Tobacco seeds as efficient production platform for a biologically active anti-HBsAg monoclonal antibody.

The use of plants as heterologous hosts is one of the most promising technologies for manufacturing valuable recombinant proteins. Plant seeds, in particular, constitute ideal production platforms for long-term applications requiring a steady supply of starting material, as they combine the general advantages of plants as bioreactors with the possibility of biomass storage for long periods in a relatively small volume, thus allowing manufacturers to decouple upstream and downstream processing. In the present work we have used transgenic tobacco seeds to produce large amounts of a functionally active mouse monoclonal antibody against the Hepatitis B Virus surface antigen, fused to a KDEL endoplasmic reticulum retrieval motif, under control of regulatory sequences from common bean (Phaseolus vulgaris) seed storage proteins. The antibody accumulated to levels of 6.5 mg/g of seed in the T3 generation, and was purified by Protein A affinity chromatography combined with SEC-HPLC. N-glycan analysis indicated that, despite the KDEL signal, the seed-derived plantibody bore both high-mannose and complex-type sugars that indicate partial passage through the Golgi compartment, although its performance in the immunoaffinity purification of HBsAg was unaffected. An analysis discussing the industrial feasibility of replacing the currently used tobacco leaf-derived plantibody with this seed-derived variant is also presented.

Efecto de diferentes métodos de cultivo sobre la regeneración in vitro de papa (Solanum tuberosum L.) de la vaeriedad comerciall Chieftain

Se evaluó la capacidad de regeneración de explantes de hoja, tubérculos y segmentos de tallo de la variedad comercial Chieftan, utilizando dos métodos: A, el mismo medio de cultivo desde la iniciación de los callos hasta la formación de los brotes y B, transferencia de los callos a un medio de cultivo libre de auxinas antes de la formación de los brotes. La mayor frecuencia de regeneración se obtuvo de discos de tubérculo en el medio (MRT-6) (método A) con 3,28 brotes por explante, seguido por 2,5 brotes en segmentos de tallo (medios MRE-4 y MRE-6, método B) y 0,8 brotes a partir de discos de hoja (medio MRH-3, método A). La combinación de 1 mg/L de nitrato de plata con 5 g/L de carbón activado, durante la propagación in vitro, mostró diferencias significativas tanto en el número de hojas por planta como en su calidad (AU)

Genetic transformation of sugarcane by agrobacterium tumefaciens using antioxidant compounds

Se evaluaron los efectos de tres compuestos antioxidantes - ácido ascórbico, cisteína y nitrato de plata - sobre el crecimiento de Agrobacterium cepa At 2260 y la interacción de éste con los explantes vegetales, así como sobre la viabilidad y la formación de callos de tejidos meristemáticos de caña de azúcar variedad comercial Ja 60-5, provenientes de plantas in vitro y de campo. Se logró la transferencia de un vector binario con los genes uid1 y bar a explanter meristemáticos de caña de azúcar y se obtuvieron callos resistentes a BASTA y GUS-positivos. El empleo de la mezcla de antioxidantes redujo en un 80 porciento la muerte celular con relación al control, y no alteró la calidad del callo en ninguna de las fases de cultivo (AU)