ABSTRACT
Duck Tembusu virus (DTMUV) is a pathogenic flavivirus that causes a substantial drop in egg production and severe neurological disorders in domestic waterfowl. Self-assembled ferritin nanoparticles with E protein domains I and II (EDI-II) of DTMUV (EDI-II-RFNp) were prepared, and its morphology was observed. Two independent experiments were conducted. First, Cherry Valley ducks aged 14 days were vaccinated with EDI-II-RFNp, EDI-II, and phosphate buffered solution (PBS, pH 7.4), and special and virus neutralization (VN) antibodies, interleukin 4 (IL-4) and interferon gamma (IFN-γ) in serum, and lymphocyte proliferation were detected. Second, the vaccinated ducks with EDI-II-RFNp, EDI-II, and PBS were injected with virulent DTMUV, clinical signs at 7 days postinfection (dpi) were observed, and mRNA levels of DTMUV in the lungs, liver, and brain at 7 and 14 dpi were detected. The results showed near-spherical nanoparticles EDI-II-RFNp with a 16.46 ± 4.70 nm diameters. The levels of specific and VN antibodies, IL-4 and IFN-γ, and lymphocyte proliferation in the EDI-II-RFNp group were significantly higher than those in the EDI-II and PBS groups. In the DTMUV challenge test, clinical signs and mRNA levels in tissue were used to evaluate protection of EDI-II-RFNp. EDI-II-RFNp-vaccinated ducks showed milder clinical signs and lower levels of DTMUV RNA in the lungs, liver, and brain. These results indicate that EDI-II-RFNp effectively protects ducks against the DTMUV challenge and could be a vaccine candidate to provide an effective and safe method for preventing and controlling DTMUV infection.
Las nanopartículas autoensambladas con los dominios de proteína E I y II del virus Tembusu del pato pueden inducir una respuesta inmunitaria más integral contra el desafío con el mismo virus. El virus Tembusu de los patos (DTMUV) es un flavivirus patógeno que causa una caída sustancial en la producción de huevos y graves trastornos neurológicos en las aves acuáticas domésticas. Se prepararon nanopartículas de ferritina autoensambladas con los dominios de la proteína E I y II (EDI-II) del virus Tembusu (EDI-II-RFNp) y se observó su morfología. Se realizaron dos experimentos independientes. En primer lugar, se vacunaron patos Cherry Valley de 14 días de edad con las partículas EDI-II-RFNp, con partículas EDI-II y con solución amortiguada de fosfato (PBS, pH 7,4), y se detectaron en suero anticuerpos especiales neutralizantes (VN), IL-4, IFN-γ y se detectó proliferación de linfocitos. En segundo lugar, a los patos vacunados con las partículas EDI-II-RFNp, EDI-II y PBS se les inyectó el virus Tembusu virulento, se observaron signos clínicos a los siete días posteriores a la infección (dpi) y se observaron los niveles de ARN mensajero del virus de Tembusu en el pulmón, el hígado y en el cerebro a los siete y 14 días después de la inoculación. Los resultados mostraron las nanopartículas casi esféricas ED?-II-RFNp con un diámetro de 16.46 ± 4.70 nm. Los niveles de anticuerpos específicos neutralizantes, IL-4, IFN-γ y la proliferación de linfocitos en el grupo inoculado con las partículas EDI-II-RFNp fueron significativamente más altos que en los de los grupos inoculados con las partículas EDI-II y con PBS. En la prueba de desafío con el virus Tembusu, se utilizaron los signos clínicos y los niveles de ARNm en tejidos para evaluar la protección inducida por las partículas EDI-II-RFNp. Los patos vacunados con las partículas EDI-II-RFNp mostraron signos clínicos más leves y niveles más bajos de ARN del virus Tembusu en los pulmones, el hígado y el cerebro. Estos resultados indican que las partículas EDI-II-RFNp protegen eficazmente a los patos contra el desafío con el virus Tembusu y podrían ser una vacuna candidata para proporcionar un método eficaz y seguro para prevenir y controlar la infección por dicho virus.
Subject(s)
Flavivirus Infections , Flavivirus , Poultry Diseases , Animals , Flavivirus Infections/veterinary , Interleukin-4 , Protein Domains , Immunity , DucksABSTRACT
<p><b>OBJECTIVE</b>To study the chemical constituents of the rhizomes of Smilax ferox which was widely used in the folk.</p><p><b>METHOD</b>The constituents of the rhizomes of S. ferox were isolated and purified by repeated silica gel column, MCI column, Sephadex LH-20 column and RP C18 column chromatography, and their structures were elueidated on the basis of spectral analysis.</p><p><b>RESULT</b>Six compounds were identified as dihydrokaempferol (1), kaempferol (2), astilbin (3), engeletin (4), resveratrol (5), beta-sitosterol (6), respectively.</p><p><b>CONCLUSION</b>All compounds were obtained from this plant for the first time.</p>