Spermatozoa Obtained From Alpaca vas deferens. Effects of Seminal Plasma Added at Post-thawing.

The viscous seminal plasma (SP) is currently a major impediment to the handling of ejaculate and the development of some biotechnologies in South American camelids. The vas deferens-collected spermatozoa of alpacas is a useful technique to avoid this problem. On the other hand, SP contains a large protein component that has been implicated in the function of spermatozoa within the female reproductive tract. In this sense, the low fertility achieved using transcervical insemination with frozen-thawed spermatozoa in alpacas could be improved by adding SP. This study aimed to evaluate the effect of the whole SP on some in vitro parameters of alpaca spermatozoa after the freezing-thawing-process and the fertility after artificial insemination. It would contribute to a better understanding of the interaction between thawed sperm cells and SP. Spermatozoa were obtained by surgically diverted vas deferens. The samples were diluted with a Tris-based extender, packaged in straws, and frozen. At thawing, each straw was divided into two post-thawing conditions: with the addition of 10% of PBS (control) or with 10% SP (treatment). The sperm cells were evaluated using dynamic parameters, sperm cell morphology, and morphometry. Fertility was assessed by an artificial insemination trial. All in vitro parameters were analyzed by ANOVA. A heterogeneity test was scheduled for the fertility trial. After the freezing-thawing process, motility and plasma membrane functionality was improved when SP was added. No differences were found for post-thaw viability between the control and treatment samples. The percentage of normal cells was higher with SP at post-thawing, and a decrease of the presence of bent tailed spermatozoa with a droplet in the SP group was observed. The length of the head spermatozoa was 3.4% higher in the samples with PBS compared to those in which SP was added. Females pregnant at day 25 post-insemination were 0/12 (with SP inside the straw) and 1/10 (without SP inside the straw). In conclusion, the presence of 10% SP at post-thawing improves sperm cells' motility, functionality, and morphology, indicating that it would be beneficial to improve the frozen-thawed alpaca's physiology spermatozoa. More fertility trials must be developed to increase this knowledge.

Evaluación de dos métodos de criopreservación de embriones de llamas sobre las tasas de supervivencia in vivo e in vitro / Evaluation of two embryo cryopreservation methods in llama on the in vivo e in vitro embryonic survival rates

El objetivo del estudio fue evaluar el efecto de dos métodos de criopreservación sobre la supervivencia in vivo e in vitro de embriones de llama. Se recuperaron 73 embriones en estadio de blastocisto eclosionado mediante una técnica no quirúrgica a los 6.5 días post servicio en llamas superestimuladas. Las llamas receptoras se distribuyeron aleatoriamente en grupo Control (n = 14), de vitrificación (n=30) y de congelación lenta (n=29). Para la vitrificación, los embriones fueron expuestos a la solución de vitrificación (SV) conteniendo 20% Glicerol + 20% Etilenglicol + 0.5M Sucrosa + 10% suero fetal bovino (SFB) + 50 µg/ml sulfato de gentamicina, y sumergidos en nitrógeno líquido dentro de pajillas de 0.25 ml. Para la congelación lenta, los embriones fueron expuestos a fosfato buffer salino (PBS) con 1.5 M de Etilenglicol + 10% de SFB + 50 µg/ml de sulfato de gentamicina, aspirados en pajillas de 0.25 ml, y enfriados a una tasa de descenso de 0.12 °C/min hasta 5 °C y, luego, en la boca del tanque de nitrógeno, se continuó el descenso a una tasa de 5 °C /min hasta -20 °C por 5 min, y luego se sumergieron en el nitrógeno líquido. En la descongelación se utilizaron soluciones de dilución conteniendo dos concentraciones de sucrosa: 0.5 M y 0.2 M para congelación lenta y 0.25 M y 0.12 M para vitrificación. Se realizó una evaluación in vivo a todos los embriones del grupo control y al 50% de los embriones de los dos grupos experimentales, mediante transferencia directa a hembras receptoras previamente sincronizadas. El diagnóstico de preñez se llevó a cabo por ecografía transrectal a los 20 y 30 días. La preñez fue de 4/13, 2/12 y 0/11 para las receptoras de los grupos Control, Vitrificados y Congelación lenta, respectivamente, sin diferencia estadística. Para la evaluación in vitro, los embriones criopreservados fueron cultivados en PBS + 20% SFB, en una atmósfera compuesta por 5% de CO2, 20% de O2 y 75% de N2, durante 1 h a 39 °C, y se observó ...

The aim of the study was to evaluate in llama embryos the effect of two cryopreservation methods on the in vivo and in vitro survival rate. Seventy three hatched blastocysts were recovered by a non-surgical technique at day 6.5 after mating from superstimulated llamas. Receptors were randomly allocated to a control group (n=14), vitrification (n=30) and slow freezing (n=29). On vitrification, embryos were exposed to a vitrification solution (VS) containing 20% Glycerol + 20% Ethylene glycol + 0.5 M Sucrose + 10% fetal calf serum (FCS) + 50 µg/ml gentamicin sulfate, and then plunged into liquid nitrogen in 0.25 ml straws. On the slow freezing, embryos were exposed to phosphate buffer saline (PBS) with 1.5 M Ethylene glycol + 10% FCS + 50 µg/ml gentamicin sulfate, loaded in 0.25 ml straws, and cooled at a rate of 0.12 °C/min to 5 °C. Then, further temperature decrease at 5 °C /min rate, to -20 °C, for 5 min at the mouth of the nitrogen tank; finally straws were plunged into liquid nitrogen. For thawing, two dilution solutions were used composed of two sucrose concentrations: 0.5 M and 0.2 M for slow freezing, and 0.25 M and 0.12 M for vitrification. An in vivo evaluation was performed in all embryos of the control group and in 50% of the experimental groups by direct transfer into previously synchronized female recipients. Pregnancy diagnosis was carried out by transrectal ultrasound evaluation at 20 and 30 days. Pregnancy was in 4/13, 2/12, and 0/11 in recipients from control, vitrification and slow freezing groups respectively, without significant difference. For the in vitro evaluation cryopreservated embryos were cultured in PBS + 20% FCS under atmosphere compose of 5% CO2, 20% O2, and 75% N2 at 39 °C for 1 h, then reexpansion ...

Alteraciones anátomo-histopatológicas testiculares en alpacas (vicugna pacos) beneficiadas en Nuñoa, Puno / Testicular anatomo-histopathological alterations in alpacas (vicugna pacos) slaughtered in Nuñoa, Puno

Se determinó la frecuencia y se caracterizó las alteraciones anátomo-histopatológicas testiculares en alpacas beneficiadas en la zona de Nuñoa, Puno. Se hizo el examen macroscópico de los testículos de 177 alpacas, donde 102 presentaron tamaño y peso disminuido, además de quistes epididimarios uni o bilaterales. Muestras de tejido testicular se fijaron con Solución de Bouin por 28 horas, y se tiñeron con Hematoxilina y Eosina, Ácido Periódico de Schiff y Tricrómico de Masson. Se encontró una frecuencia de 13.7% de alteraciones testiculares, correspondiendo a infiltración linfocítica inespecífica (7.8%), ausencia testicular (2.9%), degeneración testicular (1.0%), hidrocele (1.0%) y teratoma testicular (1.0%). Asimismo, se observó una frecuencia de 32.2% de quistes epididimarios, sin que haya asociación estadística entre presencia de quistes con edad o raza de las alpacas.

The aim of the study was to determine the frequency and characterize testicular anatomo-histopathological alterations in alpacas slaughtered in Nuñoa, Puno. Macroscopic examination of the testes was carried out in 177 alpacas, which 102 showed smaller size and low weight, and also uni or bilateral epididymal cysts. Tissue samples were fixed with the Bouin solution during 28 hours and stained with Haematoxylin and Eosin, Periodic Acid Schiff and Masson’s Trichromic stain. The frequency of testicular alterations was 13.7%, corresponding to nonspecific lymphocytic infiltration (7.8%), testicular absence (2.9%), testicular degeneration (1.0%), hidrocele (1.0%), and teratoma (1.0%). Besides, there was 32.2% of epididymal cysts, but without statistical association with age or breed.

Determinación de la presencia de Campylobacter fetus subsp. Venerealis en alpacas y llamas en la zona de Puno / Determination of the presence of Campylobacter fetus subsp. venerealis in alpacas and llamas in the Puno region

Se evaluó la presencia del Campylobacter fetus subsp. venerealis en camélidos sudamericanos del Centro de Investigación y Producción Quimsachata, Instituto Nacional de Investigación Agraria, ubicado en el departamento de Puno. Se hicieron hisopados de los fluidos vaginales y prepuciales en 244 alpacas y llamas, entre febrero y marzo de 2007. Las muestras se analizaron mediante la prueba de inmunofluorescencia directa, utilizando un conjugado comercial. Ninguna muestra resultó positiva. La probable prevalencia media, mediante el programa @Risk®, fue de 0.069 y de 0.096% en alpacas y llamas, respectivamente.

The presence of Camplylobacter fetus subsp. venerealis in South American camelides was evaluated. The animals were from the INIA-Quimsachata Research Centre located in the department of Puno. Vaginal and preputial swabs were collected from 244 alpacas and llamas between February and March 2007. Samples were analyzed by the direct immunofluorescence test using a commercial conjugate. None of the samples resulted positive. The probable mean prevalences using the @Risk software were 0.069 and 0.096% in alpacas and llamas respectively.

Transferencia embrionaria ipsilateral y contralateral a la posición del cuerpo lúteo y supervivencia embrionaria en llamas / Embryo transfer ipsilateral and contralateral to the position of the corpus luteum and embryo survival in llamas

El presente trabajo se realizó con el propósito de evaluar el efecto de la transferencia embrionaria ipsilateral y contralateral a la posición del cuerpo lúteo (CL), así como el tamaño del CL sobre la tasa de supervivencia embrionaria en llamas. Se utilizaron 43 llamas receptoras, adultas, distribuidas aleatoriamente en 4 grupos: G1 (n=10): CL en ovario derecho y transferencia ipsilateral, G2 (n=10): CL en ovario derecho y transferencia contralateral, G3 (n=15): CL en ovario izquierdo y transferencia ipsilateral y G4 (n=8): CL en ovario izquierdo y transferencia contralateral. Se usaron 10 llamas como donadoras de embriones, que fueron sincronizadas con LH (1 ml) (Día 0=D0), superovuladas con1000 UI de eCG en el D3, a las que se les provocó luteólisis con PGF 2 en el D7 y se les empadró en el D8. Ese día, las receptoras se trataron con LH para sincronizarlas con las donadoras. En el D14 se colectó, evaluó y transfirió los embriones. El 60 (G1) y 75% (G3) de las hembras preñaron con transferencia ipsilateral derecha e izquierda, respectivamente, mientras solo el 30 (G2) y 25% (G4) preñaron con transferencia contralateral derecha e izquierda, respectivamente. Sin embargo, solo se encontró diferencia significativa entre el grupo G3 con los grupos G2 y G4 (p<0.05). Los resultados indican una mayor tasa de supervivencia embrionaria en llamas al realizar la transferencia en el cuerno ipsilateral a la posición del CL ubicado en el ovario izquierdo.

The study was carried out to evaluate the effect the embryo transfer to the uterine horn ipsilateral and contralateral to the side of the corpus luteum (CL) and the size of CL on the embryo survival in llamas. It was used 43 recipient adult females randomly assigned to 4 groups: G1 (n=10): CL in right ovary and ipsilateral embryo transfer, G2 (n=10): CL in right ovary and contralateral transfer, G3 (n=15): CL in left ovary and ipsilateral transfer, and G4 (n=8): CL in left ovary and contralateral transfer. Ten llamas were used as embryo donors. They were synchronized with LH (1 ml) on Day 0 (D0), superovulated with 1000 UI eCG on D3, luteolysis was induced with PGF 2 on D7, and mated on D8. Recipients were treated on D7 with LH to get synchrony with the donors. On D14 embryos were collected, evaluated and transferred. The results showed that 60 (G1) and 75% (G3) recipients conceived when embryo transfer was right and left ipsilateral respectively, while only 30 (G2) and 25% (G4) conceived when embryo transfer was right and left contralateral respectively. However, statistical difference was only observed between G3 with G2 and G4 (p<0.05). These results indicate that pregnancy rate is higher in llamas when the embryo transfer was done in to the uterine horn ipsilateral to the CL in the left ovary.

Relación entre el día de colección y la recuperación de embriones en alpacas superovuladas / Relationship between day of collection and embryo recovery in superovulated alpacas

Se estudió la relación entre el día de colección y la recuperación embrionaria en alpacas adultas multíparas. Alpacas con folículos mayor menor que 7 mm se sometieron a un protocolo de superovulación, se cubrieron con machos fértiles (día 0 = día de servicio), y los embriones se recuperaron en el día 5 (G1), 6 (G2) y 7 (G3) post cópula, previa evaluación del número y tamaño de los cuerpos lúteos por ecografía transrectal ovárica. En el Exp. 1 se usaron 14 alpacas, que fueron sacrificadas para recuperar los embriones de los cuernos uterino y del oviducto. En el Exp. 2 se realizó la recuperación embrionaria in vivo a 21 alpacas. El lavado de los cuernos uterinos se hizo con 250 ml de PBS a través de un catéter Foley y en los oviductos se hizo con 20 ml de PBS desde la unión útero tubal hacia la fimbria. El número de embriones recuperados de cuerno uterino así como el porcentaje de recuperación embrionaria fue mayor en G2 y G3 respecto a G1 (p<0.05), mientras que en el oviducto hubo mayor recuperación en G1. Los embriones recolectados de los cuernos uterinos considerados como buenos y excelentes fue de 81.4% (35/43) en el Exp. 1 y de 74.5% (38/51) en el Exp. 2, sin encontrar diferencias significativas entre tratamientos dentro de cada experimento. El estadio de desarrollo embrionario más frecuente en ambos experimentos fue de blastocisto eclosionado (77.7%, 73/94), sin diferencia estadística entre G2 y G3. Se concluye que los embriones pueden ser recuperadas del oviducto hasta el día 5 y del cuerno uterino desde el día 6 post cópula.

He relationship between day of collection and embryo recovery was studied inmultiparous adult alpacas. Females with greater than 7 mm follicles were superovulated, mated with fertile males (day 0 = day of service) and embryos were recovered on day 5 (G1), 6 (G2) and 7 (G3) post copula, where the number and size of corpora lutea were echographically evaluated. In Exp. 1, 14 females were slaughtered and embryos were recovered from the uterine horns and the oviduct. In Exp. 2, embryos were recovered in vivo from 21 females. Each uterine horn was flushed with 250 ml of PBS using a Foley catheter; and oviducts were flushed from the utero-tubal junction to the fimbria using 20 ml of PBS. The number and rate of embryos recovered from the uterine horns was higher in G2 and G3 as compared to G1 (p<0.05), while in the oviduct was higher in G1. Collected embryos from uterine horns had the condition of excellent and good in 81.4% (35/43) in Exp. 1 and 74.5% (38/51) in Exp. 2, and without statistical differences between treatments in each experiment. The most frequent level of embryo development was hatching blastocyst (77.7%, 73/94), and without differences between G2 and G3. It was concluded that embryos could be recovered until day 5 after mating in oviducts and from day 6 on wards in the uterine horns.

Prevalencia de leptospirosis bovina en dos localidades de Puno en época de seca y determinación de factores de riesgo / Prevalence of bovine leptospirosis at two localities in Puno during the dry season and determination of risk factors

La leptospirosis es una enfermedad zoonótica causada por una espiroqueta del género Leptospira, de distribución mundial que tiene gran impacto económico por las importantes pérdidas que ocasiona en la ganadería, sobre todo en la reproducción y la producción láctea, ya que tiene potencial abortivo y es causante de mortalidad neonatal, además de disminuir o anular la producción de leche. El objetivo del presente trabajo fue determinar la prevalencia de leptospirosis en bovinos en dos predios del departamento de Puno, Perú (Estación Experimental de ILLPA- INIA y Ganadería Cárdenas en la localidad de Mañazo), y su asociación con la época del año y la edad. Se recolectaron 116 muestras de sangre del total de animales de ambos predios, en la época seca. Los sueros se evaluaron mediante la Prueba de Aglutinación Microscópica (MAT) para la detección de anticuerpos, empleándose una batería de cuatro serovares (canicola, icterohaemorrhagiae, pomona y hardjo). Se obtuvo una prevalencia total de 2.6%, del cual 1.3% correspondió a animales de ILLPA-INIA y 5.3% a los animales de Mañazo. El serovar icterohaemorrhagiae fue el único prevalente con un nivel de anticuerpos de 1:200. Estos resultados sugieren una prevalencia baja de Leptospira sp en la época de seca en la zona estudiada.

Leptospirosis is a disease caused by a spirochet of the genus Leptospira. It is a world-wide zoonotic disease with a great economic impact because of the important losses that causes to livestock farmers, especially in terms of reproduction performance and milk yield loses. The objective of the study was to estimate the prevalence of leptospirosis in bovines in two farms in the department of Puno, Peru: the ILLPA-INIA Experimental Station and Cardenas farm at Mañazo and its association with season and age. One hundred and sixteen serum samples collected during the dry season were evaluated. Blood samples were collected to all animals in both farms. The Microscopic Agglutination Test (MAT) was used for the detection of antibodies through a set of four serovars (canicola, icterohaemorrhagiae, pomona, and hardjo). The total prevalence was 2.6% while 1.3% corresponded to animals at ILLPA-INIA and 5.3% to animals at Mañazo. The icterohaemorrhagiae was the only prevalent serovar and the level of antibodies was 1:200. The results suggested a low prevalence of Leptospira sp. in the dry season in the area of study.

Efecto de la suplementación alimenticia y destete temporal sobre el comportamiento reproductivo postparto de vacas cruzadas en el trópico / Effect of feed suplementation and early weaning on postpartum reproductive performance of crossbred cows in the tropics

Se evaluó el efecto de la suplementación alimenticia y el destete temporal en 46 vacas cruzadas Bos taurus x Bos indicus sobre el reinicio de la actividad ovárica postparto. Los animales fueron distribuidos al parto en tres tratamientos: T1: Control, sin suplementación y con cría al pie; T2: Suplementación + destete temporal (48 h) a los 60 días post parto; y T3: Suplementación + cría al pie. Se suplementó 3 kg de concentrado/vaca/día desde el parto hasta los 60 días post parto. Se colectó muestras de sangre dos veces por semana desde la semana 3 a la 12 postparto para determinar niveles de progesterona como indicador de reinicio de la actividad ovárica postparto. Se encontró un intervalo parto – primera ovulación de 70.6, 56.4 y 57.8 días para las vacas que ovularon dentro de las primeras 12 semanas postparto en los grupos T1, T2 y T3, respectivamente. El 31.3, 73.3 y 66.7% de las vacas de cada tratamiento ovularon en ese periodo. Se concluye que el factor nutricional y el destete temporal contribuyeron a una mejora del comportamiento reproductivo postparto del ganado bovino cruzado en el trópico peruano.

The effect of feed supplementation and temporary weaning in 46 crossbred Bos taurus x Bos indicus cows on the resumption of post partum ovarian activity was evaluated. Animals were distributed in three treatments: T1, Control, cows without supplementation + calf at foot; T2, Feed supplementation + calf at foot and temporary weaning (48 h) at 60 days post partum; and T3, Feed supplementation + calf at foot. Supplement consisted of 3 kg/cow/day from calving till 60 days post partum. Blood samples were collected twice a week since week 3 till week 16 post partum for the determination of progesterone levels as indicator of the resumption of ovarian activity. The interval calving first ovulation was 70.6, 56.4, and 57.8 days for cows that ovulate within the first 12 weeks after calving in groups T1, T2, and T3 respectively. The 31.3, 73.3, and 66.7% of cows in each treatment group ovulate within that period. It is concluded that feed supplementation and temporary weaning contribute in improving post partum reproductive performance in crossbred cattle in the Peruvian tropics.

Efecto del sitio de deposición del plasma seminal sobre la tasa de ovulación y formación del cuerpo lúteo en alpacas / Effect of the deposition site of seminal plasma on the ovulation and corpus luteum development in alpacas

El estudio tuvo por objetivo evaluar el sitio de deposición del plasma seminal sobre la tasa de ovulación y formación del cuerpo lúteo en alpacas. Se seleccionaron 91 hembras no lactantes con folículos .7 mm detectados por ecografía transrectal. Se sincronizola onda folicular con la aplicación de 5 mg de LH, y 12 días después, se determinó la presencia de un folículo dominante (.7 mm). Las hembras se distribuyeron al azar en seis tratamientos: G1 =16 (Plasma seminal vía intramuscular), G2=15 (PBS vía intramuscular), G3=16 (Plasma seminal vía intrauterina), G4=15 (PBS vía intrauterina), G5 =15 (Plasma seminal vía intrauterina con curetaje), G6 =14 (PBS vía intrauterina con curetaje). La tasa de ovulación y presencia de cuerpo lúteo se determinó mediante ecografía el día D2 y D8 (D0 = inicio del tratamiento). Se tomó muestras de sangre los días D0, D3 y D9 para determinar perfiles séricos de progesterona mediante RIA. La tasa de ovulación fue de 93.8, 37.5 y 66.5% para G1, G3 y G5, respectivamente, y no se registraron ovulaciones en los otros grupos. Se encontró que las alpacas G1 producirían 25 veces más ovulaciones con respecto al G3. Los resultados sugieren que la absorción del factor inductor de ovulación (FIO) del plasma seminal es vía sistemica y que el curetaje facilitaría la absorción del FIO incrementando el efecto ovulatorio del plasma seminal.

The present study was carried out to evaluate the effect of deposition site of seminal plasma on the ovulation rate and size of corpus luteum in alpacas. Non-lactating females bearing a .7 mm follicle detected by ultrasound were selected (n = 91). Follicular wave was synchronized by injecting 5 mg of LH and then, the presence of a dominant follicle .7 mm was determined 12 days later through ultrasound evaluation. Alpacas were assigned to one of six experimental groups: G1 (n=16) seminal plasma (SP) by intramuscular injection . i.m.; G2 (n=15) phosphate-buffered saline (PBS) i.m.; G3 (n=16) SP by intrauterine administration . i.u.; G4 (n=15) PBS i.u.; G5 (n=15) SP i.u. with curettage; G6 (14) PBS by i.u. with curettage. Ovulation rate and corpus luteum were determined by ultrasound evaluation on D2 and D8 (D0 = day of treatment). Serum samples were taken from the jugular vein on D0, D3 and D9 to determine progesterone profiles by radioimmunoassay. Ovulation rate was 93.7, 37.5, and 66.5% for G1, G3 and G5 respectively, while none ovulations were observed in the other three groups. Alpacas in G1 would produce 25 more ovulations than G3. Results of the present study suggested that the ovulation-inducing factor (OIF) present in seminal plasma is absorbed systemically and that the mechanical action of curettage would contribute to the absorption of the OIF present in seminal plasma.

Estimulación con gonadotropina coriónica equina (ECG) durante las fases luteal y no luteal sobre la respuesta ovárica y calidad embrionaria en llamas / Equine chorionic gonadotrophin (ECG) stimulation during the luteal and non-luteal phases on ovarian response and embryo quality in llamas

Se evaluó el efecto del tratamiento superovulatorio en las dos fases del ciclo ovárico sobre la respuesta folicular y la calidad embrionaria en 45 llamas hembras adultas. Se incluyeron en el estudio aquellos animales que a la ecografía presentaron un folículo preovulatorio >7 mm. Los animales se distribuyeron en tres grupos: T0 (no estimulado), T1 (tratamiento superovulatorio en fase no luteal) y T2 (tratamiento superovulatorio en fase luteal). Los animales de T1 y T2 recibieron 1 ml de LH (día 0) para sincronizar la onda folicular y 1000 UI de eCG (día 3) como tratamiento superovulatorio. Se utilizaron esponjas vaginales impregnadas con progesterona entre el día 3 y 7 para simular la fase luteal en el T2. La inducción de la ovulación se hizo mediante monta natural y aplicación de 1 ml de GnRH (día 8). La colección y evaluación de embriones se realizó 7 días post cópula (día 15) en T1 y T2. En el grupo T0 se realizó monta natural y aplicación de GnRH y 7 días después se realizó la colección de embriones. El número de folículos preovulatorios fue mayor en T1 (11.07 ± 7.53) y T2 (6.13 ± 7.11) con respecto a T0 (1.07 ± 0.26) (p<0.05). El número de cuerpos lúteos fue mayor en T1 (9.27 ± 3.37) con respecto a T0 (1.07 ± 0.26) y T2 (6.47 ± 4.29) (p<0.05). Asimismo, el número de embriones recuperados fue mayor en T1 (3.47 ± 4.26) con respecto a T0 (0.33 ± 0.48) y T2 (1.33 ± 2.53). Los resultados permiten concluir que la aplicación del tratamiento superovulatorio durante una fase no luteal permiten obtener una mejor respuesta ovárica y embrionaria en comparación con tratamientos superovulatorios aplicados en fase luteal.

The effect of superovulatory treatment during the two phases of the ovarian cycle on follicular growth and embryo quality was evaluated in 45 sexually adult llamas. Animals bearing a >7 mm follicle, observed by ultrasonography, were selected and allocated into 3 groups: T0 (non-stimulated), T1 (superovulatory treatment during the non luteal phase), and T2 (superovulatory treatment during the luteal phase). Animals in groups T1 and T2 received 1 ml of LH (day 0) for synchronization of the follicular wave and 1000 IU of Ecg (day 3) as superovulatory treatment. Vaginal sponges impregnated with progesterone were used on days 3 to 7 in T2 to simulate the luteal phase. The induction of the ovulation (day 8) was done through natural mating and the application of GnRH (1 ml). Embryo recovery was done 7 days after natural mating (day 15) on T1 and T2. Similarly, embryo recovery was done 7 days after natural mating and application of GnRH in T0. The number of preovulatory follicles was larger in T1 (11.07 ± 7.53) and T2 (6.13 ± 7.11) than in T0 (1.07 ± 0.26) (p<0.05). The number of corpora lutea was larger in T1 (9.27 ± 3.37) than in T0 (1.07 ± 0.26) and T2 (6.47 ± 4.29) (p<0.05). The number of recovered embryos was larger in T1 (3.47 ± 4.26) than in T0 (0.33 ± 0.48) and T2 (1.33 ± 2.53). The results showed that superovulatory treatment during the non luteal phase had a better response than superovulatory treatment during the luteal phase.

Uso de dilutores hipertónicos en la criopreservación de semen ovino / Hypertonic extenders in the cryopreservation of ovine semen

Se evaluó el efecto crioprotector de dos dilutores hipertónicos (Trealosa y Lactosa) sobre las características postdescongelamiento del semen ovino (n=4). La composición de los dilutores base incluyó Tris 27.1 g/l, ácido cítrico 14.0 g/l, fructosa 10.0 g/l, glicina 10.0 g/l, yema de huevo 10.0 % (v/v) y glicerol 6.5 % (v/v). El semen colectado con vagina artificial tuvo las siguientes características: volumen: 1.1 ± 0.1ml, concentración espermática: 3.5 ± 0.1 x 109/ml, motilidad individual: 87.0 ± 2.4%, motilidad masal (escala 0-5): 4.4 ± 0.2, espermatozoides vivos: 90.2 ± 3.8% y anormales 1.8 ± 0.7%. El semen fue congelado en pajillas de 0.5 ml y conservado en nitrógeno líquido. Las pajillas fueron descongeladas luego de 3 meses para su evaluación. Se obtuvo una motilidad individual de 40.3 ± 5.9 y 30.0 ± 5.0% y un número de espermatozoides vivos de 34.4 ± 6.6 y 24.4 ± 5.0 para los dilutores Trealosa y Lactosa, respectivamente. El mejor resultado se obtuvo al utilizar el dilutor hipertónico Trealosa por tener mejores características de motilidad individual y espermatozoides vivos postdescongelamiento.

The cryoprotectant effect of two hypertonic extenders (trehalose and lactose) on the post-thawing characteristics of ram semen (n=4) was evaluated. The extender composition included Tris 27.1 g/l, Citric acid 14.0 g/l, Fructose 10.0 g/l, Glycine 10.0 g/l, egg yolk 10.0% (v/v) and Glycerol 6.5% (v/v). Semen was collected in an artificial vagina. Seminal characteristics were: volume: 1.1 ± 0.1 ml, sperm concentration: 3.50 ± 0.1 x 109/ml, individual motility: 87.0 ± 2.4%, wave motility (scale 0-5): 4.4 ± 0.2, live sperms: 90.2 ± 3.8%, and abnormal sperms: 1.8 ± 0.7%. Semen was frozen in 0.5 ml straws and stored in liquid nitrogen. Straws were thawed after 3 months. Results of post-thawing evaluation were: individual motility: 40.3 ± 5.9 and 30.0 ± 5.0%, and live sperms: 34.4 ± 6.6 and 24.3 ± 5.0% for the Trehalose and Lactose extenders respectively. Results showed a better ram semen cryopreservation when the Trehalose extender was used.

Seroprevalencia de leptospirosis en alpacas de Quimsachata, Puno / Seroprevalence of leptospirosis in alpacas from Quimsachata, Puno

El objetivo del presente estudio fue determinar la seroprevalencia de leptospirosis en alpacas durante la época de lluvias (enero-marzo) en la localidad Quimsachata, Puno. Se analizaron 344 sueros de alpacas de una estación experimental del Instituto Nacional de Investigación y Extensión Agraria, mediante la prueba de microaglutinación. Se evaluó, además, la asociación de las variables sexo y edad con la reacción a la prueba. El 44.8 ± 5.3% de los animales fueron serorreactores. Los serovares detectados fueron pomona (43.6%), icterohaemorrhagiae (9.9%), y canicola (1.5%), no encontrándose ningún reactor a hardjo. No se encontró ningún suero positivo en tuis; mientras que en adultos no se encontró diferencia significativa entre sexos. Los altos títulos hallados para pomona e icterohaemorrhagiae en estos animales sugieren una infección activa durante la época de lluvia.

The objective of this study was to estimate the prevalence of leptospirosis in alpacas reared in the locality of Quimsachata, Puno during the rainy season (January-March). Serum samples (n=344) of alpacas from the experimental station of the Instituto Nacional de Investigación y Extensión Agraria (INIA) were analyzed using the microaglutination test. The association of age and sex with test results was also evaluated. The overall seroprevalence was 44.8 ± 5.3%. The detected serovars were pomona (43.6%), icterohaemorrhagiae (9.9%), canicola (1.5%), and none for hardjo. Positive samples in young animals («tuis¼) were nil, where as in adult animals no statistical differences was found due to sex. The high antibody titres in pomona and icterohaemorrhagiae suggested an active infection during the rainy period.

Prevalencia de anticuerpos contra Leptospira sp. en dos predios de Puno / Prevalence of Leptospira sp. in two cattle farms of Puno

En el presente estudio se determinó la prevalencia de leptospirosis en 103 bovinos (98 hembras y 5 machos) de dos predios de la provincia de Puno. Las muestras de sangre se recolectaron durante los meses de febrero y marzo (época de lluvia) del 2005 y los sueros fueron enfrentados a una batería de referencia de 4 serovares de Leptospira interrogans mediante la Prueba de Aglutinación Microscópica (MAT). Anticuerpos leptospirales en títulos de 1:100 y 1:200 fueron detectados en tres animales, representando una prevalencia de 2.9%, siendo el serovar involucrado la Leptospira icterohaemorrhagiae.

The prevalence of bovine leptospirosis in 103 cattle (98 female and 5 male) from two farms of the Puno province were studied. Blood samples were collected during February and March 2005 (rainy season), and sera was confronted with four serovar reference of Leptospira interrogans by the Microscopic Agglutination Test (MAT). Two positive samples with titres of 1:100 and 1:200 were detected, representing a prevalence of 2.9%. The involved serovar was Leptospira icterohaemorrhagiae.

Efecto de fracciones del plasma seminal, según su peso molecular, sobre la inducción de la ovulación en llamas (Lama glama) / Effect of plasma seminal fractions, based on molecular weight, on the induction of ovulation in llamas (Lama glama)

El presente estudio fue realizado con el propósito de evaluar el efecto de varias fracciones de plasma seminal de llamas, según su peso molecular (PM), sobre la inducción de la ovulación. Se utilizó 54 llamas hembras sin cría y en óptimo estado reproductivo, con folículo dominante ≥7 mm de diámetro determinado por ecografía transrectal por tres días consecutivos. Los animales se distribuyeron al azar a uno de los seis tratamientos: A) fracción de plasma seminal con PM ≥30 kDa, B) fracción de plasma seminal con PM entre 10 y 30 kDa, C) fracción de plasma seminal con PM entre 5 y 10 kDa, D) fracción de plasma seminal con PM <5 kDa, E) plasma seminal completo, y F) PBS. Los animales fueron tratados con una solución de 1.5 ml de la fracción de plasma seminal o placebo correspondiente por vía intramuscular. Las llamas fueron evaluadas por ecografía en el día 2 y 9 post-tratamiento para determinar la tasa de ovulación y el tamaño del cuerpo lúteo. Los resultados indicaron una tasa de ovulación del 100 por ciento en los grupos A y E, 11.1 por ciento en B y 0 por ciento en los demás tratamientos. No se encontró diferencias estadísticas entre grupos respecto al diámetro luteal. Los resultados obtenidos permiten señalar que la fracción de plasma seminal con peso molecular mayor a 30 kDa induce la ovulación en llamas.

The present study was conducted to evaluate the effect of different fractions of llama seminal plasma, based on the molecular weight (MW), on the ovulation. Fifty four female adult llamas without calf at foot and in good reproductive conditions were used. The animals were bearing a ≥7 mm dominant follicle determined by ultrasound diagnosis during a three consecutive days. Females were randomly distributed in six groups: A, fraction of seminal plasma with MW ≥30 kDa; B, fraction of seminal plasma with MW ≥10 and <30 kDa; C, fraction of seminal plasma with MW ≥5 and <10 kDa ; D, fraction of seminal plasma with MW <5 kDa; E, complete plasma seminal; and F, PBS. Animals were treated with a 1.5 ml solution of the corresponding fraction or placebo via i.m. Ovarian ultrasound was performed at day 2 and 9 post-treatment to determine the ovulation rate and the size of the corpora lutea. Ovulation rate was 100 por ciento in groups A and E, 11.1 por ciento in group B and 0 por ciento in the other groups. No statistical differences were observed between groups on the size of the corpus luteum. The results indicated that the plasma seminal fraction with molecular weight ≥30 kDa induce ovulation in llamas.

Efecto del estadio del desarrollo folicular al momento de la monta sobre la ovulación y supervivencia embrionaria en alpacas / Effect of the follicular development stage at the time of mating on the ovulation and embryonic survival in alpacas

El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto del estadio del desarrollo folicular del folículo dominante (fd) al momento de la cópula, sobre la ovulación y supervivencia embrionaria en alpacas. Se utilizaron 116 animales con descanso post-parto ≥ 15 días, que fueron evaluadas por ecografía transrectal para distribuirlas en 4 grupos: G1 (fd en estadio de crecimiento, diámetro: 6 mm), G2 (fd en estadio de crecimiento, diámetro: mayor igual 7 y menor igual 12 mm), G3 (fd en estadio estático, diámetro: mayor igual que 7 mm) y G4 (fd en estadio de regresión, diámetro: mayor igual que 7 mm). Posteriormente, fueron sometidos a monta controlada, a excepción de 5 alpacas del grupo G1 que rechazaron al macho. El día del empadre fue considerado el día 0. Evaluaciones ecográficas adicionales se realizaron los días 2 (ocurrencia de ovulación), 9 (presencia y tamaño del cuerpo lúteo); 20, 25, 30 y 35 (presencia de vesícula embrionaria o embrión). El día 15 post cópula se realizó la prueba de receptividad sexual. El 97.3 por ciento de alpacas empadradas (n = 111) presentaron ovulación al día 2 post cópula, sin diferencia significativa (p menor que 0.05) entre grupos. En el día 9 post cópula, no se encontraron diferencias significativas en el tamaño promedio del cuerpo lúteo entre grupos. El porcentaje de supervivencia embrionaria fue estadísticamente similar para todos los grupos, aunque hubo una tendencia a un mayor nivel de supervivencia para el grupo G2 (65.5 por ciento) en comparación con los demás grupos al día 35 post cópula. Estos resultados indicarían que el estadio del desarrollo folicular del folículo dominante al momento de la monta no tendría efecto significativo sobre la tasa de ovulación y supervivencia embrionaria en alpacas.

The objective of this study was to evaluate the effect of the stage of the dominant follicle (df) at mating on the ovulation and embryonic survival in alpacas. A total of 116 alpacas with ³15 day-post-partum resting period were used and evaluated by transrectal ultrasonography in order to distribute them in 4 groups: G1 (df in growing stage, diameter: 6 mm), G2 (df in growing stage, diameter: major equal 7 minor equal 12 mm), G3 (df in static stage, diameter: major equal 7 mm,) and G4 (df in regression stage, diameter: major equal 7 mm). Subsequently, all alpacas were mated except 5 alpacas of group G1 that rejected the male. Mating day was considered as day 0. Additional ultrasound evaluations were carried out on days 2 (occurrence of ovulation), 9 (presence and size of the corpus luteum); 20, 25, 30 and 35 (presence of embryonic vesicle or embryo). On day 15, a sexual receptiveness test was performed. Ovulation occurred in 97.3 por ciento of alpacas that were mated (n=111) but without significant differences (p minor that 0.05) between groups. On day 9, no significant difference in the average size of the corpus luteum was observed among groups. The embryonic survival rate was also not significantly different among the groups, but there was a tendency to a greater rate of survival for group G2 (65.5 per cent) on day 35 after mating. These results suggested that the stage of follicular development of the dominant follicle during mating does not have a significant effect on the rate of ovulation and embryonic survival in alpacas.

Determinación de leptina y sus valores séricos en alpacas hembras adultas con diferente condición corporal / Leptin determination and serum levels in adult alpacas with different body condition

El presente estudio tuvo como objetivo determinar la presencia de la hormona leptina en alpacas adultas, cuantificar sus valores y relacionarlos con la condición corporal. Se utilizaron 36 alpacas hembras adultas, vacías y sin cría, las cuales fueron divididas en dos grupos, según su condición corporal (CC): G1: CC menor que 3.0 y G2: CC mayor que3.0, de acuerdo a una escala 1 - 5 (1: emaciada, 5: obesa). Se tomaron muestras de sangre por punción de la vena yugular y el suero resultante fue mantenido en congelación a –20 ºC hasta su análisis. La determinación de leptina fue realizada mediante la técnica de radioinmunoensayo (RIA). La media general de la concentración de leptina fue de 17.23 ± 0.81 ng/ml. Los valores encontrados para G1 fueron de 18.14 ± 1.12 ng/ml y para G2: 16.32 ± 1.15 ng/ml, sin diferencias estadísticas entre grupos. Los resultados obtenidos permiten evidenciar la presencia de leptina en alpacas.

The aim of this study was to determine the presence of leptin in adults alpacas, in order to quantify leptin values for these animals, and to relate them with body condition. For this purpose, 36 non pregnant and non nursing female adult alpacas were used. They were divided in two groups according to body condition (BC): G1: BC minor that 3.0 and G2: BC major that 3.0, using the 1 to 5 scale (1: emaciate, 5: obese). Blood samples by jugular venipunction to obtain serum were taken. Serum samples were maintained at -20 ºC until analysis. The leptin determination was carried out by the radioimmunoassay technique (RIA). The mean of leptin concentration was 17.23 ± 0.81 ng/ml. Values for G1 were 18.14 ± 1.12 ng/ml and for G2. were 16.32 ± 1.15 ng/ml, without statistical differences between groups. The results showed that the leptin hormone is also present in alpacas.

Efecto de dos antioxidantes (tempo y tempol) en la criopreservación de semen ovino empleando un dilutor en base a tris / Effect of two antioxidants (tempo and tempol) on ram semen cryopreservation using the tris extender

Se emplearon 32 muestras de semen procedentes de cuatro ovinos a fin de ser criopreservadas con la adición dos antioxidantes: Tempo (2,2,6,6 tetrametil-1-piperidiniloxil) y Tempol (4-hidroxi 2,2,6,6 tetrametil-1-piperidiniloxil), en concentraciones de 0.5, 1.0 y 2.5 mM, para evaluar el efecto postdescongelamiento que pudieran tener sobre la motilidad progresiva, la viabilidad e integridad acrosomal y la capacitación espermática prematura. En cada concentración de los dos antioxidantes y del grupo control se utilizó un dilutor en base a Tris, realizándose ocho repeticiones, cada una con cuatro muestras de semen. Los resultados obtenidos demuestran que la adición de Tempo a una concentración de 0.5 mM mejora significativamente la calidad del semen criopreservado en comparación con el grupo control (p<0.05), incrementado los porcentajes de motilidad progresiva (79 vs. 67 por ciento), viabilidad e integridad acrosomal (70 vs. 58 por ciento) y reduciendo la capacitación espermática prematura (9 vs.15 por ciento). Por otro lado, la adición de Tempol disminuyó la calidad seminal postdescongelamiento en comparación con el control. En conclusión, la adición de Tempo 0.5 mM en un dilutor en base a Tris, al finalizar la fase de enfriamiento, podría constituir una estrategia para mejorar la calidad de semen ovino criopreservado.

Thirty-two semen samples from four rams were frozed using two antioxidants, Tempo (2,2,6,6 tetramethyl-1-piperidinyloxyl) and Tempol (4-hidroxi 2,2,6,6 tetramethyl-1-piperidinyloxyl), each one in concentrations of 0.5, 1.0, and 2.5 mM, to evaluate the effects on post-thawing motility, viability, acrosomal integrity, and earlier sperm capacitation. Eight replications for each antioxidant concentration and control group, were done using four semen samples per replication. Semen samples were diluted on a Tris extender. Results showed that Tempo 0.5 mM improved frozen semen quality in comparison with control group (p<0.05), by increasing progresive motility (79 vs. 67 por ciento), viability and acrosomal integrity (70 vs. 58 por ciento), and decreasing earlier sperm capacitation (9 vs. 15 por ciento). On the other hand, Tempol decreased frozen semen quality. In conclusion, the use of Tempo 0.5 mM on a Tris extender, at the end of the cooling process, could be an alternative for improving the quality of frozed ram semen.