[Seroprevalence of rubella in urban and rural populations, Guaratinguetá]. / Soroprevalência da rubéola na população urbana e rural de Guaratinguetá

OBJECTIVE: To investigate seroprevalence of rubella antibodies in a 15 to 39 year old population in the municipal district of Guaratinguetá. METHODS: The 996 samples studied were collected in urban and rural zones, after informed and elucidated consent from men and women stratified by age (15 -39 years). Rubella IgG antibodies were detected by ELISA using the commercial kit Rubenostika IgGII (Organon Teknika THE, Holland). Age groups were stratified in 3 categories: 15-19; 20-29 and 30-39 years of age. Statistical analyses were accomplished with the software MINITAB version 14.0 (Minitab Inc, USA). RESULTS: The proportion of seropositives for antibodies of the IgG class were: 92.7.% positive for 15-19 years; 82.4% for 20 to 29 years and 90.7% for 30-39 years, with a significant difference in the seropositive proportions by age group (p <0.001). Variation of intensity of antibody response was calculated and results show a significant difference (p = 0.002) between means of the 3 age groups studied. In relation to rural and urban zone average of the ratio DO/CO for each age group, a significant tendency towards a lower average was observed in the rural zone. The same was true when the seropositive proportions were calculated. CONCLUSION: Results showed that the percentage and individuals with antibodies of the IgG class against rubella in the 20-29 year age group was lower than that in the younger and older age groups. Furthermore, the difference between seropositivity in the urban and rural zones discloses susceptibility with a potential for continued circulation of the virus in this zone.

Soroprevalência da rubéola na população urbana e rural de Guaratinguetá / Seroprevalence of rubella in urban and rural populations, Guaratinguetá

OBJETIVO: Determinar a prevalência de anticorpos para a rubéola na população de 15 a 39 anos no município de Guaratinguetá, São Paulo, SP. MÉTODOS: Neste estudo, 996 amostras foram colhidas após consentimento informado e esclarecido entre homens e mulheres na faixa etária de 15 a 39 anos. Os anticorpos da classe IgG foram detectados por ELISA usando kit comercial Rubenostika IgGII (Organon Teknika AS, Holland). As faixas etárias foram estratificadas em três categorias: 15-19 anos; 20-29 anos e 30-39 anos. As análises estatísticas foram realizadas pelo software MINITAB versão 14.0 (Minitab Inc, EUA). RESULTADOS: A proporção de soros reagentes para anticorpos da classe IgG nas faixas etárias estudadas foram: 92,7 por cento positivos de 15-19 anos; 82,4 por cento de 20 a 29 anos e 90,7 por cento de 30-39 anos com diferença significativa na proporção de soropositivos pela faixa etária ( p < 0,001 ). A variação de intensidade da resposta anticórpica foi calculada e os resultados mostram que há diferença significativa (p = 0,002) entre as médias das três faixas etárias estudadas. Em relação à área rural e urbana, a média da relação DO/CO para cada faixa etária, observa-se que há uma tendência significativa de médias menores na zona rural. O mesmo ocorre quando são calculadas as proporções de soropositivos. CONCLUSÃO: Os resultados obtidos mostraram que o percentual e indivíduos com anticorpos da classe IgG contra a rubéola na faixa etária de 20-29 anos foi abaixo aquela observada em faixas etárias inferiores ou superiores. Além disso, a diferença da soropositividade entre a zona urbana e rural traduz uma suscetibilidade com potencial de manter a circulação do vírus nesta região.

OBJECTIVE: To investigate seroprevalence of rubella antibodies in a 15 to 39 year old population in the municipal district of Guaratinguetá. METHODS: The 996 samples studied were collected in urban and rural zones, after informed and elucidated consent from men and women stratified by age (15 -39 years). Rubella IgG antibodies were detected by ELISA using the commercial kit Rubenostika IgGII (Organon Teknika THE, Holland). Age groups were stratified in 3 categories: 15-19; 20-29 and 30-39 years of age. Statistical analyses were accomplished with the software MINITAB version 14.0 (Minitab Inc, USA). RESULTS: The proportion of seropositives for antibodies of the IgG class were: 92.7. percent positive for 15-19 years; 82.4 percent for 20 to 29 years and 90.7 percent for 30-39 years, with a significant difference in the seropositive proportions by age group (p <0.001). Variation of intensity of antibody response was calculated and results show a significant difference (p = 0.002) between means of the 3 age groups studied. In relation to rural and urban zone average of the ratio DO/CO for each age group, a significant tendency towards a lower average was observed in the rural zone. The same was true when the seropositive proportions were calculated. CONCLUSION: Results showed that the percentage and individuals with antibodies of the IgG class against rubella in the 20-29 year age group was lower than that in the younger and older age groups. Furthermore, the difference between seropositivity in the urban and rural zones discloses susceptibility with a potential for continued circulation of the virus in this zone.

Isolation of the wild-type rubella virus in rabbit kidney cell line RC-IAL

O presente estudo descreve o isolamento e o crescimento do vírus selvagem da rubéola na linhagem celular RC-IAL. A susceptibilidade da linhagem celular RC-IAL (rim de coelho, Instituto Adolfo Lutz) para o vírus-padrão da rubéola RA 27/3 foi anteriormente descrito por nós(4). Amostras de 20 pacientes com suspeita de infecção por rubéola foram testadas por sorologia, isolamento viral e nested PCR. Os soros foram testados por Elisa para detecção de anticorpos reagentes para rubéola e nested PCR para detectar o RNA viral. As amostras clínicas de sangue, urina, fragmento de placenta e líquido amniótico foram inoculadas nas linhagens celulares RC-IAL (rim de coelho, Instituto Adolfo Lutz) e Sirc (córnea de coelho). O vírus da rubéola foi isolado das amostras clínicas de quatorze pacientes. O efeito citopático (ECP) foi examinado por microscopia de contraste de fase, e o RNA do vírus da rubéola foi amplificado por nested PCR. Os resultados obtidos mostram que a linhagem celular RC-IAL é um excelente substrato para isolamento do vírus da rubéola. Estes dados são importantes, pois poucas linhagens descritas na literatura apresentam efeito citopático que possibilite seu uso para isolar o vírus da rubéola de material clínico.

Infectivity of wild-type rubella virus in fibrochondrocyte cells

Este trabalho descreve o rápido crescimento do vírus da rubéola em amostras clínicas em cultura primária de fibrocondrócitos com desenvolvimento de efeito citopático em resposta a infecção pelo vírus da rubéola. As células foram isoladas do menisco do joelho do coelho após extração enzimática e incubadas a 37ºC em meio DMEM suplementado com 10 por cento de soro fetal bovino. Seis amostras clínicas de urina, sangue e liquor foram inoculadas na cultura primária de fibrocondrócitos e na linhagem Vero. As células de fibrocondrócitos apresentaram efeito citopático após 24 horas de incubação e o vírus foi detectado por imunoistoquímica e Nested PCR. As células infectadas apresentaram aspecto arredondado, com formação de alguns prolongamentos citoplasmáticos e sincícios, produzindo células multinucleadas. A curva de crescimento da infecciosidade do vírus foi mais alta quando comparada com a linhagem celular Vero.

Genetic homogeneity of measles viruses associated with a measles outbreak, São Paulo, Brazil, 1997.

During a resurgence of measles in São Paulo, Brazil, in 1997, >40,000 cases (peak incidence rate of 246/100,000 inhabitants) and 42 measles-related deaths were reported. Reverse transcriptase-polymerase chain reaction and nucleotide sequencing were used to analyze specimens from patients who had typical clinical measles infection during this outbreak and from six patients who had had measles in 1995 and 1996. Although wild-type measles viruses (genotypes D5 and D6) were present in São Paulo before this resurgence, we detected only D6 viruses. The genotype D6 viruses isolated during this outbreak had identical sequences to genotype D6 viruses isolated in other parts of Brazil and South America in 1997 and 1998, suggesting that a single chain of transmission was responsible. We also identified genotype A viruses in two vaccine-associated cases from 1995 and 1996. Our findings extend the knowledge of the circulation patterns of measles virus in South America, contributing to measles control efforts in the Americas.

Rash after measles vaccination: laboratory analysis of cases reported in São Paulo, Brazil.

OBJECTIVE: The clinical differential diagnosis of rash due to viral infections is often difficult, and misdiagnosis is not rare, especially after the introduction of measles and rubella vaccination. A study to determine the etiological diagnosis of exanthema was carried out in a group of children after measles vaccination. METHODS: Sera collected from children with rash who received measles vaccine were reported in 1999. They were analyzed for IgM antibodies against measles virus, rubella virus, human parvovirus B19 (HPV B19) using ELISA commercial techniques, and human herpes virus 6 (HHV 6) using immunofluorescence commercial technique. Viremia for each of those viruses was tested using a polimerase chain reaction (PCR). RESULTS: A total of 17 cases of children with exanthema after measles immunization were reported in 1999. The children, aged 9 to 12 months (median 10 months), had a blood sample taken for laboratory analysis. The time between vaccination and the first rash signs varied from 1 to 60 days. The serological results of those 17 children suspected of measles or rubella infection showed the following etiological diagnosis: 17.6% (3 in 17) HPV B19 infection; 76.5% (13 in 17) HHV 6 infection; 5.9% (1 in 17) rash due to measles vaccine. CONCLUSIONS: The study data indicate that infection due to HPV B19 or HHV 6 can be misdiagnosed as exanthema due to measles vaccination. Therefore, it is important to better characterize the etiology of rash in order to avoid attributing it incorrectly to measles vaccine.

Detection of rubella virus RNA in serum samples by RT-PCR assay / Detecçäo do RNA do vírus da rúbeola no soro através de RT-PCR

Em geral, a reaçäo de polimerizaçäo em cadeia precedida de retrotranscriçäo (RT-PCR) tem demonstrado ser um método rápido e sensível para detectar o RNA do vírus rubéola em uma variedade de materiais clínicos. A reaçäo de RT-PCR foi utilizada para detectar o vírus no soro e confirmar o teste sorológico em indivíduos infectados com vírus da rubéola. Para este estudo, uma fita simples de RNA viral, extraída do soro, foi usada como fita-molde para para a transcriçäo reversa, seguida da amplificaçäo com dois diferentes pares de olinucleotídeos iniciadores e de uma segunda amplificaçäo com outros pares de oligonucleotídeos. O método do RT-PCR foi utilizado para se examinar amostras de soro de nove pacientes com sorologia confirmada para o vírus da rubéola. Quatro soros testados por RT-PCR tiveram como resultado infecçäo pelo vírus da rubéola. Os soros foram primeiramente analisados utilizando-se de 500µl para a extraçäo de RNA. O vírus da rubéola foi também analisados utilizando-se 500µl para a extraçäo de RNA. O vírus da rubéola foi também analisado utilizando-se volumes menores de soro, e somente uma amostra foi amplificada a partir da extraçäo do RNA viral de 300µl. Neste estudo, a estratégia de se utilizar soro no desenvolvimento do teste RT-PCR sugere ser uma alternativa a mais para o diagnóstico da infecçäo pelo vírus da rubéola

RC-IAL cell line: sensitivy of rubella virus grow

Objetivo: Descreve-se o crescimento do vírus-padräo da rubéola RA-27/3 na linhagem celular RC-IAL, com desenvolvimento de efeito citopático em resposta à infecçäo viral. Para este propósito, o vírus-padräo foi titulado simultaneamente nas linhagens celulares Vero, SIRC e RK13. Métodos: O vírus-padräo da rubéola RA-27/3 foi inoculado na linhagem celular RC-IAL (rim de coelho, Instituto Adolfo Lutz). Placas contendo 1,5c105 células/ml foram inoculadas com 0,1ml do contendo 1x104 DICT50/0,1 ml. O efeito citopático correspondente a 25 por cento foi observado após 48h e 100 por cento após 96h. Os resultados obtidos foram comparados com o crescimento do vírus nas linhagens celulares SIRC, Vero e RK13. O vírus da rubéola na linhagem celular RC-IAL foi detectado por imuno-histoquímica. Resultados: As células inoculadas com o vírus da rubéola apresentaram efeito citopático nas primeiras 48h. As células apresentaram aspecto arredondado, com formaçäo de alguns prolongamentos citoplasmáticos e sincícios, produzindo células multinucleadas. A curva do crescimento da infectividade do vírus foi praticamente a mesma que a observada nas outras linhagens celulares. Conclusäo: Os resultados obtidos mostram que a linhagem celular RC-IAL é um ótimo substrato para crescimento do vírus da rubéola, pois poucas linhagens celulares descritas na literatura apresentam efeito citopático considerável e podem ser utilizadas para preparaçäo de antígenos e nos testes de diagnóstico sorológico para o vírus da rubéola