ABSTRACT
Se llevó a cabo la fusión de protoplastos de cepas auxotróficas y la regeneración de protoplastos de la cepa parental en algunos casos previamente tratados con polietilenglicol (PEG) pm=6 000 al 50
, antes de ser efectuada la siembra en medio completo R2YE, con vistas a estudiar el efecto de este agente en condiciones no selectivas. En ambos casos las colonias más productoras de antibiótico fueron seleccionadas mediante determinación de actividad antibiótica en medio sólido y una segunda selección en medio líquido de producción específico para el antibiótico actinomicina D. Además, en la población de protoplastos regenerados, algunas colonias presentaban variaciones en su morfología, en sus requerimientos nutricionales y en los marcadores de resistencia a diferentes antibióticos probados. El análisis de ADN cromosómico de algunas variantes genéticas seleccionadas demostró la no existencia de reordenamientos cromosómicos que pudieran explicar estas variaciones
Subject(s)
Streptomyces/genetics , Dactinomycin/biosynthesis , ProtoplastsABSTRACT
Se llevó a cabo la fusión de protoplastos de cepas auxotróficas y la regeneración de protoplastos de la cepa parental en algunos casos previamente tratados con polietilenglicol (PEG) pm=6 000 al 50 %, antes de ser efectuada la siembra en medio completo R2YE, con vistas a estudiar el efecto de este agente en condiciones no selectivas. En ambos casos las colonias más productoras de antibiótico fueron seleccionadas mediante determinación de actividad antibiótica en medio sólido y una segunda selección en medio líquido de producción específico para el antibiótico actinomicina D. Además, en la población de protoplastos regenerados, algunas colonias presentaban variaciones en su morfología, en sus requerimientos nutricionales y en los marcadores de resistencia a diferentes antibióticos probados. El análisis de ADN cromosómico de algunas variantes genéticas seleccionadas demostró la no existencia de reordenamientos cromosómicos que pudieran explicar estas variaciones
Subject(s)
Dactinomycin/biosynthesis , Protoplasts , Streptomyces/geneticsABSTRACT
Pela fusäo protoplastos inativados por aquecimento a 60-C, de Streptomyces capoamus, cepa IA-M3122/182 (prototrófica, produtora de pigmento vermelho e do antibiótico antraciclínico ciclamicina) com protoplastos viáveis de Streptomyces melanochromogenes, cepa IA-M3183 (auxotrófica met- e produtora de actinomicina), foram obtidas cinco cepas com características sugestivas de recombinaçäo. Adicionalmente, foi observado que a simples produçäo e regeneraçäo de protoplastos do Streptomyces capoamus IA-M3122/182 levou à obtençäo de subculturas cuja produçäo de ciclamicina foi aumentada entre 3 e 7 vezes em relaçäo à cultura original