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J Microbiol Methods ; 142: 46-51, 2017 11.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-28870772

RESUMEN

In vitro biofilm assays are a vital first step in the assessment of therapeutic effectiveness. Current biofilm models have been found to be limited by throughput, reproducibility, and cost. We present a novel in vitro biofilm model, utilising a sodium alginate substratum for surface biofilm colony formation, which can be readily dissolved for accurate evaluation of viable organisms. The dissolving bead biofilm assay was evaluated using a range of clinically relevant strains. The reproducibility and responsiveness of the assay to an antimicrobial challenge was assessed using standardised methods. Cryo-scanning electron microscopy was used to image biofilm colonies. Biofilms were grown for 20h prior to testing. The model provides a reproducible and responsive assay to clinically-relevant antimicrobial challenges, as defined by established guidelines. Moreover cryo-scanning electron microscopy demonstrates that biofilm formation is localised exclusively to the alginate bead surface. Our results suggest that this simple model provides a robust and adaptable assay for the investigation of bacterial biofilms.


Asunto(s)
Antibacterianos/farmacología , Biopelículas/efectos de los fármacos , Biopelículas/crecimiento & desarrollo , Farmacorresistencia Bacteriana/fisiología , Gentamicinas/farmacología , Alginatos/química , Microscopía por Crioelectrón , Enterococcus faecalis/crecimiento & desarrollo , Enterococcus faecalis/aislamiento & purificación , Escherichia coli/crecimiento & desarrollo , Escherichia coli/aislamiento & purificación , Ácido Glucurónico/química , Ácidos Hexurónicos/química , Humanos , Klebsiella pneumoniae/crecimiento & desarrollo , Klebsiella pneumoniae/aislamiento & purificación , Pruebas de Sensibilidad Microbiana , Microscopía Electrónica de Rastreo , Pseudomonas aeruginosa/crecimiento & desarrollo , Pseudomonas aeruginosa/aislamiento & purificación , Staphylococcus aureus/crecimiento & desarrollo , Staphylococcus aureus/aislamiento & purificación , Streptococcus mutans/crecimiento & desarrollo , Streptococcus mutans/aislamiento & purificación
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