Efficient Non-Viral Gene Modification of Mesenchymal Stromal Cells from Umbilical Cord Wharton's Jelly with Polyethylenimine.

Mesenchymal stromal cells (MSC) derived from human umbilical cord Wharton's jelly (WJ) have a wide therapeutic potential in cell therapy and tissue engineering because of their multipotential capacity, which can be reinforced through gene therapy in order to modulate specific responses. However, reported methodologies to transfect WJ-MSC using cationic polymers are scarce. Here, WJ-MSC were transfected using 25 kDa branched- polyethylenimine (PEI) and a DNA plasmid encoding GFP. PEI/plasmid complexes were characterized to establish the best transfection efficiencies with lowest toxicity. Expression of MSC-related cell surface markers was evaluated. Likewise, immunomodulatory activity and multipotential capacity of transfected WJ-MSC were assessed by CD2/CD3/CD28-activated peripheral blood mononuclear cells (PBMC) cocultures and osteogenic and adipogenic differentiation assays, respectively. An association between cell number, PEI and DNA content, and transfection efficiency was observed. The highest transfection efficiency (15.3 ± 8.6%) at the lowest toxicity was achieved using 2 ng/µL DNA and 3.6 ng/µL PEI with 45,000 WJ-MSC in a 24-well plate format (200 µL). Under these conditions, there was no significant difference between the expression of MSC-identity markers, inhibitory effect on CD3+ T lymphocytes proliferation and osteogenic/adipogenic differentiation ability of transfected WJ-MSC, as compared with non-transfected cells. These results suggest that the functional properties of WJ-MSC were not altered after optimized transfection with PEI.

Producción de nanopartículas de PLGA por el método de emulsión y evaporación para encapsular N-Acetilcisteína (NAC) / PLGA nanoparticles production by emulsion and evaporation to encapsulate N-acetylcysteine (NAC) / Produção de nanopartículas de PLGA pelo método de emulsão e evaporação para encapsular N-Acetilcisteína (NAC)

Se fabricaron nanopartículas de copolímero de ácido láctico y glicólico (PLGA) de tamaños inferiores a 200 nm que atraparan y transportaran N acetilcisteína (NAC) en futuras aplicaciones como sistema de liberación de fármacos. Para esto se eligió el método de emulsión sencilla con evaporación, empleándose acetato de etilo como solvente, Pluronic F127® como tensoactivo, ultrasonido como medio para generar la emulsión y agua. Se estudió el efecto de parámetros entre la fase orgánica y acuosa, amplitud y tiempo de sonicación. Se encontraron nanopartículas de 114 nm, estables coloidalmente y que atraparon un 15% de NAC. Las condiciones encontradas fueron: relación de fase orgánica a acuosa de 1 a 5, amplitud del 60% y 60 s como tiempo de ultrasonido.

Lactic and glycolic acid (PLGA) copolymer nanoparticles of less than 200 nm were produced to trap and transport N acetylcysteine (NAC) to be used in future applications, in the field of drug delivery systems. To do this, we selected the simple emulsion and evaporation method, using ethyl acetate as a solvent, Pluronic F127® as a surfactant, water and used ultrasound to generate the emulsion. The effect of the parameters during the organic to the aqueous phase was assessed as well as the amplitude and sonication. We found nanoparticles of 114 nm that trapped colloidally stable 15% NAC; the ratio of organic to the aqueous phase was 1 to 5, the amplitude 60% and the ultrasound period was 60 s.

Fabricaram-se nanopartículas e copolímero de ácido láctico e glicólico (PLGA) de tamanhos inferiores a 200 nm que capturaram e transportaram N acetilcisteína (NAC) em futuras aplicações como sistema de libertação de fármacos. Para isto se selecionou o método de emulsão simples com evaporação, empregando-se acetato de etilo como solvente, Pluronic F127® como tensioativos, ultrasons como meio para produzir a emulsão de água. Estudou-se o efeito de parâmetros entre a fase orgânica e aquosa, amplitude e tempo de sonicação. Encontraram-se nanoparticulas de 114nm, estáveis coloidamente e que capturaram cerca de 15% de NAC. As condições encontradas foram: relação da fase orgânica a aquosa de 1 a 5, amplitude de 60% e 60s como tempo de ultrasons.

Comparación cinética y bioquímica de tres cepas de clostridium tetani, para la producción de toxina tetánica / Kinetic and biochemical comparison between three strains of clostridium tetani for production of titanic toxin

En este estudio se comparó el comportamiento bioquímico y cinético de tres cepas de Clostridium tetani, Harvard (Ha), Massachusetts (Ms) y Caracas (Ca); cepas utilizadas comúnmente en la producción del toxoide tetánico. Se realizaron pruebas bioquímicas para la identificación de los microorganismos anaerobios y se desarrollaron cultivos en reactor de 5L, bajo las siguientes condiciones: Medio Latham Mueller "Con" y "Sin" glutamato de sodio; 1 por ciento (v/v) de inóculo, pH inicial, 7.1 ± 0.2 (variable), 35ðC y 100 r.p.m. Los resultados mostraron características bioquímicas similares entre las tres cepas y la cepa control ATCC 9441. El comportamiento cinético de las cepas Ms y Ha fue similar para todos los parámetros evaluados, obteniéndose mayor productividad en cultivos suplementados con 2.5g/L de glutamato de sodio (Ms: Sin: 625Lf/L.h y Con: 658Lf/L.h; Ha: Sin: 610Lf/L.h y Con: 658Lf/L.h). La cepa Ca, produjo mayor cantidad de biomasa (Ca: 0.5420g/L; Ms: 0.2721g/L y Ha: 0.2009g/L); sin embargo, la productividad de toxina fue menor (Sin: 174Lf/L.h y Con: 417Lf/L.h). Estos resultados descartan la utilización de la cepa Ca para la producción del toxoide, bajo las condiciones de fermentación ensayadas.