Charge Engineering of the Nucleic Acid Binding Cleft of a Thermostable HIV-1 Reverse Transcriptase Reveals Key Interactions and a Novel Mechanism of RNase H Inactivation.

Coupled with PCR, reverse transcriptases (RTs) have been widely used for RNA detection and gene expression analysis. Increased thermostability and nucleic acid binding affinity are desirable RT properties to improve yields and sensitivity of these applications. The effects of amino acid substitutions in the RT RNase H domain were tested in an engineered HIV-1 group O RT, containing mutations K358R/A359G/S360A and devoid of RNase H activity due to the presence of E478Q (O3MQ RT). Twenty mutant RTs with Lys or Arg at positions interacting with the template-primer (i.e., at positions 473-477, 499-502 and 505) were obtained and characterized. Most of them produced significant amounts of cDNA at 37, 50 and 65 °C, as determined in RT-PCR reactions. However, a big loss of activity was observed with mutants A477K/R, S499K/R, V502K/R and Y505K/R, particularly at 65 °C. Binding affinity experiments confirmed that residues 477, 502 and 505 were less tolerant to mutations. Amino acid substitutions Q500K and Q500R produced a slight increase of cDNA synthesis efficiency at 50 and 65 °C, without altering the KD for model DNA/DNA and RNA/DNA heteroduplexes. Interestingly, molecular dynamics simulations predicted that those mutations inactivate the RNase H activity by altering the geometry of the catalytic site. Proof of this unexpected effect was obtained after introducing Q500K or Q500R in the wild-type HIV-1BH10 RT and mutant K358R/A359G/S360A RT. Our results reveal a novel mechanism of RNase H inactivation that preserves RT DNA binding and polymerization efficiency without substituting RNase H active site residues.

Cacería para autoconsumo durante la pandemia de COVID-19: el caso de las comunidades Matsigenkas del Parque Nacional del Manu

En este trabajo, se hipotetiza el periodo de aislamiento, la inmovilización y la migración inversa que sucedidos durante la pandemia del COVID-19 (años 2020 y 2021) incrementaron la capacidad de caza de las comunidades Matsigenkas asentadas en el Parque Nacional del Manu (PN Manu). Para esto, evaluamos los cambios en los patrones del volumen de extracción de la caza a través de un monitoreo participativo utilizando el modelo de monitoreo de la intensidad de cacería. Se evidenció que hubo un incremento de la capacidad de caza de las comunidades nativas. Los volúmenes más altos de extracción y el mayor incremento del número de cazadores, esfuerzo y área de cacería se dieron en el periodo 2020 - 2021, cuando las medidas de aislamiento e inmovilización fueron establecidas. Sin embargo, hubo una disminución de los indicadores para la temporada 2021 - 2022, año en que se flexibilizaron las medidas de aislamiento y se dio la reactivación económica, permitiendo que las personas retornaran a sus actividades económicas y educativas fuera del PN Manu. Se debe considerar que los efectos de solo un año de pandemia sobre los medios de subsistencia de las comunidades pudieron afectar la abundancia de la fauna silvestre, donde el mono maquisapa y mono choro (especies vulnerables) tuvieron altos incrementos de extracción. Por otro lado, nuestros resultados indicarían que el buen estado de conservación del PN Manu permitió la provisión de alimentos a las comunidades durante la pandemia. Se recomienda la planificación de programas que mitiguen los efectos negativos de pandemias o eventos semejantes, además se señala la importancia de medir el grado de resiliencia de las principales especies de caza, ya que el incremento de caza también podría tener efectos sobre la seguridad alimentaria de estas comunidades.

In this work, we hypothesize that the period of isolation, immobilization, and reverse migration that occurred during the COVID-19 pandemic (years 2020 and 2021) increased the hunting capacity of the Matsigenka communities settled in Manu National Park (PN Manu). To evaluate this, we assessed changes in hunting volume patterns through participatory monitoring using the hunting intensity monitoring model. It was evident that there was an increase in the hunting capacity of Matsigenka communities. The highest extraction volumes and the greatest increase in the number of hunters, hunting effort, and hunting area occurred in the 2020-2021 period, the year in which isolation and immobilization measures were established. However, there was a decrease in the indicators for the 2021-2022 period, the year in which isolation measures were relaxed and economic reactivation occurred, allowing people to return to their economic and educational activities outside PN Manu. It should be considered that the effects of only one year of the pandemic on the livelihoods of the communities could have affected the abundance of wildlife, with vulnerable species such as maquisapa monkeys and choro monkeys experiencing high extraction rates. On the other hand, our results indicate that the good conservation status of PN Manu provided food provisions for the communities during the pandemic. Planning programs to mitigate the negative effects of pandemics or similar events is recommended, and the importance of measuring the resilience of key hunting species is emphasized, as increased hunting could also have effects on the food security of these communities.

Efficacy Prediction of Four Pharmaceutical Formulations for Intramammary Administration Containing Aloe vera (L.) Burm. f. Combined With Ceftiofur or Cloxacillin in Lactating Cows as an Alternative Therapy to Treat Mastitis Caused by Staphylococcus aureus.

Synergy or additive effect between Aloe vera (L.) Burm.f. and beta-lactam (ß-lactam) antibiotics has been reported against Staphylococcus aureus, one of the most important etiological agents of cow mastitis. The goal of the present study was to predict the efficacy of intramammary formulations containing the Aloe vera gel extract in the combination with cloxacillin or ceftiofur at low concentrations in lactating cows as an alternative therapy. Each quarter of 20 healthy Holstein Friesian lactating cows were treated with a single dose of one of the following formulations, corresponding to one of these treatment groups: A1, A2, A3, and A4. A1 and A2 contained cloxacillin at 0.25 and 0.5 mg/ml, whereas A3 and A4 contained ceftiofur 0.25 and 0.5 mg/ml, respectively. In addition, all formulations contained 600 mg/ml of an alcoholic extract of Aloe vera. Milk samples were taken at predefined time points. Antibiotics and aloin (active compound of Aloe vera) concentrations were assessed by liquid chromatography mass spectrometry system (LC-MS/MS). Pharmacokinetic profiles were obtained, and the efficacy index, the fraction of dosing interval in which the antimicrobial concentration remains above the minimum inhibitory concentrations (MICs) (T > MIC) for each formulation, was calculated considering MIC values against Staphylococcus aureus ATCC 29213 as obtained for the combination Aloe vera + antibiotic and aloin concentration in the extract. Mammary gland safety assessment was performed for each combination. Values of the main efficacy index for this study, T > MIC (h) for Aloe vera were 23.29, 10.50, 27.50, and 13.89, whereas for cloxacillin or ceftiofur were 19.20, 10.9, 19.74, and 15.63, for A1, A2, A3, and A4, respectively. Only A1 and A3 reached aloin and antibiotic recommended values as predictors of clinical efficacy for cloxacillin, ceftiofur, and aloin (50, 70, and 60%, respectively), assuming a dose interval of 24 h. The efficacy index values obtained suggest that A1 and A3 might be an effective therapy to treat bovine mastitis caused by S. aureus after a single dose. Nevertheless, further trials in S. aureus mastitis clinical cases are mandatory to confirm the efficacy of Aloe vera formulations.

Las ONGs latinoaméricanas y los desafío del desarrollo organizacional

El presente trabajo reúne dos estudios que se llevaron a cabo entre febrero y julio de 1999 como parte del diseño del proceso de institucionalización del Proyecto de Planificación Estratégica y Desarrollo Institucional (PEYDI) de la Organización Intereclesiástica de Cooperación al Desarrollo (ICCO) de Holanda.

Tratamiento del carcinoma vesical con bacilos Calmette-Guerin / sss

El carcinoma superficial de celulas transicionales, progresivo de vejiga urinaria, puede ser sometido a tratamiento conservador con electroresección y coagulación esdoscópicas y medicación citolítica, química e inmunológica o una terapia radical con radiación o cistectomía. El criterio clínico apropiado permite aplicar un tratamiento eficaz para evitar el progreso de la enfermedad y lograr su curación. La acción citolítica e inmunológica del BCG, ha sido establecida en la actualidad en el tratamiento del carcinoma in situ de la vejiga. Debido al menor número de recurrencias y de reacciones adversas obtenidas con el uso de esta droga, la hemos empleado a satisfacción como tratamiento coadyuvante o profiláctico después de la electroressección y coagulación endoscópicas de la neoplasia vesical. Actualmemte la cistectomía y otros métodos radicales de tratamiento, son aplicados cuando fracasa la terapia conservadora

El test antígeno prostático específico en el desarrollo del cáncer prostático / SPA Specific antigen test in the development of prostatic cancer

El antígeno prostático específico (APE), es una enzima glicoproteica aislada y producida casi exclusivamente en el epitelio prostático pues recientes estudios inmuno-histoquímicos han permitido detectar trazas, en las glándulas parauretrales de la mujer y en los tumores del uraco remanente, teniendo funcionalmente un papel importante en la licuefacción y degradación del semen

Evaluación de nódulo prostático aislado, asociado a hiperplasia prostática benigna / Evaluation of module prostatic solitary associate at beningn prostatic hyperplasia

En 100 pacientes con hiperplasia prostática benigna preparados y anestesiados, previo a la prostatectomía transuretral, se realizó un examen rectal digital y biopsia guiada digitalmente hacia el nódulo prostático solitario palpable. Esto facilita el examen del paciente, la biopsia prostática con aguja, identifica área sospechosas de malignidad que se remueven endoscópicamente, y ofrece seguridad y confianza a los resultados histológicos y en la selección de la terapia

Conceptos actuales en el tratamiento de la litiasis ureteral / Current concepts in the treatment of uretheral lithiasis

El manejo terapéutico de la litiasis ureteral ha cambiado radicalmente en los últimos años, por la introducción de la endourología y la litotricia extracorpórea, quedando la cirugía abierta para los casos complejos, cuando sea necesario tratar alguna otra anormalidad u ocurran complicaciones severas. La endourología, que primordialmente estaba reservada al trayecto uretrovesical y porción inferior del ureter, se ha extendido con el diseño de nuevos instrumentos y procedimientos técnicos que permiten el tratamiento de los cálculos en todo el trayecto urinario con éxito y pocas complicaciones, mediante la punción renal percutánea o por vía retrógrada uretrovesical. La litotricia extracorpórea se utiliza frecuentemente en las litiasis ureterales con excelente resultado, como tratamiento primario o cuando fracasan las maniobras endourológicas. En el trabajo se exponen los conceptos actuales para el tratamiento de la litiasis ureteral dentro de un moderno servicio de urología

Tratamiento del carcinoma vesical con bacilos Calmette-Guerin / Treatment of vesical carcinoma with bacillus Calmette-Guerin

El carcinoma superficial de células transicionales, progresivo de vejiga urinaria, puede ser sometido a tratamiento conservador con electroresección y coagulación endoscópicas y medicación citolítica, química e inmunológica o una terapia radical con radiación o cistectomía. El criterio clínico apropiado permite aplicar un tratamiento eficaz, para evitar el progreso de la enfermedad y lograr su curación. La acción citolítica e inmunológica del BCG, ha sido establecida en la actualidad en el tratamiento del carcinoma in situ de la vejiga. Debido al menor número de recurrencias y de reacciones adversas obtenidascon el uso de esta droga, la hemos empleado a satisfacción como tratamiento coadyuvante o profiláctico después de la electroresección y coagulación endoscópicas de la neoplasia vesical. Actualmente la cistectomía y otros métodos radicales de tratamiento, son aplicados cuando fracasa la terapia conservadora

Iatrogenia en litotricia extracorporal / Iatrogeny in extracorporeal lithotripsy

La litotricia extracorpóreal con ondas de choque ha ganado mundialmente rápida aceptación y difusión por su efectividad en el tratamiento de la litiasis urinaria. Sin embargo, no es un procedimiento completamente inocuo por la acción traumática que generan las ondas de choque sobre el organismo, especialmente sobre el riñon y tejidos vecinos, así como el potencial desarrollo de efectos deletéreos duraderos. En nuestra experiencia de 263 sesiones de litotricia extracorpórea, con un litotrictor Direx Tripter X-1, generalmente en forma ambulatoria con anestesia conductiva peridural, se demostró que es un procedimiento bastante efectivo, con un 90 por ciento de pacientes libres de cálculos a los 3 meses y una muy baja morbilidad, que permite recomendarlo como tratamiento de primera elección en la litiasis reno-ureteral

Planificación de la enseñanza urológica de post-grado / Planification of the teaching urology of post-graduate

Se presenta un programa organizativo y de planeamiento, de lo que debe constituir la formulación integral del especialista Urólogo que egresa de nuestras Escuelas de Medicina y llene las exigencias básicas actuales científicas, asistenciales, docentes, humanísticas y de investigación en relación a las necesidades sociales y culturales de nuestro País. Hemos seguido lasetapas sucesivas de toda planificación docente, o sea, una formulación precisa y explícita de los objetivos que configura el tipo de producto que se desea lograr, la selección de los contenidos y asignaturas, y la metodología, técnica y materiales a emplear y los criterios de evaluación

Novedades en el diagnóstico y tratamiento del cáncer urogenital / News in diagnostic and treatment of urogenital cancer

Es necesario actualizar periódicamente los progresos obtenidos en la urología oncológica. Los avances de la tecnología moderna aplicados a la medicina y en particular a la urología, nos permiten actualmente una mayor presión en el diagnóstico y tratamiento de la neoplasias urológicas. La investigación básica sobre el origen de los tumores urológicos ha dado valor al concepto de que los cánceres pueden ser producidos por la acción de virus oncógenos sobre células normales del organismo. Los marcadores bioquímicos tumorales, la citologia urinaria y el progreso tecnológico de la endoscopia, la radiología, el empleo de nuevas drogas, contribuyen espectacularmente en la actualidad al diagnóstico y tratamiento de la neoplasias urogenitales. Se revisan los progresos importantes obtenidos en los tumores del riñón, vejiga, prostata y testiculo

Carcinoma epidermoide de pelvis renal / Kidney pelvis epidermoid carcinoma

Se presenta una patología urogenital poco frecuente en la literatura nacional y mundial, que representa 0,6% a 0.8% de los tumores malignos de riñon y a su vez características de agresividad que cualquier tratamiento no modifica su sobrevida

Endourología: Organización en una Cátedra y Servico de Urología / Endourology: Organization of a cathedra and urologic Service

Se presenta la organización ideal de una sección de Endourología dentro de una Cátedra y Servicio de Urología para cumplir funciones docentes asistenciales y de investigación

Organización de una Cátedra y Servicio de Urología / Organization of a Cathedra and Urologic Service

Se presenta una opinión razonada en relación a la organización de una Cátedra y Servicio de Urología que debe cumplir funciones docentes de Pre y Postgrado, extensión universitaria y educación continuada, realizar actividades de investigación y proporcionar asistencia médico-urológica a la población de un Hospital General

Tratamiento conservador del carcinoma vesical superficial / Conservative treatment of superficial vesical carcinoma

Se expone el estudio y tratamiento conservador de los carcinomas transicionales superficiales de la vejiga urinaria. La asociación de la electrorresección y coagulación endoscópicas con la aplicación local de quimioterapia fue empleada en un grupo seleccionado de pacientes, controlados en su evolución durante un tiempo determinado. Los resultados de esta terapéutica son discutidos y analizados