ABSTRACT
Estudos genéticos envolvendo a clonagem e expressão de genes codificantes de proteínas associadas a importantes processos biofisiológicos e características vantajosas do ponto de vista econômico têm tornado as pesquisas biotecnológicas cada vez mais promissoras. Pela importância zootécnica, o gene codificador do hormônio de crescimento (GH) de várias espécies de peixes tem sido isolado, sequenciado, clonado e expresso em sistemas de expressão heteróga. O tambaqui (Colossoma macropomum), peixe amazônico de grande valor comercial, teve o cDNA do GH recentemente isolado e caracterizado. Neste trabalho, objetivou-se expressar o gene do hormônio de crescimento de tambaqui (tgh) na levedura metilotrófica Pichia pastoris. A sequência nucleotidica sitetica deste gene contendo os códons preferenciais para expressão em P. pastoris foiobtida, seguido de subclonagem no vetor de expressão e secreção pPIC9. A expressão foi regulada pelo promotor AOX1 e a proteína recombinante endereçada para o sobrenadante da cultura graças à sequência sinal codificante do fator-? de Saccharomyces cerevisiae. A análise em gel SDS de poliacrilamida revelou a presença de uma banda proteica de aproximadamente 23kDa, de acordo com o esperado para o GH recombinante de tambaqui