Molecular detection of feline hemoplasmas and retroviruses in free-roaming and shelter cats within a university campus.

Objectives: The aim of the present study was to assess the frequency of hemoplasma, feline immunodeficiency virus (FIV) and feline leukemia virus (FeLV) infections in cats living in an on-campus shelter and free-roaming cats within a university campus in Brazil. Methods: Blood samples were tested using quantitative PCR for hemoplasma, FIV and FeLV. Positive hemoplasma samples were sequenced. Associations between hemoplasma detection and living situation, sex, flea and/or tick parasitism, and coinfection with FIV and FeLV, were assessed using Fisher's exact test and the respective odds ratios were calculated. Results: Overall, 6/45 (13.3%) cats tested positive: four (8.9%) were infected with 'Candidatus Mycoplasma haemominutum' and two (4.4%) with Mycoplasma haemofelis. All positive samples were from free-roaming cats (6/15; 40.0%) and had statistically significantly lower packed cell volumes (P = 0.037). Although 5/23 (21.7%) males and 1/22 (4.6%) females were positive, no statistically significant association between sex and hemoplasma infection was found (P = 0.19). Viral quantitative PCR (qPCR) was performed on 43/45 samples, among which 2/43 (4.7%) were positive for FIV and none for FeLV. Only one cat (2.3%) was coinfected with hemoplasma and FIV (P = 0.26). In addition, 4/6 (66.7%) cats that tested positive for hemoplasmas were infested by fleas (P = 0.0014) and/or ticks (P = 0.25). Conclusions and relevance: These results show that even if the free-roaming cat population is clinically healthy and has adequate access to food, it may present flea infestation and hemoplasma infection with lower packed cell volume values.

Occurrence of antibodies anti-Toxoplasma gondii among sheltered and free-roaming cats within a university campus / Ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii entre gatos de abrigo e de vida livre dentro de um campus universitário

The present study aimed to assess anti-T. gondii antibodies in sheltered and free-roaming cats within a university campus that has an overlapping population of humans and livestock. A total of 51 cats were tested for anti-T. gondii antibodies using the indirect immunofluorescent antibody test. Overall, 8/51 cats (15.7%) were seropositive. Cats were more likely to be seropositive when free-roaming (p= 0.008) and with presence of skin lesions (p= 0.042), and less likely with < 1 year of age (p= 0.021), probably due to higher environmental exposure and infected prey consumption. The presence of seropositive free-roaming cats whose areas overlapped those occupied by humans and livestock may suggest an increased on-campus chance of T. gondii occurrence.(AU)

O presente estudo teve por objetivo acessar anticorpos anti-Toxoplasma gondii em gatos de abrigo e gatos de vida livre dentro de um campus universitário que tem uma população sobreposta de seres humanos e animais de produção. Um total de 51 gatos foram testados para anticorpos anti- T. gondii usando o teste de imunofluorescência indireta. No geral, 8/51 (15.7%) gatos foram soropositivos. Os gatos foram mais propensos a ser soropositivos quando em vida livre (p = 0,008) e com lesões de pele (p = 0.042), e menos prováveis com menos de 1 ano de idade (p = 0,021), provavelmente devido à maior exposição ambiental e consumo de presas infectadas. A presença de gatos errantes soropositivos cujas áreas se sobrepõem àquelas ocupadas por seres humanos e animais pode sugerir um risco aumentado de ocorrência de T. gondii no campus.(AU)

Occurrence of antibodies anti-Toxoplasma gondii among sheltered and free-roaming cats within a university campus / Ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii entre gatos de abrigo e de vida livre dentro de um campus universitário

The present study aimed to assess anti-T. gondii antibodies in sheltered and free-roaming cats within a university campus that has an overlapping population of humans and livestock. A total of 51 cats were tested for anti-T. gondii antibodies using the indirect immunofluorescent antibody test. Overall, 8/51 cats (15.7%) were seropositive. Cats were more likely to be seropositive when free-roaming (p= 0.008) and with presence of skin lesions (p= 0.042), and less likely with < 1 year of age (p= 0.021), probably due to higher environmental exposure and infected prey consumption. The presence of seropositive free-roaming cats whose areas overlapped those occupied by humans and livestock may suggest an increased on-campus chance of T. gondii occurrence.

O presente estudo teve por objetivo acessar anticorpos anti-Toxoplasma gondii em gatos de abrigo e gatos de vida livre dentro de um campus universitário que tem uma população sobreposta de seres humanos e animais de produção. Um total de 51 gatos foram testados para anticorpos anti- T. gondii usando o teste de imunofluorescência indireta. No geral, 8/51 (15.7%) gatos foram soropositivos. Os gatos foram mais propensos a ser soropositivos quando em vida livre (p = 0,008) e com lesões de pele (p = 0.042), e menos prováveis com menos de 1 ano de idade (p = 0,021), provavelmente devido à maior exposição ambiental e consumo de presas infectadas. A presença de gatos errantes soropositivos cujas áreas se sobrepõem àquelas ocupadas por seres humanos e animais pode sugerir um risco aumentado de ocorrência de T. gondii no campus.

Serosurvey of Rickettsia spp. in cats from a Brazilian spotted fever-endemic area / Soroprevalência de Rickettsia spp. em gatos de uma área endêmica para a Febre Maculosa Brasileira

Abstract Rickettsia spp. bacteria are responsible for tick-borne diseases worldwide, mostly maintained by rickettsial amplifiers capybaras in Brazilian endemic areas. The campus of the University of São Paulo, in southeastern Brazil, is an area endemic for Brazilian spotted fever (BSF), with high density of capybaras and Amblyomma spp., along with confirmed human cases. Besides capybaras, the university has also an in-campus high population of sheltered and free-roaming cats. Accordingly, the aim of this study was to determine the prevalence and characteristics associated with Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri and Rickettsia felis exposure among cats in a BSF-endemic area. Out of 51 cats sampled, 23/35 shelter (65.7%) and 5/16 free-roaming (31.2%) were positive (titers ≥ 64) for at least one Rickettsia species. Ticks species were present in 3/16 free-roaming cats (18.8%), consisting of Amblyomma spp., nymphs of Amblyomma sculptum and adult Rhipicephalus sanguineus sensu lato. Despite sharing the capybaras environment, the seropositivity among the free-roaming and shelter cats was lower than owned cats in other endemic areas. Whether equally or less exposed to rickettsial infection, compared with owned cats in endemic areas, free-roaming and shelter cats may be used as environmental sentinels for human exposure to rickettsiae in such areas.

Resumo Espécies de Rickettsia têm sido responsáveis por doenças transmitidas por carrapatos no mundo, a maioria mantida por hospedeiros amplificadores, como as capivaras em áreas endêmicas no Brasil. A Universidade de São Paulo, em Piracicaba, no sudeste do Brasil, é uma área endêmica para a Febre Maculosa Brasileira (FMB), com alta densidade de capivaras e Amblyomma spp., e com casos humanos confirmados. Além de capivaras, a universidade também possui gatos em um abrigo e de vida livre. Assim, o objetivo deste estudo foi determinar a prevalência e as características associadas com exposição à Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri e Rickettsia felis em gatos de área endêmica para a FMB. Dos 51 gatos amostrados, 23/35 (65,7%) do abrigo e 5/16 (31,2%) de vida livre foram positivos (títulos ≥ 64) para pelo menos uma Rickettsia spp. Carrapatos estiveram presentes em 3/16 (18,8%) gatos de vida livre, representados por Amblyomma spp., ninfas de Amblyomma sculptum e adultos de Rhipicephalus sanguineus sensu lato. Apesar de compartilharem o ambiente com capivaras, os gatos amostrados foram igualmente ou menos expostos à infecção riquetsial do que os gatos com proprietário em outras áreas endêmicas, podendo ser usados como sentinelas para exposição humana à riquétsias nessas áreas.

Serosurvey of Rickettsia spp. in cats from a Brazilian spotted fever-endemic area.

Rickettsia spp. bacteria are responsible for tick-borne diseases worldwide, mostly maintained by rickettsial amplifiers capybaras in Brazilian endemic areas. The campus of the University of São Paulo, in southeastern Brazil, is an area endemic for Brazilian spotted fever (BSF), with high density of capybaras and Amblyomma spp., along with confirmed human cases. Besides capybaras, the university has also an in-campus high population of sheltered and free-roaming cats. Accordingly, the aim of this study was to determine the prevalence and characteristics associated with Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri and Rickettsia felis exposure among cats in a BSF-endemic area. Out of 51 cats sampled, 23/35 shelter (65.7%) and 5/16 free-roaming (31.2%) were positive (titers ≥ 64) for at least one Rickettsia species. Ticks species were present in 3/16 free-roaming cats (18.8%), consisting of Amblyomma spp., nymphs of Amblyomma sculptum and adult Rhipicephalus sanguineus sensu lato. Despite sharing the capybaras environment, the seropositivity among the free-roaming and shelter cats was lower than owned cats in other endemic areas. Whether equally or less exposed to rickettsial infection, compared with owned cats in endemic areas, free-roaming and shelter cats may be used as environmental sentinels for human exposure to rickettsiae in such areas.

Serosurvey of Rickettsia spp. in cats from a Brazilian spotted fever-endemic area / Soroprevalência de Rickettsia spp. em gatos de uma área endêmica para a Febre Maculosa Brasileira

Rickettsia spp. bacteria are responsible for tick-borne diseases worldwide, mostly maintained by rickettsial amplifiers capybaras in Brazilian endemic areas. The campus of the University of São Paulo, in southeastern Brazil, is an area endemic for Brazilian spotted fever (BSF), with high density of capybaras and Amblyomma spp., along with confirmed human cases. Besides capybaras, the university has also an in-campus high population of sheltered and free-roaming cats. Accordingly, the aim of this study was to determine the prevalence and characteristics associated with Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri and Rickettsia felis exposure among cats in a BSF-endemic area. Out of 51 cats sampled, 23/35 shelter (65.7%) and 5/16 free-roaming (31.2%) were positive (titers 64) for at least one Rickettsia species. Ticks species were present in 3/16 free-roaming cats (18.8%), consisting of Amblyomma spp., nymphs of Amblyomma sculptum and adult Rhipicephalus sanguineus sensu lato. Despite sharing the capybaras environment, the seropositivity among the free-roaming and shelter cats was lower than owned cats in other endemic areas. Whether equally or less exposed to rickettsial infection, compared with owned cats in endemic areas, free-roaming and shelter cats may be used as environmental sentinels for human exposure to rickettsiae in such areas.(AU)

Espécies de Rickettsia têm sido responsáveis por doenças transmitidas por carrapatos no mundo, a maioria mantida por hospedeiros amplificadores, como as capivaras em áreas endêmicas no Brasil. A Universidade de São Paulo, em Piracicaba, no sudeste do Brasil, é uma área endêmica para a Febre Maculosa Brasileira (FMB), com alta densidade de capivaras e Amblyomma spp., e com casos humanos confirmados. Além de capivaras, a universidade também possui gatos em um abrigo e de vida livre. Assim, o objetivo deste estudo foi determinar a prevalência e as características associadas com exposição à Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri e Rickettsia felis em gatos de área endêmica para a FMB. Dos 51 gatos amostrados, 23/35 (65,7%) do abrigo e 5/16 (31,2%) de vida livre foram positivos (títulos 64) para pelo menos uma Rickettsia spp. Carrapatos estiveram presentes em 3/16 (18,8%) gatos de vida livre, representados por Amblyomma spp., ninfas de Amblyomma sculptum e adultos de Rhipicephalus sanguineus sensu lato. Apesar de compartilharem o ambiente com capivaras, os gatos amostrados foram igualmente ou menos expostos à infecção riquetsial do que os gatos com proprietário em outras áreas endêmicas, podendo ser usados como sentinelas para exposição humana à riquétsias nessas áreas.(AU)

Occurrence of Neospora caninum antibodies in beef cattle and in farm dogs from Avaré Region of São Paulo, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti-Neospora caninum em bovinos de corte e em cães rurais da região de Avaré, Estado de São Paulo, Brasil

The economic impact caused by Neospora caninum in beef cattle is not clear, the most relevant disturbance is the abortion, which is provoked by this parasite, therefore the identification of the disease etiology is important in order to determine measure of prevention and control. The objective of this study was to find out the occurrence of N. caninum in beef cattle and in farm dogs from Avaré region, the importance of the presence of dogs in farms and its relation to the number of cattle and winter food supplementation. It was collected 777 samples of beef cattle sera and 39 samples of dog sera, which lived with this cows in eight farms, and these sera were submitted to indirect fluorescent antibody test. Anti-N. caninum antibodies were detected in 15.57% (121/777) of the beef cattle, at dilutions from 1:200 to 1:3200, and 58.97% (23/39) of the dogs at dilutions from 1:50 to 1:400. The occurrence of antibodies have no relation to absence of dogs in two farm, however, the rate of the infected beef cattle were lower in farm with lower number of cattle per hectare. The winter food supplement have no influence in the presence of antibodies anti-N. caninum in the herd.

O impacto econômico causado pelo Neospora caninum em bovinos de corte ainda não está bem definido, sendo que o distúrbio mais evidente provocado por este parasita, é o abortamento. Assim, a identificação do agente é fundamental para se determinar medidas de prevenção e controle. O objetivo desse estudo foi determinar a ocorrência de anticorpos anti-N. caninum em bovinos de corte e em cães rurais e a importância da presença de cães nessas propriedades, bem como a influência da lotação e da suplementação de inverno na ocorrência do agente. Foram colhidas 777 amostras de soros de vacas de corte e, 39 soros de cães que conviviam com esses animais pertencentes a oito propriedades, e submetidas à reação de imunofluorescência indireta. Anticorpos anti-N. caninum foram detectados em 15,57% (121/777) dos bovinos, cujas diluições variaram entre 1:200 e 1:3200, e em 58,97% (23/39) dos cães com diluições variando entre 1:50 e 1:400. A ausência de cães em duas propriedades não foi um fator determinante para a não ocorrência da doença, entretanto, o menor número de bovinos por hectare foi um fator que contribuiu para que houvesse uma menor taxa de animais infectados. A existência de suplementação de inverno também não influenciou no índice de infecção do rebanho pelo N. caninum.

Ocorrence of Neospora caninum antibody in dairy cows assayed by ELISA and IFAT from Avaré county, SP / Ocorrência de anticorpos de Neospora caninum em vacas leiteiras avaliados pelos métodos ELISA e RIFI no município de Avaré, SP

Sera of 521 dairy cows from herds in Avaré County, SP were examined by indirect fluorescent-antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of antibodies to Neospora caninum. The positive samples for Neospora were also tested for Toxoplasma gondii by IFAT. By using IFAT 15.9% of the samples reacted for N. caninum with dilution between 1:200 and 1: 1600. By using ELISA 30.5% were seropositive for Neospora. Of the samples that were positive to ELISA and negative to IFAT for antibodies titers of 1:200, 46 showed IFAT titers of 1:160. All 129 cows that were seropositive to IFAT with titers of 1:200 and 1:160 were also positive to ELISA. Out of 44 detected abortions, 14 (31.8%) and 18 (40.9%) cows had IFAT titers of ³ 1:200 and ³ 1:160, respectively, and 24 (54.5%) cows were positive to ELISA. Of the 159 seropositive samples to N. caninum to IFAT and/or ELISA, only six were positive to IFAT to T. gondii. Moreover, among the 44 cows with history of abortion, only one demonstrated antibodies to Toxoplasma. These results suggest the presence of N. caninum in the herds that were evaluated and the potential relationship with the observed abortions.

Soros de 521 vacas do município de Avaré, SP, foram analisados pelos métodos de reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e teste imunoenzimático (ELISA) para a detecção de anticorpos contra Neospora caninum. As amostras reagentes para Neospora também foram submetidas à RIFI para Toxoplasma gondii. Pelo método de RIFI 15,9% das amostras foram positivas para N. caninum nas diluições de 1:200 a 1:1600 e pelo teste de ELISA 30,5% dos soros foram positivos. Das amostras positivas para ELISA e negativas para a RIFI 1:200, 46 foram reagentes na diluição de 1:160. Todas as 129 vacas positivas para RIFI nas diluições ³ 1:160 também o foram para ELISA. Dos 44 abortamentos constatados, 14 (31,8%) e 18 (40,9%) vacas apresentaram título na RIFI ³ 1:200 e ³ 1:160, respectivamente, e 24 (54,5%) reagiram ao teste de ELISA. Dos 159 soros que reagiram para N. caninum nos testes de RIFI e/ou ELISA, apenas seis foram positivos para T. gondii pelo método de RIFI e, das 44 vacas com histórico de abortamentos, apenas uma apresentou anticorpos anti-Toxoplasma. Esses resultados sugerem a presença de N. caninum nos rebanhos estudados e sua relação com os abortamentos observados.