Characteristics of Norovirus capsid protein-specific CD8+ T-Cell responses in previously infected individuals.

Norovirus (NV) infection causes acute gastroenteritis in children and adults. Upon infection with NV, specific CD8+ T cells, which play an important role in anti-infective immunity, are activated in the host. Owing to the NV's wide genotypic variability, it is challenging to develop vaccines with cross-protective abilities against infection. To aid effective vaccine development, we examined specific CD8+ T-cell responses towards viral-structural protein (VP) epitopes, which enable binding to host susceptibility receptors. We isolated peripheral blood mononuclear cells from 196 participants to screen and identify predominant core peptides towards NV main and small envelope proteins using ex vivo and in vitro intracellular cytokine staining assays. Human leukocyte antigen (HLA) restriction characteristics were detected using next-generation sequencing. Three conservative immunodominant VP-derived CD8+ T-cell epitopes, VP294-102 (TDAARGAIN), VP2153-161 (RGPSNKSSN), and VP1141-148 (FPHIIVDV), were identified and restrictively presented by HLA-Cw * 0102, HLA-Cw * 0702, and HLA-A *1101 alleles, separately. Our findings provide useful insights into the development of future vaccines and treatments for NV infection.

Group A rotavirus gastroenteritis: post-vaccine era, genotypes and zoonotic transmission / Gastroenterite por rotavírus do grupo A: era pós-vacinal, genótipos e transmissão zoonótica

ABSTRACT This article provides a review of immunity, diagnosis, and clinical aspects of rotavirus disease. It also informs about the changes in epidemiology of diarrheal disease and genetic diversity of circulating group A rotavirus strains following the introduction of vaccines. Group A rotavirus is the major pathogen causing gastroenteritis in animals. Its segmented RNA genome can lead to the emergence of new or unusual strains in human populations via interspecies transmission and/or reassortment events.

RESUMO Este artigo fornece uma revisão sobre imunidade, diagnóstico e aspectos clínicos da doença causada por rotavírus. Também aponta as principais mudanças no perfil epidemiológico da doença diarreica e na diversidade genética das cepas circulantes de rotavírus do grupo A, após a introdução vacinal. O rotavírus do grupo A é o principal patógeno associado à gastroenterite em animais. Seu genoma RNA segmentado pode levar ao surgimento de cepas novas ou incomuns na população humana, por meio de transmissão entre espécies e eventos de rearranjo.

Allergic bronchopulmonary aspergillosis associated with eosinophilic gastroenteritis

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Detection of Rotavirus Genotypes in Korea 5 Years after the Introduction of Rotavirus Vaccines

Rotavirus (RV) is one of the most important viral etiologic agents of acute gastroenteritis (AGE) in children. Although effective RV vaccines (RVVs) are now used worldwide, novel genotypes and outbreaks resulting from rare genotype combinations have emerged. This study documented RV genotypes in a Korean population of children with AGE 5 yr after the introduction of RVV and assessed potential genotype differences based on vaccination status or vaccine type. Children less than 5-yr-old diagnosed with AGE between October 2012 and September 2013 admitted to 9 medical institutions from 8 provinces in Korea were prospectively enrolled. Stool samples were tested for RV by enzyme immunoassay and genotyped by multiplex reverse-transcription polymerase chain reaction. In 346 patients, 114 (32.9%) were RV-positive. Among them, 87 (76.3%) patients were infected with RV alone. Eighty-six of 114 RV-positive stool samples were successfully genotyped, and their combinations of genotypes were G1P[8] (36, 41.9%), G2P[4] (12, 14.0%), and G3P[8] (6, 7.0%). RV was detected in 27.8% of patients in the vaccinated group and 39.8% in the unvaccinated group (P=0.035). Vaccination history was available for 67 of 86 cases with successfully genotyped RV-positive stool samples; RotaTeq (20, 29.9%), Rotarix (7, 10.4%), unvaccinated (40, 59.7%). The incidence of RV AGE is lower in the RV-vaccinated group compared to the unvaccinated group with no evidence of substitution with unusual genotype combinations.

Caracterização molecular dos genótipos do rotavírus em pacientes pediátricos imunossuprimidos e não imunossuprimidos / Molecular characterization of rotavirus genotypes in immunosuppressed and non-immunosuppressed pediatric patients

OBJETIVO: Descrever a variabilidade genotípica do rotavírus grupo A (RVA) encontrado em pacientes pediátricos imunocompetentes e imunocomprometidos tratados no Hospital de Clínicas/Universidade Federal do Paraná (HC/UFPR), Curitiba, Paraná. MÉTODOS: Foi realizado um estudo transversal com 1.140 amostras de fezes coletadas, de abril de 2001 a dezembro de 2008, em pacientes ambulatoriais e pacientes hospitalizados com gastroenterite aguda encaminhados ao hospital. As técnicas usadas foram o método da aglutinação do látex e imunoensaio enzimático para diagnóstico de RVA. Foi realizada transcrição reversa, seguida por PCR multiplex semi-nested e sequência de nucleotídeos para caracterização do genótipo. Foram relatados dados de combinações de genótipos, clínicos, epidemiológicos, laboratoriais e sobre a presença de infecções hospitalares. RESULTADOS: Foi analisado um total de 80 amostras de fezes positivas para rotavírus. As associações mais frequentes entre os genótipos G e P foram: G4 P[8] (38,9%), G1 P[8] (30,5%), G9 P[8] (13,9%), G2 P[4] (6.9 %) e G3 P[8] 1,4%). O genótipo prevalente foi G2 P[4] depois da implementação da vacina nos anos de 2006 e 2008. Verificou-se que um total de 62,5% das crianças com idade abaixo de 12 meses estavam infectadas. Destas, 55,6% tinham grave desidratação, e 26,7% precisaram de cuidados intensivos. Encontrou-se uma frequência de 12,5% de infecções hospitalares. Não se observou correlação entre o genótipo e a gravidade da infecção nos pacientes estudados. CONCLUSÃO: As infecções por RVA podem associar-se a manifestações clínicas graves e é crucial a vigilância da variabilidade genotípica desse vírus para monitorizar a emergência de novas cepas e o impacto da imunização nesses pacientes.

OBJECTIVE: To describe the genotypic variability of group A rotavirus (RVA) found in immunosuppressed and non-immunosuppressed pediatric patients treated at the Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná (HC-UFPR), Curitiba, Paraná. METHODS: A cross-sectional study was conducted with 1,140 stool samples collected from April, 2001 to December, 2008 in outpatients and hospitalized patients with acute gastroenteritis referred to the hospital. RVA diagnosis was performed through the latex agglutination method and enzyme immunoassay. Reverse transcription followed by multiplex hemi-nested polymerase chain reaction (PCR) and nucleotide sequencing were used for genotype characterization. Genotype combinations, clinical data, epidemiological data, laboratory data, and presence of hospital-acquired infections were reported. RESULTS: A total of 80 rotavirus-positive stool samples were analyzed. The most frequent associations between genotypes G and P were: G4 P[8] (38.9%), G1 P[8] (30.5%), G9 P[8] (13.9%), G2 P[4] (6.9%), and G3 P[8] (1.4%). G2 P[4] was the most prevalent genotype after the vaccine implementation in the years 2006 and 2008. A total of 62.5% of children aged less than 12 months were found to be infected. Of these, 55.6% had severe dehydration and 26.7% needed intensive care. A frequency of 12.5% of nosocomial infections was found. No correlation was observed between genotype and severity of infection in the study patients. CONCLUSION: RVA infections can be associated with severe clinical manifestations, and the surveillance of genotypic variability of this virus is crucial to monitor the emergence of new strains and the impact of the immunization in these patients.

Probióticos para el binomio madre-hijo (I) / Probiotics for the mother-infant dyad (I)

El diseño de probióticos dirigidos a la población infantil ha despertado interés en los sectores médico e industrial, ya que podrían facilitar la creación de una barrera segura y eficaz frente a microrganismos patógenos y, además, contribuir a la maduración del tejido linfoide asociado a la mucosa intestinal. Actualmente, existen evidencias sobre el efecto beneficioso que algunos probióticos ejercen sobre la salud infantil, particularmente en lo concerniente a la reducción de la duración y severidad de los procesos diarreicos asociados a gastroenteritis infecciosas agudas, incluyendo aquellas asociadas a la antibioterapia. Por otra parte, ciertas cepas podrían ejercer efectos preventivos y terapéuticos sobre el eccema atópico y otras enfermedades de base alérgica, aunque serán necesarios más estudios clínicos antes de que se generalice el empleo de probióticos para el tratamiento de estas enfermedades

The design of probiotics specifically targeted to the infant population is attractive to both the medical community and the industrial sector since they could facilitate the creation of a safe and efficient barrier against pathogenic microorganisms and, in addition, they can contribute to the maturation of the gut-associated lymphoid tissue. At present, there is scientific evidence supporting the beneficial effect of certain probiotic strains on infant health, particularly in relation to the reduction in the duration and/or severity of diarrheal episodes associated with acute infectious gastroenteritis, including those secondary to antibiotic therapy. On the other hand, some strains may exert preventive and therapeutic effects on atopic eczema and other allergic diseases, although additional clinical studies will be required before probiotics can be used for the treatment of such conditions on a widespread basis

Vacuna pentavalente frente a rotavirus: Rotateq(R) / A pentavalent rotavirus vaccine: RotaTeq(R)

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Efecto de la ingesta de leche fermentada con Lactobacillus casei DN-114 001 sobre la flora intestinal / Intake of fermented milk containing Lactobacillus casei DN-114 001 and its effect on gut flora

Objetivo Estudiar las características de la flora microbiana intestinal de niños que recibieron en su dieta leche fermentada con Lactobacillus casei y Streptococcus termophilus y su repercusión en los valores de inmunoglobulinas secretoras. Material y métodos Estudio experimental aleatorizado, prospectivo, con 2 grupos paralelos. Se incluyeron un total de 35 niños (18 en el grupo experimental y 17 en el grupo control), con una edad media de 2 años (DE: 0,6 años; rango: 1-3 años). El grupo experimental recibió en su dieta leche fermentada (500 ml/día) con L. casei y S. termophilus durante 6 semanas y leche de vaca normal estándar durante 6 semanas más. El grupo control recibió leche de vaca normal estándar (500 ml/día) a lo largo de todo el estudio. Se evaluaron los valores de IgA secretora en saliva del grupo experimental al inicio y a las 6 semanas del estudio. Se recogieron heces para el estudio de la flora intestinal a las 0, 6 y 12 semanas en ambos grupos. Resultados Se observó un aumento estadísticamente significativo (p 5 0,0063) de un valor medio basal de 2,5 mg/dl al inicio hasta una media de 3,4 mg/dl a las 6 semanas. Así mismo, se observó un descenso de la flora aeróbica gramnegativa a la semana 6 en comparación con el grupo control (p 5 0,0203). La proporción de niños en los que se les aisló Lactobacillus spp. en la flora intestinal fue superior en el grupo experimental a partir de la semana 6 y llegando a ser estadísticamente significativa (p 5 0,028) a las 12 semanas. Conclusión El presente estudio aporta evidencia sobre la supervivencia de L. casei en el tracto intestinal y su efecto inmunoestimulante en un incremento significativo del la IgA secretora

Objective To study the gut flora in infants who received fermented milk containing Lactobacillus casei and Streptococcus termophilus and its effect on secretory immunoglobulin levels. Material and methods An experimental, randomized, prospective, parallel group study was carried out. Thirty-five infants were included (18 in the treatment group and 17 in the control group) with a mean age of 2 years (SD: 0.6 years; range: 1-3 years). The experimental group received both fermented milk (0.5 l/day) containing L. casei and S. termophilus for 6 weeks and standard cow's milk for the following 6 weeks. The control group received standard cow's milk (0.5 l/day) for 12 weeks. Secretory IgA levels in saliva were evaluated in the experimental group at the start of the study (baseline levels) and 6 weeks later. In both groups, stools were collected to study gut flora at 0, 6 and 12 week. Results Secretory IgA levels significantly increased (p 5 0.0063) from a mean baseline value of 2.5 mg/dl to a mean of 3.4 mg/dl at 6 weeks. Gram-negative aerobic flora were decreased in the experimental group after 6 weeks compared with the control group (p 5 0.0203). The number of infants with Lactobacillus spp in their gut flora was greater in the experimental group than in the control group at week 6 and this difference was statistically significant (p 5 0.028) at week 12. Conclusion The present study provides evidence of L. casei survival in the gastrointestinal tract and of its effect of increasing secretory IgA

Seroepidemiología de los rotavirus humanos en una comunidad del partido de Avellaneda, Provincia de Buenos Aires / Seroepidemiology of human rotavirus in a community of the Avellaneda district, Province of Buenos Aires

El presente trabajo describe los resultados obtenidos durante un estudio prospectivo llevado a cabo en 49 familias del Partido de Avellaneda, tendiente a conocer la seroepidemiología de los rotavirus humanos en nuestro medio. Cada familia fue incorporada estado la madre embarazada y el recien nacido fue estudiado hasta los 2 años de vida. La mayoría de las infecciones observadas durante el primer año fueron primarias (0,64 infecciones por niño-año; el 91,3% en niños seronegativos; p < 0,005). Esto coindidió con el período de mayor suceptibilidad a la diarrea por rotavirus (0,25 casos por niño-año; p < 0,01). La incidencia de infecciones en toda la población fue 0,63 casos por persona-año, sin variaciones signficativas para cada grupo de edad. El 61,6% de ellas fueron reinfecciones y en su gran mayoría asintomáticas. Por último se demonstró una relación signficativa entre el nivel de IgG específica circulante y la protección contra la infección y la diarrea causada por los rotavirus, durante los períodos de 6 meses estudiados (p < 0,005 para la infección; p < 0,03 para la diarrea). Aunque se encontró un mayor porcentaje de personas con anticuerpos y mayores niveles a medida que aumentaba la edad (p < 0,005), la incidencia de infecciones por rotavirus no presentó variaciones significativas con la misma. De acuredo con la alta incidencia de reinfecciones encontrada y por haber hallado la total desaparición del nivel de anticuerpos en un 5% de las infecciones un año después, se postula que la protección asociada al nivel de anticuerpos circulantes disminuye rápidamente luego de los 6 meses (AU)

Seroepidemiología de los rotavirus humanos en una comunidad del partido de Avellaneda, Provincia de Buenos Aires / Seroepidemiology of human rotavirus in a community of the Avellaneda district, Province of Buenos Aires

El presente trabajo describe los resultados obtenidos durante un estudio prospectivo llevado a cabo en 49 familias del Partido de Avellaneda, tendiente a conocer la seroepidemiología de los rotavirus humanos en nuestro medio. Cada familia fue incorporada estado la madre embarazada y el recien nacido fue estudiado hasta los 2 años de vida. La mayoría de las infecciones observadas durante el primer año fueron primarias (0,64 infecciones por niño-año; el 91,3% en niños seronegativos; p < 0,005). Esto coindidió con el período de mayor suceptibilidad a la diarrea por rotavirus (0,25 casos por niño-año; p < 0,01). La incidencia de infecciones en toda la población fue 0,63 casos por persona-año, sin variaciones signficativas para cada grupo de edad. El 61,6% de ellas fueron reinfecciones y en su gran mayoría asintomáticas. Por último se demonstró una relación signficativa entre el nivel de IgG específica circulante y la protección contra la infección y la diarrea causada por los rotavirus, durante los períodos de 6 meses estudiados (p < 0,005 para la infección; p < 0,03 para la diarrea). Aunque se encontró un mayor porcentaje de personas con anticuerpos y mayores niveles a medida que aumentaba la edad (p < 0,005), la incidencia de infecciones por rotavirus no presentó variaciones significativas con la misma. De acuredo con la alta incidencia de reinfecciones encontrada y por haber hallado la total desaparición del nivel de anticuerpos en un 5% de las infecciones un año después, se postula que la protección asociada al nivel de anticuerpos circulantes disminuye rápidamente luego de los 6 meses

Caracterización de rotavirus asociados a gastroenteritis infantil humana / Characterization of rotavirus associated to human infant gastroenteritis

Se hace un estudio de los principales agentes virales asociados a cuadros diarreicos en niños venezolanos, a fin de caracterizarlos y establecer sus patrones epidemiológicos

Surtos familiares de gastroenterite aguda associados a rotavírus em Belém, Pará / Self-limited outbreak fo acute diarrhoea affecting three families in Belem, Para

Durante os microssurtos ocorridos em Belém, Pará, abril de 1986, foram estudadas 26 pessoas, distribuídas em 3 famílias residentes no bairro da Pedreira. Exames com vistas à detecçäo de bactérias, parasitos e agentes viróticos foram realizados nos espécimes fecais dos indivíduos envolvidos no surto, encontrando-se como único patógeno os rotavirus. Quatro amostras positivas para rotavírus foram detectadas pelo método imunoenzimático ("ELISA"), sendo esses vírus classificados como pertencentes ao subgrupo exhibirám os mesmos perfis eletroforéticos. A pesquisa de anticorpos grupo-específicos para rotavírus, através do método de "ELISA", revelou 3 soroconversöes, e que 84.2% dos adultos apresentaram níveis estacionários

Enzimoinmunoanalisis para rotavirus con nylon como fase solida / Enzyme-linked immunoassay for ratavirus using nylon as solid phase

El presente trabajo describe un enzimoinmunoanálisis (EIA) para detectar Rotavirus en heces usando anticuerpos preparados en conejo inmovilizaods en nylon como fase de captura, y un segundo anticuerpo, preparado en cabra conjugado a enzima como fase de revelado. El conjugado se preparó usando peroxidas de rábano picante mediante la técnica de oxidación con periodato de Nakane. La fase sólida consistió en dados de nylon (66 CNL) de 3 mm de lado, los que fueron sometidos a hidrólisis parcial con ácido para liberar los grupos amino reactivos. El acople de anticuerpo de captura a la fase sólida se hizo mediante el uso de un brazo químico de glutarraldehido y resultó en una unión covalente entre la gamma globulina y el nylon. Como sustrato de revelado se usó o-fenilendiamina en buffer fosfato citrato pH 5,0 con 0,5% de peróxido de hidrógeno. El EIA se realizó con extractos acuosos de heces que fueron incubados con un dado de nylon sensibilizado con anticuerpos y posteriormente revelado incubado con el conjugado y posterior agregado del sustrato. Se leyerion como positivo todas aquellas muestras que desarrollaron color y cuya DO a 492 nm fue superior a 0,350. El método mostró perfecta correlación con muestras positivas y testigos negativos frente a un reactivo obtenido comercialmente (AU)

Enzimoinmunoanalisis para rotavirus con nylon como fase solida / Enzyme-linked immunoassay for ratavirus using nylon as solid phase

El presente trabajo describe un enzimoinmunoanálisis (EIA) para detectar Rotavirus en heces usando anticuerpos preparados en conejo inmovilizaods en nylon como fase de captura, y un segundo anticuerpo, preparado en cabra conjugado a enzima como fase de revelado. El conjugado se preparó usando peroxidas de rábano picante mediante la técnica de oxidación con periodato de Nakane. La fase sólida consistió en dados de nylon (66 CNL) de 3 mm de lado, los que fueron sometidos a hidrólisis parcial con ácido para liberar los grupos amino reactivos. El acople de anticuerpo de captura a la fase sólida se hizo mediante el uso de un brazo químico de glutarraldehido y resultó en una unión covalente entre la gamma globulina y el nylon. Como sustrato de revelado se usó o-fenilendiamina en buffer fosfato citrato pH 5,0 con 0,5% de peróxido de hidrógeno. El EIA se realizó con extractos acuosos de heces que fueron incubados con un dado de nylon sensibilizado con anticuerpos y posteriormente revelado incubado con el conjugado y posterior agregado del sustrato. Se leyerion como positivo todas aquellas muestras que desarrollaron color y cuya DO a 492 nm fue superior a 0,350. El método mostró perfecta correlación con muestras positivas y testigos negativos frente a un reactivo obtenido comercialmente

Surtos familiares de gastroenterite aguda associados a rotavírus em Belém, Pará / Self-liited outbreak fo acute diarrhoea affecting three families in Belem, Para

Durante os microssurtos ocorridos em Belém, Pará, abril de 1986, foram estudadas 26 pessoas, distribuídas em 3 famílias residentes no bairro da Pedreira. Exames com vistas à detecçäo de bactérias, parasitos e agentes viróticos foram realizados nos espécimes fecais dos indivíduos envolvidos no surto, encontrando-se como único patógeno os rotavirus. Quatro amostras positivas para rotavírus foram detectadas pelo método imunoenzimático ("ELISA"), sendo esses vírus classificados como pertencentes ao subgrupo exhibirám os mesmos perfis eletroforéticos. A pesquisa de anticorpos grupo-específicos para rotavírus, através do método de "ELISA", revelou 3 soroconversöes, e que 84.2

dos adultos apresentaram níveis estacionários (AU)