T. gondii Infection in Urban and Rural Areas in the Amazon: Where Is the Risk for Toxoplasmosis?

Toxoplasmosis, an infection caused by Toxoplasma gondii, which is found worldwide, can affect human and animal health in different ways. This study aimed to estimate the infection prevalence in humans and to determine risk factors related to urban and rural areas in a municipality in the Brazilian Amazon where an outbreak had been registered. Blood samples for serological analysis were obtained, and interviews were performed to fill out an epidemiological questionnaire. A total of 1140 individuals were included, of which 70.6% (804/1140; 95% CI: 67.9-73.2%) were positive for IgG anti-T. gondii antibodies. In rural areas, the prevalence was 62.6% (95% CI: 58.9-66.3%), while in urban areas, it was 81.9% (95% CI: 78.4-85.4%). The risk of becoming infected in urban areas was 2.7 times higher (95% CI = 2.0-3.6%) than that in rural areas. When comparing the prevalence in the age group from 1 to 10 years in both areas, the rate was 28.6% (42/147; 95% CI: 21.3-35.9%) for rural areas and 69.4% (61/88; CI 95%: 59.7-79.0%) for urban areas. Therefore, it is concluded that parasite exposure starts in the first years of life in urban areas and that disordered urban area expansion may cause an increase in exposure to the different strains of T. gondii present in the Amazon.

Anti-Toxoplasma gondii antibodies in beef cattle slaughtered in the metropolitan region of Belém, Brazilian Amazon.

The relevance of consuming raw or undercooked beef in the transmission of toxoplasmosis is unclear due to the high resistance of cattle to infection. However, this possibility needs to be considered in endemic areas, such as the Amazon, where the consumption of beef is frequent. The objective of this study was to determine the frequency of anti-Toxoplasma gondii IgG antibodies in beef cattle slaughtered in the metropolitan region of Belem, Pará state, Brazil. Blood samples were collected from 500 animals of both genders in a licensed slaughterhouse in Belém. Anti-T. gondii IgG antibodies were detected by an indirect immunofluorescence assay (IFA) with a cut-off titer of 1:64. Anti-T. gondii antibodies were found in 203 animals (40.6%), with a titer of 64 in 112 animals (55.2%), 128 in 68 animals (33.5%), 256 in 15 animals (7.4%), 512 in 5 animals (2.5%), and 1,024 in 3 animals (1.4%). No significant difference was observed between males and females (p > 0.05). The high frequency of anti-T. gondii antibodies observed in beef cattle slaughtered in Belém indicates that the meat of these animals may be an important source of infection for humans and carnivorous domestic animals when inadequately cooked beef is consumed.

Anti-Toxoplasma gondii antibodies in beef cattle slaughtered in the metropolitan region of Belém, Brazilian Amazon / Anticorpos anti-Toxoplasma gondii em bovinos de corte abatidos na região metropolitana de Belém, Amazônia brasileira

Abstract The relevance of consuming raw or undercooked beef in the transmission of toxoplasmosis is unclear due to the high resistance of cattle to infection. However, this possibility needs to be considered in endemic areas, such as the Amazon, where the consumption of beef is frequent. The objective of this study was to determine the frequency of anti-Toxoplasma gondii IgG antibodies in beef cattle slaughtered in the metropolitan region of Belem, Pará state, Brazil. Blood samples were collected from 500 animals of both genders in a licensed slaughterhouse in Belém. Anti-T. gondii IgG antibodies were detected by an indirect immunofluorescence assay (IFA) with a cut-off titer of 1:64. Anti-T. gondii antibodies were found in 203 animals (40.6%), with a titer of 64 in 112 animals (55.2%), 128 in 68 animals (33.5%), 256 in 15 animals (7.4%), 512 in 5 animals (2.5%), and 1,024 in 3 animals (1.4%). No significant difference was observed between males and females (p > 0.05). The high frequency of anti-T. gondii antibodies observed in beef cattle slaughtered in Belém indicates that the meat of these animals may be an important source of infection for humans and carnivorous domestic animals when inadequately cooked beef is consumed.

Resumo A importância do consumo de carne bovina crua ou mal passada na transmissão da toxoplasmose ainda é pouco definida, devido à alta resistência desses animais à infecção. Contudo, em áreas endêmicas, como da Amazônia, onde o consumo de carne bovina é frequente, essa possibilidade precisa ser considerada. O objetivo do presente estudo foi determinar a frequência de anticorpos IgG anti-T. gondii em bovinos de corte abatidos na região metropolitana de Belém, Estado do Pará. Foram coletadas amostras de sangue de 500 animais, de ambos os sexos, em um abatedouro oficial do município de Belém. A detecção de anticorpos IgG anti-T. gondii foi realizada pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), com ponto de corte de 1:64. Anticorpos anti-T. gondii foram encontrados em 203 animais (40,6%), com títulos de 64 em 112 animais (55,2%); 128 em 68 (33,5%); 256 em 15 (7,4%); 512 em 05 (2,5%); e 1.024 em 03 (1.4%). Não foi observada diferença estatisticamente significativa entre machos e fêmeas (p > 0,05). A alta frequência de anticorpos anti-T. gondii, observada nos bovinos de corte abatidos em Belém, indica que a carne desses animais pode ser importante fonte de infecção para humanos e animais domésticos carnívoros, caso venha a ser consumida de forma inadequada.

Incidence of congenital toxoplasmosis in the City of Belém, State of Pará, Northern Brazil, determined by a neonatal screening program: preliminary results.

INTRODUCTION: The aim of this study was to determinate the incidence of congenital toxoplasmosis among a group of newborns (NBs) from Belém using neonatal screening. METHODS: Among the 6,000 newborns referred for investigation of genetic and metabolic diseases, 1,000 were selected for screening for congenital toxoplasmosis by determining the amount of IgM in the eluates of blood collected on filter paper. Positive tests were confirmed using paired serology of the NB and his mother. RESULTS: Out of the 1,000 NBs assessed, one had a positive screening result that was confirmed by paired serology. CONCLUSIONS: The incidence of congenital toxoplasmosis in Belém was 10/10,000 live NBs.

Incidence of congenital toxoplasmosis in the city of Belém, state of Pará, northern Brazil, determined by a neonatal screening program: preliminary results / Incidência de toxoplasmose congênita na cidade de Belém, estado do Pará, norte do Brasil, através de um programa de triagem neonatal: resultados preliminares

INTRODUCTION: The aim of this study was to determinate the incidence of congenital toxoplasmosis among a group of newborns (NBs) from Belém using neonatal screening. METHODS: Among the 6,000 newborns referred for investigation of genetic and metabolic diseases, 1,000 were selected for screening for congenital toxoplasmosis by determining the amount of IgM in the eluates of blood collected on filter paper. Positive tests were confirmed using paired serology of the NB and his mother. RESULTS: Out of the 1,000 NBs assessed, one had a positive screening result that was confirmed by paired serology. CONCLUSIONS: The incidence of congenital toxoplasmosis in Belém was 10/10,000 live NBs.

INTRODUÇÃO: O objetivo do estudo foi determinar a incidência da toxoplasmose congênita em um grupo de recém-nascidos (RNs) de Belém, pela triagem neonatal. MÉTODOS: Entre 6.000 RNs, encaminhados para investigação de doenças genéticas e metabólicas, foram selecionados 1.000 para triagem de toxoplasmose congênita, através da pesquisa de anticorpos IgM em eluatos de sangue colhido em papel de filtro. Os testes positivos foram confirmados, através da sorologia pareada do RN e respectiva genitora. RESULTADOS: Dos 1.000 RNs investigados, um apresentou triagem positiva confirmada pela sorologia pareada. CONCLUSÕES: A incidência de toxoplasmose congênita em Belém foi de 10/10.000 RNs vivos.

Surto de toxoplasmose humana no Distrito de Monte Dourado, Município de Almeirim, Pará, Brasil / Outbreak of human toxoplasmosis in the District of Monte Dourado, Municipality of Almeirim, Pará State, Brazil

OBJETIVO: Relatar um surto de toxoplasmose humana ocorrido no Distrito de Monte Dourado, Município de Almeirim, Pará, Brasil. MATERIAIS E MÉTODOS: Após diagnóstico confirmatório de cinco pacientes-índices com sintomas sugestivos de toxoplasmose aguda, teve início uma investigação clínica e soroepidemiológica de toxoplasmose na localidade de procedência dos pacientes. Foram avaliados 186 indivíduos, incluindo pacientes sintomáticos, seus familiares e/ou contatos próximos. Todos, espontaneamente, submeteram-se a inquérito epidemiológico, avaliação clínica e sorologia pelo ensaio imunoenzimático (ELISA) para detecção de anticorpos IgG e IgM anti-Toxoplasma gondii. RESULTADOS: Quarenta indivíduos (21,5 por cento) apresentaram perfil sorológico de toxoplasmose aguda, considerando-se IgM e IgG reagentes em elevados títulos. A análise epidemiológica indicou que os casos poderiam estar vinculados à infecção com oocistos eliminados pelos gatos, cuja população era elevada. A hipótese provável de transmissão seria pelo contato direto com oocistos do parasito, na ingestão de alimentos contaminados, ou, possivelmente, até por inalação dessas formas presentes no solo. A possibilidade de transmissão hídrica por meio do sistema de distribuição de água local foi descartada,já que o sistema é inacessível aos gatos. Os indivíduos doentes foram tratados nos serviços de saúde do Município. Asautoridades sanitárias locais foram orientadas para implementar medidas de controle de gatos errantes, visando prevenir novos casos ou surtos. CONCLUSÃO: O surto ocorrido entre fevereiro e março de 2004, em Monte Dourado-PA, foi causado pelo T. gondii. Admite-se que houve uma somatória de fatores que mantêm a hipótese sustentada da contaminação via oocistos, tais como: elevada população de gatos no Distrito; procedimentos frequentes de jardinagem; e ausência de relatos de ingestão de carne crua ou mal cozida.

OBJECTIVE: To report an outbreak of human toxoplasmosis that occurred in the District of Monte Dourado, Municipality of Almeirim, Pará State, Brazil. MATERIALS AND METHODS: After the positive diagnosis of five patients with symptoms suggestive of toxoplasmosis, clinical research and epidemiology were executed in the locality. A total of 186 individualswere evaluated, including symptomatic patients, their relatives and/or close contacts. All subjects underwent epidemiological inquiry, clinical assessment and serology by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of anti-Toxoplasma gondii IgG and IgM. RESULTS: A total of 40 individuals presented a serological profile of acute toxoplasmosis. Epidemiological analysis indicated that the cases could be related to infection with oocysts eliminated bycats, whose population density was very high in the surveyed locality. The most likely hypothesis of transmission would be through direct contact with oocysts of the parasite, either by the ingestion of contaminated food or by the inhalation of these forms in the soil. The possibility of water transmission through the local supply system was discarded because the system is inaccessible to cats. Infected individuals were treated at the local health care units. Moreover, local health authorities were instructed to implement measures to control stray cats in order to prevent new cases or outbreaks. CONCLUSION: The outbreak that occurred between February and March 2004 in Monte Dourado was caused by T. gondii. The hypothesis of contamination via oocysts of the parasite is supported by several factors, such as a high population density of cats in the surveyed District, frequent gardening habits and a lack of reports of ingestion of raw or undercooked meat.

Comparison of two DNA obtainment methods as alternative protocols for the detection of human malária parasites by nested PCR

The correct and precise laboratory diagnosis of human malaria is still a challenge because the reference method, the Giemsa-stained thick blood smear (TS), has limitations that present problems for malaria control. Because of these problems, several studies have attempted to develop alternative methods for malaria diagnosis. Many of these studies focus on molecular diagnosis methods and have led to the development of some alternatives to TS. However, their limitations include high cost, protocol complexity and variable quality of DNA sources and reagents. Nested PCR has been shown to be a good method in this respect and it can be improved by using a high-quality source of DNA. In this study we evaluated two methods for the obtainment of DNA from dried blood samples on filter paper: 1) washing and 2) saponin/chelex-100. The second method showed higher sensitivity and specificity compared to the first, as it detected more infections, whether single or mixed, as well as Plasmodium malariae infections. Based on these results, we present this method as the protocol of choice for DNA obtainment. Nested PCR using saponin/chelex-100 for DNA extraction could be an alternative or complementary diagnosis method for human malaria parasites, but it is not appropriate for routine use...

Um diagnóstico laboratorial correto e preciso de malária humana ainda é considerado um desafio, pois o método de referência, o da gota espessa com colocação pelo Giemsa, apresenta limitações que dificultam o controle da malária. Devido a esses problemas, várias pesquisas têm objetivado desenvolver métodos alternativos para o diagnóstico da malária. Grande parte desses estudos aborda métodos de diagnóstico molecular, que têm acarretado o desenvolvimento de algumas alternativas ao método de coloração pelo Giemsa. No entanto, esses métodos, por sua vez, apresentam suas limitações, que incluem seu alto custo, a complexidade do protocolo e a variação da qualidade das fontes de DNA e de reagentes. Neste aspecto, a técnica de nested PCR tem demonstrado ser um bom método e pode ser melhorado usando uma fonte de DNA de alta qualidade. Neste estudo foram avaliados dois métodos para a obtenção de DNA de amostras de sangue seco colhidas em papel de filtro: 1) lavagem e 2) saponina/Chelex-100. O segundo método apresentou sensibilidade e especificidade mais altas em relação ao primeiro, pois detectou mais infecções, tanto simples como mistas, bem como infecções por Plasmodium malariae. Com base nesses resultados, apresentamos o segundo como o protocolo de escolha para a obtenção de DNA. A técnica de nested PCR usando saponina/Chelex-100 para extração de DNA pode ser um método alternativo ou complementar de diagnóstico de parasitas da malária humana, mas não é considerado adequado para o uso de rotina...

Risco de transmissão de malária humana em área de implantação de projeto de prospecção mineral, município de Juruti, Estado do Pará / Human malaria transmission risk in an implementation area of mineral prospection, Juruti Municipality, Para State, Brazil

Este estudo objetivou avaliar o risco de transmissão de malária humana em áreas de influência do projeto Juruti no período 2006 a 2008. Um total de 976 mosquitos anofelinos foram capturados por atração humana protegida, identificados e processados para determinação de infectividade pelo teste de imunoensaio (ELISA) e, parte deles (10por cento) para taxa de paridade. Para o inquérito hemoscópico, foram feitas duas coletas (setembro/2007 na comunidade Capiranga e invasão Nova Vitória e março/2008 somente na última) utilizando-se o método da gota expressa (GE). Foram identificadas oito espécies de mosquitos anofelinos, com predomínio da espécie An. albitarsis s.l (76,8por cento) cuja taxa de paridade foi de 9,6por cento. A taxa de infecção foi zero para os primeiros dois anos de estudo e de 0,5por cento em 2008, quando um exemplar de An. albitarsis s.l coletado na comunidade de Santa Maria foi positivo para P. vivax-VK247. O índice de picada homem/hora (IPHH) variou de 0,1 a 8,1. Todas as 148 amostras de sangue foram negativas pela GE. Concluiu-se, portanto, que o risco de transmissão de malária na área estudada é baixo, apesar da presença de mosquitos vetores. Contudo, faz-se necessária vigilância permanente por causa, principalmente, do intenso fluxo migratório gerado pelo projeto.

Toxoplasmose ocular adquirida pós-natal em Belém-Pará / Acquired postnatally ocular toxoplasmosis in Belém city, Pará

Objetivo: investigar a ocorrência de toxoplasmose ocular adquirida pós-natal em Belém-PA, pela análise soro lógica do binômio mãe-filho. Método: estudados 18 pacientes com diagnóstico oftalmológico de toxoplasmose ocular e suas respectivas genitoras, ambos encaminhados ao Laboratório de Toxoplasmose do Instituto Evandro Chagas; os testes sorológicos utilizados foram a lmunofluorescência indireta - IFI (IgG/IgM) e o ensaio imunoenzimático ELISA (IgG; IgM, IgA). Resultados: pela IFI, todos os pacientes apresentaram IgG positivo e IgM negativo; em relação às genitoras, duas apresentaram positividade tanto para IgG quanto para IgM, uma foi negativa para ambos anticorpos e as demais positivas somente para IgG. Pelo ELISA, 2 pacientes foram positivos para todas as classes de anticorpos pesquisados, 1 positivo para IgG e IgM e os demais positivos somente para IgG. Quanto às genitoras, uma foi negativa para as três imunoglobulinas, uma positiva para IgG e IgM, três positivas para IgG, IgM e IgA, três positivas para IgG e IgA e as demais positivas somente para IgG. Conclusão: apesar da casuística ter sido pequena, a análise sorológica do binômio mãe-filho, confirmou que há ocorrência de toxoplasmose ocular adquirida pós-natal na cidade de Belém. Assim, há necessidade de implementar medidas de prevenção para toxoplasmose, devido ao risco de desenvolvimento de manifestações oculares decorrentes da infecção adquirida após o nascimento

[Research on antibodies anti toxoplasma gondii in intraocular fluids (Aqueous and vitreous humor) from patients with ocular toxoplasmosis, in the City of Belém, Pará State]. / Pesquisa de anticorpos anti Toxoplasma gondii em fluidos intra-oculares (humor vítreo e humor aquoso) de pacientes com toxoplasmose ocular, na cidade de Belém, PA.

Tests were performed for antibodies IgG, IgM and IgA anti-Toxoplasma gondii antibodies in serum and intraocular fluids (Aqueous and vitreous humor) from patients with ocular toxoplasmosis. By the results obtained, it was verified that intraocular IgG and IgA anti-Toxoplasma gondii antibodies can be important markers for the diagnosis of ocular toxoplasmosis.

Pesquisa de anticorpos anti Toxoplasma gondii em fluidos intra-oculares (humor vítreo e humor aquoso) de pacientes com toxoplasmose ocular, na cidade de Belém, PA / Research on antibodies anti toxoplasma gondii in intraocular fluids (Aqueous and vitreous humor) from patients with ocular toxoplasmosis, in the City of Belém, Pará State

Foi realizada pesquisa de anticorpos IgG, IgM e IgA anti-Toxoplasma gondii no soro e fluidos intra-oculares (humor aquoso e vítreo) de pacientes com toxoplasmose ocular. A partir dos resultados obtidos verificou-se que anticorpos IgG e IgA intraocular anti-Toxoplasma gondii podem vir a ser importantes marcadores no diagnóstico de toxoplasmose ocular.

Inquérito sorológico de toxoplasmose em candidatos a transplante renal no Hospital Ofir Loyola, Belém, Pará, Brasil / Serological survey of toxoplasmosis in renal transplant candidates at the Ofir Loyola Hospital, Belém, Pará, Brasil

Foi realizada investigação sorológica (2001) com o objetivo de determinar o índice de positividade para toxoplasmose em 82 pacientes com insuficiência renal crônica, de ambos os sexos, com idade entre 11 e 77 anos, submetidos a hemodiálise no setor de Nefrologia do Hospital Ofir Loyola e candidatos a transplante renal. O método sorológico utilizado foi o ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto para detecção de IgG e o de captura para IgM. O índice de positividade observado para IgG foi de 82,93 (68/82). Não foram detectados anticorpos IgM no grupo de pacientes estudado. O indicativo de toxoplasmose pregressa, evidenciado pelo alto índice de positividade para IgG anti-T. gondii nos pacientes estudados, revela a importância do rastreamento sorológico para toxoplasmose nos procedimentos pré-transplantes, devido ao risco de reativação de cistos teciduais do parasito em decorrência da terapia imunossupressora