Genetic diversity of Trypanosoma cruzi strains isolated from chronic chagasic patients and non-human hosts in the state of São Paulo, Brazil.

BACKGROUND: Trypanosoma cruzi shows an exuberant genetic diversity. Currently, seven phylogenetic lineages, called discrete typing units (DTUs), are recognised: TcI-TcVI and Tcbat. Despite advances in studies on T. cruzi and its populations, there is no consensus regarding its heterogeneity. OBJECTIVES: This study aimed to perform molecular characterisation of T. cruzi strains, isolated in the state of São Paulo, to identify the DTUs involved and evaluate their genetic diversity. METHODS: T. cruzi strains were isolated from biological samples of chronic chagasic patients, marsupials and triatomines through culture techniques and subjected to molecular characterisation using the fluorescent fragment length barcoding (FFLB) technique. Subsequently, the results were correlated with complementary information to enable better discrimination between the identified DTUs. FINDINGS: It was possible to identify TcI in two humans and two triatomines; TcII/VI in 19 humans, two marsupials and one triatomine; and TcIII in one human host, an individual that also presented a result for TcI, which indicated the possibility of a mixed infection. Regarding the strains characterised by the TcII/VI profile, the correlation with complementary information allowed to suggest that, in general, these parasite populations indeed correspond to the TcII genotype. MAIN CONCLUSIONS: The TcII/VI profile, associated with domestic cycles and patients with chronic Chagas disease, was the most prevalent among the identified DTUs. Furthermore, the correlation of the study results with complementary information made it possible to suggest that TcII is the predominant lineage of this work.

Efficacies of insecticide dog collars against visceral leishmaniasis in low and high-income areas and the effects for non-collared neighbor dogs.

Previous studies demonstrated that insecticide collars are highly effective in reducing canine visceral leishmaniasis (CVL); however, it is unclear if the efficacy differs by socioeconomic conditions across diverse communities. This study aimed fourfold: (i) to evaluate the protection of 4% impregnated deltamethrin collared (DMC) dogs in different areas of an endemic city for visceral leishmaniasis (VL); (ii) to analyze socioeconomic variables with the seroconversion rates; (iii) to analyze the indirect effect of DMC on untreated dogs in areas of intervention; and, (iv) to evaluate the potential transmission to other dogs in the same household when one positive dog is present. The study employed the municipality of Bauru, São Paulo, Brazil, as the area of interest and used Geographic Information System tools to fit binary logistic regression models.  Dogs were divided into three cohort studies: intervention with DMC (I), indirect effect of DMC (IE), and control (C). Pre-intervention, lower mean income was associated with higher rates of CVL and a 142% increase in the odds of transmission (OR = 1.42, p-value = 0.001, CI 1.14,1.77). Post-intervention, lower-income areas depicted greater efficacy (76%) than higher-income areas (45%). The overall efficacy of DMC in preventing CVL was 63%; however, seroconversion rates were higher for IE (6.02%) than C (3.78%), revealing the failure of the indirect protection of DMC to manage the spread of the disease among the general non-wearing DMC canine population living in the same area. The protected dogs may repel the vectors, and non-protected dogs attract them, creating a higher transmission rate for non-protected dogs. Greater seroconversion was observed for living with an infected dog (10.20% in IE and 8.75% in C) than for the indirect effect of DMC, demonstrating the social burden of CVL. Overall, uncollared dogs have three times higher odds of being infected with CVL than DMC dogs (p < 0.005), and uncollared dogs living with (an) infected dog(s) in the same household can reach 3.5 times higher odds than those living with negative ones (p < 0.005). The results may assist in enhancing public policies and minimizing inequality in low and middle-income countries that suffer from neglected diseases such as VL.

The path of canine visceral leishmaniasis versus the path of Center for Zoonoses Control: contributions of spatial analysis to health.

Visceral leishmaniasis (VL) is a public health problem in Brazilian municipalities. As much as there is a planning of public policies regards VL in São Paulo State, new cases have been reported and spread. This paper aims to discuss how the Center for Zoonoses Control conducts its actions spatially in endemic city of Presidente Prudente, São Paulo State. Data are from the Municipal Health Department of Presidente Prudente, Adolfo Lutz Institute, and Brazilian Institute of Geography and Statistics. We spatially estimated the dog population per census tract and used geoprocessing tools to perform choropleth maps, spatial trends, and spatial autocorrelation. We found a spatial pattern of higher prevalence in the city's outskirt and a positive statistically significant spatial autocorrelation (I = 0.2, p-value < 0.000) with clusters of high-high relationships in the Northwest part of the city. Moreover, we identified a different direction in the path of the conducted serosurveys versus the canine VL trend, which stresses the fragility of the Center for Zoonoses Control actions to control the disease. The Center for Zoonoses Control always seems to chase the disease. The spatial analysis may be useful for rethinking how the service works and helps in public policies.

Genetic diversity of Trypanosoma cruzi strains isolated from chronic chagasic patients and non-human hosts in the state of São Paulo, Brazil

BACKGROUND Trypanosoma cruzi shows an exuberant genetic diversity. Currently, seven phylogenetic lineages, called discrete typing units (DTUs), are recognised: TcI-TcVI and Tcbat. Despite advances in studies on T. cruzi and its populations, there is no consensus regarding its heterogeneity. OBJECTIVES This study aimed to perform molecular characterisation of T. cruzi strains, isolated in the state of São Paulo, to identify the DTUs involved and evaluate their genetic diversity. METHODS T. cruzi strains were isolated from biological samples of chronic chagasic patients, marsupials and triatomines through culture techniques and subjected to molecular characterisation using the fluorescent fragment length barcoding (FFLB) technique. Subsequently, the results were correlated with complementary information to enable better discrimination between the identified DTUs. FINDINGS It was possible to identify TcI in two humans and two triatomines; TcII/VI in 19 humans, two marsupials and one triatomine; and TcIII in one human host, an individual that also presented a result for TcI, which indicated the possibility of a mixed infection. Regarding the strains characterised by the TcII/VI profile, the correlation with complementary information allowed to suggest that, in general, these parasite populations indeed correspond to the TcII genotype. MAIN CONCLUSIONS The TcII/VI profile, associated with domestic cycles and patients with chronic Chagas disease, was the most prevalent among the identified DTUs. Furthermore, the correlation of the study results with complementary information made it possible to suggest that TcII is the predominant lineage of this work.

The path of canine visceral leishmaniasis versus the path of Center for Zoonoses Control: contributions of spatial analysis to health / O caminho da leishmaniose visceral canina versus o caminho do Centro de Controle de Zoonoses: contribuições da análise espacial para a saúde / La trayectoria de la leishmaniasis visceral canina versus la trayectoria del Centro para el Control de Zoonoses: contribuciones del análisis espacial a la salud

Visceral leishmaniasis (VL) is a public health problem in Brazilian municipalities. As much as there is a planning of public policies regards VL in São Paulo State, new cases have been reported and spread. This paper aims to discuss how the Center for Zoonoses Control conducts its actions spatially in endemic city of Presidente Prudente, São Paulo State. Data are from the Municipal Health Department of Presidente Prudente, Adolfo Lutz Institute, and Brazilian Institute of Geography and Statistics. We spatially estimated the dog population per census tract and used geoprocessing tools to perform choropleth maps, spatial trends, and spatial autocorrelation. We found a spatial pattern of higher prevalence in the city's outskirt and a positive statistically significant spatial autocorrelation (I = 0.2, p-value < 0.000) with clusters of high-high relationships in the Northwest part of the city. Moreover, we identified a different direction in the path of the conducted serosurveys versus the canine VL trend, which stresses the fragility of the Center for Zoonoses Control actions to control the disease. The Center for Zoonoses Control always seems to chase the disease. The spatial analysis may be useful for rethinking how the service works and helps in public policies.

A leishmaniose visceral (LV) é um problema de saúde pública nas cidades brasileiras. Por mais que haja um planejamento de políticas públicas para LV no Estado de São Paulo, Brasil, novos casos têm sido notificados e se disseminado. O artigo objetiva discutir como o Centro de Controle de Zoonoses realiza suas atividades espacialmente em uma cidade endêmica, Presidente Prudente, no Estado de São Paulo. Os dados são da Secretaria Municipal de Saúde de Presidente Prudente, Instituto Adolfo Lutz e Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística. Estimamos espacialmente a população canina por setor censitário e utilizamos ferramentas de geoprocessamento para produzir mapas coropléticos, tendências espaciais e autocorrelação espacial. Encontramos um padrão espacial de maior prevalência na periferia da cidade e uma autocorrelação espacial positiva estatisticamente significativa (I = 0,2; p < 0,000) com clusters de relação alta-alta no noroeste da cidade. Além disso, identificamos uma direção diferente no caminho dos inquéritos sorológicos realizados versus a tendência na LV canina, o que enfatiza a fragilidade das medidas de controle do Centro de Controle de Zoonoses para controlar casos da doença. O Centro de Controle de Zoonoses parece estar sempre correndo atrás da doença. A análise espacial pode ser útil para repensar o funcionamento do serviço e auxiliar as políticas públicas.

La leishmaniasis visceral (LV) es un problema de salud pública en las ciudades brasileñas. Aunque hay políticas públicas de planificación relacionadas con la LV en el estado de São Paulo, Brasil, se han informado de nuevos casos, además de su propagación. El objetivo de este trabajo es discutir cómo el Centro de Control de Zoonosis dirige sus acciones espacialmente en una ciudad endémica del estado de São Paulo, Presidente Prudente. Los datos proceden de la Secretaría Municipal de Salud de Presidente Prudente, del Instituto Adolfo Lutz, y del Instituto Brasileño de Geografía y Estadística. Estimamos espacialmente la población de perros por sector censal y utilizamos herramientas de geoprocesamiento para elaborar mapas de coropletas, tendencias espaciales, y autocorrelación espacial. Encontramos un patrón espacial de más alta prevalencia en la periferia de la ciudad, además de una autocorrelación espacial positiva y estadísticamente significativa (I = 0,2; valor de p < 0,000) con clústeres de relaciones alto-alto en la parte noroccidental de la ciudad. Además, identificamos una dirección diferente en la trayectoria de las encuestas serológicas llevadas a cabo, frente a la tendencia de LV canina, que enfatiza la debilidad de acciones del Centro de Control de Zoonosis para controlar casos de la enfermedad. El Centro de Control de Zoonosis parece siempre estar tras la enfermedad. El análisis espacial podría ser útil para repensar cómo está funcionando el servicio, además de ayudar a políticas públicas.

Impact of the dog population and household environment for the maintenance of natural foci of Leishmania infantum transmission to human and animal hosts in endemic areas for visceral leishmaniasis in Sao Paulo state, Brazil.

When it comes to visceral leishmaniasis (VL) in Brazil, one of the main targets of public health policies of surveillance is the control of domestic canine reservoirs of Leishmania infantum. This paper aims to evaluate the effect of the dog population and household environment for the maintenance of natural foci in the transmission to human and animal hosts in an endemic city for VL, Bauru, in Brazil. We collected 6,578 blood samples of dogs living in 3,916 households from Nov.2019 to Mar.2020 and applied geospatial models to predict the disease risk based on the canine population. We used Kernel density estimation, cluster analysis, geostatistics, and Generalized Additive Models (GAM). To validate our models, we used cross-validation and created a receiver operating characteristic (ROC) curve. We found an overall canine VL (CVL) seroprevalence of 5.6% for the sampled dogs, while for the households, the positivity rate was 8.7%. Odds ratios (OR) for CVL increased progressively according to the number of canines for >2 dogs (OR 2.70); households that already had CVL in the past increased the chances for CVL currently (OR 2.73); and the cases of CVL increase the chances for human VL cases (OR 1.16). Our models were statistically significant and demonstrated a spatial association between canine and human disease cases, mainly in VL foci that remain endemic. Although the Kernel density ratio map had the best performance (AUC = 82), all the models showed high risk in the city's northwest area. Canine population dynamics must be considered in public policies, and geospatial methods may help target priority areas and planning VL surveillance in low and middle-income countries.

Classificação epidemiológica dos municípios do Estado de São Paulo segundo o Programa de Vigilância e Controle da Leishmaniose Visceral, 2017 / Epidemiological classification of the municipalities of the Stat e of São Paulo according to the Visceral Leishmaniasis Control and Surveillance Program, 2017

Foi realizado um estudo descritivo dos casos de Leishmaniose Visceral (LV) notificados no período de 1999 a 2017 no Estado de São Paulo (ESP). Para a classificação epidemiológica dos municípios com transmissão humana de LV foram seguidas as recomendações do Ministério da Saúde1 que considera: "Municípios com transmissão recente aqueles que apresentaram o primeiro registro da doença nos últimos três anos" e "Municípios endêmicos aqueles que apresentam transmissão contínua de LV humana há pelo menos três anos

Avaliação da efetividade do uso de coleiras impregnadas com deltametrina no controle da leishmaniose visceral no município de Votuporanga, Estado de São Paulo, Brasil, 2014 – 2016 / Evaluation of the effectiveness of using deltamethrinimpregnated collars to control visceral leishmaniasis in the municipality of Votuporanga, State of São Paulo, Brazil, 2014 – 2016

O objetivo deste artigo é apresentar os principais resultados do Projeto de Inovação Tecnológica em Saúde realizado entre 2014 e 2015, destacando-se o uso de coleiras impregnadas com deltametrina a 4% em cães em uma região endêmica para leishmaniose visceral (LV), o município de Votuporanga, São Paulo, Brasil. Neste município, anterior à realização do projeto, eram registrados muitos casos caninos e humanos da doença, com elevada taxa de letalidade. Durante o projeto, foram monitorados cerca de 16,5 mil cães, examinadas 25.700 amostras de sangue, considerando-se as perdas e as entradas de novos animais durante os quatro inquéritos sorológicos. Após sua finalização, verificou-se uma diminuição da prevalência e incidência de LV canina, assim como do número de casos humanos. A diminuição dos casos caninos foi correlacionada positivamente aos casos humanos no período de 2011 a 2016 (Correlação de Pearson de 0.914, p-valor<0.05). Além disso, a análise espacial dos resultados corrobora a diminuição ou desaparecimento da concentração de casos caninos e, consequentemente, de fontes e de infecção nas áreas endêmicas à medida que avançaram no tempo e espaço as diferentes etapas de desenvolvimento do projeto. Apesar da drástica redução na incidência da LV canina, ainda permaneceram algumas áreas críticas. Os resultados delineados sugerem a revisão de protocolos e manuais demonstrando a efetividade do uso das coleiras como medida preventiva e potencial no controle da LV.

This paper aims to present the main results of the Health Technology Innovation Project carried out between 2014 and 2015, which evaluates the use of 4% deltamethrin-impregnated collars in dogs, in an endemic region for visceral leishmaniasis (VL), the municipality of Votuporanga, São Paulo, Brazil. Before this project, Votuporanga had notified canine and human cases of the disease, with a high case fatality rate. We monitored approximately 16.5 thousand dogs, 25,700 blood samples analyzed, considering losses and entrances of new animals during the four serological surveys. After the project, the prevalence and incidence of canine VL decreased as well as the number of human cases. We found a positive correlation between the decrease of infected dogs and human cases from 2011 to 2016 (Pearson correlation of 0.914, p-value <0.05). Furthermore, the spatial analysis of the results indicated areas with canine cases concentration that decreased its intensity or disappeared concomitantly to the project levels in the space-time. Despite the drastic reduction in the incidence of canine VL, some critical areas remain. The current results suggest the review of protocols and manuals demonstrating the effectiveness of the use of collars as a preventive measure and potential in the control of VL.

Avaliação da efetividade do uso de coleiras impregnadas com deltametrina no controle da leishmaniose visceral no município de Votuporanga, Estado de São Paulo, Brasil, 2014 ­ 2016 / Evaluation of the effectiveness of using deltamethrinimpregnated collars to control visceral leishmaniasis in the municipality of Votuporanga, State of São Paulo, Brazil, 2014 ­ 2016

O objetivo deste artigo é apresentar os principais resultados do Projeto de Inovação Tecnológica em Saúde realizado entre 2014 e 2015, destacando-se o uso de coleiras impregnadas com deltametrina a 4% em cães em uma região endêmica para leishmaniose visceral (LV), o município de Votuporanga, São Paulo, Brasil. Neste município, anterior à realização do projeto, eram registrados muitos casos caninos e humanos da doença, com elevada taxa de letalidade. Durante o projeto, foram monitorados cerca de 16,5 mil cães, examinadas 25.700 amostras de sangue, considerando-se as perdas e as entradas de novos animais durante os quatro inquéritos sorológicos. Após sua finalização, verificou-se uma diminuição da prevalência e incidência de LV canina, assim como do número de casos humanos. A diminuição dos casos caninos foi correlacionada positivamente aos casos humanos no período de 2011 a 2016 (Correlação de Pearson de 0.914, p-valor<0.05). Além disso, a análise espacial dos resultados corrobora a diminuição ou desaparecimento da concentração de casos caninos e, consequentemente, de fontes e de infecção nas áreas endêmicas à medida que avançaram no tempo e espaço as diferentes etapas de desenvolvimento do projeto. Apesar da drástica redução na incidência da LV canina, ainda permaneceram algumas áreas críticas. Os resultados delineados sugerem a revisão de protocolos e manuais demonstrando a efetividade do uso das coleiras como medida preventiva e potencial no controle da LV. (AU)

This paper aims to present the main results of the Health Technology Innovation Project carried out between 2014 and 2015, which evaluates the use of 4% deltamethrin-impregnated collars in dogs, in an endemic region for visceral leishmaniasis (VL), the municipality of Votuporanga, São Paulo, Brazil. Before this project, Votuporanga had notified canine and human cases of the disease, with a high case fatality rate. We monitored approximately 16.5 thousand dogs, 25,700 blood samples analyzed, considering losses and entrances of new animals during the four serological surveys. After the project, the prevalence and incidence of canine VL decreased as well as the number of human cases. We found a positive correlation between the decrease of infected dogs and human cases from 2011 to 2016 (Pearson correlation of 0.914, p-value <0.05). Furthermore, the spatial analysis of the results indicated areas with canine cases concentration that decreased its intensity or disappeared concomitantly to the project levels in the space-time. Despite the drastic reduction in the incidence of canine VL, some critical areas remain. The current results suggest the review of protocols and manuals demonstrating the effectiveness of the use of collars as a preventive measure and potential in the control of VL. (AU)

Estudos da fauna flebotomínica (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) e infecção natural por Leishmania infantum em municípios da região noroeste do estado de São Paulo, Brasil / Studies on the phlebotomine sandflies fauna (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) and on the natural infection by Leishmania infantum in municipalities of northwest region of the State of São Paulo

A expansão geográfica e o crescente aumento dos casos de leishmaniose visceral na região noroeste do estado de São Paulo despertaram o interesse em desenvolver estudo para identificar a fauna flebotomínica e avaliar sua infecção natural por Leishmania infantum nos municípios de Fernandópolis, Santa Fé do Sul e Votuporanga. Foram realizados inquéritos entomológicos com a utilização de armadilhas luminosas do tipo CDC, instaladas em diferentes ecótopos peridomiciliares, durante o período de agosto de 2013 a novembro de 2014. A detecção de DNA de L. infantum em flebotomíneos foi realizada por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Foram coletados 507 flebotomíneos, sendo 116 fêmeas (22,9 %) e 391 machos (77,1 %), representados por sete espécies, com predomínio de Lutzomyia longipalpis, com 461 exemplares (90,9 %). As análises moleculares revelaram DNA de L. infantum em um exemplar de L. longipalpis capturado em Fernandópolis. Estes resultados confirmam a presença desta espécie nos municípios pesquisados. E o encontro de pelo menos um exemplar, naturalmente infectado, em Fernandópolis evidencia a necessidade de realizar ações de controle direcionadas aos vetores neste município, com o intuito de conter sua dispersão e prevenir a ocorrência de casos humanos de leishmaniose visceral.

The geographical expansion and the increase of visceral leishmaniasis cases in northwest region ofthe São Paulo state aroused the interest of conducting a study to identify the phlebotomine sandfliesfauna, and to evaluate the rate of natural infection by Leishmania infantum in Fernandópolis, SantaFé do Sul and Votuporanga. Entomological surveys were conducted using the CDC miniature lighttraps, installed in different types of peridomestic ecotopes, during the period from August 2013 toNovember 2014. The L. infantum DNA detection in phlebotomine sandflies was performed by meansof conventional Polymerase Chain Reaction (PCR). Five hundred seven phlebotomine sandfliesspecimens were collected, being 116 females (22.9 %) and 391 males (77.1 %), which were representedby seven species, prevailing Lutzomyia longipalpis, with 461 specimens (90.9 %). Molecular analysisrevealed DNA of L. infantum in one specimen of L. longipalpis from Fernandópolis. These findingsconfirm the occurrence of this species in all of the surveyed municipalities. And the existence ofat least one specimen, naturally infected in Fernandópolis, highlights the need for performing thefurther control measures directed to the vectors in this municipality, for restraining their spread andto prevent the occurrence of human cases of visceral leishmaniasis.

Avaliação do exame imuno-histoquímico para o diagnóstico de Leishmania spp. em amostras de tecidos caninos / Evaluation of immunohistochemical technique for the diagnosis of Leishmania spp. in canine tissues samples

No Brasil, as leishmanioses representam um importante problema de saúde pública pela sua elevada incidência, ampla distribuição geográfica e marcante aumento na transmissão associados à urbanização da doença. Cães são considerados os principais reservatórios da leishmaniose visceral (LV) no ambiente urbano, tornando-se fundamental o aprimoramento do diagnóstico dadoença nessa espécie. Este estudo objetivou a avaliação da técnica de imuno-histoquímica (IHQ) para o diagnóstico de Leishmania spp. em amostras de diferentes tecidos de cães recebidas no Núcleo de Patologia Quantitativa do Instituto Adolfo Lutz (NPQ-IAL). Amostras de tecidos coletadas de 134 cães, provenientes de municípios do Estado de São Paulo, positivos para LV por teste rápido(TR DPP®-Bio-Manguinhos), ensaio imunoenzimático-EIE/Elisa (Bio-Manguinhos) e pela reação em cadeia de polimerase, foram submetidas a marcação IHQ específica, em duplicata. A reação de IHQ apresentou sensibilidade de 98,51 %, especificidade de 100,00 % e acurácia de 98,61 %. A maior positividade foi detectada nas amostras de baço. O índice Kappa foi de 0,84 entre os resultados da análise dos tecidos em duplicata. A técnica de IHQ pode ser utilizada como uma técnica rotineirapara o diagnóstico das leishmanioses caninas, sendo padronizada e implantada no NPQ-IAL.

In Brazil, leishmaniasis represents an important public health problem due to its high incidence, wide geographic distribution and marked increase in transmission associated to the urbanization of the disease. Dogs are considered the main reservoirs of visceral leishmaniasis (VL) in the urban environment, making it fundamental to improve the diagnosis of this species. This study aimed at the evaluation of the immunohistochemical technique (IHC) for the diagnosis of Leishmania spp. In samples of different dog tissues received at the Adolfo Lutz Institute's Quantitative Pathology Center (NPQ-IAL). Tissue specimens collected from 134 dogs, from municipalities in the State of São Paulo, positive for LV by rapid test (TR DPP®-Bio-Manguinhos), enzyme-linked immunosorbent assay (EIE / Elisa (Bio-Manguinhos) and the chain reaction of Polymerase, were subjected to specific IHQ labeling, in duplicate. The IHQ reaction showed sensitivity of 98.51%, specificity of 100.00% and accuracy of 98.61%. The highest positivity was detected in spleen samples. The Kappa index was 0.84 between the results of the tissue analysis in duplicate. The IHC technique can be used as a routine technique for the diagnosis of canine leishmaniasis, being standardized and implanted in the NPQ-IAL.

Evaluation of immunohistochemical technique for the diagnosis of Leishmania spp. in canine tissues samples / Avaliação do exame imuno-histoquímico para o diagnóstico de Leishmania spp. em amostras de tecidos caninos

In Brazil, leishmaniasis represents a major public health problem due to its high incidence, wide distribution and remarkable increase in transmission associated with the disease urbanization. Dogs are considered as the main reservoirs of visceral leishmaniasis (VL) in the urban environment and diagnosis improvement was fundamental in this species. This study aimed at evaluating the immunohistochemical technique (IHC) for diagnosing Leishmania spp. in differents tissues samples collected from dogs. This investigation was performed at the Quantitative Pathology Center of the Institute Adolfo Lutz (NPQ-IAL). Tissue samples collected from 134 dogs, derived from municipalities of São Paulo State, positive for VL by rapid testing (TR DPP® - Bio-Manguinhos), enzyme-linked immunosorbent assay (EIA/ELISA - Bio-Manguinhos), and polymerase chain reaction, were analyzed by specific IHC in duplicate. These dogs were previously diagnosed as VL. IHC showed sensitivity of 98.51 %, specificity of 100.00 %, positive predictive value of 100.00 %, negative predictive value of 83.33 % and accuracy of 98.61 %. The major positivity was detected in spleen samples. Kappa index between the tissues duplicate results was of 0.84. IHC technique, standardized and implemented at NPQ-IAL, showed to be suitable to be used as routine test for diagnosing canine leishmaniasis effectivelly.

No Brasil, as leishmanioses representam um importante problema de saúde pública pela sua elevada incidência, ampla distribuição geográfica e marcante aumento na transmissão associados à urbanização da doença. Cães são considerados os principais reservatórios da leishmaniose visceral (LV) no ambiente urbano, tornando-se fundamental o aprimoramento do diagnóstico da doença nessa espécie. Este estudo objetivou a avaliação da técnica de imuno-histoquímica (IHQ) para o diagnóstico de Leishmania spp. em amostras de diferentes tecidos de cães recebidas no Núcleo de Patologia Quantitativa do Instituto Adolfo Lutz (NPQ-IAL). Amostras de tecidos coletadas de 134 cães, provenientes de municípios do Estado de São Paulo, positivos para LV por teste rápido (TR DPP®-Bio-Manguinhos), ensaio imunoenzimático-EIE/Elisa (Bio-Manguinhos) e pela reação em cadeia de polimerase, foram submetidas a marcação IHQ específica, em duplicata. A reação de IHQ apresentou sensibilidade de 98,51 %, especificidade de 100,00 % e acurácia de 98,61 %. A maior positividade foi detectada nas amostras de baço. O índice Kappa foi de 0,84 entre os resultados da análise dos tecidos em duplicata. A técnica de IHQ pode ser utilizada como uma técnica rotineira para o diagnóstico das leishmanioses caninas, sendo padronizada e implantada no NPQ-IAL.

Classificação epidemiológica dos municípios segundo o programa de vigilância e controle da leishmaniose visceral no Estado de São Paulo, dezembro de 2014 / Epidemiological classification of municipalities according to the visceral leishmaniasis surveillance and control program in the state of São Paulo, December 2014

Ainda com relação aos municípios com transmissão humana, foram considerados parâmetros utilizados pelo MS4 que consideram a média de casos num período de três anos consecutivos. Município com média menor que 2,4 casos é estratificado como "Transmissão Esporádica", média entre 2,4 casos a <4,4 casos como "Transmissão Moderada" e média ≥ 4,4 casos como "Transmissão Intensa". A partir dessa estratificação, que é avaliada anualmente, municípios com transmissão moderada e intensa são considerados como "Prioritários" para as ações do PVCLV...(AU)

Spatial epidemiology of American cutaneous leishmaniasis in a municipality of west São Paulo State, Brazil.

BACKGROUND & OBJECTIVES: In the last decade, in the state of São Paulo, 5898 cases of cutaneous leishmaniasis (CL) were reported. This study was undertaken to analyze the epidemiology of CL in the municipality of Teodoro Sampaio, in São Paulo State, Brazil, based on a geographic approach, as very little is known of the relationship between CL and the spatial transformation process. METHODS: This is a population-based quantitative, descriptive and cross-sectional case study. Surveys of the official notifications in the healthcare center and official sources from 1998 to 2011 were analysed. The data were described based on statistics and the Kernel method to detect hotspots of transmission. RESULTS: The age group between 21 and 40 yr was most affected, with 24 cases (57.9%). Of the 41 cases reported between 1998 and 2011, 33 cases were having low education status and 31 cases (75.6%) were males. The spatial and temporal distribution was aggregated in three-year periods which permitted the identification of two microfoci, in periods I (1998-2000) and III (2005-2007). INTERPRETATION & CONCLUSION: The disease has presented, in recent years, a pattern of sporadic transmission or microfoci, and continues to maintain enzootic cycles of Leishmania in a sylvatic environment, ensuring the perpetuation of the pathogen in nature, and the risk of emergence of new cases of CL in domestic animals and humans.

Dinâmica de circulação de Leishmania spp no ambiente enzoótico florestal de diferentes regiões do Estado de São Paulo / Dynamics of circulation of Leishmania spp in the enzootic forested environment in two regions of the State of São Paulo, Brazil

Com o objetivo de investigar a ecoepidemiologia de Leishmania spp com relação a animais silvestres e domésticos e aos flebotomíneos, desenvolveram-se estudos no período entre 2000 e 2009 em duas áreas no Estado de São Paulo (Ilhabela S 23º 48' W 45º 20' e Itupeva na Serra do Japi, S 23º 10' W 47º 02' ). Cada animal foi examinado por um ou mais dos seguintes métodos: observações clínicas, exame direto de esfregaços ou imprints de aspirados e/ou biópsias, teste rápido com antígeno rk39, intradermorreação com antígeno de L.(V.) braziliensis, inoculação in vivo e in vitro e extração de DNA para testes moleculares. Em relação aos animais silvestres foram utilizadas técnicas de captura-marcação-recaptura o que nos permitiu determinar a dinâmica de circulação de Leishmania spp. Em todas as recapturas os animais foram reexaminados. Coletas de flebotomíneos também foram realizadas nos mesmos locais e em galinheiros, utilizando-se de armadilhas luminosas, tipo Falcão modificada, aspiradores de castro, armadilha de Shannon, armadilha Disney e papéis untados com vaselina líquida. De um total de 2.714 animais silvestres capturados, 2.048 foram recapturas. Em Ilhabela verificou-se que exemplares de Proechimys iheringi e Philander opossum foram recapturados de 2 a 35 vezes e um exemplar de Philander opossum foi recapturado até 79 meses após sua captura. L. (V.) braziliensis foi observado em áreas de LTA infectando cães em Ilhabela e Itupeva, Rodentia (Proechimys iheringi de Ilhabela,Nectomys squamipes e Lutreolina crassicaudata de Itupeva) e Marsupialia (Didelphis aurita de Itupeva). L. (L.) amazonensis foi observado em áreas de LTA em P. iheringi.de Ilhabela. L.(L.) infantum chagasi, de outra parte, foi observado em áreas de LTA em Itupeva (Akodon spp, D. 9 marsupialis). Em algumas áreas foi possível determinar ciclos concomitantes de 2 ou 3 espécies de Leishmania...

Freqüência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em mulheres, atendidas nas unidades da rede de saúde publica da região metropolitana de São Paulo (2001-2005) / Frequency of anti-Toxoplasma gondii antibodies in women attended at public health center network of São Paulo metropolitan region (2001-2005)

Toxoplasma gondii é um parasita intracelular obrigatório que pode infectar o homem e animais homeotérmicos. Nos indivíduos imunocompetentes a infecção é geralmente assintomática, os principais grupos atingidos gravemente pela doença são os indivíduos imunodeprimidos e as gestantes que adquirem a infecção durante a gestação. Neste trabalho foram analisadas 1485 amostras de soros de mulheres atendidas na rede pública de saúde da grande São Paulo, durante o período de janeiro de 2001 a julho de 2005. A detecção de anticorpos IgG anti-T.gondii foi realizada por meio de ensaio imunoenzimático(ELISA) e a técnica Imunofluorescência Indireta (IFAT) foi utilizada para detecção de anticorpos IgMe IgG anti- T.gondii. Das amostras analisadas 57,10% apresentaram anticorpos IgG anti-T.gondii, e 1,95% possuíam anticorpos específicos da classe IgM. Os inquéritos epidemiológicos realizados no Brasil demonstraram que a soroprevalência de anticorpos IgG anti-T. gondii varia de 40 a 80%, o que corroboram com os dados obtidos no presente estudo. Existe a necessidade de estudos que identifiquem as taxas de prevalência nas várias regiões brasileiras, com o intuito de implantar trabalhos de informação e conscientização da população para diminuição do risco de infecção congênita por T. gondii.

Manutençäo da fecundidade e oviposiçäo em triatoma infestans após décadas de criaçäo em condiçöes de laboratório / Maintenance of fecundity and oviposition in triatoma infestans after decades of breeding under laboratory conditions

O objetivo deste estudo foi avaliar a possibilidade da manutençäo da fecundidade e oviposiçäo em triatomíneos após décadas de criaçäo em condiçöes de laboratório. Foi observado o desempenho de 11 colônias de triatoma infestans do Laboratório de Triatomíneos do Instituto Adolfo Lutz. Os insetos foram mantidos em temperatura e umidade constantes (27-28 grau C e 70-80(por cento),respectivamente) e acasalados em diferentes proporçöes de machos e fêmeas. Dois ritmos de alimentaçäo foram utilizados. No primeiro, os triatomíneos foram alimentados semanalmente, e no segundo, o ritmo de alimentaçäo foi quinzenal ou a cada 21 dias. Durante o estudo marrecos foram utilizados como fonte de sangue. Os resultados confirmaram a importância do ritmo de alimentaçäo para o oviposiçäo. Insetos que receberam alimentaçäo semanal apresentaram os melhores índices de oviposiçäo, representados pelo número de ovos por fêmea por dia (ofd), entre 0.39 e 4.40 ofd, sendo mais frequente taxas acima de 1.30 ofd. Colônias que tiveram alimentaçäo quizenal ou a cada 21 dias apresentaram inexpressivos índices de oviposiçäo, entre 0.05 e 1.07 ofd, sendo mais frequente inferior a 0.30 ofd. Concluiu-se que após décadas de criaçäo em condiçöes de laboratório, é possível manter a fecundidade e a capacidade de oviposiçäo dentro dos padröes normais, em colônias de Triatoma infestans, se o ritmo de alimentaçäo dos adultos näo exceder 7 dias. O ritmo de alimentaçäo näo afetou o índice de sobrevivência dos adultos, mas foi crítico para a fecundidade e oviposiçäo. (AU)

The aim of this study was to evaluate the possibility of maintenance of fecundity and the capability of oviposition in Reduviid bugs after decades of breeding under laboratory conditions. It was observed the performance of eleven colonies of Triatoma infestans from the Laboratory of Triatomines of Adolfo Lutz Institute. Insects were mated in different ratio of males and females. Two rhythms of alimentation were used. In the first, triatomines were fed weekly, and in the second rhythm the meal were offered every fifteen or twenty one days. During all the study teals were used as blood source, and temperature and humidity were constant, at 27-28∞C and 70-80%, respectivelly. The results confirm the importance of the rhythm of alimentation for oviposition. Insects fed weekley showed the best rates of oviposition, it was represented by number of eggs by female per day (efd), between 0.39 to 4.40 efd, being more frequent up to 1.30 efd. Colonies that were fed every fifteen or twenty one days showed inexpressives rates of oviposition, between 0.05 to 1.07 efd, being more frequent below to 0.30efd. It was concluded that after decades of breeding under laboratory conditions it is possible to maintain the fecundity, into normal patterns, in the T. infestans if the rhythm of alimentation of adults donít exceed seven days. Rhythm of alimentation donít affected the survival rates of adults, but it was critical for the fecundity and oviposition. (AU)

Epidemiologia da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) no Estado de Säo Paulo: III. Influência da açäo antrópica na sucessäo vetorial da LTA / Epidemiology of American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) in the State of Säo Paulo, Brazil: III. Anthropic action influence in the vectorial succession of ACL

As alteraçöes ambientais e reduçöes na cobertura vegetal do Estado de Säo Paulo, ao longo do século XX, resultantes da açäo do próprio homem, determinaram diferentes perfis epidemiológicos para a LTA em terras paulistas. Ateraçöes significativas, também, foram verificadas na composiçäo da fauna flebotomínica. Lutzomyia intermedia s.l. tornou-se a espécie presente em maior densidade nas áreas endêmicas no final deste século. Nesta investigaçäo objetivou-se avaliar a importância da açäo antrópica na perpetuaçäo da LTA, hoje espalhada em todo o Estado de Säo Paulo. No município de Eldorado, Vale do Ribeira, foram definidos 3 ambientes para as coletas de flebotomíneos: i - interior de mata, ambiente näo modificado; ii - margem de mata, ambiente pouco modificado com a construçäo de um galinheiro experimental e iii - ambiente modificado pela açäo antrópica com habilitaçäo humana, animais domésticos e cultivo de banana. Os ambientes florestados e aquele com pequena alteraçäo revelaram maior diversidade de espécies de flebotomíneos, com predomínio de L. fischeri, L. ayrozai e L. migonei. No ambiente altamente alterado, L. intermedia s.l. constituiu a espécie predominante. A açäo antrópica sobre o ambiente exerceu pressäo decisiva na sucessäo biológica das espécies de flebotomíneos. (AU)

Different patterns in the Americana Cutaneous Leishmaniasis have been determinated in the XX th Century due to environmental modifications by anthropic action. Modifications have been occurred in the sandfly composition, too. Observations were made in rural and periurban areas in Eldorado county, Ribeira Valley, S"o Paulo State for the purpouse of evaluate the influence of anthropic action in the sandfly composition. The insects were caught around the house, at the edge and inside the forest, between October,1989 and September,1993. It was observed that the level of environmental modification produced considerable effect on the biological succession of the phlebotomine fauna, and suggested the difficulty that L. fischeri, L. migonei and L. ayrozai have in their attempt to overcome the barriers created by man. L. intermedia s.l. has adapted so well that is at present the only species which has successfully colonizated the anthropic environment in the Ribeira Valley. (AU)