Chagas cardiomyopathy is associated with a high susceptibility to T. cruzi infection in monocyte-derived macrophages and a predominance of CD4+CD45RO+ T-cells with immunoregulatory patterns.

The pathogenesis of Chronic Chagas Cardiomyopathy (CCC) is still not fully understood, and the persistence of the parasite in tissues seems to be essential for the onset and progression of heart disease, tissue destruction, and chronic inflammation. It is clear that the polarity found between the asymptomatic (IND) and cardiac clinical forms refers mainly to the mechanisms involved in the regulation of the host's immune response. Thus, to elucidate aspects of the susceptibility of host phagocytes to T. cruzi infection, the present study explored novel aspects of innate immune response, integrating data on susceptibility to infection and intracellular replication, using monocyte-derived macrophages from CCC patients, together with memory CD4+ T-cells (CD45RO+). The isolation of PBMC was conducted by means of in vitro infection assay with T. cruzi trypomastigotes and flow cytometry analysis of the intracytoplasmic cytokine production by CD4+T-cells. Our findings indicated that monocytes derived from individuals with CCC are more susceptible to the infection and replication of intracellular amastigotes. Moreover, the stimulation of CD4+ T-cells from CCC patients, together with T. cruzi trypomastigotes, induces a predominance of a regulatory response over a type 1 response, demonstrated by an increase in IL-10 production and a reduction in the IFN-γ and IFN-γ/IL-10. Suppression of the function of monocyte-derived macrophages, from CCC patients, to control trypomastigote infection and intracellular replication sheds light on a potential susceptibility of these cells isolated from peripheral blood, which may reflect the ineffectiveness of parasite control by phagocytes in cardiac tissues, which can subsequently result in serious heart disease.

Parasitological and immunological evaluation of cattle experimentally infected with Trypanosoma vivax.

Trypanosoma vivax infection causes relevant economical impact due to high morbidity and mortality leading to negative impact on local livestock. Despite parasitological and serological methods are used for the diagnosis of T. vivax infection, gaps regarding sensitivity and specificity of these methods still represent a challenge. The present study aimed to compare the kinetics of parasitological and serological parameters in cattle experimentally infected with T. vivax along with immunophenotypic analysis of whole blood leukocytes. Based on the parasitemia profile the analysis were performed in three distinct periods, referred as pre-patent, patent and post-treatment. Distinct kinetics of anti-T. vivax IgM and IgG were observed during the pre-patent, patent and post-treatment periods. Increased levels of WC1+ γδ T-cells were observed throughout the infection with strong correlations with other biomarkers observed during post-treatment period. Our findings demonstrated that there is a important participation of Monocytes:CD14+; NK-cells:CD335+ and WC1+ γδ T-cells that coincide with the peak of parasitemia and also with the adaptive immunity, specially CD4+ T-cells in T. vivax infection. The knowledge of the immune response is important not only for understanding the biology of the parasite in the host, but for the design of new treatment strategies for trypanosome infections.

Callithrix penicillata: a feasible experimental model for dengue virus infection.

Although the murine models have the feasibility to reproduce some signs of dengue Virus (DENV) infection, the use of isogenic hosts with polarized immune response patterns does not reproduce the particularities of human disease. Our goal was to investigate the kinetics of peripheral blood biomarkers in immunocompetent Callithrix penicillata non-human primates subcutaneously infected with DENV-3. The viral load of infected animals was determinated by quantitative real time PCR. Measurements of DENV-3/IgM were performed, and several parameters were assessed by hemogram: red blood cells count, hemoglobin, hematocrit, white blood cells count, neutrophils, monocytes, lymphocytes, and platelets count. The coagulogram was performed by prothrombin time (PT), and activated partial thromboplastin time (APTT) assays. The renal function was monitored by urea and creatinine, and the liver function by the aspartate (AST), and alanine (ALT) aminotransferases. Also, the level of the cytokines IL-6, TNF-α, IL-2, IFN-γ, IL-4 and IL-5 was quantified during the experimental study. Data analysis was performed considering relevant differences when baseline fold changes were found outside from 0.75 to 1.5 range. Our data demonstrated that infected animals presented relevant signs of dengue disease, including peaks of viremia at 5 days-post-infection (dpi), peaks of anti-DENV-3 IgM at 15 dpi and hemaglutination inhibition assay (HIA) from 15 to at 60 dpi. Despite early monocytosis, slight neutrophilia and lymphocytosis, animals developed persistent leucopenia starting at 4 dpi. Anemia episodes were steady at 3-4 dpi. Patent thrombocytopenia was observed from 1 to 15 dpi with sporadic decrease of APTT. A substantial increase of ALT and AST was observed with higher peak at 4 dpi. Moreover, early increases of TNF-alpha and IFN-gamma besides late increase of IFN-gamma were observed. The analysis of biomarkers network pointed out two relevant strong axes during early stages of dengue fever, a protective axes TNF-alpha/Lymphocytes/Platelets, and a pathological IL-2/IL-6/Viremia/Monocyte/PT bond. Later on, the biomarker network highlighted the interaction IFN-gamma/PLT/DENV-3(IgM;HAI)/PT, and the involvement of type-2 cytokines (IL-4; IL-5). Our findings demonstrated that C. penicillata is a feasible experimental model for dengue virus infection, which could be useful to pathogenesis studies, discovery of novel antiviral drugs as well as to evaluate vaccine candidates against DENV.

Caracterização de biomarcadores imunológicos em pacientes portadores de leishmaniose cutânea da comunidade indígena Xakriabá, Minas Gerais, Brasil

A leishmaniose cutânea (LC) é uma doença inflamatória crônica causada por espécies dermotrópicas pertencentes aos subgêneros Viannia e Leishmania, sendo a L. (V.) braziliensis o principal agente etiológico no Brasil. O estabelecimento e evolução das lesões causadas pela infecção por L. (V.) braziliensis são altamente dependentes da imunidade celular, contudo um estudo que avalia o impacto da interação parasito-monócitos no perfil de resposta imune associado ao estabelecimento/manutenção da infecção em humanos ainda não foi realizado. Nesse contexto, o objetivo do trabalho foi caracterizar biomarcadores imunológicos, no sangue periférico e no infiltrado inflamatório de lesões cutâneas, em indígenas da comunidade Xakriabá portadores de LC (grupo LC) e com teste de Montenegro positivo sem lesão (grupo TM+sL), com intuito de melhor compreender os mecanismos imunológicos envolvidos na progressão dessa patologia, bem como dos eventos associados à resistência à infecção. A análise dos resultados mostrou que pacientes do grupo LC apresentaram menor capacidade em internalizar formas promastigotas vivas de L. (V.) braziliensis em relação ao grupo TM+sL. Além disso, observou-se que pacientes do grupo LC apresentaram perfil ativado, principalmente pelo maior percentual/Índice de Estimulação (IE) da molécula de ativação CD23, com produção de altos níveis de TNF-, provenientes de monócitos que não fagocitaram e fagocitaram formas promastigotas de L. (V.) braziliensis.

Contudo, os níveis de TNF- correlacionaram de forma negativa com a produção de NO, sugerindo que essa citocina estaria muito mais associada ao desenvolvimento das lesões do que controle da doença. Por outro lado, pacientes do grupo TM+sL apresentaram maior equilíbrio entre a produção de citocinas inflamatórias (IL-12, IFN-, IL-17) e moduladoras (IL-10, IL-4) e sintetizaram maiores níveis de NO, indicando que esse perfil de resposta imune balanceada e efetora poderia combater a infecção sem provocar dano tecidual. A análise do perfil fenotípico-funcional de monócitos e linfócitos T CD4+ e CD8+ circulantes e de citocinas e quimiocinas no infiltrado inflamatório das lesões mostrou que o tempo de evolução da lesão teve grande influência no perfil de resposta imune dos pacientes do grupo LC. Nesse contexto, observou-se que monócitos e linfócitos T CD4+ e CD8+ circulantes de pacientes do grupo lesão recente apresentaram menor IE das moléculas de ativação CD23 e co-estimulação CD80, acompanhado pela menor produção das citocinas inflamatórias (TNF-, IL-17) e moduladoras (IL-10, TGF- e IL-4) em relação ao grupo lesão tardia. Por outro lado, observou-se que esses pacientes apresentaram maior capacidade fagocítica juntamente com maior IE de monócitos expressando os receptores CD16, TLR-2 e TLR-4 e produção de NO.

A análise da resposta imune localizada mostrou que pacientes do grupo lesão recente apresentaram maiores níveis de transcritos de IL12B, IFNG, TNF, IL10, TGFB1, IL4, CCL2, CCL3, CCL5 e CXCL10, bem como maior carga parasitária em relação ao grupo lesão tardia. Os resultados obtidos no presente estudo forneceram informações importantes sobre a infecção causada pela L. (V.) braziliensis, permitindo a identificação e proposição de potenciais biomarcadores associados à resistência à LC (IL-12, IL-17 e NO) e ao desenvolvimento e manutenção da lesão (TNF-α). Além disso, esse foi o primeiro estudo que avaliou aspectos imunológicos da LC em uma população indígena brasileira.

Caracterização de biomarcadores imunológicos em pacientes portadores de leishmaniose cutânea da comunidade indígena Xakriabá, Minas Gerais, Brasil / Characterization of immunological biomarkers in patients with cutaneous leishmaniasis of the indigenous community Xakriabá, Minas Gerais, Brazil

A leishmaniose cutânea (LC) é uma doença inflamatória crônica causada por espécies dermotrópicas pertencentes aos subgêneros Viannia e Leishmania, sendo a L. (V.) braziliensis o principal agente etiológico no Brasil. O estabelecimento e evolução das lesões causadas pela infecção por L. (V.) braziliensis são altamente dependentes da imunidade celular, contudo um estudo que avalia o impacto da interação parasito-monócitos no perfil de resposta imune associado ao estabelecimento/manutenção da infecção em humanos ainda não foi realizado. Nesse contexto, o objetivo do trabalho foi caracterizar biomarcadores imunológicos, no sangue periférico e no infiltrado inflamatório de lesões cutâneas, em indígenas da comunidade Xakriabá portadores de LC (grupo LC) e com teste de Montenegro positivo sem lesão (grupo TM+sL), com intuito de melhor compreender os mecanismos imunológicos envolvidos na progressão dessa patologia, bem como dos eventos associados à resistência à infecção. A análise dos resultados mostrou que pacientes do grupo LC apresentaram menor capacidade em internalizar formas promastigotas vivas de L. (V.) braziliensis em relação ao grupo TM+sL. Além disso, observou-se que pacientes do grupo LC apresentaram perfil ativado, principalmente pelo maior percentual/Índice de Estimulação (IE) da molécula de ativação CD23, com produção de altos níveis de TNF-, provenientes de monócitos que não fagocitaram e fagocitaram formas promastigotas de L. (V.) braziliensis...

Rural tourism: a risk factor for schistosomiasis transmission in Brazil.

This paper reports an outbreak of acute schistosomiasis among 38 tourists who rented a country house in the district of Igarapé, the metropolitan region of Belo Horizonte, Brazil, during a holiday period in 2006. A total number of 32 individuals were positive for Schistosoma mansoni. Results of stool examinations revealed individual S. mansoni egg counts per gram of faeces (epg) ranging from 4-768 epg with a geometric mean egg count of 45. The most frequent clinical symptoms were abdominal pain (78.1%), headache (75%), fever (65.6%), dry cough (65.2%) and both diarrhoea and asthenia (59.4%). A malacological survey of the area, where 22 specimens of Biomphalaria glabrata were collected, revealed three (13.6%) specimens eliminating Schistosoma cercariae. This investigation re-confirms a recently described pattern of schistosomiasis infection, resulting in the acute form of the disease and connected to rural tourism, which contributes to the spread of the disease among the middle-class and into non-endemic areas. The lack of specific knowledge about acute schistosomiasis among health services causes an increased number of unnecessary diagnostic procedures and delays in accurate diagnosis and treatment, resulting in considerable discomfort for the patients.

Acompanhamento clínico, epidemiológico e imunológico de pacientes portadores da fase aguda da esquistossomose mansoni, submetidos à terapêutica específica com Praziquantel

Nesse estudo foi realizada avaliação epidemiológica e acompanhamento clínico-laboratorial e imunológico de pacientes portadores da forma clínica aguda da esquistossomose mansoni. Nosso objetivo foi investigar as principais alterações clínicas, ultrassonográficas e imunofenotípicas provocadas pela infecção pelo Schistosoma mansoni e o impacto que a quimioterapia específica com praziquantel teria nesse contexto. Os pacientes avaliados nesse estudo (grupo AGD-AT) adquiriram a forma clínica aguda da infecção pelo S. mansoni na zona rural de Igarapé, município da região metropolitana de Belo Horizonte, MG. Amostras de fezes e sangue periférico dos pacientes foram coletadas para realização do exame parasitológico e hemograma, respectivamente. Os pacientes foram submetidos à anamnese detalhada a fim de avaliar as principais manifestações clínicas observadas durante a fase aguda da infecção. Posteriormente, os pacientes foram submetidos ao exame de ultrassom para avaliar comprometimento hepático e/ou esplênico. O perfil imunofenotípico dos leucócitos do sangue periférico dos pacientes também foi realizado por citometria de fluxo Os resultados mostraram que dos 38 pacientes previamente avaliados (idade: 01-65 anos; sexo: 16 homens, 22 mulheres), 34 (89,5%) apresentaram exame parasitológico de fezes positivo para ovos do S. mansoni. No entanto devido aos critérios de exclusão adotados para esse estudo, dezesseis pacientes foram acompanhados. Os resultados da anamnese demonstraram que os sintomas/sinais clínicos mais frequentes foram dor de cabeça (62,5%), febre e cólica abdominal (ambos com 56,3% de frequência), diarreia, tosse, emagrecimento e astenia (todos com 43,8% de frequência).

Com relação ao perfil hematológico, observou-se redução significativa do número de hemácias (mm3), da concentração de hemoglobina (g/dL), do percentual do hematócrito, aumento do número de plaquetas (mm3) e aumento da global de leucócitos (mm3) dos pacientes do grupo AGD-AT, refletido nas populações de eosinófilos, neutrófilos e linfócitos, quando comparados aos indivíduos saudáveis (grupo CT). As alterações ultrassonográficas mais comumente observadas foram linfonodomegalia periportal (88%), hepatomegalia (88%) e espessamento ecogênico incipiente da parede da veia porta-Fibrose grau I (75%). Na avaliação do perfil imunofenotípico, os dados mostraram aumento do número absoluto de linfócitos T CD3+ dos pacientes do grupo AGD-AT, refletido nas subpopulações CD4+ e CD8+, quando comparados aos indivíduos do grupo CT. Além disso, leucócitos circulantes dos pacientes do grupo AGD-AT apresentaram ativação celular determinada pela expressão de moléculas co-estimuladoras CD28, CD80 e CD86 e moléculas de ativação como, CD25, HLA-DR e CD69. Foi observado também aumento das moléculas de adesão celular CD18, CD44 e CD54 do grupo AGD-AT quando comparado ao grupo CT Com relação aos receptores de quimiocinas foi observado aumento da expressão de CCR5 e CXCR3 do grupo AGD-AT quando comparado ao grupo CT.

Contudo, embora, a maioria dos aspectos clínico-laboratoriais e imunofenotípicos avaliados dos pacientes do grupo AGD-AT retornaram à normalidade após quimioterapia específica com praziquantel, as principais alterações ultrassonográficas e algumas alterações imunológicas ainda permanecem (hepatomegalia, esplenomegalia, fibrose periportal incipiente, bem como aumento do número absoluto de CD28, CD80, CD86, CD18, CCR2, CXCR3 em eosinófilos, diminuição de CD62L em neutrófilos, aumento de linfócitos T CD8+ e de CD18 em linfócitos T CD4+). A permanência dessas alterações, mesmo um ano após o tratamento, sugere um impacto a longo prazo da terapêutica específica pós-fase aguda da infecção esquistossomótica sobre o estado geral dos pacientes

Acompanhamento clínico, epidemiológico e imunológico de pacientes portadores da fase aguda da esquistossomose mansoni, submetidos à terapêutica específica com Praziquantel / Monitoring clinical, epidemiological and immunological characteristics in patients with the acute phase of schistosomiasis, undergoing specific treatment with Praziquantel

Nesse estudo foi realizada avaliação epidemiológica e acompanhamento clínico-laboratorial e imunológico de pacientes portadores da forma clínica aguda da esquistossomose mansoni. Nosso objetivo foi investigar as principais alterações clínicas, ultrassonográficas e imunofenotípicas provocadas pela infecção pelo Schistosoma mansoni e o impacto que a quimioterapia específica com praziquantel teria nesse contexto. Os pacientes avaliados nesse estudo (grupo AGD-AT) adquiriram a forma clínica aguda da infecção pelo S. mansoni na zona rural de Igarapé, município da região metropolitana de Belo Horizonte, MG. Amostras de fezes e sangue periférico dos pacientes foram coletadas para realização do exame parasitológico e hemograma, respectivamente. Os pacientes foram submetidos à anamnese detalhada a fim de avaliar as principais manifestações clínicas observadas durante a fase aguda da infecção. Posteriormente, os pacientes foram submetidos ao exame de ultrassom para avaliar comprometimento hepático e/ou esplênico. O perfil imunofenotípico dos leucócitos do sangue periférico dos pacientes também foi realizado por citometria de fluxo Os resultados mostraram que dos 38 pacientes previamente avaliados (idade: 01-65 anos; sexo: 16 homens, 22 mulheres), 34 (89,5%) apresentaram exame parasitológico de fezes positivo para ovos do S. mansoni. No entanto devido aos critérios de exclusão adotados para esse estudo, dezesseis pacientes foram acompanhados. Os resultados da anamnese demonstraram que os sintomas/sinais clínicos mais frequentes foram dor de cabeça (62,5%), febre e cólica abdominal (ambos com 56,3% de frequência), diarreia, tosse, emagrecimento e astenia (todos com 43,8% de frequência).

Com relação ao perfil hematológico, observou-se redução significativa do número de hemácias (mm3), da concentração de hemoglobina (g/dL), do percentual do hematócrito, aumento do número de plaquetas (mm3) e aumento da global de leucócitos (mm3) dos pacientes do grupo AGD-AT, refletido nas populações de eosinófilos, neutrófilos e linfócitos, quando comparados aos indivíduos saudáveis (grupo CT). As alterações ultrassonográficas mais comumente observadas foram linfonodomegalia periportal (88%), hepatomegalia (88%) e espessamento ecogênico incipiente da parede da veia porta-Fibrose grau I (75%). Na avaliação do perfil imunofenotípico, os dados mostraram aumento do número absoluto de linfócitos T CD3+ dos pacientes do grupo AGD-AT, refletido nas subpopulações CD4+ e CD8+, quando comparados aos indivíduos do grupo CT. Além disso, leucócitos circulantes dos pacientes do grupo AGD-AT apresentaram ativação celular determinada pela expressão de moléculas co-estimuladoras CD28, CD80 e CD86 e moléculas de ativação como, CD25, HLA-DR e CD69. Foi observado também aumento das moléculas de adesão celular CD18, CD44 e CD54 do grupo AGD-AT quando comparado ao grupo CT Com relação aos receptores de quimiocinas foi observado aumento da expressão de CCR5 e CXCR3 do grupo AGD-AT quando comparado ao grupo CT.

Contudo, embora, a maioria dos aspectos clínico-laboratoriais e imunofenotípicos avaliados dos pacientes do grupo AGD-AT retornaram à normalidade após quimioterapia específica com praziquantel, as principais alterações ultrassonográficas e algumas alterações imunológicas ainda permanecem (hepatomegalia, esplenomegalia, fibrose periportal incipiente, bem como aumento do número absoluto de CD28, CD80, CD86, CD18, CCR2, CXCR3 em eosinófilos, diminuição de CD62L em neutrófilos, aumento de linfócitos T CD8+ e de CD18 em linfócitos T CD4+). A permanência dessas alterações, mesmo um ano após o tratamento, sugere um impacto a longo prazo da terapêutica específica pós-fase aguda da infecção esquistossomótica sobre o estado geral dos pacientes