Berberine Photo-Activation Potentiates Cytotoxicity in Human Astrocytoma Cells through Apoptosis Induction.

Photodynamic therapy (PDT) has recently attracted interest as an innovative and adjuvant treatment for different cancers including malignant gliomas. Among these, Glioblastoma (GBM) is the most prevalent neoplasm in the central nervous system. Despite conventional therapeutic approaches that include surgical removal, radiation, and chemotherapy, GBM is characterized by an extremely poor prognosis and a high rate of recurrence. PDT is a physical process that induces tumor cell death through the genesis and accumulation of reactive oxygen species (ROS) produced by light energy interaction with a photosensitizing agent. In this contribution, we explored the potentiality of the plant alkaloid berberine (BBR) as a photosensitizing and cytotoxic agent coupled with a PDT scheme using a blue light source in human established astrocytoma cell lines. Our data mainly indicated for the combined BBR-PDT scheme a potent activation of the apoptosis pathway, through a massive ROS production, a great extent of mitochondria depolarization, and the sub-sequent activation of caspases. Altogether, these results demonstrated that BBR is an efficient photosensitizer agent and that its association with PDT may be a potential anticancer strategy for high malignant gliomas.

Development of Artificial Plasma Membranes Derived Nanovesicles Suitable for Drugs Encapsulation.

Extracellular vesicles (EVs) are considered as promising nanoparticle theranostic tools in many pathological contexts. The increasing clinical employment of therapeutic nanoparticles is contributing to the development of a new research area related to the design of artificial EVs. To this aim, different approaches have been described to develop mimetic biologically functional nanovescicles. In this paper, we suggest a simplified procedure to generate plasma membrane-derived nanovesicles with the possibility to efficiently encapsulate different drugs during their spontaneously assembly. After physical and molecular characterization by Tunable Resistive Pulse Sensing (TRPS) technology, transmission electron microscopy, and flow cytometry, as a proof of principle, we have loaded into mimetic EVs the isoquinoline alkaloid Berberine chloride and the chemotherapy compounds Temozolomide or Givinostat. We demonstrated the fully functionality of these nanoparticles in drug encapsulation and cell delivery, showing, in particular, a similar cytotoxic effect of direct cell culture administration of the anticancer drugs. In conclusion, we have documented the possibility to easily generate scalable nanovesicles with specific therapeutic cargo modifications useful in different drug delivery contexts.

The Search for Molecular Markers in a Gene-Orphan Case Study of a Pediatric Spinal Cord Pilocytic Astrocytoma.

BACKGROUND/AIM: We herein presented a case of pediatric spinal cord pilocytic astrocytoma diagnosed on the basis of histopathological and clinical findings. MATERIALS AND METHODS: Given the paucity of data on genetic features for this tumor, we performed exome, array CGH and RNA sequencing analysis from nucleic acids isolated from a unique and not repeatable very small amount of a formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) specimen. RESULTS: DNA mutation analysis, comparing tumor and normal lymphocyte peripheral DNA, evidenced few tumor-specific single nucleotide variants in DEFB119, MUC5B, NUDT1, LTBP3 and CPSF3L genes. Differently, tumor DNA was not characterized by for the main pilocytic astrocytoma gene variations, including BRAFV600E. An inframe trinucleotides insertion involving DLX6 or lnc DLX6-AS1 genes was scored in 44.9% of sequenced reads; the temporal profile of this variation on the expression of DLX-AS1 was investigated in patient's urine-derived exosomes, reporting no significant variation in the one-year molecular follow-up. Array CGH identified a tumor microdeletion at the 6q25.3 chromosomal region, spanning 1,01 Mb and comprising ZDHHC14, SNX9, TULP4 and SYTL3 genes. The expression of these genes did not change in urine-derived exosomes during the one-year investigation period. Finally, RNAseq did not reveal any of the common pilocytic BRAF-KIAA1549 genes fusion events. CONCLUSION: To our knowledge, the present report is one of the first described gene-orphan case studies of a pediatric spinal cord pilocytic astrocytoma.

Trehalose Modulates Autophagy Process to Counteract Gliadin Cytotoxicity in an In Vitro Celiac Disease Model.

Celiac disease (CD) is a chronic systemic autoimmune disorder that is triggered by the ingestion of gliadin peptides, the alcohol-soluble fraction of wheat gluten. These peptides, which play a key role in the immune response that underlies CD, spontaneously form aggregates and exert a direct toxic action on cells due to the increase in the reactive oxygen species (ROS) levels. Furthermore, peptic-tryptic digested gliadin peptides (PT-gliadin) lead to an impairment in the autophagy pathway in an in vitro model based on Caco-2 cells. Considering these premises, in this study we have analyzed different mTOR-independent inducers, reporting that the disaccharide trehalose, a mTOR-independent autophagy activator, rescued the autophagy flux in Caco-2 cells treated with digested gliadin, as well as improved cell viability. Moreover, trehalose administration to Caco-2 cells in presence of digested gliadin reduced the intracellular levels of these toxic peptides. Altogether, these results showed the beneficial effects of trehalose in a CD in vitro model as well as underlining autophagy as a molecular pathway whose modulation might be promising in counteracting PT-gliadin cytotoxicity.

The In Vitro Effects of Enzymatic Digested Gliadin on the Functionality of the Autophagy Process.

Gliadin, the alcohol-soluble protein fraction of wheat, contains the factor toxic for celiac disease (CD), and its toxicity is not reduced by digestion with gastro-pancreatic enzymes. Importantly, it is proved that an innate immunity to gliadin plays a key role in the development of CD. The immune response induces epithelial stress and reprograms intraepithelial lymphocytes into natural killer (NK)-like cells, leading to enterocyte apoptosis and an increase in epithelium permeability. In this contribution, we have reported that in Caco-2 cells the administration of enzymatically digested gliadin (PT-gliadin) reduced significantly the expression of the autophagy-related marker LC3-II. Furthermore, electron and fluorescent microscope analysis suggested a compromised functionality of the autophagosome apparatus. The rescue of the dysregulated autophagy process, along with a reduction of PT-gliadin toxicity, was obtained with a starvation induction protocol and by 3-methyladenine administration, while rapamycin, a well-known autophagy inducer, did not produce a significant improvement in the clearance of extra- and intra-cellular fluorescent PT-gliadin amount. Altogether, our results highlighted the possible contribution of the autophagy process in the degradation and in the reduction of extra-cellular release of gliadin peptides and suggest novel molecular targets to counteract gliadin-induced toxicity in CD.

Liberacion endoscopica de la fascia plantar / Arthroscopic facial plantar release

Objetivo: Presentar nuestra experiencia con el tratamiento endoscopico de la fascitis plantar refractaria a tratamiento medico ortopedico. Metodo: Once pacientes con diagnostico de fascitis plantar tratados en forma incruenta por un periodo de 6 meses sin respuesta fueron intervenidos quirurgicamente entre abril de 2003 y agosto de 2006 con tecnica endoscopica. Diez de ellos fueron analizados en forma retrospectiva y los resultados evaluados con el Clinical Rating System para tobillo y retropie de AOFAS, el sistema otorga un maximo de 100 puntos, y los resultados son categorizados como muy bueno, bueno, regular y malo. El tiempo minimo de seguimiento fue 14 meses y el maximo 41 meses, con una media de 32,6 meses. Resultados: 8 fueron categorizados como muy buenos, 1 como bueno y 1 como regular. No se registraron complicaciones infecciosas ni hematomas. Dos pacientes refirieron sintomas neurologicos en el postoperatorio. Un caso con parestesias en la region plantar externa, el cuadro se resolvio espontaneamente a los 6 meses. El otro paciente refirio una zona de hipoestesia alrededor del portal medial, que a la fecha del ultimo control no se ha resuelto. Conclusiones: La liberacion endoscopica de la fascia plantar es una alternativa util para el tratamiento de los casos refractarios a tratamiento medico y segura en la medida que se respeten los detalles de tecnica quirurgica descriptos.

Liberacion endoscopica de la fascia plantar / Arthroscopic facial plantar release

Objetivo: Presentar nuestra experiencia con el tratamiento endoscopico de la fascitis plantar refractaria a tratamiento medico ortopedico. Metodo: Once pacientes con diagnostico de fascitis plantar tratados en forma incruenta por un periodo de 6 meses sin respuesta fueron intervenidos quirurgicamente entre abril de 2003 y agosto de 2006 con tecnica endoscopica. Diez de ellos fueron analizados en forma retrospectiva y los resultados evaluados con el Clinical Rating System para tobillo y retropie de AOFAS, el sistema otorga un maximo de 100 puntos, y los resultados son categorizados como muy bueno, bueno, regular y malo. El tiempo minimo de seguimiento fue 14 meses y el maximo 41 meses, con una media de 32,6 meses. Resultados: 8 fueron categorizados como muy buenos, 1 como bueno y 1 como regular. No se registraron complicaciones infecciosas ni hematomas. Dos pacientes refirieron sintomas neurologicos en el postoperatorio. Un caso con parestesias en la region plantar externa, el cuadro se resolvio espontaneamente a los 6 meses. El otro paciente refirio una zona de hipoestesia alrededor del portal medial, que a la fecha del ultimo control no se ha resuelto. Conclusiones: La liberacion endoscopica de la fascia plantar es una alternativa util para el tratamiento de los casos refractarios a tratamiento medico y segura en la medida que se respeten los detalles de tecnica quirurgica descriptos.(AU)

Liberacion endoscopica de la fascia plantar / Arthroscopic facial plantar release

Objetivo: Presentar nuestra experiencia con el tratamiento endoscopico de la fascitis plantar refractaria a tratamiento medico ortopedico. Metodo: Once pacientes con diagnostico de fascitis plantar tratados en forma incruenta por un periodo de 6 meses sin respuesta fueron intervenidos quirurgicamente entre abril de 2003 y agosto de 2006 con tecnica endoscopica. Diez de ellos fueron analizados en forma retrospectiva y los resultados evaluados con el Clinical Rating System para tobillo y retropie de AOFAS, el sistema otorga un maximo de 100 puntos, y los resultados son categorizados como muy bueno, bueno, regular y malo. El tiempo minimo de seguimiento fue 14 meses y el maximo 41 meses, con una media de 32,6 meses. Resultados: 8 fueron categorizados como muy buenos, 1 como bueno y 1 como regular. No se registraron complicaciones infecciosas ni hematomas. Dos pacientes refirieron sintomas neurologicos en el postoperatorio. Un caso con parestesias en la region plantar externa, el cuadro se resolvio espontaneamente a los 6 meses. El otro paciente refirio una zona de hipoestesia alrededor del portal medial, que a la fecha del ultimo control no se ha resuelto. Conclusiones: La liberacion endoscopica de la fascia plantar es una alternativa util para el tratamiento de los casos refractarios a tratamiento medico y segura en la medida que se respeten los detalles de tecnica quirurgica descriptos

Rotula bipartita: tratamiento artroscopico / Bipartite patella: arthroscopic treatment

Presentamos una alternativa terapeutica para el tratamiento de la rotula bipartita sintomatica, realizada en forma exclusivamente artroscopica. Asimismo analizamos la patologia, su posible etiologia, sus distintas formas de presentacion, y los tratamientos propuestos en la literatura. Consideramos que la tecnica presentada es original y permite en los casos indicados lograr los objetivos del tratamiento con menor agresion y morbilidad

Rotula bipartita: tratamiento artroscopico / Bipartite patella: arthroscopic treatment

Presentamos una alternativa terapeutica para el tratamiento de la rotula bipartita sintomatica, realizada en forma exclusivamente artroscopica. Asimismo analizamos la patologia, su posible etiologia, sus distintas formas de presentacion, y los tratamientos propuestos en la literatura. Consideramos que la tecnica presentada es original y permite en los casos indicados lograr los objetivos del tratamiento con menor agresion y morbilidad

Factores que influyen en el resultado de la reconstruccion del ligamento cruzado anterior / Results of the anterior cruciate ligament reconstruction

Se presenta una serie de 43 pacientes operados por reconstruccion del ligamento cruzado anterior con hueso tendon hueso y un seguimiento promedio de 46,6 meses. Se registraron las lesiones asociadas al momento de la intervencion asi como el tiempo de evolucion de la lesion y se analizo la influencia que tuvieron sobre el resultado final. El analisis de los resultados se realizo utilizando el score de Lysholm, IKDC y radiografia de la rodilla con apoyo monopodalico. Como conclusion proponemos agrupar las lesiones del ligamento cruzado anterior en 3 grupos de acuerdo a evolucion y lesiones asociadas presentes, de manera de hacer mas homogeneas las muestras que se analizan y poder comparar resultados entre grupos de pacientes similares

Factores que influyen en el resultado de la reconstruccion del ligamento cruzado anterior / Results of the anterior cruciate ligament reconstruction

Se presenta una serie de 43 pacientes operados por reconstruccion del ligamento cruzado anterior con hueso tendon hueso y un seguimiento promedio de 46,6 meses. Se registraron las lesiones asociadas al momento de la intervencion asi como el tiempo de evolucion de la lesion y se analizo la influencia que tuvieron sobre el resultado final. El analisis de los resultados se realizo utilizando el score de Lysholm, IKDC y radiografia de la rodilla con apoyo monopodalico. Como conclusion proponemos agrupar las lesiones del ligamento cruzado anterior en 3 grupos de acuerdo a evolucion y lesiones asociadas presentes, de manera de hacer mas homogeneas las muestras que se analizan y poder comparar resultados entre grupos de pacientes similares