Histopathological Study of the Lungs of Mice Receiving Human Secretory IgA and Challenged with Mycobacterium tuberculosis.

BACKGROUND: Humoral and cellular immune responses are associated with protection against extracellular and intracellular pathogens, respectively. In the present study, we evaluated the effect of receiving human secretory immunoglobulin A (hsIgA) on the histopathology of the lungs of mice challenged with virulent Mycobacterium tuberculosis. METHODS: The hsIgA was purified from human colostrum and administered to Balb/c mice by the intranasal route prior to infection with M. tuberculosis or in a pre-incubated formulation with mycobacteria, with the principal aim to study its effect on qualitative pulmonary histopathology. RESULTS: The intranasal administration of hsIgA and the pre-incubation of mycobacteria with this preparation was associated with the presence of organised granulomas with signs of immune activation and histological features related to efficient disease control. This effect was highly evident during the late stage of infection (60 days), as demonstrated by numerous organised granulomas with numerous activated macrophages in the lungs of treated mice. CONCLUSION: The administration of hsIgA to mice before intratracheal infection with M. tuberculosis or the pre-incubation of the bacteria with the antibody formulation induced the formation of well-organised granulomas and inflammatory lesions in lungs compared with non-treated animals which correlates with the protective effect already demonstrated by these antibody formulations.

Repeated dose toxicity study of Vibrio cholerae-loaded gastro-resistant microparticles.

CONTEXT: Microencapsulation of antigens has been extensively studied over the last decades aiming at improving the immunogenicity of vaccine candidates. OBJECTIVE: Addressing microparticles (MPs) toxicity in rats. MATERIAL AND METHODS: Spray-dried Eudragit® L 30 D-55 MPs and Eudragit® L 30 D-55 alginate MPs were elaborated and characterized. MPs obtained were administered to rats, three groups were defined: G1, control group; G2, administered with Vibrio cholerae (VC)-loaded MPs; G3, receiving VC-loaded alginate MPs. Animals received three vaccine doses. Body weight, food and water intake were controlled during the study. Haematological parameters, vibriocidal titres, organ weight and histology in necropsy were also analyzed. RESULTS: All animals grew healthy. Body weight gain, food and water intake and haematological parameters remained within physiological values, showing no treatment-related differences. Moreover, organ weight changes were not detected and animals developed protective vibriocidal titres. CONCLUSION: VC-loaded MPs and VC-loaded alginate MPs have proved to be safe and effective in the assessed conditions.

Toxicidad aguda oral e irritabilidad de la mucosa oral con una formulación de tabletas de Tamarindus indica L / Acute oral toxicity and irritability of the oral mucosa with a tablet formulation of Tamarindus indica L

In this study, the possible preclinical toxic effects of the Tamarindus indica L tablets were evaluated by the acute oral toxicity (AOT) and oral mucosa irritation (OMI), adapting guideline OECD 423 and ISO 10993-10, respectively. The AOT was evaluated, using the Class Toxocity Method in Sprague Dawley females rats and the OMI was assessed in sirian hamsters, according to the acute exposure method. Any sign of toxicity were not observed in the study. No animal death was occurring and the body weight increase in the two experimental groups was not statistically different. Slight irritation of the oral mucosa of the animals was observed, but this fact didn't impede them to feed appropriately and they body weight increase normally during the assay. Tamarind tablets were framed as non toxic substance and they produce a “light irritability” of the oral mucosa.

En este trabajo se evaluó a nivel preclínico, los posibles efectos tóxicos de las tabletas de Tamarindus indica L. Se ensayó la toxicidad aguda oral, por el método de las clases de toxicidad, en ratas hembras de la línea Sprague Dawley y la irritabilidad de la mucosa oral en Hamster sirio, según las normas OECD 423 y ISO 10993-10, respectivamente. Durante el estudio de toxicidad aguda, no se observaron signos de toxicidad, ni muerte. El peso corporal en ambos grupos experimentales aumentó y no fue diferente estadísticamente. En el estudio de irritabilidad, se observó una ligera irritación en la mucosa de los biomodelos. Esto no les impidió alimentarse adecuadamente y se observó un incremento del peso corporal de ambos grupos experimentales. Se determinó que las tabletas producen una irritabilidad “leve” de la mucosa oral y no clasifican como tóxicas según las normas internacionales de referencia.

Caracterización de aislamientos clínicos de Leptospira por métodos fenotípicos y moleculares en la República de Nicaragua / Phenotypic and molecular characterization of Leptospira clinical isolations from the Republic of Nicaragua

En este trabajo se caracterizaron ocho cepas de Leptospira, aisladas de casos clínicos en Nicaragua mediante métodos fenotípicos y moleculares, las cuales no mostraron crecimiento a 13 °C ni en medio suplementado con 8-azaguanina (2,25 mg/mL). Se observó la conversión a formas esféricas a los 60 min de estar expuestas en un medio suplementado con NaCl 1M. Para la caracterización molecular de los aislamientos se realizó la reacción en cadena de la polimerasa (RCP) de genes conservados con cepas patógenas, cuyos productos génicos confieren virulencia al microorganismo ( ompL1 y lipL32 ). Los resultados de este ensayo demostraron la presencia de bandas de amplificación de los genes ompL1 y lipL32 para los ocho aislamientos, lo que permite afirmar que los microorganismos analizados constituyen cepas de Leptospira patógenas, según los métodos fenotípicos y moleculares recomendados(AU)

This paper present the phenotypic and molecular characterization of eight strains of Leptospira isolated from Nicaragua clinical cases. The phenotypic characterization results showed absence of cell growth on culture media incubated at 13 °C or 8-azaguanina (2.25 mg/mL) supplemented medium. Besides a conversion to spherical shapes at 60 min to exposure NaCl 1M supplemented medium was observed. The molecular characterization was carried out by polymerase chain reaction (PCR) of ompL1 and lipL32 genes stored with pathogen strains. The results demonstrated the presence of amplified bands for both genes on eight strains, which allow to affirm that the analyzed microorganisms are Leptospira pathogens strains(AU)

Assessment of repeat dose toxicity of Cochleate derived from Neisseria meningitidis proteoliposome in Sprague Dawley rats / Evaluación de la toxicidad por dosis repetida de un cocleato derivado de un proteoliposoma de Neisseria meningitidis en ratas Sprague Dawley

The AFCo1 cochleate is a potential novel adjuvant derived from Neisseria meningitidis B proteoliposome. The aim of this study was to assess the safety of AFCo1 by repeated doses in Sprague Dawley rats. Rats were grouped for treatment with AFCo1, placebo formulation or control. Four similar doses of the test substance were instilled every five days. Intranasal dose of 100 µL was used, and the body weight, water and food intakes were monitored as well as the clinical symptoms. Rats were sacrificed at 3, 14 and 28 days after the last inoculation and anatomopathological studies were conducted. Clinical observations were carried out for the study and a number of rats from each group were sacrificed 3 and 14 days after the last dose in order to conduct hematological, hemochemical and anatomopathological studies. Clinical symptoms, food and water intakes, and body weight did not show differences of toxicological relevance. The histological changes found were mild and similar in the three groups. AFCo1 is potentially safe by nasal route for human use as evidenced by the absence of local and systemic signs of toxicity in Sprague Dawley rats(AU)

El cocleato AFCo1, derivado de un proteoliposoma de Neisseria meningitidis B, es un nuevo y potente adyuvante vacunal. En el presente trabajo se evaluó la seguridad del AFCo1 mediante un estudio de dosis repetida en ratas Sprague Dawley. Los animales se agruparon en: tratados con AFCo1, placebo y control. Se les administraron cuatro dosis de 100 µL durante 5 días por vía intranasal. Se monitoreo el peso corporal, consumo de agua y alimento y los síntomas clínicos; así como estudios hematológicos y bioquímicos. Las ratas se sacrificaron a los 3, 14 y 28 días después de la última inoculación y se les realizó, además, pruebas anatomopatológicas. Los síntomas clínicos, el consumo de agua y alimento y el peso corporal no mostraron diferencias de relevancia toxicológica. Los cambios histológicos encontrados fueron leves y con frecuencias similares en los tres grupos. Por lo que se concluyó que el adyuvante AFCo1 nasal es potencialmente no tóxico para uso en humanos, por la ausencia de signos locales y sistémicos de toxicidad en las ratas Sprague Dawley(AU)

Pharmacology and toxicology of an oral tablet whole cells inactivated cholera vaccine in Sprague Dawley rats.

Here we further investigate the pharmacological and toxicological properties of a cholera vaccine based on inactivated whole cells presented in either enteric coated (COA) or uncoated (U/C) tablet formulation from Vibrio cholerae C7258 strain. Tablets were dispersed in 2mL drinking water and administered orally to Sprague Dawley rats distributed in five groups (I COA7, II U/C7 immunized at 0, 7, 69days and III COA14, IV U/C14 immunized at 0, 14, 69days and V control group). Serum vibriocidal antibody response was measured after the administration of two doses with an interval of 7-14days. To further investigate the toxicological aspects a third dose was applied 10 weeks after the initial one. Animals were observed daily and water and food consumption was measured every other day. Periodic blood extractions were performed for hematology, biochemistry, and the titer of serum vibriocidal antibodies was determined. Anatomopathological analysis was performed at days 3 or 14 after the third dose. Results from clinical observations, as well as from water and food consumption and body weigh indicated no toxicity of the vaccine product. Meanwhile, no biological differences were found among different groups in hematological, hemo-chemistry, and anatomopathological studies. Moreover, enteric coated and uncoated tablets against human cholera were found to induce an immune response in rats.

Evaluación del potencial de Mycobacterium smegmatis como candidato vacunal contra la tuberculosis mediante estudios in sílico e in vivo / Evaluation of the potential of Mycobacterium smegmatis as vaccine Candidate against tuberculosis by in silico and in vivo studies

In this study, we scanned multiple published databases of gene expression in vivo of M tuberculosis at different phases of infection in animals and humans, to select 38 proteins that are highly expressed in the active, latent and reactivation phases. The selected proteins were predicted for T and B epitopes. For each proteins, the regions containing T and B epitopes were selected at the same time to look for identical epitopes on M smegmatis based on sequence alignments. Preliminary studies of humoral immunogenicity and cross-reactivity with M tuberculosis in mice using two M smegmatis-derived experimental vaccines were carried out, demonstrating the immunogenicity of M smegmatis proteoliposomes and the recognition of M tuberculosis proteins by the sera of animals immunized with this vaccine candidate. The conjunction of in silico and in vivo studies suggested the potential for future evaluation of M smegmatis as vaccine candidate against tuberculosis using different strategies.(AU)

En este estudio se revisaron múltiples bases de datos publicadas, relacionadas con experimentos de expresión de genes de M tuberculosis in vivo en diferentes estadios de la infeccción en humanos y animales. Se identificaron 38 proteínas con elevada expresión en las fases activa, latente y de reactivación de la infección. Se llevó a cabo la predicción de epítopes T y B en dichas proteínas. Las regiones de cada proteína que contenían simultàneamente epítopes T y B se seleccionaron y utilizaron para identificar regiones idénticas en M smegmatis mediante el alineamiento de secuencias. Se llevaron a cabo estudios de inmunogenicidad humoral y reactividad cruzada con M tuberculosis en ratones inmunizados con dos vacunas experimentales obtenidas a partir de M smegmatis, demostràndose la immunogenicidad de los proteoliposomas y el reconocimiento de proteínas de M tuberculosis por el suero de ratones vacunados con este candidato vacunal. Los resultados obtenidos con los estudios in sílico e in vivo sugieren la potencialidad para evaluación futura de candidatos vacunales obtenidos a partir de M smegmatis para la prevención de la tuberculosis(AU)

Evaluación en animales del efecto protector de una inmunoglobulina anti Pseudomonas aeruginosa para uso terapéutico / Evaluation in animals of the protective effect of an anti Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa constituye uno de los agentes patógenos oportunistas de mayor frecuencia de aislamiento en los diversos procesos infecciosos, por lo que es reconocido como un gran problema de salud a nivel mundial. Al no existir un fármaco de alta efectividad ni vacunas disponibles contra esta bacteria, se emplea una terapia con inmunoglobulinas polivalentes comerciales que de forma combinada con los antibióticos contribuyen a eliminar la infección, aunque los preparados disponibles en el mercado no contienen concentraciones suficientemente elevadas de anticuerpos específicos contra este microorganismo. En este trabajo se llevó a cabo la evaluación en un modelo animal de una inmunoglobulina anti-Pseudomonas aeruginosa para uso terapéutico mediante un ensayo de reto con una cepa virulenta. Se evaluó dosis y vía de administración de la misma, así como el valor profiláctico o terapéutico de los anticuerpos. Esta gammaglobulina resultó ser protectora en animales mostrando una sobreviviencia cercana a un 75 por ciento en comparación con el grupo control no protegido y además se logra eliminar el estado de portador en los individuos infectados(AU)

Desarrollo de biomodelos para la evaluación de la inmunidad secretora contra M. tuberculosis en ratones Babl/c / Development of Biomodels for the evaluation of the secretory immunity against M tuberculosis in Balb/c mice

Poco se ha estudiado acerca del papel de los anticuerpos específicos, presentes en las secreciones del aparato respiratorio, en la defensa contra patógenos intracelulares, como es el caso de las micobacterias causantes de la tuberculosis en el hombre: Micobacterium tuberculosis, bovis y africanum. Con el objetivo de desarrollar modelos adecuados para evaluar el posible papel de la inmunidad secretoria en la defensa contra la tuberculosis, se desarrollaron dos modelos animales con la utilización de un anticuerpo monoclonal IgA dirigido contra la proteína de 16 kD de M. tuberculosis y M. bovis. En el primer modelo se inocularon ratones Balb/c, por vía subcutánea al nivel de la nuca, con diferentes cantidades de células del hibridoma TBA61, productor de la IgA específica. En un segundo modelo, se inoculó por vía intraperitoneal líquido ascítico correspondiente a este hibridoma obtenido en ratón. En ambos casos se determinó, a diferentes tiempos, la concentración del monoclonal en saliva y sólo en suero para el segundo. En los dos modelos se demostró el paso del monoclonal a la saliva, donde alcanzó la máxima concentración: a los 21 días en los animales inoculados con el hibridoma, y a las 2 horas en saliva y suero en los animales inoculados con el líquido ascítico. Se sugiere, por su sencillez y mayor inocuidad, el uso del segundo modelo para la realización de estudios de reto por vía mucosal(AU)