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Eur Phys J E Soft Matter ; 34(6): 63, 2011 Jun.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-21706281

RESUMEN

The size polydispersity distribution of synaptic vesicles (SVs) is characterized under quasi-physiological conditions by dynamic light scattering (DLS). Highly purified fractions of SVs obtained from rat brain still contain a small amount of larger contaminant structures, which can be quantified by DLS and further reduced by asymmetric-flow field-flow (AFFF) fractionation. The intensity autocorrelation functions g (2)(τ) recorded from these samples are analyzed by a constrained regularization method as well as by an alternative direct modeling approach. The results are in quantitative agreement with the polydispersity obtained from cryogenic electron microscopy of vitrified SVs. Next, different vesicle fusion assays based on samples composed of SVs and small unilamellar proteoliposomes with the fusion proteins syntaxin 1 and SNAP-25A are characterized by DLS. The size increase of the proteoliposomes due to SNARE-dependent fusion with SVs is quantified by DLS under quasi-physiological conditions.


Asunto(s)
Microscopía por Crioelectrón/métodos , Proteolípidos/química , Proteínas SNARE/análisis , Proteínas SNARE/química , Vesículas Sinápticas/química , Vesículas Sinápticas/ultraestructura , Difracción de Rayos X/instrumentación , Animales , Encéfalo/citología , Encéfalo/metabolismo , Cromatografía Liquida , Simulación por Computador , Luz , Fusión de Membrana , Proteínas del Tejido Nervioso/análisis , Proteínas del Tejido Nervioso/química , Proteínas del Tejido Nervioso/metabolismo , Proteolípidos/análisis , Proteolípidos/síntesis química , Proteínas R-SNARE/análisis , Proteínas R-SNARE/química , Proteínas R-SNARE/metabolismo , Ratas , Proteínas SNARE/metabolismo , Dispersión de Radiación , Dispersión del Ángulo Pequeño , Vesículas Sinápticas/metabolismo , Proteína 25 Asociada a Sinaptosomas/análisis , Proteína 25 Asociada a Sinaptosomas/química , Proteína 25 Asociada a Sinaptosomas/metabolismo , Sintaxina 1/análisis , Sintaxina 1/química , Sintaxina 1/metabolismo
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