RESULTS: It was obtained 2-13 x 10(7) (median = 2.35 x 10(7)) nucleated cells/cm(2) by the method without the Ficoll-Paque gradient density, and 3.7-15.7 x 10(6) (median = 7.2 x 10(6)) mononuclear cells/cm(2) by the method with the Ficoll-Paque gradient density. In all cultures adherent cells were observed 24 hours after being cultured. Cells presented fibroblastoid and epithelioid morphology. In most of the cultures, cell proliferation occurred in the first week, but after the second week only some cultures - derived from the method without the Ficoll-Paque gradient density-maintained the growth rate reaching confluence. Those cultures were submitted to trypsinization with 0.25% trypsin/EDTA solution and cultured for two to three months. CONCLUSION: In the samples analyzed, cell separation and mesenchymal stem cell culture techniques from human umbilical cord blood by the method without the Ficoll-Paque density gradient was more efficient than the method with the Ficoll-Paque density gradient.

Cultivo de células mesenquimais do sangue de cordão umbilical com e sem uso do gradiente de densidade Ficoll-Paque / Blood mesenchymal stem cell culture from the umbilical cord with and without Ficoll-Paque density gradient method

OBJETIVOS: Implantação de técnicas de isolamento e cultivo de células-tronco mesenquimais do sangue de cordão umbilical humano, com e sem uso de gradiente de densidade Ficoll-Paque (d=1,077g/ml). MÉTODOS: Dez amostras de sangue de cordão umbilical humano de gestação a termo foram submetidas a dois procedimentos de cultivo de células-tronco mesenquimais: sem gradiente de densidade Ficoll-Paque e com gradiente de densidade. As células foram semeadas em frascos de 25cm² a uma densidade de 1x10(7)células nucleadas/cm² (sem Ficoll) e 1,0x10(6) células mononucleares/cm² (com Ficoll). As células aderentes foram submetidas a marcação citoquímica com fosfatase ácida e reativo de Schiff. RESULTADOS: No procedimento sem gradiente de densidade Ficoll, foram obtidas 2,0-13,0x10(7) células nucleadas (mediana=2,35x10(7)) e, no procedimento com gradiente de densidade Ficoll, foram obtidas 3,7-15,7x10(6) células mononucleares (mediana=7,2x10(6)). Em todas as culturas foram observadas células aderentes 24 horas após o início de cultivo. As células apresentaram morfologias fibroblastóides ou epitelióides. Na maioria das culturas houve proliferação celular nas primeiras semanas de cultivo, mas após a segunda semana, somente três culturas provenientes do método sem gradiente de densidade Ficoll-Paque mantiveram crescimento celular, formando focos confluentes de células. Essas culturas foram submetidas a várias etapas de tripsinização para espalhamento ou subdivisão e permaneceram em cultivo por períodos que variaram de dois a três meses. CONCLUSÃO: Nas amostras estudadas, o isolamento e cultivo de células-tronco mesenquimais do sangue de cordão umbilical humano pelo método sem gradiente de densidade Ficoll-Paque foi mais eficiente do que o método com gradiente de densidade Ficoll-Paque.

OBJECTIVES: Implantation of cell separation and mesenchymal stem cell culture techniques from human umbilical cord blood with and without using the Ficoll-Paque gradient density method (d=1.077g/ml). METHODS: Ten samples of the umbilical cord blood obtained from full-term deliveries were submitted to two different procedures of mesenchymal stem cell culture: a) Method without the Ficoll-Paque density gradient, which concentrates all nucleated cells; b) Method with the Ficoll-Paque density gradient, which selects only low-density mononuclear cells. Cells were initially plated into 25 cm² cultures flasks at a density of 1x10(7) nucleated cells/cm² and 1x10(6) mononuclear cells/cm². RESULTS: It was obtained 2-13x10(7) (median = 2.35x10(7)) nucleated cells/cm² by the method without the Ficoll-Paque gradient density, and 3.7-15.7x10(6) (median = 7.2x10(6)) mononuclear cells/cm² by the method with the Ficoll-Paque gradient density. In all cultures adherent cells were observed 24 hours after being cultured. Cells presented fibroblastoid and epithelioid morphology. In most of the cultures, cell proliferation occurred in the first week, but after the second week only some cultures - derived from the method without the Ficoll-Paque gradient density - maintained the growth rate reaching confluence. Those cultures were submitted to trypsinization with 0.25 percent trypsin/EDTA solution and cultured for two to three months. CONCLUSION: In the samples analyzed, cell separation and mesenchymal stem cell culture techniques from human umbilical cord blood by the method without the Ficoll-Paque density gradient was more efficient than the method with the Ficoll-Paque density gradient.

Biomarcadores de suscetibilidade à endometriose / Biomarkers of susceptibility to endometriosis

Objetivos: verificar as freqüências dos genótipos nulos para os genes GSTT1 e GSTM1, assim como as freqüências do alelo polimórfico do gene CYP1A1 em um grupo de mulheres com endometriose, e comparar essas freqüências com aquelas observadas em um grupo que não apresenta a doença (controle), visando uma possível identificação de biomarcadores de suscetibilidade à endometriose. Métodos: foram incluídas 50 mulheres com sinais clínicos sugestivos de endometriose e que foram submetidas à videolaparoscopia e biópsia das lesões avaliadas histologicamente. A endometriose foi confirmada em 25 mulheres, consideradas como o grupo caso, e resultado negativo foi observado nas outras 25 (grupo controle). Os genótipos nulos para os genes GSTT1 e GSTM1 foram avaliados pela reação em cadeia da polimerase (PCR) multiplex. A investigação do alelo polimórfico do gene CYP1A1 foi realizada por meio da técnica de PCR- RFLP (polimorfismos de comprimento de fragmentos de restrição). Para a análise estatística utilizou-se o teste exato de Fisher. Resultados: em ambos os grupos, as freqüências dos polimorfismos de deleção apresentaram valores de 16 por cento para o gene GSTT1 e de 44 por cento para o gene GSTM1. Portanto, os resultados não mostraram diferenças na distribuição dos genótipos nulos GSTT1 e GSTM1 entre os grupos estudados. A diferença da freqüência alélica para o alelo m1 do gene CYP1A1, embora não significante, foi mais elevada nas mulheres com endometriose (0,22) quando comparada àquelas do grupo controle (0,14). Conclusão: os resultados não mostraram uma associação entre os polimorfismos avaliados e o diagnóstico de endometriose.