ABSTRACT
Glioblastoma é tumor primário mais frequente do sistema nervoso central e está associado a uma alta mortalidade. A formação de novos vasos (angiogênese) é um processo essencial para a manutenção desses tumores, o que torna importante a busca por terapias que interfiram neste processo, visando um melhor resultado no tratamento. A proteína stress inducible phophoprotein one (STI1) é uma co-chaperona que auxilia o dobramento de proteínas e também pode ser secretada em vesículas extracelulares (VE) e formar um complexo com a proteína príon celular (PrPC) na membrana plasmática, desencadeando diversas funções celulares, como proliferação, diferenciação e migração. O complexo STI1-PrPC também já foi associado à regulação da angiogênese em modelos de isquemia experimental, mas nada se conhece sobre o papel deste complexo na angiogênese tumoral. Um importante regulador da angiogênese é a hipóxia, que ocorre quando há diminuição dos níveis de oxigênio no tecido. Considerando a função das VEs em células tumorais e seu papel na secreção de STI1, sugere-se que a expressão e secreção de STI1 possa ser modulada pela hipóxia e contribuir na estimulação da angiogênese tumoral. Portanto esse projeto tem como objetivo investigar os mecanismos e a relevância da secreção de STI1 utilizando o modelo de glioblastoma murino GL-261. Animais transgênicos que expressam diferentes quantidades de STI1 foram inoculados com GL261 e aqueles que superexpressam a proteína (denominados TGA) apresentaram maior sobrevida e microvasculatura tumoral comprometida, com menor número de vasos totais e de menor calibre (> 20 um). A inoculação intratumoral do peptídeo STI1¬¬230-245 não alterou o crescimento tumoral de GL261 em animais tipo-selvagem e haploinsuficientes para STI1. Não houve alteração na quantidade de VE e de STI1 secretadas pro células GL261 submetidas à hipóxia. Meio condicionado e vesículas extracelulares de GL261 foram capazes de estimular a migração e formação de tubos de células endoteliais, porém ainda não foi possível determinar se a STI1 extracelular apresenta contribuição nesse fenótipo. Observamos uma tendência de pacientes com glioblastoma produzirem menor número de VE do que pacientes com astrocitomas de grau II e III, porém a diferença não foi significativa (AU)
Glioblastoma is the most frequent type of central nervous system primary tumors and are associated with a high mortality. The formation of new vessels (angiogenesis) is an essential process for the maintenance of these tumors, which makes important the search for therapies that interfere in this process, aiming at a better result in the treatment. The stress inducible phophoprotein one (STI1) is a co-chaperone that assists the folding of proteins and can also be secreted in extracellular vesicles (EV) and form a complex with the cellular prion protein (PrPC) in the plasma membrane, triggering several cellular functions such as proliferation, differentiation and migration. The STI1-PrPC complex has also been associated with the angiogenesis regulation in experimental ischemia models, but nothing is known about the role of this complex in tumor angiogenesis. An important angiogenesis regulator is the hypoxia, which occurs when tissue oxygen levels decrease. Considering the EVs role in tumor cells and their role in STI1 secretion, it is suggested that STI1 expression and secretion can be modulated by hypoxia and contribute to the stimulation of tumor angiogenesis. Therefore, this project aims to investigate the mechanisms and relevance of STI1 secretion using the GL-261 murine glioblastoma model. Transgenic animals expressing different amounts of STI1 were inoculated with GL261 and those that overexpress the protein (called TGA) presented higher survival and tumoral microvasculature with a lower number of total vessels and vessels with smaller caliber (> 20 µm). The STI1230-245 peptide intratumoral inoculation did not alter GL261 tumor growth in wild-type and haploinsufficient STI1 animals. There was no change in the amount of extracellular vesicles and STI1 secreted into GL261 cells submitted to hypoxia. Conditioned medium and extracellular vesicles of GL261 were able to stimulate the migration and formation of endothelial cell tubes, but it was not possible to determine yet if extracellular STI1 has a contribution to this phenotype. We observed a tendency for patients with glioblastoma to express less extracellular vesicles than patients with grade II and III astrocytomas, but the difference was not significant (AU)