Biosynthesis of silver nanoparticles from Syzygium cumini leaves and their potential effects on odontogenic pathogens and biofilms.

This study analyzed the antimicrobial and antibiofilm action and cytotoxicity of extract (HEScL) and silver nanoparticles (AgNPs-HEScL) from Syzygium cumini leaves. GC-MS, UV-Vis, EDX, FEG/SEM, DLS and zeta potential assays were used to characterize the extract or nanoparticles. Antimicrobial, antibiofilm and cytotoxicity analyses were carried out by in vitro methods: agar diffusion, microdilution and normal oral keratinocytes spontaneously immortalized (NOK-SI) cell culture. MICs of planktonic cells ranged from 31.2-250 (AgNPs-HEScL) to 1,296.8-10,375 µg/ml (HEScL) for Actinomyces naeslundii, Fusobacterium nucleatum, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans, Streptococcus oralis, Veillonella dispar, and Candida albicans. AgNPs-HEScL showed antibiofilm effects (125-8,000 µg/ml) toward Candida albicans, Streptococcus mutans and Streptococcus oralis, and Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis. The NOK-SI exhibited no cytotoxicity when treated with 32.8 and 680.3 µg/ml of AgNPs-HEScL and HEScL, respectively, for 5 min. The data suggest potential antimicrobial and antibiofilm action of HEScL, and more specifically, AgNPs-HEScL, involving pathogens of medical and dental interest (dose-, time- and species-dependent). The cytotoxicity of HEScL and AgNPs-HEScL detected in NOK-SI was dose- and time-dependent. This study presents toxicological information about the lyophilized ethanolic extract of S. cumini leaves, including their metallic nanoparticles, and adds scientific values to incipient studies found in the literature.

Antimicrobial potential, phytochemical profile, cytotoxic and genotoxic screening of Sedum praealtum A. DC. (balsam).

BACKGROUND: Sedum praealtum has been used for a long time in traditional medicine as an analgesic and anti-inflammatory agent. Its beneficial effects have been known since ancient times, when Latinos used it to treat sore and swollen eyes. This research evaluated the antimicrobial potential, the cytotoxic and genotoxic effects, and some chromatographic profiles of the hydroethanolic extract of leaves, stems and roots of S. praealtum. METHODS: The antimicrobial activities were carried out by broth microdilution and agar diffusion. In vitro cytotoxicity was evaluated by cell cultures of Aedes albopictus and the selectivity index (SI) was estimated: SI=CI50/MIC. Genotoxic and systemic toxic effects of S. praealtum leaves were analyzed by micronucleus assay in mice bone marrow. Chromatographic profiles and mass spectra were investigated by GC-MS. RESULTS: Gram-positive (B. subtilis, B. cereus, M. luteus, E. faecalis and S. aureus) and gram-negative (E. coli, E. aerogenes, S. marcescens, P. aeruginosa, P. mirabilis and S. typhimurium) bacteria exhibited MICs ranging from 12.5-50 and 0-50 mg/ml, respectively. Sedum praealtum showed no efficacy against M. tuberculosis and M. bovis. Cytotoxicity (CI50) of S. praealtum was 4.22 and 5.96 mg/ml for leaves and stems, respectively, while its roots showed no cytotoxicity. Micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCEs) analyzes showed no differences between treatment doses (0.5-2 g/kg) and negative control (NaCl), but the PCE/NCE ratio (polychromatic erythrocyte/normochromatic erythrocyte) showed significant differences. Phytochemical screening identified thirteen compounds in the leaves, stems and roots of S. praealtum potentially associated with their biological activities. CONCLUSIONS: This research comprises a first scientific study on genotoxicity, cytotoxicity and antimicrobial effects of S. praealtum (Balsam), and it provides an initial theoretical foundation for its comprehensive use. Results showed antibacterial action of S. praealtum against gram-positive bacteria and some gram-negative species (depending on the plant anatomical part), but ineffective antimycobacterial action. However, S. praealtum leaves and stems display potential cytotoxicity, contributing to the SI < 1 values. In addition, S. praealtum leaves exhibit no clastogenic and/or aneugenic effects, but it has systemic toxicity dose-independent.

Staphylococcus aureus ampicillin-resistant from the odontological clinic environment.

The aim of this research was to evaluate the prevalence of Staphylococcus spp. and S. aureus in the odontological clinic environment (air), their production of beta-lactamase and antibacterial susceptibility to the major antibiotics utilized in medical particle. During 12 months of samples collect were isolated 9775 CFU by MSA medium suggesting a high amount of Staphylococcus spp. in the clinic environment which can appear through aerosols. A total of 3149 colonies (32.2%) were suggestive of pathogenic staphylococci. Gram coloration, catalase test, colony-mallow growing on chromogenic medium, and coagulase test confirmed the identity of 44 (0.45%) S. aureus isolates. Of these, 35 isolates (79.5%) showed production of beta-lactamase by Cefinase discs and resistance to ampicillin, erythromycin (7 isolates) and tetracycline (1 isolate) suggesting the existence of multiresistant isolates. The evaluation of the oxacillin MIC by Etest assays showed susceptibility patterns suggesting the inexistence of the mecA gene in chromosomal DNA. These results point out to the need of a larger knowledge on the contamination means and propagation of this microorganism into the odontological clinic.

Staphylococcus aureus ampicillin-resistant from the odontological clinic environment

Foi avaliada a prevalência de Staphylococcus spp. e S. aureus no ambiente clínico odontológico, a produção de ß-lactamase e a susceptibilidade antibacteriana aos principais antibióticos utilizados na prática clínica. Durante 12 meses de coleta de amostras foram isolados 9775 UFC no meio de cultura AMS, demonstrando uma elevada quantidade de Staphylococcus spp. no ambiente clínico, provavelmente em decorrência da propagação de aerossóis. Um total de 3149 colônias (32,2%) foi sugestivo de estafilococos patogênicos. Coloração de Gram, teste de catalase, crescimento de colônias-malva sobre meio cromogênico e teste de coagulase confirmaram a identidade de 44 (0,45%) isolados de S. aureus. Destes, 35 isolados (79,5%) mostraram produção de ß-lactamase através de discos de CefinaseTM e resistência a ampicilina, eritromicina (7 isolados) e tetraciclina (1 isolado), sugerindo a existência de isolados multirresistentes. A avaliação do MIC de oxacilina através dos ensaios de Etest® mostrou padrões de susceptibilidade o que sugere a inexistência do gene mecA gene no DNA cromossômico. Estes resultados apontam para a necessidade de um maior conhecimento sobre os meios de contaminação e propagação deste microrganismo dentro da clínica odontológica.

Atividade de cárie na primeira infância, fatalidade ou transmissibilidade? / Caries activity in childhood fatality or transmissibility?

A lesão de cárie em dentes decíduos é encarada com normalidade e considerada uma fatalidade, pois muitas mães desconhecem que esta alteração constitui uma doença infecciosa transmissível, passível de prevenção e que pode ser controlada evitando a contaminação entre as mães e seus filhos. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar a correlação entre a atividade de cárie entre crianças e suas mães, bem como analisar sua relação com o nível de Streptococcus do grupo mutans. Foi avaliada a atividade de cárie de 51 crianças de 2 meses a 5 anos de idade, assim como a de suas mães. O biofilme bacteriano foi coletado dos dentes das crianças, para realizar a contagem de colônias do microrganismo. Pode-se observar que não houve evidência de que o nível de Streptococcus do grupo mutans presente na cavidade bucal das crianças dependeu de suas idades, e que não ocorreu associação entre atividade de cárie e o aumento do nível deste microrganismo.Os autores encontraram também evidência de associação entre a atividade de cárie das crianças e de suas mães. Desta forma concordamos que há necessidade do desenvolvimento de programas educativos voltados para os pais e preventivos voltados para os bebês procurando estabelecer hábitos saudáveis para evitar a contaminação da cavidade bucal da criança e oferecer a verdadeira promoção de saúde.

Atividade de cárie na primeira infância fatalidade ou transmissibilidade?

A lesão de cárie em dentes decíduos é encarada com normalidade e considerada uma fatalidade, pois muitas mães desconhecem que esta alteração constitui uma doença infecciosa transmissível, passível de prevenção e que pode ser controlada evitando a contaminação entre as mães e seus filhos. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar a correlação entre a atividade de cárie entre crianças e suas mães, bem como analisar sua relação com o nível de Streptococcus do grupo mutans. Foi avaliada a atividade de cárie de 51 crianças de 2 meses a 5 anos de idade, assim como a de suas mães. O biofilme bacteriano foi coletado dos dentes das crianças, para realizar a contagem de colônias do microrganismo. Pode-se observar que não houve evidência de que o nível de Streptococcus do grupo mutans presente na cavidade bucal das crianças dependeu de suas idades, e que não ocorreu associação entre atividade de cárie e o aumento do nível deste microrganismo.Os autores encontraram também evidência de associação entre a atividade de cárie das crianças e de suas mães. Desta forma concordamos que há necessidade do desenvolvimento de programas educativos voltados para os pais e preventivos voltados para os bebês procurando estabelecer hábitos saudáveis para evitar a contaminação da cavidade bucal da criança e oferecer a verdadeira promoção de saúde. (AU)

Electrophoretic protein patterns and numerical analysis of Candida albicans from the oral cavities of healthy children

O objetivo da presente pesquisa foi avaliar os graus de polimorfismos protéicos entre setenta e cinco linhagens de C. albicans isoladas da cavidade oral de crianças saudáveis provenientes de cinco categorias socioeconômicas e oito escolas (particulares e públicas) do município de Piracicaba, Estado de São Paulo, a fim de identificar subespécies de C. albicans e suas similaridades em grupos de populações infantis e estabelecer suas possíveis rotas de disseminação. Culturas celulares foram desenvolvidas em meio YEPD, coletadas por centrifugação e lavadas com solução salina gelada. As proteínas celulares totais foram extraídas por rompimento celular usando pérolas de vidro e submetidas à técnica de SDS-PAGE. Após a eletroforese, as bandas de proteínas foram coradas com Coomassie-blue e analisadas pelo conjunto de programas estatísticos NTSYS-pc versão 1.70. Matriz de similaridade e dendrograma foram gerados, pela aplicação do coeficiente de similaridade de Dice e do algoritmo UPGMA, respectivamente, os quais permitiram avaliar os graus de polimorfismo ou similaridade intra-específico, baseados nos padrões eletroforéticos de proteínas totais de isolados orais de C. albicans. Um total de 13 principais fenons (grupos) foi analisado de acordo com suas características homogêneas (categoria socioeconômica e/ou escola idênticas) e heterogêneas (categorias socioeconômicas e/ou escolas diferentes). Com relação ao aspecto epidemiológico socioeconômico, as composições dos grupos mostraram alta similaridade (0.788 < SD < 1.0) entre algumas linhagens de C. albicans isoladas de crianças saudáveis independentemente de suas camadas socioeconômicas (alta, média e baixa). Isolados de alta similaridade não foram encontrados nas cavidades orais de crianças saudáveis pertencentes às camadas sociais A e D, B e C, ou C e E. Isto pode ser explicado pela ausência de uma rota de disseminação entre estas crianças. Geograficamente, algumas crianças saudáveis entre escolas idênticas e diferentes (particulares e públicas) também são portadoras de linhagens semelhantes, mas tal similaridade não foi encontrada entre outros de determinadas escolas. Esses dados podem refletir uma rota de disseminação restrita destes microrganismos em alguns grupos de escolares saudáveis, a qual pode ser dependente da categoria socioeconômica ou local geográfico de cada criança. Em contraste à alta similaridade, a baixa similaridade ou alto grau de polimorfismo dos perfis protéicos foi demonstrado...

Electrophoretic protein patterns and numerical analysis of Candida albicans from the oral cavities of healthy children.

The aim of this research was to evaluate the protein polymorphism degree among seventy-five C. albicans strains from healthy children oral cavities of five socioeconomic categories from eight schools (private and public) in Piracicaba city, São Paulo State, in order to identify C. albicans subspecies and their similarities in infantile population groups and to establish their possible dissemination route. Cell cultures were grown in YEPD medium, collected by centrifugation, and washed with cold saline solution. The whole-cell proteins were extracted by cell disruption, using glass beads and submitted to SDS-PAGE technique. After electrophoresis, the protein bands were stained with Coomassie-blue and analyzed by statistics package NTSYS-pc version 1.70 software. Similarity matrix and dendrogram were generated by using the Dice similarity coefficient and UPGMA algorithm, respectively, which made it possible to evaluate the similarity or intra-specific polymorphism degrees, based on whole-cell protein fingerprinting of C. albicans oral isolates. A total of 13 major phenons (clusters) were analyzed, according to their homogeneous (socioeconomic category and/or same school) and heterogeneous (distinct socioeconomic categories and/or schools) characteristics. Regarding to the social epidemiological aspect, the cluster composition showed higher similarities (0.788 < SD < or = 1.0) among C. albicans strains isolated from healthy children independent of their socioeconomic bases (high, medium, or low). Isolates of high similarity were not found in oral cavities from healthy children of social stratum A and D, B and D, or C and E. This may be explained by an absence of a dissemination route among these children. Geographically, some healthy children among identical and different schools (private and public) also are carriers of similar strains but such similarity was not found among other isolates from children from certain schools. These data may reflect a restricted dissemination route of these microorganisms in some groups of healthy scholars, which may be dependent of either socioeconomic categories or geographic site of each child. In contrast to the higher similarity, the lower similarity or higher polymorphism degree (0.499 < or = SD < 0.788) of protein profiles was shown in 23 (30.6%) C. albicans oral isolates. Considering the social epidemiological aspect, 42.1%, 41.7%, 26.6%, 23.5%, and 16.7% were isolates from children concerning to socioeconomic categories A, D, C, B, and E, respectively, and geographically, 63.6%, 50%, 33.3%, 33.3%, 30%, 25%, and 14.3% were isolates from children from schools LAE (Liceu Colégio Albert Einstein), MA (E.E.P.S.G. "Prof. Elias de Melo Ayres"), CS (E.E.P.G. "Prof. Carlos Sodero"), AV (Alphaville), HF (E.E.P.S.G. "Honorato Faustino), FMC (E.E.P.G. "Prof. Francisco Mariano da Costa"), and MEP (E.E.P.S.G. "Prof. Manasses Ephraim Pereira), respectively. Such results suggest a higher protein polymorphism degree among some strains isolated from healthy children independent of their socioeconomic strata or geographic sites. Complementary studies, involving healthy students and their families, teachers, servants, hygiene and nutritional habits must be done in order to establish the sources of such colonization patterns in population groups of healthy children. The whole-cell protein profile obtained by SDS-PAGE associated with computer-assisted numerical analysis may provide additional criteria for the taxonomic and epidemiological studies of C. albicans.