ABSTRACT
Baloxavir marboxil (BXM) is a cap-dependent nucleic acid endonuclease inhibitor, which exerts its antiviral effects after being metabolized to its active form baloxavir acid (BXA). Ethylenediamine tetra-acetic acid (EDTA) and heparin are the two most used anticoagulants in clinical blood sample collection to estimate drug levels in plasma. However, compared to heparin plasma, there is a lack of clinical pharmacokinetic data of BXA using EDTA anticoagulant tubes for blood collection. In the present study, an efficient, rapid, and sensitive ultra-high performance liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/MS) method was developed and validated for simultaneous quantification of BXM and its active metabolite BXA in human plasma with its isotopic baloxavir-d5 (BXA-d5) as internal standard (IS). Plasma samples (50⯵L) were undergone using acetonitrile containing 0.1â¯% formic acid a precipitant. Chromatographic separation was achieved by a Waters XBridge®C8 (2.1â¯mm × 50â¯mm, 2.5⯵m) column. The gradient mobile phase was 0.1â¯% formic acid in water (A, pH 2.8) and 0.1â¯% formic acid in acetonitrile (B) and delivered at a flow rate of 0.6â¯mL/min for 4.5â¯min. BXM and BXA were monitored using a positive electrospray triple quadrupole mass spectrometer (TRIPLE QUAD™ 6500+) via multiple reaction monitoring mode. The mass-to-charge ratios (m/z) were 572.2â247.0, 484.2â247.0 and 489.2â252.0 for BXM, BXA, and BXA-d5 (IS). Calibration curves exhibited excellent linearity in the range of 0.1-10â¯ng/mL for BXM (r2 > 0.996), and 0.3-300â¯ng/mL for BXA (r2 > 0.998). Within-run and between-run precisions in coefficients of variations were less than 11.62â¯% for BXM and less than 7.47â¯% for BXA, and accuracies in relative error were determined to be within -7.78â¯% to 5.70â¯% for BXM and -6.67â¯% to 8.56â¯% for BXA. Extraction recovery efficiency was 92.76â¯% for BXM, 95.32â¯% for BXA, and 99.26â¯% for BXA-d5, respectively. The matrix effect of BXM and BXA was in line with the requirements, where the relative deviation of the accuracy was less than 6.67â¯% and the precision was less than 6.69â¯%. The validated efficient and simple UHPLC-MS/MS method was successfully used in the pharmacokinetic study of BXM and BXA in healthy human volunteers with K2EDTA and heparin tubes for blood collection. EDTA might compete with BXA for chelating metal ions and thereby decrease the plasma ratio in whole blood, leading to approximately 50â¯% lower measurement of pharmacokinetic parameters as compared with those obtained from heparin plasma anticoagulant tubes.
Subject(s)
Anticoagulants , Dibenzothiepins , Oxazines , Pyridines , Pyridones , Tandem Mass Spectrometry , Humans , Tandem Mass Spectrometry/methods , Chromatography, High Pressure Liquid/methods , Anticoagulants/blood , Anticoagulants/pharmacokinetics , Dibenzothiepins/pharmacokinetics , Dibenzothiepins/blood , Pyridones/pharmacokinetics , Pyridones/blood , Pyridines/pharmacokinetics , Pyridines/blood , Oxazines/pharmacokinetics , Oxazines/blood , Morpholines/pharmacokinetics , Morpholines/blood , Triazines/pharmacokinetics , Triazines/blood , Reproducibility of Results , Edetic Acid/pharmacokinetics , Limit of Detection , Heparin/blood , Heparin/pharmacokineticsABSTRACT
No disponible
Subject(s)
Humans , Animals , Male , Dogs , Guinea Pigs , Heparin/blood , Heparin/classification , Heparin , Heparin/history , Heparin/pharmacology , Heparin/therapeutic use , Venous Thromboembolism/pathology , Venous Thromboembolism/prevention & control , Venous Thromboembolism/therapyABSTRACT
INTRODUÇÃO: A mudança na marca da heparina rotineiramente utilizada nas cirurgias cardíacas no Brasil tem sido acompanhada por aumento do número de casos de discrasia sanguínea, aumento de reoperações e efeitos adversos em nossa Instituição e em outras. MÉTODOS: Foram avaliadas no Laboratório de Tecido Conjuntivo do HUCFF/UFRJ, quatro preparações disponíveis e comparadas à heparina retirada do mercado (Liquemine) e ao padrão de controle internacional. As preparações de heparina foram submetidas à ressonância nuclear magnética para avaliação da integridade estrutural, bem como avaliação de sua eficácia anticoagulante. RESULTADOS: Houve diferença significativa quanto à atividade anticoagulante entre as amostras. Também se observou a presença de contaminação com dermatam sulfato, amostras degradadas quimicamente e com significativa alteração do peso molecular. CONCLUSÃO: Das amostras estudadas, nenhuma atendeu aos requisitos de segurança para utilização em cirurgias cardíacas com circulação extracorpórea. Nenhuma delas apresentou a qualidade semelhante ao Liquemine, não mais disponível no mercado brasileiro.
INTRODUCTION: The change in the heparin solution trade mark in Brazil that had been commonly used in cardiac surgery has shown increased number in the coagulopathy, re-exploration and other side effects in our Institution and others. METHODS: All four different heparin solutions available in the Brazilian market were studied in the Connective Tissue Lab, HUCFF, UFRJ and compared to the Liquemine (out of the market) and the international control solution. All samples were evaluated by magnetic nuclear resonance as well as their anticoagulant effectiveness. RESULTS: There were significant differences among them regarding the anticoagulant activity. It was also observed contamination with other dermatan sulfate, samples chemically degraded and with significant change in the molecular weight. CONCLUSION: Among the studied samples, none of them can offer security in cardiac surgeries on pump. None of them has demonstrated similar quality to Liquemine, which is not available in the Brazilian market.
Subject(s)
Humans , Anticoagulants/standards , Cardiovascular Surgical Procedures , Drug Industry/standards , Heparin/standards , Anticoagulants/blood , Anticoagulants/chemistry , Brazil , Chromatography, Gel , Drug Contamination , Dermatan Sulfate/blood , Heparin/blood , Heparin/chemistry , Hexuronic Acids/blood , Magnetic Resonance Spectroscopy , Molecular Weight , Partial Thromboplastin Time , Quality Control , Reference StandardsABSTRACT
Objetivo: Avaliar a morbidade venosa dos membros inferiores de pacientes submetidos à ressecção da veia femoral superficial. Método: No período de dezembro de 1995 a maio de 2001, foram avaliados oito pacientes submetidos a nove ressecções de veia femoral superficial utilizada para o tratamento de infecção de prótese vascular do segmento aorto-ilíaco-femoral. Todos os pacientes tiveram o sistema venoso dos membros inferiores avaliados de acordo com a classificação CEAP para a insuficiência venosa crônica (sintomatologia clínica, etiologia, locais anatômicos e fisiopatologia) e foram submetidos ao estudo eco-Doppler venoso antes e após a cirurgia. Resultados: Nenhum paciente apresentou edema clinicamente significativo ou sinais de insuficiência venosa crônica nos membros inferiores doadores dos auto-enxertos venosos. O período de acompanhamento variou de 18 a 77 meses. Conclusão: A utilização da veia femoral superficial é uma alternativa cirúrgica segura que pode ser oferecida aos pacientes para o tratamento de infecção de prótese vascular. É mínima a morbidade venosa dos membros inferiores após a ressecção da veia femoral superficial.
Subject(s)
Humans , Male , Female , Adult , Middle Aged , Lower Extremity/pathology , Femoral Vein , Venous Insufficiency , Chronic Disease , Heparin/blood , Nervous System/blood supply , Time FactorsABSTRACT
Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da injeção de heparina e do tratamento com gemfibrozil na cinética plasmática de uma emulsão de quilomícrons artificiais em pacientes hipertrigliceridêmicos. Os efeitos da heparina também foram estudados em indivíduos normolipidêmicos. Foram estudados inicialmente 39 indivíduos, 27 hipertrigliceridêmicos (18 homens e 9 mulheres, idade 48,0 ñ 14,0 anos) com triglicérides (TG) e colesterol total do plasma (CT), expressos em mediana (por cento 25; por cento 75), de 379,0 (320,0; 718,0) mg/dL e 290,0 (236,0; 317,0) mg/dL. Os pacientes foram comparados a 12 normolipidêmicos (7 homens e 5 mulheres, idade 43,0 ñ 13,0 anos) com TG e CT do plasma respectivamente de 81,0 (57,0; 155,0) e 182,0 (149,0; 208,0) mg/dL...
Subject(s)
Humans , Male , Female , Adolescent , Adult , Middle Aged , Emulsions , Gemfibrozil/administration & dosage , Heparin/blood , Hypertriglyceridemia , Lipoproteins/metabolism , Chylomicrons/metabolism , Kinetics , Lipids , Lipolysis , TriglyceridesABSTRACT
Com o objetivo de quantificar o nível sérico de heparina, sua atenuaçao em funçao do tempo e o valor residual após a neutralizaçao com sulfato de protamina, foram coletadas amostras de sangue em tempos pré-estabelecidos em 27 pacientes submetidos a revascularizaçao do miocárdio com circulaçao extracorpórea. Após a heparinizaçao (400 Ul/kg) as amostras de sangue foram coletadas nos tempos de 5, 10, 30 e 60 minutos e subseqüentemente a cada 3O minutos, dependendo do tempo da circulaçao extracorpórea. A cada hora, após a heparinizaçao, administrava-se nova dose de heparina (200 Ul/kg). As amostras eram armazenadas à temperatura de 4 graus Celsius antes do processo de extraçao da heparina que foi realizado por métodos físico-químicos. As dosagens mostraram que 5 minutos após a heparinizaçao os pacientes apresentaram concentraçao sangüínea máxima de heparina e, ao tempo de 60 minutos, a sua concentraçao é de aproximadamente 68 por cento da encontrada aos 5 minutos. Ao tempo de 90 minutos, ou seja, após a reheparinizaçao a concentraçao de heparina é 96 por cento da evidenciada aos cinco minutos e, após a neutralizaçao com sulfato de protamina (1,5: 1), ainda se encontra um valor residual de heparina que corresponde a 4 por cento do observado inicialmente. Observou-se que os pacientes mais idosos têm uma tendência a manter um nível sérico mais prolongado e através da equaçao (Conc. de heparina = 104,7 + (- 12,85 x minutos (ln)) + O,25 x idade) podemos estimar a concentraçao de heparina em determinado tempo.
Subject(s)
Humans , Male , Female , Adult , Middle Aged , Cardiac Output, Low/surgery , Extracorporeal Circulation , Heparin/blood , Myocardial Revascularization , Heparin/administration & dosage , Regression Analysis , Time FactorsABSTRACT
A concentraçäo de heparina foi determinada no sangue de pacientes submetidos a cirurgia cardíaca com circulaçäo extracorpórea, antes e depois da sua neutralizaçäo com protamina. Determinou-se também a quantidade de heparina no sangue coletado dos drenos da cavidade torácica 12 horas após a operaçäo. Cerca de 15 por cento da heparina, a despeito de um tempo de coagulaçäo normal, permanece na circulaçäo após a administraçäo de protamina, e também é encontrada no sangue coletado dos drenos da cavidade torácica. O peso molecular médio dessa heparina circulante, bem como da encontrada nos drenos torácicos, foi ao redor de 7 KiloDaltons (KDa), comparando ao de 15 KDa da heparina dosada no sangue antes da sua neutralizaçäo pela protamina. Graças a achados anteriores de que as heparinas de baixo peso molecular, responsáveis pelo sangramento da ferida operatória, podem ser neutralizadas por trifosfato de adenosina (ATP), a cavidade torácica de pacientes consecutivos e näo selecionados, divididos em 3 grupos de 15, foi lavada com diferentes concentraçöes, ou de ATP (10 elevado a -5, 5 x 10 elevado a -4 M) ou com protamina, ou, ainda, apenas com soluçäo fisiológica (grupo controle). Observou-se uma curva dose-resposta linear entre a diminuiçäo do sangramento com o aumento da dose da ATP utilizada. ATP, numa concentraçäo de 10 elevado a -4 M, diminuiu significativamente o volume de sangue drenado da cavidade torácica dos pacientes (média de 288 + ou - 188 ml), quando comparado ao grupo que recebeu protamina (média de 496 + ou - 210 ml), e ao grupo controle (média 564 + ou - 288 ml) (p<0,05). ATP numa concentraçäo de 5 x 10 elevado a -5 M reduziu as perdas sanguíneas a 370 + ou - 155 ml dos pacientes (p<0,08). A média de sangramento, no total dos pacientes que receberam ATP, foi de 314 + ou - 170 ml(p<0,08).
Subject(s)
Humans , Male , Female , Middle Aged , Adenosine Triphosphate/pharmacology , Heparin Antagonists/pharmacology , Heparin/adverse effects , Myocardial Revascularization , Postoperative Hemorrhage , Dose-Response Relationship, Drug , Electrophoresis, Agar Gel , Extracorporeal Circulation , Heparin/blood , Molecular Weight , Protamines/pharmacologyABSTRACT
Se estudiaron 55 pacientes ambulatorios, de ambos sexos (28 hombres y 27 mujeres), con una edad promedio de 60,93 años (32-80 años) que presentaban menos del 120
de sobrepeso. Fueron divididos en dos grupos normo o hiporreactor a la heparina de acuerdo con los resultados obtenidos en la prueba de tolerancia a la heparina (PTH). Cada grupo fue comparable en edad, talla y tanto por ciento de sobrepeso. De acuerdo con esta clasificación no hubo diferencias significativas en la actividad del sistema lipolítico al comparar los grupos entre sí. Se identificaron dos grupos de pacientes con sensibilidades diferentes a la heparina mediante un análisis de Clusters. Se encontró un descenso significativo (p<0,05) en las actividades del sistema lipolítico total y de la lipasa lipoproteica, así como un aumento (p<0,05) en los niveles endógenos de heparina en el grupo con tipo II de respuesta, al compararlos con el tipo I. No se encontraron cambios de trascendencia en las actividades de la lipasa basal y hepática al comparar los grupos entre sí
Subject(s)
Adult , Middle Aged , Aged , Humans , Male , Female , Heparin/blood , LipolysisABSTRACT
Se estudiaron 55 pacientes ambulatorios, de ambos sexos (28 hombres y 27 mujeres), con una edad promedio de 60,93 años (32-80 años) que presentaban menos del 120% de sobrepeso. Fueron divididos en dos grupos normo o hiporreactor a la heparina de acuerdo con los resultados obtenidos en la prueba de tolerancia a la heparina (PTH). Cada grupo fue comparable en edad, talla y tanto por ciento de sobrepeso. De acuerdo con esta clasificación no hubo diferencias significativas en la actividad del sistema lipolítico al comparar los grupos entre sí. Se identificaron dos grupos de pacientes con sensibilidades diferentes a la heparina mediante un análisis de Clusters. Se encontró un descenso significativo (p<0,05) en las actividades del sistema lipolítico total y de la lipasa lipoproteica, así como un aumento (p<0,05) en los niveles endógenos de heparina en el grupo con tipo II de respuesta, al compararlos con el tipo I. No se encontraron cambios de trascendencia en las actividades de la lipasa basal y hepática al comparar los grupos entre sí
Subject(s)
Adult , Middle Aged , Humans , Male , Female , Heparin/blood , Lipolysis/drug effectsABSTRACT
Para disminuir el riesgo de coagulación en el dializador, la heparina ha sido ampliamente usada en pacientes sometidos a hemodiálisis (HD). El efecto anticoagulante de la heparina depende de los niveles de antirombina III (AT III) de la sangre. La heparina acelera la reacción entre la AT III y las enzimas que participan en la coagulación sanguínea formando complejos inactivos equimolares. En trabajos recientes se muestran que los niveles de ATIII son contradictorios en HD. Los objetivos de este trabajo son: 1) evaluar los niveles de AT III en pacientes con insuficiencia renal crónica (IRC) en HD); 2) valorar las variaciones de AT III durante y después de la HD; 3) medir la heparinemia durante y después del tratamiento idalítico; 4) encontrar una prueba de laboratorio simple, pero sensible para medir el nivel de anticoagulación. Se estudian 20 pacientes (7 mujeres y 134 varones) con una edad promedio de 30 años (18 a 55 años) portadores de IRC terminan en plan de HD intermitente, con un filtrado glomerular inferior a 5 ml/min.; 11 pacientes fueron estudiados en 2 oportunidades lo que hace un total de 31 determinaciones. La forma de administración de la heparina fue por vía EV intermitente. La AT III, heparinemia y KPTT, son dosados a partir de muestras sanguíneas antes, durante y luego de cada sesión de HD; además en 12 pacientes se tomaron muestras 24 horas después de la HDEl nivel de AT III en pacientes con IRC se encontró dentro de límites normales. No se encontraron variaciones entre los valores iniciales y durante la HD, lo que podría deberse a que el aumento de la heparinemia es transitorio. El perfil de variación de la heparinemia es similar al observado con el KPTT. En nuestros resultados encontramos que la profilaxis de heparina durante la diálisis en pacientes urémicos pueden ser dadas en una dosis suficiente para prolongar el KPTT a 5 ó 6 veces el valor inicial, sin ningún riesgo de coagulación en el dializador y sin ningún riesgo de inducir una pérdida o consumo de AT III
Subject(s)
Adolescent , Adult , Middle Aged , Humans , Male , Female , Antithrombin III/analysis , Renal Dialysis , Heparin/blood , Blood Coagulation Tests , Heparin/pharmacologyABSTRACT
Para disminuir el riesgo de coagulación en el dializador, la heparina ha sido ampliamente usada en pacientes sometidos a hemodiálisis (HD). El efecto anticoagulante de la heparina depende de los niveles de antirombina III (AT III) de la sangre. La heparina acelera la reacción entre la AT III y las enzimas que participan en la coagulación sanguínea formando complejos inactivos equimolares. En trabajos recientes se muestran que los niveles de ATIII son contradictorios en HD. Los objetivos de este trabajo son: 1) evaluar los niveles de AT III en pacientes con insuficiencia renal crónica (IRC) en HD); 2) valorar las variaciones de AT III durante y después de la HD; 3) medir la heparinemia durante y después del tratamiento idalítico; 4) encontrar una prueba de laboratorio simple, pero sensible para medir el nivel de anticoagulación. Se estudian 20 pacientes (7 mujeres y 134 varones) con una edad promedio de 30 años (18 a 55 años) portadores de IRC terminan en plan de HD intermitente, con un filtrado glomerular inferior a 5 ml/min.; 11 pacientes fueron estudiados en 2 oportunidades lo que hace un total de 31 determinaciones. La forma de administración de la heparina fue por vía EV intermitente. La AT III, heparinemia y KPTT, son dosados a partir de muestras sanguíneas antes, durante y luego de cada sesión de HD; además en 12 pacientes se tomaron muestras 24 horas después de la HDEl nivel de AT III en pacientes con IRC se encontró dentro de límites normales. No se encontraron variaciones entre los valores iniciales y durante la HD, lo que podría deberse a que el aumento de la heparinemia es transitorio. El perfil de variación de la heparinemia es similar al observado con el KPTT. En nuestros resultados encontramos que la profilaxis de heparina durante la diálisis en pacientes urémicos pueden ser dadas en una dosis suficiente para prolongar el KPTT a 5 ó 6 veces el valor inicial, sin ningún riesgo de coagulación en el dializador y sin ningún riesgo de inducir una pérdida o consumo de AT III (AU)
Subject(s)
Adolescent , Adult , Middle Aged , Humans , Male , Female , Antithrombin III/analysis , Renal Dialysis , Heparin/blood , Heparin/pharmacology , Blood Coagulation TestsABSTRACT
El objetivo de la investigación fue la obtención de un método que permitiera la determinación de la heparina y otros glicosaminoglicanos (GAG) naturales en las cantidades pequeñas en que se los encuentra en los líquidos biológicos. El método debía ser sencillo y de la mayor especificidad posible. Se ha logrado poner a punto la reacción de los hidratos de carbono con el indol en medio ácido, de manera tal que, dependiendo de las condiciones de una hidrólisis previa también en medio ácido, sea específica, bien para la heparina y el dermatán sulfato, o bien para el condroitín 4-sulfato o el condroitín 6-sulfato. La albúmina humana y las sales inorgánicas no interfieren con la reacción, lo que valoriza el método para su aplicación a material biológica. La sencillez de la técnica, pues no requiere ninguna precipitación previa, acrecienta en mayor medida su valor potencial para la Bioquímica analítica (AU)
Subject(s)
Humans , In Vitro Techniques , Heparin/analysis , Chondroitin Sulfates/analysis , Glycosaminoglycans/urine , Heparin/blood , Heparin/urine , Chondroitin Sulfates/blood , Chondroitin Sulfates/urine , Indoles/diagnosisABSTRACT
El objetivo de la investigación fue la obtención de un método que permitiera la determinación de la heparina y otros glicosaminoglicanos (GAG) naturales en las cantidades pequeñas en que se los encuentra en los líquidos biológicos. El método debía ser sencillo y de la mayor especificidad posible. Se ha logrado poner a punto la reacción de los hidratos de carbono con el indol en medio ácido, de manera tal que, dependiendo de las condiciones de una hidrólisis previa también en medio ácido, sea específica, bien para la heparina y el dermatán sulfato, o bien para el condroitín 4-sulfato o el condroitín 6-sulfato. La albúmina humana y las sales inorgánicas no interfieren con la reacción, lo que valoriza el método para su aplicación a material biológica. La sencillez de la técnica, pues no requiere ninguna precipitación previa, acrecienta en mayor medida su valor potencial para la Bioquímica analítica
Subject(s)
Humans , Chondroitin Sulfates/analysis , Glycosaminoglycans/urine , Heparin/analysis , In Vitro Techniques , Chondroitin Sulfates/blood , Chondroitin Sulfates/urine , Heparin/blood , Heparin/urine , IndolesABSTRACT
Se estudió el comportamiento de la prueba de tolerancia a la heparina in vitro, con plasma humano normal y patológico, y se obtuvieron cinco tipos de respuesta. Cada tipo de respuesta está constituido por un grupo homogéneo e independiente. Al estudiar comparativamente la distribución de individuos normales y enfermos, en los tipos de respuestas descritos, se obtuvo una diferencia significativa entre controles y diabéticos arterioscleróticos para el tipo III, y entre controles y sujetos con trombosis venosa para el tipo II. Esta clasificación ofrece una descripción de la heterogeneidad de la respuesta a la heparina in vitro, la cual puede ser de utilidad en estudios posteriores(AU)