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Intervalo de año de publicación
1.
Elife ; 122023 01 25.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-36695566

RESUMEN

Voltage-dependent gating of the voltage-gated proton channels (HV1) remains poorly understood, partly because of the difficulty of obtaining direct measurements of voltage sensor movement in the form of gating currents. To circumvent this problem, we have implemented patch-clamp fluorometry in combination with the incorporation of the fluorescent non-canonical amino acid Anap to monitor channel opening and movement of the S4 segment. Simultaneous recording of currents and fluorescence signals allows for direct correlation of these parameters and investigation of their dependence on voltage and the pH gradient (ΔpH). We present data that indicate that Anap incorporated in the S4 helix is quenched by an aromatic residue located in the S2 helix and that motion of the S4 relative to this quencher is responsible for fluorescence increases upon depolarization. The kinetics of the fluorescence signal reveal the existence of a very slow transition in the deactivation pathway, which seems to be singularly regulated by ΔpH. Our experiments also suggest that the voltage sensor can move after channel opening and that the absolute value of the pH can influence the channel opening step. These results shed light on the complexities of voltage-dependent opening of human HV1 channels.


Asunto(s)
Activación del Canal Iónico , Protones , Humanos , Activación del Canal Iónico/fisiología , Aminoácidos
2.
Protein Expr Purif ; 201: 106172, 2023 01.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-36115641

RESUMEN

Heterologous expression systems have been used as a powerful experimental strategy to study the function of many proteins, particularly ion transporters. For this experiment, it is fundamental to prepare an expression vector encoding a protein of interest. However, we encountered problems in vector preparation of the voltage sensor domain (VSD) of murine sperm-specific Na+/H+ exchanger (sNHE) due to its severe toxicity to bacteria. We overcame the problems by insertion of an amber stop codon or a synthetic intron into the coding sequence of the VSD in the expression vectors. Both methods allowed us to express the protein of interest in HEK293 cells (combined with a stop codon suppression system for amber codon). The VSD of mouse sNHE generates voltage-dependent outward ionic currents, which is a probable cause of toxicity to bacteria. We propose these two strategies as practical solutions to study the function of any protein toxic to bacteria.


Asunto(s)
Protones , Semen , Animales , Bacterias/metabolismo , Codón de Terminación/metabolismo , Células HEK293 , Humanos , Masculino , Ratones , Semen/metabolismo , Sodio/metabolismo , Intercambiadores de Sodio-Hidrógeno/genética , Intercambiadores de Sodio-Hidrógeno/metabolismo , Espermatozoides/metabolismo
3.
Elife ; 102021 08 06.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-34355697

RESUMEN

Voltage-dependent proton-permeable channels are membrane proteins mediating a number of important physiological functions. Here we report the presence of a gene encoding Hv1 voltage-dependent, proton-permeable channels in two species of reef-building corals. We performed a characterization of their biophysical properties and found that these channels are fast-activating and modulated by the pH gradient in a distinct manner. The biophysical properties of these novel channels make them interesting model systems. We have also developed an allosteric gating model that provides mechanistic insight into the modulation of voltage-dependence by protons. This work also represents the first functional characterization of any ion channel in scleractinian corals. We discuss the implications of the presence of these channels in the membranes of coral cells in the calcification and pH-regulation processes and possible consequences of ocean acidification related to the function of these channels.


Asunto(s)
Antozoos/metabolismo , Canales Iónicos/metabolismo , Protones , Animales , Arrecifes de Coral , Concentración de Iones de Hidrógeno , Canales Iónicos/genética , Agua de Mar/química
4.
J Gen Physiol ; 152(6)2020 06 01.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-32110806

RESUMEN

Slow inactivation has been described in multiple voltage-gated K+ channels and in great detail in the Drosophila Shaker channel. Structural studies have begun to facilitate a better understanding of the atomic details of this and other gating mechanisms. To date, the only voltage-gated potassium channels whose structure has been solved are KvAP (x-ray diffraction), the KV1.2-KV2.1 "paddle" chimera (x-ray diffraction and cryo-EM), KV1.2 (x-ray diffraction), and ether-à-go-go (cryo-EM); however, the structural details and mechanisms of slow inactivation in these channels are unknown or poorly characterized. Here, we present a detailed study of slow inactivation in the rat KV1.2 channel and show that it has some properties consistent with the C-type inactivation described in Shaker. We also study the effects of some mutations that are known to modulate C-type inactivation in Shaker and show that qualitative and quantitative differences exist in their functional effects, possibly underscoring subtle but important structural differences between the C-inactivated states in Shaker and KV1.2.


Asunto(s)
Activación del Canal Iónico , Canal de Potasio Kv.1.2 , Animales , Canal de Potasio Kv.1.2/metabolismo , Ratas , Xenopus laevis/metabolismo
5.
Elife ; 92020 02 25.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-32093826

RESUMEN

A native calcium ion channel has been identified in bacteria for the first time.


Asunto(s)
Canales de Calcio , Calcio , Calcio/metabolismo , Canales de Calcio/genética
6.
Rev. Costarric. psicol ; 36(2)jul.-dic. 2017.
Artículo en Español | LILACS-Express | LILACS | ID: biblio-1507332

RESUMEN

En este artículo se presentan y discuten los hallazgos del estudio "Caracterización del estilo de crianza de los niños y las niñas en cuidado permanente en una Aldea Gubernamental: sistemas de creencias parentales y orientación cultural" (Durán-Delgado, 2012). La especificidad cultural del parentaje, en un contexto de cuidado en una institución de protección transitoria gubernamental, se analiza desde estudios precedentes sobre particularidad cultural del parentaje en Costa Rica. Se discute cómo el contexto y la cultura tienen una función homogenizante en lo que a trayectorias del desarrollo se refiere. A partir de una aproximación metodológica sensible al contexto y un diseño mixto, se trabajó en una institución de protección transitoria gubernamental. Se aplicaron entrevistas, escalas y observación etnográfica a niños, niñas y cuidadoras. A partir del estudio, se concluye que a pesar de la discontinuidad que el contexto institucional de cuidado ofrece, las trayectorias del desarrollo orientadas a la relacionalidad autónoma, propias de la cultura, son exitosamente estimuladas y concretadas. Las creencias y las prácticas de las cuidadoras muestran evidencia de una particularidad de un contexto institucional de cuidado, así como también no dejan de inscribirse en las trayectorias de la cultura local predominante. El estímulo a formas más autónomas del desarrollo en medio de un contexto de la relacionalidad refleja la necesidad de estimular formas resilientes para esta población en particular.


This paper discusses the findings of the study "Characterization of Parenting Style among Children in a Permanent- Care State-Run Village: Parental Belief Systems and Cultural Orientation" (Duran-Delgado, 2012). The cultural specificity of parenting, in a context of institutional care in a semi -permanent publicly-run establishment is analyzed from the perspective of prior studies on the cultural peculiarities of parenting in Costa Rica. We discuss how the context and the culture have a homogenizing function with regards to trajectories for development. Based on a mixed-design context-sensitive methodological approach, we worked in a publicly-run institution for transitory care. Interviews, scales and ethnographic observation were carried out on the children and their care-takers. Based on the study, we conclude that in spite of the discontinuity offered by the institutional context, developmental trajectories oriented to the autonomous relationships typical of the culture are successfully stimulated and formed. The care-takers' beliefs and practices show evidence of a peculiarity of the institutional context of care, as well as not allowing them to enlist in the trajectories of the predominant local culture. The stimulus towards more autonomous forms of development in the midst of the context of the relationships reflects the need for stimulating more resilient forms for this population in particular.

7.
Univ. psychol ; 8(2): 447-454, mayo.-ago. 2009. tab
Artículo en Español | LILACS | ID: lil-572155

RESUMEN

El objetivo de este trabajo es comprobar qué relación existe entre el sentido de la vida y la desesperanza en un grupo de 302 sujetos. La hipótesis de trabajo afirma una relación significativa, de signo negativo, entre ambas variables, de manera que a mayor logro de sentido se asocian inferiores niveles de desesperanza y, por el contrario, a vacío existencial se asocian niveles superiores de desesperanza. Los instrumentos empleados son el Purpose In Life Test (Test de Sentido de la Vida, PIL; Crumbaugh & Maholick, 1969) y la Hopelessness Scale (Escala de Desesperanza, HS; Beck, Weissman, Lester & Trexler, 1974). Los estadísticos usados son el coeficiente de correlación de Pearson y el coeficiente rho de Spearman (rs). Los resultados (r= -0.550, p= 0.000; rs= -0.502, p= 0.000) apoyan la hipótesis planteada: el logro de sentido se asocia a nivel nulo-mínimo de desesperanza, mientras que el vacío existencial se asocia a nivel moderado-alto de desesperanza, de manera estadísticamente significativa.


The aim of this paper is to analyze the relationship between purpose in life and hopelessness in a sample of 302 subjects. Hypothesis declare that booth variables are significant, negative, associated. Purpose In Life Test (PIL; Crumbaugh & Maholick, 1969) and Hopelessness Scale (HS; Beck,Weissman, Lester & Trexler, 1974) are used. Statistical used are Pearson’scorrelation coefficient and Spearman’s rho coefficient. Results (r= -0.550,p= 0.000; rs= -0.502, p= 0.000) support hypothesis: purpose in life isnegatively associated to hopelessness. High level of purpose in life involveless hopelessness, and existential vacuum is associated to high level of hopelessness, statistically significant.


Asunto(s)
Humanos , Esperanza de Vida , Depresión/psicología , Suicidio/prevención & control
8.
Univ. psychol ; 6(2): 213-229, mayo.-ago. 2007. tab
Artículo en Español | LILACS | ID: lil-571870

RESUMEN

En este trabajo se analizan las relaciones entre la religiosidad (autodefinición religiosa, asistencia a la Eucaristía e importancia de Dios en la propia vida) y los factores del test Purpose in Life (PIL) (Crumbaugh & Maholick, 1969), en un grupo de 302 sujetos, y se plantea como hipótesis una relación significativa: a mayor religiosidad, más altas puntuaciones en los factores del PIL. Los instrumentos de evaluación utilizados son un Cuestionario de actitudes religiosas (CAR), adaptado de Elzo (1994) y el PIL. Los resultados indican que las tres variables religiosas ejercen un influjo significativo, bien de forma parcial sobre alguno o algunos de los cuatro factores, bien sobre la totalidad de éstos.


In this paper, the relationship between religiosity (religious self-definition, Mass attendance and significance of Godin life) and the Purpose In Life test (PIL) factors (Crumbaugh & Maholick, 1969) is analyzed, in a sample of 302subjects. The Hypothesis states that they are positively associated: higher religiosity is associated to higher scores in PIL factors. A Religious Attitudes Questionnaire (CAR) adapted from Elzo (1994) and the PIL are used. Results suggest that the three religious variables exert a significant influence, either on some factor or on the four PIL factors.


Asunto(s)
Humanos , Estilo de Vida
9.
Rev. latinoam. psicol ; Rev. latinoam. psicol;37(1): 131-148, abr. 2005. tab, graf
Artículo en Español | LILACS | ID: lil-421082

RESUMEN

Como se ha venido señalando en la literatura especializada, si bien estructura y contenido son aspectos diferentes del razonamiento moral, no son independientes; existe una relación entre determinadas estructuras de razonamiento moral y determinadas orientaciones axiológicas: a la preconvencionalidad, la convencionalidad y la posconvencionalidad moral se hallan significativamente vinculados ciertos valores, tanto positiva como negativamente, y no otros. En relación con esto, se hipotetiza que existen relaciones significativas entre los diferentes niveles de razonamiento moral y la jerarquía de valores de los sujetos. Los resultados obtenidos en el presente trabajo, utilizando el Definíng Issues Test-DIT de J. Rest y la Escala de valores (A) de Milton Rokeach, en un grupo de 323 estudiantes universitarios, indican que a la convencionalidad moral se asocia una constelación de valores diferente a la que se asocia a la posconvencionalidad moral, en términos estadísticamente significativos. Todo ello permite concluir que el avance del razonamiento moral a través de los estadios a de desarrollo moral (estructura del razonamiento moral) se ve acompañado de cambios en la jerarquía de valores asociada (contenido del razonamiento moral), que estructura y contenido del razonamiento moral no son independientes


Asunto(s)
Procesos de Grupo , Moral , Principios Morales
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