RESUMEN
Cell polarity and morphogenesis are regulated by the small GTPase Cdc42. Even though major advances have been done in the field during the last years, the molecular details leading to its activation in particular cellular contexts are not completely understood. In fission yeast, the ß(1,3)-glucanase Eng2 is a "moonlighting protein" with a dual function, acting as a hydrolase during spore dehiscence, and as component of the endocytic machinery in vegetative cells. Here, we report that Eng2 plays a role in Cdc42 activation during polarized growth through its interaction with the scaffold protein Scd2, which brings Cdc42 together with its guanine nucleotide exchange factor (GEF) Scd1. eng2Δ mutant cells have defects in activation of the bipolar growth (NETO), remaining monopolar during all the cell cycle. In the absence of Eng2 the accumulation of Scd1 and Scd2 at the poles is reduced, the levels of Cdc42 activation decrease, and the Cdc42 oscillatory behavior, associated with bipolar growth in wild type cells, is altered. Furthermore, overexpression of Eng2 partially rescues the growth and polarity defects of a cdc42-L160S mutant. Altogether, our work unveils a new factor regulating the activity of Cdc42, which could potentially link the polarity and endocytic machineries.
Asunto(s)
Polaridad Celular/fisiología , Retroalimentación , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/metabolismo , Proteína de Unión al GTP cdc42/metabolismo , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Factores de Intercambio de Guanina Nucleótido/metabolismo , Schizosaccharomyces/metabolismoRESUMEN
Paxillin is a scaffold protein that participates in focal adhesion signaling in mammalian cells. Fission yeast paxillin ortholog, Pxl1, is required for contractile actomyosin ring (CAR) integrity and collaborates with the ß-glucan synthase Bgs1 in septum formation. We show here that Pxl1's main function is to recruit calcineurin (CN) phosphatase to the actomyosin ring; and thus the absence of either Pxl1 or calcineurin causes similar cytokinesis defects. In turn, CN participates in the dephosphorylation of the Cdc15 F-BAR protein, which recruits and concentrates Pxl1 at the CAR. Our findings suggest the existence of a positive feedback loop between Pxl1 and CN and establish that Pxl1 is a crucial component of the CN signaling pathway during cytokinesis.
Asunto(s)
Calcineurina/metabolismo , Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Citocinesis/fisiología , Proteínas del Citoesqueleto/metabolismo , Proteínas de Unión al GTP/metabolismo , Glucosiltransferasas/metabolismo , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/metabolismo , Schizosaccharomyces/fisiología , Citoesqueleto de Actina/metabolismo , Actomiosina/metabolismo , Calcineurina/genética , Proteínas de Ciclo Celular/genética , Proteínas del Citoesqueleto/genética , Proteínas de Unión al GTP/genética , Glucosiltransferasas/genética , Proteolisis , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/genética , beta-Glucanos/metabolismoRESUMEN
The final step in post-translational processing of Ras and Rho GTPases involves methylation of the prenylated cysteine residue by an isoprenylcysteine-O-carboxyl methyltransferase (ICMT). ICMT activity is essential for cell growth and development in higher eukaryotes, and inhibition of GTPase methylation has become an attractive target in cancer therapy to inactivate prenylated oncoproteins. However, the specificity and dynamics of the GTPase methylation process remain to be fully clarified. Notably, cells lacking Mam4, the ICMT ortholog in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe, are viable. We have exploited this feature to analyze the role of methylation on GTPase localization and function. We show that methylation differentially affects GTPase membrane localization, being particularly relevant for plasma membrane tethering and downstream signaling of palmitoylated and farnesylated GTPases Ras1 and Rho2 lacking C-terminal polybasic motifs. Indeed, Ras1 and Rho2 cysteine methylation is required for proper regulation of differentiation elicited by MAPK Spk1 and for stress-dependent activation of the cell integrity pathway (CIP) and its main effector MAPK Pmk1. Further, Mam4 negatively regulates TORC2 signaling by a cross-inhibitory mechanism relying on Rho GTPase methylation. These results highlight the requirement for a tight control of GTPase methylation in vivo to allow adequate GTPase function.
Asunto(s)
Cisteína/metabolismo , Metilación , Schizosaccharomyces/metabolismo , Proteínas de Unión al GTP rho/metabolismo , Secuencias de Aminoácidos , Secuencia de Aminoácidos , Membrana Celular/metabolismo , Sistema de Señalización de MAP Quinasas , Diana Mecanicista del Complejo 2 de la Rapamicina/metabolismo , Modelos Biológicos , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/metabolismo , Proteínas ras/metabolismo , Proteínas de Unión al GTP rho/químicaRESUMEN
Active Cdc42 is essential for the establishment of polarized growth. This GTPase is negatively regulated by the GTPase-activating proteins (GAPs), which are important for the spatial specificity of Cdc42 function. Rga4 is the only GAP described as negative regulator of fission yeast Cdc42. We report here that Rga6 is another fission yeast Cdc42 GAP which shares some functions with Rga4. Cells lacking Rga6 are viable but slightly shorter and broader than wild type, and cells lacking Rga6 and Rga4 simultaneously are rounded. In these cells, active Cdc42 is observed all around the membrane. These additive effects indicate that both GAPs collaborate in the spatial regulation of active Cdc42. Rga6 localizes to the plasma membrane forming clusters different from those formed by Rga4. A polybasic region at the Rga6 C-terminus is responsible for its membrane localization. Rga6-GFP fluorescence decreases considerably at the growing tips, and this decrease is dependent on the actin cables. Notably, in the absence of Rga6 the amplitude of active Cdc42 oscillations at the tips decreases, and less GTP-Cdc42 accumulates at the new end of the cells. We propose here that Rga6 collaborates with Rga4 to spatially restrict active Cdc42 at the cell tips and maintain cell dimensions.
RESUMEN
F-BAR domain proteins act as linkers between the cell cortex and cytoskeleton, and are involved in membrane binding and bending. Rga7 is one of the seven F-BAR proteins present in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe. In addition to the F-BAR domain in the N-terminal region, Rga7 possesses a Rho GTPase-activating protein (GAP) domain at its C-terminus. We show here that Rga7 is necessary to prevent fragmentation of the contracting ring and incorrect septum synthesis. Accordingly, cultures of cells lacking Rga7 contain a higher percentage of dividing cells and more frequent asymmetric or aberrant septa, which ultimately might cause cell death. The Rga7 F-BAR domain is necessary for the protein localization to the division site and to the cell tips, and also for the Rga7 roles in cytokinesis. In contrast, Rga7 GAP catalytic activity seems to be dispensable. Moreover, we demonstrate that Rga7 cooperates with the two F-BAR proteins Cdc15 and Imp2 to ensure proper cytokinesis. We have also detected association of Rga7 with Imp2, and its binding partners Fic1 and Pxl1. Taken together, our findings suggest that Rga7 forms part of a protein complex that coordinates the late stages of cytokinesis.
Asunto(s)
Proteínas de Ciclo Celular/metabolismo , Citocinesis/fisiología , Proteínas de Unión al GTP/metabolismo , Proteínas Activadoras de GTPasa/metabolismo , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/metabolismo , Schizosaccharomyces/metabolismo , Actomiosina/metabolismo , Estructura Terciaria de Proteína , Schizosaccharomyces/citologíaRESUMEN
Rho1 GTPase is the main activator of cell wall glucan biosynthesis and regulates actin cytoskeleton in fungi, including Schizosaccharomyces pombe. We have obtained a fission yeast thermosensitive mutant strain carrying the rho1-596 allele, which displays reduced Rho1 GTPase activity. This strain has severe cell wall defects and a thermosensitive growth, which is partially suppressed by osmotic stabilization. In a global screening for rho1-596 multicopy suppresors the pmp1+ gene was identified. Pmp1 is a dual specificity phosphatase that negatively regulates the Pmk1 mitogen-activated protein kinase (MAPK) cell integrity pathway. Accordingly, elimination of Pmk1 MAPK partially rescued rho1-596 thermosensitivity, corroborating the unexpected antagonistic functional relationship of these genes. We found that rho1-596 cells displayed increased basal activation of the cell integrity MAPK pathway and therefore were hypersensitive to MgCl2 and FK506. Moreover, the absence of calcineurin was lethal for rho1-596. We found a higher level of calcineurin activity in rho1-596 than in wild-type cells, and overexpression of constitutively active calcineurin partially rescued rho1-596 thermosensitivity. All together our results suggest that loss of Rho1 function causes an increase in the cell integrity MAPK activity, which is detrimental to the cells and turns calcineurin activity essential.
Asunto(s)
Calcineurina/metabolismo , Pared Celular/metabolismo , Fosfatasa 1 de Especificidad Dual/genética , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/genética , Proteínas de Unión al GTP rho/genética , Secuencia de Aminoácidos , Fosfatasa 1 de Especificidad Dual/metabolismo , Regulación Fúngica de la Expresión Génica/efectos de los fármacos , Glucanos/biosíntesis , Sistema de Señalización de MAP Quinasas , Cloruro de Magnesio/farmacología , Proteínas Quinasas Activadas por Mitógenos/genética , Proteínas Quinasas Activadas por Mitógenos/metabolismo , Mutación , Presión Osmótica , Fosforilación/efectos de los fármacos , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/metabolismo , Tacrolimus/farmacología , Proteínas de Unión al GTP rho/metabolismoRESUMEN
Micromonospora strains have been isolated from diverse niches, including soil, water, and marine sediments and root nodules of diverse symbiotic plants. In this work, we report the genome sequence of Micromonospora lupini Lupac 08 isolated from root nodules of the wild legume Lupinus angustifolious.
Asunto(s)
ADN Bacteriano/química , ADN Bacteriano/genética , Genoma Bacteriano , Lupinus/microbiología , Micromonospora/genética , Nódulos de las Raíces de las Plantas/microbiología , Análisis de Secuencia de ADN , Micromonospora/aislamiento & purificación , Datos de Secuencia MolecularRESUMEN
Schizosaccharomyces pombe Rho2 GTPase regulates alpha-D-glucan synthesis and acts upstream of Pck2 to activate the MAP kinase pathway for cell integrity. However, little is known about its regulation. Here we describe Rga2 as a Rho2 GTPase-activating protein (GAP) that regulates cell morphology. rga2+ gene is not essential for growth but its deletion causes longer and thinner cells whereas rga2+ overexpression causes shorter and broader cells. rga2+ overexpression also causes abnormal accumulation of Calcofluor-stained material and cell lysis, suggesting that it also participates in cell wall integrity. Rga2 localizes to growth tips and septum region. The N-terminal region of the protein is required for its correct localization whereas the PH domain is necessary exclusively for Rga2 localization to the division area. Also, Rga2 localization depends on polarity markers and on actin polymerization. Rga2 interacts with Rho2 and possesses in vitro and in vivo GAP activity for this GTPase. Accordingly, rga2Delta cells contain more alpha-D-glucan and therefore partially suppress the thermosensitivity of mok1-664 cells, which have a defective alpha-D-glucan synthase. Additionally, genetic interactions and biochemical analysis suggest that Rga2 regulates Rho2-Pck2 interaction and might participate in the regulation of the MAPK cell integrity pathway.
Asunto(s)
Proteínas Activadoras de GTPasa/metabolismo , Regulación Fúngica de la Expresión Génica , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/metabolismo , Schizosaccharomyces/genética , Proteínas de Unión al GTP rho/metabolismo , Actinas/metabolismo , Polaridad Celular , Pared Celular/metabolismo , ADN de Hongos/genética , Proteínas Activadoras de GTPasa/genética , Eliminación de Gen , Genes Fúngicos , Glucanos/metabolismo , Sistema de Señalización de MAP Quinasas , Microscopía Fluorescente , Morfogénesis , Schizosaccharomyces/citología , Schizosaccharomyces/metabolismo , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/genética , Proteínas de Unión al GTP rho/genéticaRESUMEN
Schizosaccharomyces pombe Rho GTPases regulate actin cytoskeleton organization and cell integrity. We studied the fission yeast gene SPBC4F6.12 based on its ability to suppress the thermosensitivity of cdc42-1625 mutant strain. This gene, named pxl1(+), encodes a protein with three LIM domains that is similar to paxillin. Pxl1 does not interact with Cdc42 but it interacts with Rho1, and it negatively regulates this GTPase. Fission yeast Pxl1 forms a contractile ring in the cell division region and deletion of pxl1(+) causes a delay in cell-cell separation, suggesting that it has a function in cytokinesis. Pxl1 N-terminal region is required and sufficient for its localization to the medial ring, whereas the LIM domains are necessary for its function. Pxl1 localization requires actin polymerization and the actomyosin ring, but it is independent of the septation initiation network (SIN) function. Moreover, Pxl1 colocalizes and interacts with Myo2, and Cdc15, suggesting that it is part of the actomyosin ring. Here, we show that in cells lacking Pxl1, the myosin ring is not correctly assembled and that actomyosin ring contraction is delayed. Together, these data suggest that Pxl1 modulates Rho1 GTPase signaling and plays a role in the formation and contraction of the actomyosin ring during cytokinesis.
Asunto(s)
Citocinesis/fisiología , Paxillin/metabolismo , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/metabolismo , Schizosaccharomyces/metabolismo , Proteínas de Unión al GTP rho/metabolismo , Actomiosina/química , Actomiosina/metabolismo , Citocinesis/genética , Genes Fúngicos , Complejos Multiproteicos , Mutación , Miosina Tipo II/química , Miosina Tipo II/metabolismo , Paxillin/química , Paxillin/genética , Estructura Terciaria de Proteína , Proteínas Recombinantes de Fusión/química , Proteínas Recombinantes de Fusión/genética , Proteínas Recombinantes de Fusión/metabolismo , Schizosaccharomyces/citología , Schizosaccharomyces/genética , Schizosaccharomyces/crecimiento & desarrollo , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/química , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/genética , Temperatura , Proteína de Unión al GTP cdc42 de Saccharomyces cerevisiae/genética , Proteína de Unión al GTP cdc42 de Saccharomyces cerevisiae/metabolismo , Proteínas de Unión al GTP rho/genéticaRESUMEN
Cdc42 GTPase plays a critical role in the establishment of cell polarity in most eukaryotic organisms. Cdc42 active state, as that of other GTPases, depends on the bound nucleotide. The protein with GTP is active, and only in this state can it interact with different target effector proteins. The spatio-temporal control of Cdc42 activity is therefore necessary to generate growth polarity. In fission yeast cells, Cdc42 mainly localizes to the division area, and also to the growing tips and to some internal membranes. While the role of Cdc42 in apical growth is well defined, no role has been described for Cdc42 in the process of cell division. Fission yeast Cdc42 activity is regulated by two specific guanidine nucleotide exchange factors (GEFs), Scd1, and Gef1. We discuss here how Hob3, a BAR domain containing protein similar to human BIN3 and S. cerevisiaeRsv161, may be required to recruit Cdc42 to the cell division site as well as for the activation of this GTPase mediated by Gef1. We also discuss the possible role of Cdc42 in the contraction of the actomyosin ring necessary for cytokinesis.
Asunto(s)
Proteínas Portadoras/metabolismo , Polaridad Celular , Citocinesis/fisiología , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/metabolismo , Proteína de Unión al GTP cdc42 de Saccharomyces cerevisiae/metabolismo , Proteínas Portadoras/genética , Ciclo Celular/fisiología , Canales de Cloruro/genética , Canales de Cloruro/metabolismo , Activación Enzimática , Humanos , Proteínas Recombinantes de Fusión/genética , Proteínas Recombinantes de Fusión/metabolismo , Schizosaccharomyces/citología , Schizosaccharomyces/genética , Schizosaccharomyces/metabolismo , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/genética , Proteína de Unión al GTP cdc42 de Saccharomyces cerevisiae/genéticaRESUMEN
Cdc42 GTPase is required for polarization in eukaryotic cells, but its spatial regulation is poorly understood. In Schizosaccharomyces pombe, Cdc42p is activated by Scd1p and Gef1p, two guanine-nucleotide exchange factors. Two-hybrid screening identified Hob3p as a Gef1p binding partner. Hob3p is a BAR domain-containing protein ortholog of human Bin3. Hob3p also interacts directly with Cdc42p independently of Gef1p. Hob3p, Cdc42p and Gef1p form a complex, and Hob3p facilitates Gef1p-Cdc42p interaction and activation. Hob3p forms a ring in the division area, similar to that of Gef1p. This localization requires actin polymerization and Cdc15p but is independent of the septation initiation network. Hob3p is required for the concentration of Cdc42p to the division area. The actomyosin ring contraction is slower in hob3Delta than in wild-type cells, and this contributes to its cytokinesis defect. Moreover, this report extends previous evidence that human Bin3 suppresses the cytokinesis phenotype of hob3Delta cells, showing that Bin3 can partially recover the GTP-Cdc42p level and its localization. These results suggest that Hob3p is required to recruit and activate Cdc42p at the cell division site and that this function might be conserved in other eukaryotes.
Asunto(s)
Proteínas Portadoras/metabolismo , Citocinesis , Proteínas de Microfilamentos/metabolismo , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/metabolismo , Schizosaccharomyces/citología , Homología de Secuencia de Aminoácido , Proteína de Unión al GTP cdc42/metabolismo , Actinas/metabolismo , Actomiosina/metabolismo , Polaridad Celular , Activación Enzimática , Unión Proteica , Transporte de ProteínasRESUMEN
Introduccion: El compromiso de raquis cervical alto en la artritis reumatoide (AR) no es una entidad estatica; por el contrario, es una afeccion dinamica y progresiva. Esta cadena lesional comienza con la subluxacion C1-C2 anterior reducible hasta la rigidez, con la consiguiente migracion de la odontoides hacia el foramen magno, que ocasiona invalidez o la muerte del paciente. La subluxacion C1-C2 se encuentra en el 80 por ciento de los pacientes a los 24 meses del diagnostico y en el 100 por ciento de ellos a los 5 años de la aparicion de la enfermedad. El hecho de que las lesiones neurologicas no esten presentes en todos los pacientes con luxaciones genera la discusion si se debe o no artrodesar tempranamente esta articulacion. Materiales y metodos: Se evaluaron 17 pacientes mujeres con artritis reumatoide con compromiso de la columna cervical alta.Todas fueron estudiadas en forma clinica y electrofisiologica con EMG y PESS, radiografias y resonancia magnetica (RM). Se solicitaron radiografias transoral, anteroposterior, perfil neutro, en flexion y en extension. Resultados: Todos los pacientes intervenidos quirurgicamente y evaluados en esta serie fueron mujeres, con un promedio de edad de 59 años (45-72). El seguimiento medio fue de 18 meses (5-36). Todas las pacientes del grupo A fueron ambulatorias y se les realizo una fusion C1-C2 con tornillos transarticulares segun Magerl. Al final del seguimiento no evidenciaron progresion de las lesiones radiologicas ni del compromiso clinico-neurologico. Todas las pacientes del grupo B fueron no ambulatorias. En todos los casos se trato de lesiones cervicales altas rigidas con migracion de la odontoides. Todas las fijaciones fueron hasta el occipital. Todas las pacientes del grupo B presentaron complicaciones intraoperatorias y posoperatorias que requirieron, en algunos casos, asistencia respiratoria mecanica (ARM) posoperatoria. La tasa de mortalidad de este grupo fue del 40 por ciento. Conclusiones: La fusion pre...(AU)
Asunto(s)
Femenino , Persona de Mediana Edad , Anciano , Artritis Reumatoide , Vértebras Cervicales/cirugía , Fusión Vertebral , Traumatismos Vertebrales/clasificaciónRESUMEN
Introduccion: El compromiso de raquis cervical alto en la artritis reumatoide (AR) no es una entidad estatica; por el contrario, es una afeccion dinamica y progresiva. Esta cadena lesional comienza con la subluxacion C1-C2 anterior reducible hasta la rigidez, con la consiguiente migracion de la odontoides hacia el foramen magno, que ocasiona invalidez o la muerte del paciente. La subluxacion C1-C2 se encuentra en el 80 por ciento de los pacientes a los 24 meses del diagnostico y en el 100 por ciento de ellos a los 5 años de la aparicion de la enfermedad. El hecho de que las lesiones neurologicas no esten presentes en todos los pacientes con luxaciones genera la discusion si se debe o no artrodesar tempranamente esta articulacion. Materiales y metodos: Se evaluaron 17 pacientes mujeres con artritis reumatoide con compromiso de la columna cervical alta.Todas fueron estudiadas en forma clinica y electrofisiologica con EMG y PESS, radiografias y resonancia magnetica (RM). Se solicitaron radiografias transoral, anteroposterior, perfil neutro, en flexion y en extension. Resultados: Todos los pacientes intervenidos quirurgicamente y evaluados en esta serie fueron mujeres, con un promedio de edad de 59 años (45-72). El seguimiento medio fue de 18 meses (5-36). Todas las pacientes del grupo A fueron ambulatorias y se les realizo una fusion C1-C2 con tornillos transarticulares segun Magerl. Al final del seguimiento no evidenciaron progresion de las lesiones radiologicas ni del compromiso clinico-neurologico. Todas las pacientes del grupo B fueron no ambulatorias. En todos los casos se trato de lesiones cervicales altas rigidas con migracion de la odontoides. Todas las fijaciones fueron hasta el occipital. Todas las pacientes del grupo B presentaron complicaciones intraoperatorias y posoperatorias que requirieron, en algunos casos, asistencia respiratoria mecanica (ARM) posoperatoria. La tasa de mortalidad de este grupo fue del 40 por ciento. Conclusiones: La fusion pre...(AU)
Asunto(s)
Femenino , Persona de Mediana Edad , Anciano , Artritis Reumatoide , Vértebras Cervicales/cirugía , Fusión Vertebral , Traumatismos Vertebrales/clasificaciónRESUMEN
Introduccion: El compromiso de raquis cervical alto en la artritis reumatoide (AR) no es una entidad estatica; por el contrario, es una afeccion dinamica y progresiva. Esta cadena lesional comienza con la subluxacion C1-C2 anterior reducible hasta la rigidez, con la consiguiente migracion de la odontoides hacia el foramen magno, que ocasiona invalidez o la muerte del paciente. La subluxacion C1-C2 se encuentra en el 80 por ciento de los pacientes a los 24 meses del diagnostico y en el 100 por ciento de ellos a los 5 años de la aparicion de la enfermedad. El hecho de que las lesiones neurologicas no esten presentes en todos los pacientes con luxaciones genera la discusion si se debe o no artrodesar tempranamente esta articulacion. Materiales y metodos: Se evaluaron 17 pacientes mujeres con artritis reumatoide con compromiso de la columna cervical alta.Todas fueron estudiadas en forma clinica y electrofisiologica con EMG y PESS, radiografias y resonancia magnetica (RM). Se solicitaron radiografias transoral, anteroposterior, perfil neutro, en flexion y en extension. Resultados: Todos los pacientes intervenidos quirurgicamente y evaluados en esta serie fueron mujeres, con un promedio de edad de 59 años (45-72). El seguimiento medio fue de 18 meses (5-36). Todas las pacientes del grupo A fueron ambulatorias y se les realizo una fusion C1-C2 con tornillos transarticulares segun Magerl. Al final del seguimiento no evidenciaron progresion de las lesiones radiologicas ni del compromiso clinico-neurologico. Todas las pacientes del grupo B fueron no ambulatorias. En todos los casos se trato de lesiones cervicales altas rigidas con migracion de la odontoides. Todas las fijaciones fueron hasta el occipital. Todas las pacientes del grupo B presentaron complicaciones intraoperatorias y posoperatorias que requirieron, en algunos casos, asistencia respiratoria mecanica (ARM) posoperatoria. La tasa de mortalidad de este grupo fue del 40 por ciento. Conclusiones: La fusion pre...
Asunto(s)
Femenino , Persona de Mediana Edad , Artritis Reumatoide , Fusión Vertebral , Traumatismos Vertebrales/clasificación , Vértebras Cervicales/cirugíaRESUMEN
Introducción: Debido al conocimiento exacto del sitio de la lesión y al mejor entendimiento de los mecanismos traumáticos, el abordaje quirúrgico de las fracturas toracolumbares ha tenido una importante evolución en cuanto a su clasificación y tratamiento. El abordaje simultáneo, por tratarse de una sola cirugía, reduce el porcentaje de complicaciones y al mismo tiempo, es un método dinámico de reducción de la fractura con control completo de las columnas anterior y posterior.Materiales y métodos: Se evaluó una serie consecutiva de 16 pacientes tratados con abordaje quirúrgico simultáneo. Las patologías incluidas fueron todas fracturas toracolumbares agudas. Registros, partes quirúrgicos, radiografías preoperatorias y posoperatorias, tomografía computarizada (TC) y resonancia magnética (RM) de todos los pacientes se revisaron con cuidado desde el ingreso hasta el último control evolutivo. Todas las fracturas se clasificaron según las clasificaciones de McCormack y de Oner. Se tomaron retrospectivamente los datos de todos los pacientes, que incluyeron: edad, sexo, diagnóstico, puntos de la clasificación de McCormack, clasificación de Oner, estado neurológico, cifosis preoperatoria, grados corregidos quirúrgicamente, niveles fusionados, pérdida de sangre estimada, reposición de líquidos, reposición sanguínea, tiempo operatorio, complicaciones y tiempo de hospitalización. Ambas clasificaciones se utilizaron de manera combinada para tomar la decisión quirúrgica. El abordaje simultáneo se realizó en pacientes que reunían 7 puntos o más de la clasificación de McCormack, en combinación con disrupción parcial (PLC 2 o 3) o completa (PLC 4) del complejo ligamentario posterior en la clasificación de Oner. Resultados: En este estudio se incluyeron 16 pacientes, de los cuales 7 fueron mujeres. La edad promedio fue de 35,5 años, con una mínima de 16 y una máxima de 55 años. El promedio de seguimiento fue de 32 meses, con un seguimiento mínimo de 16 y un máximo de 48 meses...(AU)
Asunto(s)
Humanos , Vértebras Torácicas/cirugía , Vértebras Lumbares/cirugía , Traumatismos Vertebrales , Fusión Vertebral , Fracturas Óseas/clasificaciónRESUMEN
Respiratory viruses (RVs) are known to be major causes of morbidity and mortality in recipients of hematopoietic stem cell transplants (HSCTs), but prospective long-term studies are lacking. We prospectively screened all adult HSCT recipients (172 allogeneic [alloHSCT] and 240 autologous [autoHSCT]) who underwent transplantation during a 4-year period (1999 to 2003) for the development of a first episode of symptomatic upper respiratory tract infections and/or lower respiratory tract infections (LRTI) by an RV. RVs studied were influenza A and B viruses (n=39), human respiratory syncytial virus (n=19), human adenoviruses (n=11), human parainfluenza viruses 1 to 3 (n=8), human enteroviruses (n=5), human rhinoviruses (n=3), and the recently discovered human metapneumoviruses (n=19). During the study, 51 and 32 cases of RV symptomatic infections were identified of alloHSCT and autoHSCT recipients (2-year incidence, 29% and 14%, respectively). Risk factors for progression of upper respiratory tract infection to LRTI included severe (<0.2x10(9)/L) and moderate (<0.2x10(9)/L) lymphocytopenia in alloHSCT (P=.02) and autoHSCT (P=.03). Death from LRTI was attributed to an RV in 8 alloHSCT recipients. Symptomatic RV had no effect on 2-year outcomes, with the possible exception of influenza A and B virus infections in autoHSCT: these were associated with nonrelapse mortality (P=.02). In conclusion, this prospective trial allows an estimation of the minimum incidence of a first RV infection in adult HSCT recipients and identifies risk factors for acquisition of an RV infection and progression to LRTI; this should aid in the design of future studies. In addition, human metapneumovirus should be added to the potentially serious causes of RV infections in HSCT.
Asunto(s)
Neoplasias Hematológicas/complicaciones , Trasplante de Células Madre Hematopoyéticas/efectos adversos , Infecciones del Sistema Respiratorio/diagnóstico , Infecciones del Sistema Respiratorio/virología , Adulto , Anciano , Salud de la Familia , Femenino , Neoplasias Hematológicas/terapia , Humanos , Incidencia , Masculino , Tamizaje Masivo , Persona de Mediana Edad , Estudios Prospectivos , Infecciones del Sistema Respiratorio/epidemiología , Factores de Riesgo , Factores de Tiempo , Trasplante Autólogo , Trasplante Homólogo , Resultado del Tratamiento , Virus/aislamiento & purificaciónRESUMEN
Introducción: Debido al conocimiento exacto del sitio de la lesión y al mejor entendimiento de los mecanismos traumáticos, el abordaje quirúrgico de las fracturas toracolumbares ha tenido una importante evolución en cuanto a su clasificación y tratamiento. El abordaje simultáneo, por tratarse de una sola cirugía, reduce el porcentaje de complicaciones y al mismo tiempo, es un método dinámico de reducción de la fractura con control completo de las columnas anterior y posterior.Materiales y métodos: Se evaluó una serie consecutiva de 16 pacientes tratados con abordaje quirúrgico simultáneo. Las patologías incluidas fueron todas fracturas toracolumbares agudas. Registros, partes quirúrgicos, radiografías preoperatorias y posoperatorias, tomografía computarizada (TC) y resonancia magnética (RM) de todos los pacientes se revisaron con cuidado desde el ingreso hasta el último control evolutivo. Todas las fracturas se clasificaron según las clasificaciones de McCormack y de Oner. Se tomaron retrospectivamente los datos de todos los pacientes, que incluyeron: edad, sexo, diagnóstico, puntos de la clasificación de McCormack, clasificación de Oner, estado neurológico, cifosis preoperatoria, grados corregidos quirúrgicamente, niveles fusionados, pérdida de sangre estimada, reposición de líquidos, reposición sanguínea, tiempo operatorio, complicaciones y tiempo de hospitalización. Ambas clasificaciones se utilizaron de manera combinada para tomar la decisión quirúrgica. El abordaje simultáneo se realizó en pacientes que reunían 7 puntos o más de la clasificación de McCormack, en combinación con disrupción parcial (PLC 2 o 3) o completa (PLC 4) del complejo ligamentario posterior en la clasificación de Oner. Resultados: En este estudio se incluyeron 16 pacientes, de los cuales 7 fueron mujeres. La edad promedio fue de 35,5 años, con una mínima de 16 y una máxima de 55 años. El promedio de seguimiento fue de 32 meses, con un seguimiento mínimo de 16 y un máximo de 48 meses...
Asunto(s)
Humanos , Traumatismos Vertebrales , Fusión Vertebral , Vértebras Lumbares/cirugía , Vértebras Torácicas/cirugía , Fracturas Óseas/clasificaciónRESUMEN
Realizamos un estudio del plano sagital de la columna vertebral, en cuanto a la relacion que guarda con la posicion de la pelvis, en 25 pacientes que presentaban lumbalgias progresivas de 2 años de evolucion, sin cirugias previas, escoliosis u otras patologias de columna agregadas. Todos los pacientes fueron evaluados en forma clinica y radiografica y con resonancia magnetica. Fueron agrupados en 3 niveles de afectacion: discopatias altas (L2-L3, L3-L4), discopatias medias (L4-L5) y discopatias bajas (L4-L5, L5-S1). Se tomaron las siguientes mediciones radiologicas: incidencia pelviana, version pelviana, punta sacra o sacral slope, lordosis lumbar y gite sagital o Th9 tilt. En las discopatias altas se observo una retroversion pelviana con valores de lordosis lumbar por debajo de los limites inferiores. En el grupo de discopatias flotantes (L4-L5) la incidencia se encontro mas cercana a los valores normales, la pelvis se encuentra en retroversion y existe menor perdida de lordosis lumbar. En el ultimo grupo (L4-L5, L5-S1) la incidencia pelviana es normal y la retroversion pelviana es menor que en el grupo anterior, como tambien la retropulsion de tronco. Creemos que el comportamiento de la pelvis y de la columna lumbar, en pacientes con discopatias, tiende a generar mecanismos compensadores para colocar el tronco dentro del eje de carga fisiologico. El tratamiento debe estar orientado a recuperar la relacion lumbo-pelvica correcta y el equilibrio del balance sagital
Asunto(s)
Lordosis , Dolor de la Región Lumbar , Pelvis/diagnóstico por imagen , Vértebras Lumbares/diagnóstico por imagenRESUMEN
Schizosaccharomyces pombe Rho1p regulates (1,3)beta-d-glucan synthesis and is required for cell integrity maintenance and actin cytoskeleton organization, but nothing is known about the regulation of this protein. At least nine different S. pombe genes code for proteins predicted to act as Rho GTPase-activating proteins (GAPs). The results shown in this paper demonstrate that the protein encoded by the gene named rga5+ is a GAP specific for Rho1p. rga5+ overexpression is lethal and causes morphological alterations similar to those reported for Rho1p inactivation. rga5+ deletion is not lethal and causes a mild general increase in cell wall biosynthesis and morphological alterations when cells are grown at 37 degrees C. Upon mild overexpression, Rga5p localizes to growth areas and possesses both in vivo and in vitro GAP activity specific for Rho1p. Overexpression of rho1+ in rga5Delta cells is lethal, with a morphological phenotype resembling that of the overexpression of the constitutively active allele rho1G15V. In addition (1,3)beta-d-glucan synthase activity, regulated by Rho1p, is increased in rga5Delta cells and decreased in rga5-overexpressing cells. Moreover, the increase in (1,3)beta-d-glucan synthase activity caused by rho1+ overexpression is considerably higher in rga5Delta than in wild-type cells. Genetic interactions suggest that Rga5p is also important for the regulation of the other known Rho1p effectors, Pck1p and Pck2p.
Asunto(s)
Pared Celular/metabolismo , Proteínas Activadoras de GTPasa/metabolismo , Regulación Fúngica de la Expresión Génica , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/metabolismo , Schizosaccharomyces/ultraestructura , Proteínas de Unión al GTP rho/metabolismo , Proteínas Activadoras de GTPasa/genética , Eliminación de Gen , Glucosiltransferasas/metabolismo , Proteína Quinasa C/metabolismo , Schizosaccharomyces/genética , Schizosaccharomyces/metabolismo , Proteínas de Schizosaccharomyces pombe/genéticaRESUMEN
Schizosaccharomyces pombe cdc42(+) regulates cell morphology and polarization of the actin cytoskeleton. Scd1p/Ral1p is the only described guanine nucleotide exchange factor (GEF) for Cdc42p in S. pombe. We have identified a new GEF, named Gef1p, specifically regulating Cdc42p. Gef1p binds to inactive Cdc42p but not to other Rho GTPases in two-hybrid assays. Overexpression of gef1(+) increases specifically the GTP-bound Cdc42p, and Gef1p is capable of stimulating guanine nucleotide exchange of Cdc42p in vitro. Overexpression of gef1(+) causes changes in cell morphology similar to those caused by overexpression of the constitutively active cdc42G12V allele. Gef1p localizes to the septum. gef1(+) deletion is viable but causes a mild cell elongation and defects in bipolar growth and septum formation, suggesting a role for Gef1p in the control of cell polarity and cytokinesis. The double mutant gef1delta scd1delta is not viable, indicating that they share an essential function as Cdc42p activators. However, both deletion and overexpression of either gef1(+) or scd1(+) causes different morphological phenotypes, which suggest different functions. Genetic evidence revealed a link between Gef1p and the signaling pathway of Shk1/Orb2p and Orb6p. In contrast, no genetic interaction between Gef1p and Shk2p-Mkh1p pathway was observed.