Testicle histology of the Epicrates cenchria: a morphological and reproductive biology analysis / [Histologia dos testículos de Epicrates cenchria: uma análise morfológica e da biologia reprodutiva]

The lack of information about anatomy, physiology and reproductive biology in many snake species makes the understanding of these free-living animals' reproduction and reproductive biotechnics application in captivity difficult. The present study aims to evaluate the Epicrates cenchria's testicle morphology and correlate these findings with environmental aspects and reproductive biology. The testicles of five specimens of E. cenchria were histologically evaluated, and it was possible to observe seasonality in sperm production, with the presence of mature spermatozoa in the wettest and warmest periods of the year, as well as the highest testicular volume in these periods. Correlating these findings with that reported in the literature on copulation period presupposes a prenuptial (or associated) pattern in E. cenchria.

A falta de informações sobre anatomia, fisiologia e biologia reprodutiva em muitas espécies de serpentes impossibilita compreender melhor a reprodução desses animais em vida livre e aprimorar as biotécnicas reprodutivas nessas espécies em cativeiro. O presente trabalho tem como objetivo avaliar a morfologia dos testículos de Epicrates cenchria e correlacionar esses achados com aspectos ambientais e da biologia reprodutiva. Os testículos de cinco espécimes de E. cenchria foram avaliados histologicamente, sendo possível observar sazonalidade na produção espermática, com presença de espermatozoides maduros nos períodos mais chuvosos e quentes do ano, bem como o maior volume testicular nesses períodos. Correlacionando-se esses achados com o relatado em literatura sobre período de cópulas, pressupõe-se um padrão pré-nupcial (ou associado) em E. cenchria.

Pseudo-Fringe sign in frontal fibrosing alopecia-like cutaneous lupus erythematosus.

BACKGROUND: Marginal alopecia presents itself frequently in dermatological practice. For patients who present peripheral scalp hair loss, cicatricial and non-cicatricial alopecia should be considered, such as ophiasis, traction alopecia and frontal fibrosing alopecia. In spite of the several types of hair loss that have been described in cutaneous lupus erythematosus, the 'pseudo-fringe sign' had never been observed in such patents. OBJECTIVE: This study aims at including the 'pseudo-fringe sign' as another possibility of clinical manifestation in patients with cutaneous lupus erythematosus. METHODS: A case report of a 67-year-old lady with the diagnosis of lupus erythematosus and peripheral hair loss is shown in this study; the respective differential diagnosis have also been discussed. RESULTS: The diagnosis of a scarring alopecia caused by lupus erythematosus was established with dermoscopy and histopathology. CONCLUSION: Cutaneous lupus erythematosus is another diagnostic possibility for patients who display the 'pseudo-fringe sign'.

Coleta de sêmen em Leopardus guttulus pelo método do cateterismo uretral / Leopardus guttulus semen collection using urethral catheter method

Considerando a realidade conservacionista dos animais mantidos em cativeiro, em especial os pequenos felídeos silvestres, objetivou-se, com este estudo, descrever o método de coleta de sêmen por cateterismo uretral em Leopardus guttulus cativos, anestesiados com cetamina-dexmedetomidina. Inicialmente foram utilizados 13 animais para coleta de sêmen por cateterismo mediante o uso de diferentes doses de cetamina-dexmedetomidina. Após determinação da dose anestésica ideal para coleta de sêmen nessa espécie, cinco L. guttulus machos foram submetidos a coletas seriadas de sêmen pelo método do cateterismo. A dose ideal para coleta de sêmen foi de 0,008mg/kg de dexmedetomidina e 10mg/kg de cetamina. Os valores médios para volume e concentração foram de 35,9µL e 552,8x106sptz/mL. Com média de 71% de motilidade e 3,1 de vigor, 68% dos espermatozoides apresentaram vitalidade (integridade de membrana) e 77% integridade acrossomal. Sobre as patologias espermáticas, obteve-se uma média de 28% de espermatozoides com defeitos maiores, 6% com defeitos menores e 67% normais. As vantagens do método, como a facilidade e o baixo custo, fazem recomendar sua utilização em L. guttulus, pois foram apresentados bons resultados quanto à concentração espermática, à motilidade, ao vigor, à viabilidade espermática e à integridade acrossomal, sendo uma técnica promissora para utilização em felinos selvagens.(AU)

Considering the conservationist reality of animals kept in captivity, especially the small wild felids, this study aimed to describe the semen collection method using urethral catheterization in captive Leopardus guttulus, anesthetized with ketamine-dexmedetomidine. Initially, 13 animals were used for semen collection using catheterization with different ketamine-dexmedetomidine doses. After determination of the best anesthetic dose for semen collection in this species, five male L. guttulus were submitted to serial semen collections using the catheter method. The dose for semen collection was 0.008mg/kg dexmedetomidine and 10mg/kg ketamine. The mean values for volume and concentration were 35.9µL and 552.8x106sptz/mL, with a mean of 71% motility, 3.1 vigor, and 68% of spermatozoa presented vitality and 77% presented acrosomal integrity. Sperm pathologies obtained an average of 28% of spermatozoa with major defects, 6% of spermatozoa with minor defects and 67% of normal spermatozoa. The method advantages such as ease and low cost lead us to recommend the use in L. guttulus, since it presented good results regarding sperm concentration, motility, vigor, sperm viability and acrosomal integrity, being a promising technique for use in wild cats.(AU)

Coleta de sêmen em Leopardus guttulus pelo método do cateterismo uretral / Leopardus guttulus semen collection using urethral catheter method

Considerando a realidade conservacionista dos animais mantidos em cativeiro, em especial os pequenos felídeos silvestres, objetivou-se, com este estudo, descrever o método de coleta de sêmen por cateterismo uretral em Leopardus guttulus cativos, anestesiados com cetamina-dexmedetomidina. Inicialmente foram utilizados 13 animais para coleta de sêmen por cateterismo mediante o uso de diferentes doses de cetamina-dexmedetomidina. Após determinação da dose anestésica ideal para coleta de sêmen nessa espécie, cinco L. guttulus machos foram submetidos a coletas seriadas de sêmen pelo método do cateterismo. A dose ideal para coleta de sêmen foi de 0,008mg/kg de dexmedetomidina e 10mg/kg de cetamina. Os valores médios para volume e concentração foram de 35,9µL e 552,8x106sptz/mL. Com média de 71% de motilidade e 3,1 de vigor, 68% dos espermatozoides apresentaram vitalidade (integridade de membrana) e 77% integridade acrossomal. Sobre as patologias espermáticas, obteve-se uma média de 28% de espermatozoides com defeitos maiores, 6% com defeitos menores e 67% normais. As vantagens do método, como a facilidade e o baixo custo, fazem recomendar sua utilização em L. guttulus, pois foram apresentados bons resultados quanto à concentração espermática, à motilidade, ao vigor, à viabilidade espermática e à integridade acrossomal, sendo uma técnica promissora para utilização em felinos selvagens.(AU)

Considering the conservationist reality of animals kept in captivity, especially the small wild felids, this study aimed to describe the semen collection method using urethral catheterization in captive Leopardus guttulus, anesthetized with ketamine-dexmedetomidine. Initially, 13 animals were used for semen collection using catheterization with different ketamine-dexmedetomidine doses. After determination of the best anesthetic dose for semen collection in this species, five male L. guttulus were submitted to serial semen collections using the catheter method. The dose for semen collection was 0.008mg/kg dexmedetomidine and 10mg/kg ketamine. The mean values for volume and concentration were 35.9µL and 552.8x106sptz/mL, with a mean of 71% motility, 3.1 vigor, and 68% of spermatozoa presented vitality and 77% presented acrosomal integrity. Sperm pathologies obtained an average of 28% of spermatozoa with major defects, 6% of spermatozoa with minor defects and 67% of normal spermatozoa. The method advantages such as ease and low cost lead us to recommend the use in L. guttulus, since it presented good results regarding sperm concentration, motility, vigor, sperm viability and acrosomal integrity, being a promising technique for use in wild cats.(AU)

Efecto Regulador de Tibolona sobre la Actividad Antiinflamatoria del Macrófago / Regulatory Effect of Tibolone on Antiinflamatory Activity of Macrophage

Resumen Los macrófagos son células fagocíticas que activan a la sintasa de óxido nítrico (SON) y la NADPH oxidasa con el objetivo de eliminar agentes que reconocen como extraños. Además, participan en el desarrollo y mantenimiento de la respuesta inflamatoria. Tibolona (Tb), a través de sus metabolitos, tiene actividad estrogénica, progestagénica y androgénica. Es utilizada como alternativa de la terapia hormonal de la menopausia, que además disminuye marcadores de inflamación. El objetivo de este estudio fue describir el efecto de Tb sobre la expresión de las interleucinas I, 6, 10 y TNF-α así como la actividad de la NADPH oxidasa del macrófago. Se utilizó la línea celular THP-1, se diferenció a macrófago, y se evaluó la actividad de NADPH oxidasa por el ensayo de NBT y la expresión de IL-1β, IL-6, TNF-α e IL-10 por RT-qPCR. Se encontró que Tb regula la actividad enzimática, así como la expresión de citocinas ante un estímulo proinflamatorio. Por lo que se concluye que Tb favorece la actividad antiinflamatoria del macrófago. Estos resultados contribuyen a la descripción de los mecanismos de acción de este fármaco. Además, se propone al macrófago como un blanco de regulación del proceso inflamatorio por acción de Tb. Se sugiere que se determine la expresión proteica de las citocinas por otras técnicas, tales como western blot, ELISA, o citometría de flujo; así como la actividad de SON.

Abstract Macrophages are phagocytic cells that activate NOS and NADPH oxidase to eliminate agents that recognize like strangers, also participate in development and maintain of inflammatory response. In other hand, tibolone (Tb) has three main metabolites, which have an estrogenic, prostagenic and androgenic activity. This drug is a hormonal therapy to treat symptoms of menopause, with ability to decrease inflammation markers. The aim of this study is to describe the effect of Tb on macrophage activity. This study was carried out on differentiated macrophage THP-1 cell line used. NADPH oxidase activity by NBT assay and expression of IL-1β, IL-6, TNF-α and IL-10 by RT-qPCR were measured. It has been observed that Tb regulates the enzymatic activity, as well as the cytokines expression in the cells that received a proinflammatory stimulus; these results contribute to description of mechanism of action of this drug. The results suggest that macrophage could be a target for antiinflammatory action of Tb. Its remain to investagate the protein expression of cytokines and activity of iNOS.

Aspectos da biologia reprodutiva de Boa constrictor constrictor: um estudo histológico dos testículos nos períodos reprodutivos de quiescência e máxima atividade / Boa constrictor constrictor reproductive biology aspects: the testes histological study in the reproductive periods of quiescence and maximal activity

As serpentes pertencem ao segundo maior grupo dentro dos répteis, podendo apresentar sazonalidade quanto à espermatogênese, com produção descontínua ou contínua. O presente trabalho tem como objetivo caracterizar aspectos da biologia reprodutiva de Boa constrictor constrictor com base nos achados histológicos dos testículos nos períodos de máxima atividade (período de gametogênese) e quiescência. Os testículos de dois espécimes de Boa c. constrictor (7767 e 11752) foram cortados a uma espessura de 3µm em micrótomo, corados com azul de toluidina 1%, fotodocumentados e descritos. A presença de espermatozoides na luz do túbulo seminífero no indivíduo 7767 indica um período de máxima gametogênese, enquanto o lúmen dos túbulos seminíferos pouco evidentes, sem a presença de espermatozoides e de células gaméticas em divisão, caracteriza o indivíduo 11752 em período quiescente. Mediante os achados histológicos descritos no presente estudo, concluiu-se que Boa c. constrictor apresenta sazonalidade em relação à gametogênese, sendo esse padrão de sazonalidade associado ao período de cópulas relatado em literatura característico de serpentes com padrão pré-nupcial.(AU)

These snakes belong to the second largest group within the reptiles, being able to present seasonality regarding spermatogenesis, with discontinuous or continuous production. The present study aims to characterize Boa constrictor constrictor reproductive biology aspects from histological findings in testicles during periods of maximum activity (period of gametogenesis) and quiescence. The testicles of two specimens of Boa c. constrictor (7767 and 11752) were cut to a thickness of 3µm in microtome, stained with 1% toluidine blue, photodocumented and described. The spermatozoa presence in the seminiferous tubule lumen in individual 7767 indicates a period of maximum gametogenesis, whereas the seminiferous tubules lumen is not very evident without spermatozoa and the absence of dividing gametic cells characterizes individual 11752 in the quiescent period. Through the histological findings we concluded that Boa c. constrictor presents seasonality in relation to gametogenesis, and the pattern of reproductive seasonality observed along with the period of copulas reported in the literature resembles the pre-nuptial pattern.(AU)

Leiomioma vulvar em lobo-guará (Chrysocyon brachyurus) - relato de caso / Leiomyoma vulvar in maned wolf (Chrysocyon brachyurus) - case report

Descrição de leiomioma vulvar em lobo-guará (Chrysocyon brachyurus), fêmea, castrada, apresentando 10 anos de idade e mantida em cativeiro. Com base na avaliação clínica, no monitoramento de formação nodular de crescimento lento e progressivo e no diagnóstico preliminar sugestivo de neoplasia, procedeu-se à exérese da massa tumoral e à identificação anatomopatológica do leiomioma. Exames complementares radiográficos e ultrassonográficos não apontaram presença de metástases. A ressecção cirúrgica se mostrou satisfatória como conduta clínica, não havendo recidiva.(AU)

Description of leiomyoma vulvar in a female castrated Chrysocyon brachyurus, , ten years of age, and maintained in captivity. Based on the clinical evaluation, monitoring of nodular formation of slow and progressive growth, and preliminary diagnosis suggestive of neoplasia, the tumor mass was excised and anatomopathological identification of the leiomyoma was done. Complementary radiographic and ultrasound examinations did not indicate the presence of metastases. Surgical resection proved to be satisfactory as a clinical practice, and there was no relapse.(AU)

Leiomioma vulvar em lobo-guará (Chrysocyon brachyurus) - relato de caso / Leiomyoma vulvar in maned wolf (Chrysocyon brachyurus) - case report

Descrição de leiomioma vulvar em lobo-guará (Chrysocyon brachyurus), fêmea, castrada, apresentando 10 anos de idade e mantida em cativeiro. Com base na avaliação clínica, no monitoramento de formação nodular de crescimento lento e progressivo e no diagnóstico preliminar sugestivo de neoplasia, procedeu-se à exérese da massa tumoral e à identificação anatomopatológica do leiomioma. Exames complementares radiográficos e ultrassonográficos não apontaram presença de metástases. A ressecção cirúrgica se mostrou satisfatória como conduta clínica, não havendo recidiva.(AU)

Description of leiomyoma vulvar in a female castrated Chrysocyon brachyurus, , ten years of age, and maintained in captivity. Based on the clinical evaluation, monitoring of nodular formation of slow and progressive growth, and preliminary diagnosis suggestive of neoplasia, the tumor mass was excised and anatomopathological identification of the leiomyoma was done. Complementary radiographic and ultrasound examinations did not indicate the presence of metastases. Surgical resection proved to be satisfactory as a clinical practice, and there was no relapse.(AU)

Aspectos da biologia reprodutiva de Boa constrictor constrictor: um estudo histológico dos testículos nos períodos reprodutivos de quiescência e máxima atividade / Boa constrictor constrictor reproductive biology aspects: the testes histological study in the reproductive periods of quiescence and maximal activity

As serpentes pertencem ao segundo maior grupo dentro dos répteis, podendo apresentar sazonalidade quanto à espermatogênese, com produção descontínua ou contínua. O presente trabalho tem como objetivo caracterizar aspectos da biologia reprodutiva de Boa constrictor constrictor com base nos achados histológicos dos testículos nos períodos de máxima atividade (período de gametogênese) e quiescência. Os testículos de dois espécimes de Boa c. constrictor (7767 e 11752) foram cortados a uma espessura de 3µm em micrótomo, corados com azul de toluidina 1%, fotodocumentados e descritos. A presença de espermatozoides na luz do túbulo seminífero no indivíduo 7767 indica um período de máxima gametogênese, enquanto o lúmen dos túbulos seminíferos pouco evidentes, sem a presença de espermatozoides e de células gaméticas em divisão, caracteriza o indivíduo 11752 em período quiescente. Mediante os achados histológicos descritos no presente estudo, concluiu-se que Boa c. constrictor apresenta sazonalidade em relação à gametogênese, sendo esse padrão de sazonalidade associado ao período de cópulas relatado em literatura característico de serpentes com padrão pré-nupcial.(AU)

These snakes belong to the second largest group within the reptiles, being able to present seasonality regarding spermatogenesis, with discontinuous or continuous production. The present study aims to characterize Boa constrictor constrictor reproductive biology aspects from histological findings in testicles during periods of maximum activity (period of gametogenesis) and quiescence. The testicles of two specimens of Boa c. constrictor (7767 and 11752) were cut to a thickness of 3µm in microtome, stained with 1% toluidine blue, photodocumented and described. The spermatozoa presence in the seminiferous tubule lumen in individual 7767 indicates a period of maximum gametogenesis, whereas the seminiferous tubules lumen is not very evident without spermatozoa and the absence of dividing gametic cells characterizes individual 11752 in the quiescent period. Through the histological findings we concluded that Boa c. constrictor presents seasonality in relation to gametogenesis, and the pattern of reproductive seasonality observed along with the period of copulas reported in the literature resembles the pre-nuptial pattern.(AU)

Medicina Regenerativa para Úlceras Crónicas: Aplicación Cutánea de Células Troncales Mesenquimales de Gelatina de Wharton / Regenerative Medicine for Chronic Ulcers: Cutaneous Application of Mesenchymal Stem Cells of Wharton's Jelly

Resumen El empleo de células mesenquimales ha emergido como una parte importante en la medicina regenerativa con efectos positivos en la recuperación de tejidos dañados o perdidos. Las úlceras crónicas incluyen lesiones cutáneas que afectan a una gran parte de la población con diabetes mellitus, (por ejemplo 9.14% desarrollan lesiones por pie diabético según ENSANUT 2016) y representan gastos económicos considerables, debido a la pobre calidad de vida que llevan los pacientes. El tratamiento convencional que se lleva a cabo en estos casos es a largo plazo, y los efectos benéficos generados que se presentan son limitados, ya que las lesiones reinciden por no contar con un tratamiento específico y regenerativo, solo paliativo. Es por ello que en este trabajo se obtuvieron y emplearon células troncales mesenquimales derivadas de gelatina de Wharton (CTM-GW) bajo los criterios propuestos por la Sociedad Internacional de la Terapia Celular. El tratamiento fue aplicado en dos pacientes con úlceras crónicas flebostáticas de diferentes condiciones médicas y se monitoreo a corto plazo, por lo que fue un estudio limitado. Los resultados mostraron que las CTM-GW indujeron la reconstrucción cutánea mediante formación de tejido de granulación, además de disminuir el proceso inflamatorio crónico en la zona de daño, lo que favoreció el índice de cierre de la herida. Por lo anterior, se propone la utilización de CTM-GW en úlceras flebostáticas crónicas como tratamiento en la regeneración de la estructura tisular con resultados a corto plazo.

Abstract Use of mesenchymal cells has emerged as an important part in regenerative medicine with positive effects in the recovery of damaged or lost tissues. Chronic ulcers include skin lesions that affect a large part of the population with diabetes mellitus, (for example, 9.14 develop diabetic foot according to ENSANUT 2016) and represent considerable economic expenses, due to poor quality of life in patients. The conventional treatment that is carried out in these cases is long term, and the generated beneficial effects that are presented are limited, since the injuries recur due to not having a specific and regenerative treatment, only palliative. That is why in this work they were obtained and used mesenchymal stem cells derived from Wharton's jelly (MSC-WJ) under the criteria proposed by the International Society for Cell Therapy. The treatment was applied in two patients with chronic ulcers phlebostatic of different medical conditions and short-term monitoring, so it was a limited study. The results showed that MSC-WJ induced skin reconstruction by tissue formation granulation, in addition to decreasing the chronic inflammatory process in the area of damage, which favored the index of wound healing. Therefore, the use of MSC-WJ in chronic phlebostatic ulcers is proposed as a treatment in the regeneration of the tissue structure with short-term results.

A biosensor capable of identifying low quantities of breast cancer cells by electrical impedance spectroscopy.

Breast cancer (BC) is a malignant disease with a high prevalence worldwide. The main cause of death is not the primary tumor, but instead the spread of tumor cells to distant sites. The aim of the present study was to examine a new method for the detection of cancer cells in aqueous medium using bioimpedance spectroscopy assisted with magnetic nanoparticles (MNP's) exposure to a constant magnetic field. The spectroscopic patterns were identified for three breast cancer cell lines. Each BC cell line represents a different pathologic stage: the early stage (MCF-7), invasive phase (MDA-MB-231) and metastasis (SK-BR-3). For this purpose, bioimpedance measurements were carried out at a certain frequency range with the aid of nanoprobes, consisting of magnetic nanoparticles (MNPs) coupled to a monoclonal antibody. The antibody was specific for the predominant cell surface protein for each cell line, which was identified by using RT-qPCR and flow cytometry. Accordingly, EpCAM corresponds to MCF-7, MUC-1 to MDA-MB-231, and HER-2 to SK-BR-3. Despite their low concentrations, BC cells could be detected by impedance spectroscopy. Hence, this methodology should permit the monitoring of circulating tumor cells (CTC) and therefore help to prevent recurrences and metastatic processes during BC treatment.

Sexagem em tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) por meio do teste da reação em cadeia da polimerase / Polymerase chain reaction for sexing in giant anteater's (Myrmecophaga tridactyla)

Em tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) não há dimorfismo sexual, tornando-se necessária a diferenciação entre machos e fêmeas, em especial naqueles indivíduos com finalidade reprodutiva. Entre as diversas técnicas empregadas para a caracterização sexual, a reação em cadeia da polimerase (PCR) é utilizada em mamíferos para identificar uma sequência genética especifica do cromossomo Y (SRY), sendo considerado um meio moderno e eficaz de determinação sexual. O objetivo deste trabalho é padronizar um protocolo para determinação sexual de tamanduá-bandeira por meio da técnica de PCR, utilizando material genético extraído do bulbo capilar desses animais. Mediante esse protocolo, foi possível determinar o sexo de sete animais testados, sendo compatível com o sexo de cada indivíduo. Conclui-se que o protocolo padronizado apresentou total eficácia, sendo possível determinar o sexo de tamanduás-bandeira utilizando material genético extraído do bulbo capilar.(AU)

There is no sexual dimorphism in the giant anteater (Myrmecophaga tridactyla), so the distinction between males and females become necessary, especially in animals with reproductive purpose. The Polymerase Chain Reaction (PCR), among the various techniques used for characterization, is considered a modern and effective means of sex determination and used in mammals to identify the Y chromosome (SRY) specifies genetic sequence. The objective of this work is to standardize a protocol for sex determination of giant anteater by PCR technique, using genetic material extracted from the capillary bulb of these animals. With this protocol was possible the sex determination of seven tested animals, being compatible with the sex of each individual. In conclusion, this protocol showed total effectiveness, being possible to determine the giant anteater sex using genetic material extracted from the capillary bulb.(AU)

Sexagem em tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) por meio do teste da reação em cadeia da polimerase / Polymerase chain reaction for sexing in giant anteater's (Myrmecophaga tridactyla)

Em tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) não há dimorfismo sexual, tornando-se necessária a diferenciação entre machos e fêmeas, em especial naqueles indivíduos com finalidade reprodutiva. Entre as diversas técnicas empregadas para a caracterização sexual, a reação em cadeia da polimerase (PCR) é utilizada em mamíferos para identificar uma sequência genética especifica do cromossomo Y (SRY), sendo considerado um meio moderno e eficaz de determinação sexual. O objetivo deste trabalho é padronizar um protocolo para determinação sexual de tamanduá-bandeira por meio da técnica de PCR, utilizando material genético extraído do bulbo capilar desses animais. Mediante esse protocolo, foi possível determinar o sexo de sete animais testados, sendo compatível com o sexo de cada indivíduo. Conclui-se que o protocolo padronizado apresentou total eficácia, sendo possível determinar o sexo de tamanduás-bandeira utilizando material genético extraído do bulbo capilar.(AU)

There is no sexual dimorphism in the giant anteater (Myrmecophaga tridactyla), so the distinction between males and females become necessary, especially in animals with reproductive purpose. The Polymerase Chain Reaction (PCR), among the various techniques used for characterization, is considered a modern and effective means of sex determination and used in mammals to identify the Y chromosome (SRY) specifies genetic sequence. The objective of this work is to standardize a protocol for sex determination of giant anteater by PCR technique, using genetic material extracted from the capillary bulb of these animals. With this protocol was possible the sex determination of seven tested animals, being compatible with the sex of each individual. In conclusion, this protocol showed total effectiveness, being possible to determine the giant anteater sex using genetic material extracted from the capillary bulb.(AU)

Detecção molecular de Neospora caninum em macaco-da-noite (Aotus azarae) de vida livre no estado do Mato Grosso: relato de caso / Molecular detection of Neospora caninum in azara's night monkey (Aotus azarae) of wildlife in the state of Mato Grosso: Case report

Estudos indicam, por meio de infecção experimental, que primatas não humanos são susceptíveis à infecção por Neospora caninum. Relata-se um caso de um macaco-da-noite (Aotus azarae infulatus), que apresentou sinais inespecíficos e não respondeu à terapêutica clínica de suporte, evoluindo a óbito, encaminhado em seguida para exame anatomopatológico. Amostras de tecidos foram coletadas e processadas rotineiramente para confecção de lâminas histológicas. Microscopicamente, a principal lesão foi observada no coração e consistia em miocardite necrótica multifocal por protozoário, com a presença de estruturas compatíveis com o estágio de taquizoítos de protozoários dos gêneros Neospora sp. ou Toxoplasma sp. No sistema nervoso central, predominantemente no tronco encefálico, havia estruturas semelhantes às descritas no coração. Os resultados da reação em cadeia pela polimerase (PCR) foram positivos para N. caninum e negativos para Toxoplasma gondii, usando DNA extraído do sangue e dos tecidos. Este relato de caso fornece evidências histológicas e moleculares de que o primata em questão foi susceptível a uma infecção natural, porém estudos devem ser realizados para investigar o real papel dos primatas no ciclo de vida de N. caninum.(AU)

Studies indicate through experimental infection that non-human primates are susceptible to infection by Neospora caninum. This report is of a case of a night monkey (Aotus azarae infulatus) that presented nonspecific signs and did not respond to supportive clinical therapy evolving to death, followed by a pathology examination. Tissue specimens were routinely collected and processed for the preparation of histological slides. Microscopically, the main lesion was observed in the heart and consisted of multifocal necrotic myocarditis by protozoa, with the presence of structures compatible with the stage of protozoan tachyzoites of the genus Neospora sp. or Toxoplasma sp. In the central nervous system, predominantly in the brainstem there were structures similar to those described in the heart. Polymerase chain reaction (PCR) results were positive for N. caninum and was negative for Toxoplasma gondii using DNA extracted from blood and tissues. This case report provides histological and molecular evidence that the primate in question was susceptible to a natural infection, but studies should be conducted to investigate the real role of primates in the life cycle of N. caninum.(AU)

Diagnóstico ecocardiográfico e tratamento de cardiomiopatia dilatada em tamanduá- bandeira ( Myrmecophaga trydactila ) mantido em cativeiro: relato de caso / Echocardiographic diagnosis and treatment of dilated cardiomyopathy in captive giant anteater (Myrmecophaga trydactila): case report

A cardiomiopatia dilatada é uma doença de caráter crônico, que compromete a função cardíaca, resultando em desequilíbrio da circulação sanguínea e da homeostase corporal do animal. Este relato apresenta a evolução do quadro clínico e o tratamento de cardiomiopatia dilatada em um exemplar cativo de tamanduá-bandeira. O animal apresentou quadro clínico de insuficiência cardíaca e foi submetido a duas baterias de exames laboratoriais e de imagem em um período de três meses. Posteriormente, foi iniciado o tratamento com pimobendan e suplementação de taurina, resultando em resposta positiva e melhora dos sinais clínicos do paciente. Os achados ecocardiográficos do caso foram compatíveis com cardiomiopatia dilatada com sinais evidentes de diminuição progressiva das frações de ejeção, bem como encurtamento e aumento expressivo das câmaras cardíacas, quando se comparou este caso ao de cães de grande porte e animais saudáveis da mesma espécie. O tratamento com inotrópico positivo, suplementação dietética de taurina e diuréticos se mostrou eficiente em controlar os sinais clínicos do animal.(AU)

The dilated cardiomyopathy it is a chronic disease that leads to a cardiac dysfunction, resulting in unstable blood circulation and specimen body homeostasis. This description shows the dilated cardiomyopathy evolution and treatment in a giant anteater captive model. The patient presented cardiac insufficient clinical condition and was submitted to two sets of laboratorial and image exams in three months. Furthermore, the treatment started with pimobendam and taurine supplementation, leading to satisfactory response to treatment and clinical improvement. The echocardiographic findings were compatible with dilated cardiomyopathy, moreover clear evidence of progressive reduction at the ejection portions and shortening and expressive increase of the cardiac chamber when compared to large dogs and healthy animals of the same species. Treatment with positive inotropic and taurine dietary supplement revealed as effective in clinical managementr.(AU)

Detecção molecular de Neospora caninum em macaco-da-noite (Aotus azarae) de vida livre no estado do Mato Grosso: relato de caso / Molecular detection of Neospora caninum in azara's night monkey (Aotus azarae) of wildlife in the state of Mato Grosso: Case report

Estudos indicam, por meio de infecção experimental, que primatas não humanos são susceptíveis à infecção por Neospora caninum. Relata-se um caso de um macaco-da-noite (Aotus azarae infulatus), que apresentou sinais inespecíficos e não respondeu à terapêutica clínica de suporte, evoluindo a óbito, encaminhado em seguida para exame anatomopatológico. Amostras de tecidos foram coletadas e processadas rotineiramente para confecção de lâminas histológicas. Microscopicamente, a principal lesão foi observada no coração e consistia em miocardite necrótica multifocal por protozoário, com a presença de estruturas compatíveis com o estágio de taquizoítos de protozoários dos gêneros Neospora sp. ou Toxoplasma sp. No sistema nervoso central, predominantemente no tronco encefálico, havia estruturas semelhantes às descritas no coração. Os resultados da reação em cadeia pela polimerase (PCR) foram positivos para N. caninum e negativos para Toxoplasma gondii, usando DNA extraído do sangue e dos tecidos. Este relato de caso fornece evidências histológicas e moleculares de que o primata em questão foi susceptível a uma infecção natural, porém estudos devem ser realizados para investigar o real papel dos primatas no ciclo de vida de N. caninum.(AU)

Studies indicate through experimental infection that non-human primates are susceptible to infection by Neospora caninum. This report is of a case of a night monkey (Aotus azarae infulatus) that presented nonspecific signs and did not respond to supportive clinical therapy evolving to death, followed by a pathology examination. Tissue specimens were routinely collected and processed for the preparation of histological slides. Microscopically, the main lesion was observed in the heart and consisted of multifocal necrotic myocarditis by protozoa, with the presence of structures compatible with the stage of protozoan tachyzoites of the genus Neospora sp. or Toxoplasma sp. In the central nervous system, predominantly in the brainstem there were structures similar to those described in the heart. Polymerase chain reaction (PCR) results were positive for N. caninum and was negative for Toxoplasma gondii using DNA extracted from blood and tissues. This case report provides histological and molecular evidence that the primate in question was susceptible to a natural infection, but studies should be conducted to investigate the real role of primates in the life cycle of N. caninum.(AU)

Diagnóstico ecocardiográfico e tratamento de cardiomiopatia dilatada em tamanduá- bandeira ( Myrmecophaga trydactila ) mantido em cativeiro: relato de caso / Echocardiographic diagnosis and treatment of dilated cardiomyopathy in captive giant anteater (Myrmecophaga trydactila): case report

A cardiomiopatia dilatada é uma doença de caráter crônico, que compromete a função cardíaca, resultando em desequilíbrio da circulação sanguínea e da homeostase corporal do animal. Este relato apresenta a evolução do quadro clínico e o tratamento de cardiomiopatia dilatada em um exemplar cativo de tamanduá-bandeira. O animal apresentou quadro clínico de insuficiência cardíaca e foi submetido a duas baterias de exames laboratoriais e de imagem em um período de três meses. Posteriormente, foi iniciado o tratamento com pimobendan e suplementação de taurina, resultando em resposta positiva e melhora dos sinais clínicos do paciente. Os achados ecocardiográficos do caso foram compatíveis com cardiomiopatia dilatada com sinais evidentes de diminuição progressiva das frações de ejeção, bem como encurtamento e aumento expressivo das câmaras cardíacas, quando se comparou este caso ao de cães de grande porte e animais saudáveis da mesma espécie. O tratamento com inotrópico positivo, suplementação dietética de taurina e diuréticos se mostrou eficiente em controlar os sinais clínicos do animal.(AU)

The dilated cardiomyopathy it is a chronic disease that leads to a cardiac dysfunction, resulting in unstable blood circulation and specimen body homeostasis. This description shows the dilated cardiomyopathy evolution and treatment in a giant anteater captive model. The patient presented cardiac insufficient clinical condition and was submitted to two sets of laboratorial and image exams in three months. Furthermore, the treatment started with pimobendam and taurine supplementation, leading to satisfactory response to treatment and clinical improvement. The echocardiographic findings were compatible with dilated cardiomyopathy, moreover clear evidence of progressive reduction at the ejection portions and shortening and expressive increase of the cardiac chamber when compared to large dogs and healthy animals of the same species. Treatment with positive inotropic and taurine dietary supplement revealed as effective in clinical managementr.(AU)

Comparación entre Células Troncales Mesenquimales obtenidas de Médula Ósea, Tejido Adiposo y Gelatina de Wharton en base a los Criterios de la ISCT / Comparison between Mesenchymal Stem Cells obtained from Bone Marrow, Adipose Tissue and Wharton Gelatin according to the ISCT Criteria

RESUMEN: Las células troncales mesenquimales (CTM) representan una población heterogénea con capacidad para auto-renovarse y diferenciarse a distintos tipos celulares. Estas fueron descritas en un inicio en médula ósea (MO) a mediados del siglo pasado, desde entonces este tejido se ha convertido en el estándar de oro para la obtención y caracterización de CTM. Actualmente se sabe que este tipo de células se encuentran alojadas en nichos distribuidos por todo el organismo, donde contribuyen a los procesos de regeneración del tejido donde se localizan. No obstante, encontrar una fuente alterna de CTM con las mismas características que las de MO, pero que su extracción no suponga riesgo para el donador es fundamental para su utilización con fines terapéuticos. En este trabajo se aislaron células troncales de médula ósea, y se compararon con tejido adiposo y gelatina de Wharton y caracterizaron de acuerdo a los criterios de la Sociedad Internacional para la Terapia Celular (ISCT). Los resultados mostraron que la morfología, diferenciación osteogénica y adipogénica, así como la expresión de los antígenos de superficie CD90, CD73 y CD105 cumplen con los estándares, señalando a las provenientes de gelatina de Wharton como mejor opción.

ABSTRACT: Mesenchymal stem cells (MSC) represent a heterogeneous population with the capacity to self-renew and differentiate into different cell types. At the middle of the last century these cells initially were described in bone marrow (BM), thence this tissue has become the gold standard for obtaining and characterization of MSC. It is known that these cells are housed in specific areas called niches distributed throughout all body, where they contribute to tissue regeneration processes of self-tissue were they are located. However, finding an alternative source of CTM with the same characteristics that have showed in MO, but its obtention no represent a risk since the donor is essential to their use for therapeutic purposes. In this study we isolated mesenchymal stem cells from bone marrow, adipose tissue and Wharton's jelly and they were compared in their characteristics in according to the standards of the International Society for Cellular Therapy (ISCT). The results showed that the morphology as well as adipogenic and osteogenic differentiation and also the expression of surface antigens (CD90, CD73, and CD105) from all tissues accomplished the standards, although Wharton's jelly represented the best option.

Efecto de la dehidroepiandroesterona y el acetónido de triamcinolona sobre la línea celular 3T3-L1 / Effect of dehydroepiandroesterone and triamcinolone acetonide on 3T3-L1 cell line

RESUMEN: La piel es el órgano más extenso en el ser humano, su integridad representa protección contra diferentes agentes químicos, biológicos y mecánicos. Las lesiones ocasionadas en este tejido se resuelven mediante la formación de una cicatriz, sin embargo, diferentes alteraciones moleculares pueden sobre estimular este proceso, lo que conlleva a la formación de cicatrices aberrantes (hipertrófica o queloide). El tratamiento más recomendado para este tipo de lesiones es la aplicación intralesional del acetónido de triamcinolona (AT) y por otro lado, la dehidroepiandrosterona (DHEA) es una pro-hormona que posee una gran variedad de efectos biológicos como: regulación de la síntesis de fibras de colágeno, protección celular, propiedades antitumorales, antiinflamatorias y antioxidante. En este trabajo, se estudió la combinación de AT-DHEA sobre la proliferación y muerte celular en la línea celular de fibroblastos 3T3-L1. Los resultados mostraron que la AT a 100 M y la DHEA a 1000 M inhiben la proliferación en un 50 y 40% respectivamente. La combinación de AT-DHEA (10000-10 M) inhibe la proliferación celular e inducen muerte celular programada, entonces esta combinación pudiera utilizarse en cicatrices hipertróficas o queloides para su eliminación.

ABSTRACT: The skin in the human is the largest organ, his integrity represents protection against various chemical, biological and mechanical agents. The injuries in this tissue are solved by forming a scar, however, different molecular alterations may overstimulate this process, leading to the formation of aberrant scars (hypertrophic or keloid). The most recommended treatment for such injuries is the intralesional application of triamcinolone acetonide (TA) and on the other hand, dehydroepiandrosterone (DHEA) is a pro-hormone that has a wide variety of biological effects such as regulation of the synthesis of collagen fibers, cell protection, anti-tumor properties, anti-inflammatory and antioxidant. In this paper, the combination of AT-DHEA on proliferation and cell death in fibroblast cell line 3T3-L1 was studied. The results showed that the AT 100 and 1000 M DHEA to inhibit proliferation by 50 and 40% respectively. The combination of AT-DHEA (10000-10 M) inhibits cell proliferation and induce programmed cell death, so this combination could be used in hypertrophic or keloid scars for disposal.

Efecto del Medio Condicionado de la Línea Celular H9C2 Tratada con Dehidroepiandrosterona y Expuesta a Daño sobre la Motilidad de Células Troncales Mesenquimales / Effect of the Conditioned Medium from H9C2 Cell Line Treated with Dehydroepiandrosterone and Exposed to Damage on the Motility of Mesenchymal Stem Cells

RESUMEN: Las enfermedades cardiovasculares (ECV) son la principal causa de muerte a nivel mundial, donde la terapia con Células Troncales Mesenquimales (CTM) representa una alternativa para los pacientes que no logran recuperarse con los tratamientos actuales. El lograr que las CTM residentes se movilicen al órgano afectado representaría una ventaja para el manejo terapéutico de las ECV. La dehidroepiandrosterona (DHEA) es un precursor hormonal cuyos niveles disminuyen a lo largo de la vida, lo que se ha asociado al desarrollo de ECV. Diversos estudios han demostrado que el consumo de DHEA previene y mejora la condición cardiaca, aunque no se sabe si esto ocurre porque se ejerce un efecto en los cardiomiocitos y estos, a su vez, hacia las CTM. El objetivo del presente estudio fue determinar el efecto del medio condicionado procedente de la línea H9C2 pretratada con DHEA y sometida a daño, sobre la motilidad de CTM, llevando a cabo un ensayo de cierre de herida. El pretratamiento con DHEA y el daño en la línea H9C2, promueve la motilidad de CTM. El estímulo de la motilidad de CTM por un efecto indirecto de DHEA podría ser una estrategia terapéutica para el daño cardiaco.

ABSTRACT: Cardiovascular diseases (CVD) are the leading cause of death worldwide. Mesenchymal Stem Cell (MSC) therapy is an alternative for patients who cannot recover with current treatments. Ensure movilization of MSC to the affected organs would represent an advantage for therapeutic management of CVD. Dehydroepiandrosterone (DHEA) is a hormone precursor whose levels decrease throughout life, which has been associated with the onset of CVD. Several studies have shown that DHEA consumption, prevents and improves heart condition, although it is not known if this is because an effect on cardiomyocytes is exercised on these cells and this, in turn, to CTM. The aim of this study was to determine the effect of conditioned medium from H9C2 cell line pretreated with DHEA and subjected to damage, on the motility of CTM, performing a wound healing assay. Pretreatment with DHEA and damage to H9C2 cell line, promotes motility of CTM. Stimulation of CTM motility by an indirect effect of DHEA could be a therapeutic strategy for heart damage.