RESUMEN
Medicinal plants have been used for many years by communities to treat illnesses. The need for scientific proof of these vegetable's curative effects is as necessary as the proof of the inexistence of toxicity related to the use of extracts with therapeutic potential. Annona squamosa L. (Annonaceae), popularly known as "pinha", "ata" or "fruta do conde", has been used in traditional medicine for its analgesic and antitumor activities. The toxic effects attributed to this plant have also been explored as a pesticide and an insecticide. The aim of the present study was to investigate the toxicity of the methanolic extract of A. squamosa seeds and pulp against human erythrocytes. Blood samples were treated with methanolic extract at different concentrations, osmotic fragility was determined using saline tension assays and morphological analyzes were performed using optical microscopy. The extracts were analyzed using high performance liquid chromatography with diode array detection (HPLC-DAD) for phenolic quantification. The seed's methanolic extract showed toxicity above 50% from a concentration of 100 µg/mL, while also presenting echinocytes in the morphological analysis. The pulp's methanolic extract did not show toxicity to red blood cells or morphological changes at the concentrations tested. HPLC-DAD analysis revealed the presence of caffeic acid in the seed extract and gallic acid in the pulp extract. The seed's methanolic extract is toxic and the pulp's methanolic extract showed no toxicity against human erythrocytes.
RESUMEN
Introdução: o estudo com plantas medicinais tem sido usado para assistência médica e farmacêutica, mais principalmente utilizadas como forma alternativa ou complementar ao tratamento terapêutico. Objetivo: este trabalho teve como objetivo elucidar os principais metabólitos secundários e atividade antioxidante, bem como avaliar a atividade antifúngica e moduladora do extrato etanólico de folhas de Anadenanthera macrocarpa frente às linhagens do gênero Candida. Métodos: na elucidação dos constituintes químicos foi utilizado o método de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, sendo que a verificação da atividade antioxidante foi realizada por método de FRAP. A atividade antifúngica do extrato foi mensurada através da determinação da Concentração Inibitória Mínima, sendo a modulação realizada por ensaio de microdiluição, realizado para verificar as interações entre o produto natural e o antifúngico utilizando a amostra em uma concentração subinibitória. Resultados: demonstrou-se pela análise do Cromatografia Líquida de Alta Eficiência a presença de metabólitos secundários, como a: quercitrina, quercetina, isoquercitrina, apigenina, ácido gálico e ácido caféico. No ensaio FRAP, a redução ocorreu em uma equivalência de 2,72 mg de FeSO4 por g de extrato. Na avaliação da concentração inibitória mínima foram obtidos resultados ≥512 µg/mL e na avaliação dos ensaios para efeito modulador, o extrato etanólico não potencializou o efeito do antifúngico, não havendo nem sinergismo nem antagonismo. Conclusão: através dos resultados podemos concluir que o presente extrato pode ser uma alternativa terapêutica uma vez que possui constituintes químicos com reconhecidas atividades biológicas e antioxidantes com baixo potencial tóxico(AU)
Introduction: the study of medicinal plants has been used for medical and pharmaceutical services, but mainly used as an alternative or in addition to therapeutic treatment. Objective: this study aimed to elucidate the main secondary metabolites and antioxidant activity and to evaluate the antifungal and modulating activity of the ethanol extract from Anadenanthera macrocarpa leaves against genus Candida strains. Methods: the chemical component clearance was made by using high-performance liquid chromatography, and checking of the antioxidant activity was performed by FRAP method. The antifungal activity of the extract was measured by determining the minimum inhibitory concentration, the modulation performed by microdilution test, carried out to verify the interactions between the natural product and the antifungal product using the sample at a subinhibitory concentration. Results: high-performance liquid chromatography showed the presence of secondary metabolites, such as: quercitrin, quercetin, isoquercitrin, apigenin, caffeic acid and gallic acid. In the FRAP assay, the reduction was 2,72 mg per equivalence grams of FeSO4 extract. The results of the assessment of minimum inhibitory concentration were ?512 µg/mL and in the evaluation of tests for modulating effect, the extract ethanol did not potentiate the antifungal effect, with neither synergism nor antagonism. Conclusions: from the results we can conclude that this extract can be an alternative since it has chemical constituents with known biological activities and antioxidants with low toxic potential(AU)
Introducción: el estudio de las plantas medicinales se han utilizado para la asistencia médica y farmacéutica, la mayoría utiliza principalmente como una alternativa o complemento al tratamiento terapéutico. Objetivo: el objetivo del estudio para dilucidar los principales metabolitos secundarios y la actividad antioxidante, así como evaluar la actividad antifúngica modulando el extracto de etanol de Anadenanthera macrocarpa frente las cepas del género Candida. Métodos: el esclarecimiento de los componentes químicos se utilizó cromatografía líquida de alta eficiencia y la comprobación de la actividad antioxidante se realizó por el método FRAP. La actividad antifúngica del extracto se midió mediante la determinación de la concentración mínima inhibitoria, y la modulación realizó por la prueba de microdilución, llevado a cabo para comprobar las interacciones entre el producto natural y el antifúngico utilizando la muestra a una concentración subinibitória. Resultados: se demostró mediante análisis por cromatografía líquida de alta eficiencia, de la presencia de metabolitos secundarios, tales como: quercitrina, quercetina, isoquercitrina, apigenina, ácido gálico y ácido cafeico. El ensayo FRAP, la reducción fue de 2,72 mg por equivalencia g de FeSO4 extrato. Na evaluación de la concentración inhibitoria mínima se obtuvieron resultados ≥512 µg/mL y la evaluación de las pruebas para el efecto de modulación, el extracto etanol no potenció el efecto de antifúngico, ni con sinergismo o antagonismo. Conclusión: de los resultados se puede concluir que el extracto puede ser una terapia alternativa, ya que tiene componentes químicos con actividades biológicas reconocidas y antioxidantes con bajo potencial tóxico(AU)
