RESUMEN
Although the chronic phase of chronic myelocytic leukemia (CML) is characterized by the Philadelphia (Ph) chromosome creating a hybrid BCR/ABL gene, additional genetic changes involved in blast crisis are poorly understood. We report a 4-8-fold amplification by tandem duplication of the BCR/ABL fusion gene clustered on a masked Ph chromosome in a 61-year-old male patient with CML in myeloblastic crisis. Our finding suggests that the BCR/ABL amplification may play a role as a novel mechanism in the progression to an aggressive blast transformation in some cases of Ph-positive CML.
Asunto(s)
Proteínas de Fusión bcr-abl/genética , Amplificación de Genes , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/genética , Familia de Multigenes/genética , Cromosoma Filadelfia , Humanos , Hibridación Fluorescente in Situ , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/patología , Masculino , Persona de Mediana EdadRESUMEN
We have evaluated the apoptotic and DNA damaging activity of Idarubicin (IDA) on K-562 cells alone and following the uptake of modified antisense-oligodeoxynucleotides (AS-ODNs) targeting b3a2 mRNA of bcr/abl hybrid gene, after treatment with AS-ODNs/DCChol-DOPE (liposomes) complexes. The uptake of FITC-labeled oligonucleotide-liposomes complexes (FITC-ODNs/DCChol-DOPE) was analyzed by flow cytometry and fluorescence microscopy. Both techniques indicated cytoplasmic accumulation of labeled liposome complexes following 24h of exposure. In absence of liposomes, AS-ODNs uptake was minimal. Pre-treatment of cells with AS-ODNs/DCChol-DOPE increased the capability of IDA to induce apoptosis as determined by morphology and the comet assay. In contrast, the use of a non-sense oligodeoxynucleotide conjugated with liposomes, in the presence of IDA, did not increase K-562 cell apoptosis. Nevertheless, DNA damage in IDA treated cells was not related to ODNs/liposomes pre-treatment, as determined by the comet assay. Our data suggests that DCChol-DOPE increases the uptake of ODNs in K-562 cells, and these modified AS-ODNs increase IDA induced apoptosis by decreasing p210(bcr/abl) levels in K-562 cells.
Asunto(s)
Apoptosis/efectos de los fármacos , Colesterol/análogos & derivados , Idarrubicina/farmacología , Células K562/efectos de los fármacos , Oligodesoxirribonucleótidos Antisentido/metabolismo , Transporte Biológico , Cationes/química , Colesterol/química , Ensayo Cometa , Daño del ADN , ADN de Neoplasias/análisis , Sinergismo Farmacológico , Citometría de Flujo , Proteínas de Fusión bcr-abl/biosíntesis , Proteínas de Fusión bcr-abl/genética , Regulación Leucémica de la Expresión Génica/efectos de los fármacos , Humanos , Células K562/metabolismo , Lípidos/química , Liposomas/administración & dosificación , Liposomas/química , Microscopía Fluorescente , Proteínas de Neoplasias/biosíntesis , Proteínas de Neoplasias/genética , Oligodesoxirribonucleótidos Antisentido/administración & dosificación , Oligodesoxirribonucleótidos Antisentido/farmacología , Fosfatidiletanolaminas/química , Compuestos de Amonio Cuaternario/química , ARN Mensajero/antagonistas & inhibidores , ARN Mensajero/genética , ARN Neoplásico/antagonistas & inhibidores , ARN Neoplásico/genéticaRESUMEN
Fludarabine (FLU, a fluorinated purine analog) and idarubicin (IDA, a DNA-topoisomerase II poison) are frequently used in cancer chemotherapy. The effects of these drugs on cultured normal human lymphocytes were studied to establish the possible involvement of chromosome damage in the apoptotic program. Chromosome aberrations (CA) were evaluated in first division metaphases and the apoptotic process was measured by morphological and electrophoretical techniques. The percentage of abnormal cells was increased from the doses of FLU 1.0 microg/ml and IDA 0.005 microg/ml (P<0.0001) with an important decrease in the mitotic index (MI) for the highest doses assayed. A significant dose-dependent induction of abnormal cells was observed for both drugs. An increase of apoptotic cells was found at 5.0 and 10.0 microg/ml of FLU (P<0.001) while IDA activated apoptosis at 0.05 microg/ml (P<0.01) and markedly from 0.1 microg/ml (P<0.001). These increments were dose dependent. Apoptotic cell morphology was associated with DNA fragmentation at the highest doses. The increased induction of abnormal cells and the decreased MI were in correlation with the apoptotic index for FLU and IDA, suggesting the role of CA in drug-induced cell death.
Asunto(s)
Antibióticos Antineoplásicos/toxicidad , Antineoplásicos/toxicidad , Idarrubicina/toxicidad , Linfocitos/efectos de los fármacos , Mutágenos/toxicidad , Vidarabina/toxicidad , Apoptosis , Células Cultivadas , Aberraciones Cromosómicas , Fragmentación del ADN , Relación Dosis-Respuesta a Droga , Colorantes Fluorescentes , Humanos , Linfocitos/patología , Linfocitos/ultraestructura , Vidarabina/análogos & derivadosRESUMEN
El pronóstico de la leucemia mieloide crónica (LMC) mejoró substancialmente con el tratamiento con Interferón alfa (IFNalfa) y los mejores resultados estarían relacionados a la respuesta genética (RG). Para evaluar tal presunción, se compararon los resultados terapéuticos obtenidos en 30 pacientes con LMC Ph+ en primera fase crónica, tratados con IFN alfa 5 MU/M²/d (Grupo 1) con los resultados obtenidos en 31 pacientes pertenecientes a un protocolo previo basado en IFN alfa 3 MU 3/v/sem., más 6-mercapto purina 150mg/d/v.o. y citarabina 150 mg/d/sc por cuatro días por mes (Grupo 2). El Grupo 1 tuvo mejores respuestas hematológicas completas (80 por ciento) y RG (76 por ciento) que el Grupo 2 (29 por ciento y 17 por ciento respectivamente) (p < 0.001). La duración de la fase crónica fue más larga en el Grupo 1, 43 meses contra 18 meses en el Grupo 2 (p < 0.001). Además, la probabilidad de sobrevida a 5 años (SV) fue mejor en el Grupo 1, 62 por ciento contra 15 por ciento en el Grupo 2 (p < 0.001). En nuestra experiencia, 5 MU/M²/d de IFN alfa prolongó la SV y la duración de la fase crónica, independientemente de la RG, sugiriendo que los beneficios del IFN alfa podrían relacionarse a otros mecanismos de acción, además de la supresión del cromosoma Ph.
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Adolescente , Adulto , Persona de Mediana Edad , Análisis Citogenético , Inducción de Remisión/métodos , Interferón-alfa , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/genética , Leucemia Mielógena Crónica BCR-ABL Positiva/tratamiento farmacológico , Cromosoma Filadelfia , Resultado del Tratamiento , Protocolos Clínicos , Interferón-alfa , Leucemia Mieloide de Fase Crónica , SobrevivientesRESUMEN
El pronóstico de la leucemia mieloide crónica (LMC) mejoró substancialmente con el tratamiento con Interferón alfa (IFNalfa) y los mejores resultados estarían relacionados a la respuesta genética (RG). Para evaluar tal presunción, se compararon los resultados terapéuticos obtenidos en 30 pacientes con LMC Ph+ en primera fase crónica, tratados con IFN alfa 5 MU/M²/d (Grupo 1) con los resultados obtenidos en 31 pacientes pertenecientes a un protocolo previo basado en IFN alfa 3 MU 3/v/sem., más 6-mercapto purina 150mg/d/v.o. y citarabina 150 mg/d/sc por cuatro días por mes (Grupo 2). El Grupo 1 tuvo mejores respuestas hematológicas completas (80 por ciento) y RG (76 por ciento) que el Grupo 2 (29 por ciento y 17 por ciento respectivamente) (p < 0.001). La duración de la fase crónica fue más larga en el Grupo 1, 43 meses contra 18 meses en el Grupo 2 (p < 0.001). Además, la probabilidad de sobrevida a 5 años (SV) fue mejor en el Grupo 1, 62 por ciento contra 15 por ciento en el Grupo 2 (p < 0.001). En nuestra experiencia, 5 MU/M²/d de IFN alfa prolongó la SV y la duración de la fase crónica, independientemente de la RG, sugiriendo que los beneficios del IFN alfa podrían relacionarse a otros mecanismos de acción, además de la supresión del cromosoma Ph. (AU)
