Aislamiento microbiológico en trabajadores de salud posterior a la higiene de manos

Introducción: La higiene de manos es un paso fundamental para prevenir la transmisión y diseminación de infecciones asociadas a la atención en salud (IAAS), por esto, es de vital importancia su correcta ejecución según los 5 momentos sugeridos por la Organización Mundial de la Salud (OMS). Objetivo: Aislar bacterias y hongos posterior a la higiene de las manos en el personal de salud. Métodos: Estudio descriptivo, experimental, transversal, con una muestra de 16 individuos que laboraban en el Servicio de Enfermedades Infecciosas del Adulto del Hospital Universitario de Caracas, divididos en dos grupos de 8 participantes, quienes realizaron la higiene de manos de acuerdo a las técnicas descritas por la Organización Mundial de la Salud con agua y jabón (grupo A) y con gel antibacterial a base de alcohol al 70 % (grupo B). Consecutivamente, se tomó muestra de las manos mediante aposición en placas de Petri, en Agar Endo (HiMedia™) y Agar Sabouraud (Oxoid™). Los crecimientos positivos fueron repicados a otros agares y se realizaron pruebas bioquímicas para su identificación. Resultados: En 56,25 % (9/16) de las muestras hubo crecimiento de levaduras, a partir de las cuales se identificaron C. parapsilosis (77,7 %), C. tropicalis (11,3 %) y C. kefyr (11,3 %). Por su parte, 50 % (8/16) tuvieron crecimiento positivo para bacilos Gram negativos fermentadores y no fermentadores. Conclusiones: En las manos de los trabajadores de salud se aislaron bacilos Gram negativos fermentadores y no fermentadores, así como especies de Candida. Se observó una mayor eficacia antimicrobiana con el uso de agua y jabón líquido con respecto a la eliminación de Candida spp.

Introduction: Hand washing is a key tool to prevent transmission and dissemination of hospital associated infections; thus it is a very important to elaborate the proper technique to achieve hand antisepsis, throughout several methods including the 5 times to hand washing proposed by World Health Organization (WHO). Aim: To isolate bacteria and fungi after handwashing in a group of healthcare personnel. Methods: This was an experimental, descriptive and cross-sectional study carried out with 16 healthcare personnel from the Adult Infectious Disease Department at the Hospital Universitario de Caracas, divided in 2 groups (A and B) of 8 participants who was asked and instructed to performed the handwashing technique stablished by the WHO. Group A used conventional soap and water, while group B used 70 % alcohol-based hand sanitizer. After hand sanitization with any of both substances, sample collection was performed throughout hand apposition in Petri dishes with Endo agar (HiMedia™) and Sabouraud dextrose agar with chloramphenicol (Oxoid™) and incubated during 36h in an aerobic 37 °C atmosphere. Positive growth in each case was replied and biochemical tests were performed to each isolation to confirm its identification. Results: 56.25 % (9/16) of the growth was represented by Candida sp: C. parapsilosis (77.7 %), C. tropicalis (11.33 %) and C. kefyr (11.3 %). About bacteria, 50 % (8/16) of the samples collected had growth for gram negative fermenting and nonfermenting bacilli. Conclusions: There were presence of gram-negative bacilli and fungi after handwashing in the hands of the healthcare personnel studied. It was observed that water and soap had a better antimicrobial outcome in comparison with alcohol-based sanitizer to eliminate Candida sp.

Granulomatous mastitis due to coinfection with Histoplasma sp. and Paracoccidioides sp.: A case report.

A 51 years old female patient with granulomatous mastitis diagnosis, was referred to the Medical Mycology Department "Dr. Dante Borelli" at the Instituto de Medicina Tropical, Universidad Central de Venezuela (IMT-UCV). Mycological diagnosis demonstrated the presence of intracellular yeast structures suggesting Histoplasma sp. and also multi-budding structures compatible with Paracoccidioides sp. To the best of our knowledge, this is the first case report of a granulomatous mastitits due to coinfection of both fungi. 2012 Elsevier Ltd. All rights reserved.

Nasal Septum Perforation Associated to Histoplasmosis: A Retrospective Study

Abstract Objective: To determine the prevalence of nasal septum perforation associated to Histoplasma sp. Material and Methods: A retrospective descriptive study was conducted with patients who developed nasal septum perforation associated to histoplasmosis. The diagnosis was made based on clinical manifestations and confirmed with mycological direct examination with Giemsa stain, culture, serologic tests (immunodiffusion method), and histopathology with hematoxylin-eosin, Grocott methenamine (GMS) and Periodic Acid-Schiff stain (PAS). Results: Out of 1654 medical records reviewed with diagnosis of histoplasmosis in the study period, we found 22 cases with nasal septum perforation. Autoimmune disease was present in 6 patients; all six were on immunosuppressive treatment. Two patients had HIV/AIDS, one of them had also paracoccidiodomycoses and the remaining had no apparent underlying disease or conditions. Conclusion: Physicians of endemic areas such as Venezuela, must consider this entity in the differential diagnosis with other diseases.

Oral Manifestations Associated to Paracoccidioidomicosis and Histoplasmosis

Objective: To determine the frequency and clinical forms of oral manifestations associated to Paracoccidioidomycosis (PCM) and Histoplasmosis. Material and Methods: 481 medical records of outpatients referred to the Medical Mycology Department were reviewed since 2009 to 2016. Data were analyzed using descriptive statistical methods. Results: 47 (9.77%) cases had oral manifestations, 29 (61.70%) were associated to PCM and 18 (38.29%) to histoplasmosis. For PCM, male-female ratio was 8:1 and 1:1 for histoplasmosis. The average age for PCM was 48 years old and 53 for histoplasmosis. All the PCM patients had more than 1 oral structure affected: 44.82% were gingival lesions and 27.58% palate. In patients with histoplasmosis, 6 (33.33%) were lesions affecting palate and 6 (33.33%) involving tongue. For both entities, painful ulcers and granulomatous-like lesions were the most prevalent clinical forms; however, we observed a wide range of other oral manifestations. Regarding PCM patient's comorbidities, 3 (10.34%) cases had HIV/AIDS, 8 (27.58%) histoplasmosis and 2 (6.89%) carcinomas. Whereas the comorbidities of patients with histoplasmosis, 2 (11.11%) had HIV/AIDS and 1 (5.55%) had carcinoma. Conclusion: In endemic countries for both mycoses, dentists must be aware of patients with mouth lesions, take advantage of epidemiologic clues that suggest risk factors and be acquainted with all the current diagnostic tests in order to make a quick diagnosis and treatment in highly suspicious cases.

Isolation of Fungi and Gram Negative Bacteria from Toothbrushes and Bathroom Bioaerosols

Objective: To identify, using phenotypic methods, FGNB, NFGNB and Candida sp. in toothbrushes, and environmental samples of bathroom air in a group of students from the Dentistry School of the Universidad Central de Venezuela. Material and Methods: Thirty-four toothbrushes were supplied to the cohort during a 60-day period; environmental samples were collected in the rooms where toothbrushes were kept during this period. All samples were processed by traditional methods of microbiological counting isolation and phenotypic identification using selective and differential agar based on the international guidelines of the United States Pharmacopeia (USP) 38. Results: 82.36% of the toothbrush samples were positive to bacteria and fungi and 91.17% of the environmental samples were positive to enterobacteria. Conclusion: It is necessary to establish antiseptic protocols for the management, storage and disinfection of toothbrushes. The high rate of contamination may represent an opportunity for enterobacteria colonization of oral biofilms, reservoir to infection foci and metastatic infections in certain populations.

Presentaciones atípicas de histoplasmosis: anemia hemolítica. Descripción de un caso y revisión de la literatura / Atypical presentations of histoplasmosis: hemolytic anemia. Case report and literature review

La histoplasmosis es una enfermedad granulomatosa, producida por Histoplasma capsulatum. Causa un amplio espectro de manifestaciones clínicas, la más frecuente es la pulmonar. En algunos casos se presentan formas diseminadas, con afectación de uno o múltiples órganos, con características atípicas, difíciles de reconocer. Reporte del caso: Se presenta el caso de un paciente masculino de 70 años de edad, procedente de Barinas, quien trabajó en una granja de gallinas, con diagnóstico de histoplasmosis y anemia hemolítica, las cuales se resolvieron con tratamiento antifúngico. Conclusiones: En Venezuela, zona endémica para esta micosis, el médico está obligado a tener un alto índice de sospecha acerca de la misma, teniendo en cuenta factores como la edad y la epidemiología. A la luz de nuestros conocimientos, es el tercer caso reportado.

Histoplasmosis is a granulomatous disease, produced by Histoplasma capsulatum. This fungus causes a wide range of clinical manifestations; the most common is the pulmonary form. In some cases, atypical presentations are described. Case report: a 70 year old male patient, from Barinas, Venezuela, who worked in a chicken farm, with diagnosis of histoplasmosis and hemolytic anemia is described. The patient improved with antifungal treatment. Conclusions: in Venezuela, an endemic area for this mycosis, clinicians must have a high suspicion index for this disease, taking into account risk factors, such as age and epidemiology. To our knowledge, this is the third case report in the literature.

Presentaciones atípicas de histoplasmosis / Atypical presentations of histoplasmosis

La histoplasmosis es una enfermedad granulomatosa, producida por Histoplasma capsulatum. Causa un amplio espectro de manifestaciones clínicas, la más frecuente es la pulmonar. En algunos casos se presentan formas diseminadas con afectación de uno o múltiples órganos, de características atípicas difíciles de reconocer. La patogenia de esta enfermedad es igual a la de tuberculosis y se ha descrito coinfección. Se reportan tres casos de histoplasmosis de presentación infrecuente: ancianos, coinfección con micobacterias, localizaciones atípicas y revisión de la literatura. El primer caso fue el de un paciente de 19 años de edad con absceso cerebral. El segundo y tercer caso correspondieron a personas mayores de 60 años, con coinfección por Histoplasma capsulatum y Mycobacterium sp, de presentación articular y enfermedad ginecológica, respectivamente. En Venezuela, zona endémica para esta micosis, el médico está obligado a tener un alto índice de sospecha acerca de la misma, teniendo en cuenta factores como la edad y la epidemiología. (Acta Med Colomb 2015; 40: 254-259).

Histoplasmosis is a granulomatous disease caused by Histoplasma capsulatum. It causes a wide spectrum of clinical manifestations, being the pulmonary the most common one. In some cases disseminated forms with involvement of one or multiple organs are manifested with atypical characteristics difficult to recognize. The pathogenesis of this disease is equal to that of TB and co-infection has been described. Three cases of infrequent presentation of histoplasmosis: elderly, co-infection with mycobacteria, atypical presentations and review of the literature are presented. The first case involved a 19-year-old with cerebral abscess. The second and third cases were for people over 60, co-infected with Histoplasma capsulatum and Mycobacterium sp, with joint involvement and gynecological disease, respectively. In Venezuela, endemic area for histoplasmosis, the doctor is required to have a high index of suspicion about this entity, taking into account factors such as age and epidemiology. (Acta Med Colomb 2015; 40: 254-259).

Epidemiology of sporotrichosis in Venezuela.

BACKGROUND: Sporotrichosis is one of the most common subcutaneous mycoses in Venezuela. It is a granulomatous chronic infection with cutaneous or subcutaneous tissue lesions. Regional lymphatic involvement may be present; extracutaneous disease is rare. The causal fungus Sporothrix schenckii has been isolated from soil, vegetation, and animals on numerous occasions and in many localities throughout the world. The aim of this study is to describe clinical and epidemiological features of cases of sporotrichosis observed in Venezuela and review of the literature. PATIENTS AND METHODS: We included the demographic data, clinical features, diagnostic methods, treatment, and follow-up of patients with sporotrichosis from 1963 to 2009, diagnosed at the Department of Medical Mycology. RESULTS: One-hundred and thirty-three sporotrichosis cases were diagnosed. Most patients were under the age of 30 years (66.15%). In 61.6% of them, the mode of transmission was not identified. The predominant clinical form in this population was lymphocutaneous (63.15%). Direct microscopic diagnosis was performed in 123 cases, and 57.9% yielded positive results for asteroid body. CONCLUSIONS: Sporotrichosis is an endemic subcutaneous mycosis in Venezuela. There are no reports to this date of disseminated forms of the disease, even amongst patients with acquired immunodeficiency syndrome. Direct microscopic examination of wet mount slides with saline solution or distilled water in the search for asteroid bodies is paramount. Saturated sodium and potassium iodine solutions continue to be extremely efficacious and affordable to most of our patients, therefore our treatment of choice.

Paracoccidioidomicosis: clínica, epidemiología y tratamiento / Paracoccidioidomicosis: clinical considerations, epidemiology and treatment

Objetivo: caracterizar desde el punto de vista clínico, epidemiológico y de tratamiento, los pacientes con diagnóstico de paracoccidioidomicosis evaluados en la Consulta Externa de la Sección de Micología Médica del IMT-UCV y procedentes de otros hospitales del área de la Gran Caracas, cuyas muestras fueron procesadas en dicha Sección, entre los años 2001-2011. Métodos: estudio descriptivo de registros, donde se tomaron en cuenta las historias de los pacientes con diagnóstico de paracoccidioidomicosis. Resultados: la relación hombre:mujer obtenida fue de 6,5:1, sólo el 29,16% de los pacientes tenían ocupaciones agrícolas. Los síntomas más frecuentes fueron tos (50%) y pérdida de peso (45,06%) y los signos más comunes fueron lesiones en orofaringe (53,6%) y adenopatías (27,2%). 7,65% cursaron concomitantemente con infección por VIH/SIDA, 5,61% con tuberculosis y 6,63% con histoplasmosis. En cuanto al diagnóstico, el examen directo fue positivo en 87,5% de los casos, el cultivo en el 62,90% y la serología en el 88,46%. La mortalidad general fue de 4,11%. Discusión: La paracoccidioidomicosis es una enfermedad que puede ocurrir en pacientes inmunocompetentes e inmunocomprometidos; tiende a observarse ahora con mayor frecuencia en los pacientes con SIDA. El número de casos entre los pacientes del sexo femenino ha aumentado. La investigación acerca del lugar de origen, de la procedencia y la ocupación del paciente es importante a la hora de plantearse el diagnóstico. Esto debe ser tomado en consideración en un país endémico como el nuestro. Su diagnóstico es relativamente fácil en manos de personal entrenado.

Objective: to characterize from the clinical, epidemiological and treatment viewpoints, patients diagnosed with paracoccidioidomycosis and evaluated in the outpatient clinic of the Medical Mycology Section, at the IMT-UCV and from other hospitals in the greater Caracas area, whose samples were processed in this section between 2001-2011. Methods: descriptive study of records, taking into account the histories of patients diagnosed with paracoccidioidomicosis. Results: the male:female ratio obtained was 6.5:1; only 29.16% of the patients had agricultural occupations. The most common symptoms were cough (50%) and weight loss (45.06%), and the most common signs were oropharyngeal lesions (53.6%) and adenopathy (27.2%). Concomitantly, 7.65% had HIV/AIDS infection, 5.61% tuberculosis and 6.63% histoplasmosis. In terms of diagnosis, the direct exam was positive in 87.5% of cases, the culture in 62.90% and serology in 88.46%. Overall mortality was 4.11%. Discussion: paracoccidioidomycosis is a disease that can occur in immunocompetent and immunocompromised patients; currently, it tends to appear more frequently in patients with AIDS. The number of cases among female patients has increased. Research about the place of birth, the origin and the occupation of the patient is important when considering the diagnosis; this should be taken into consideration in an endemic country like Venezuela. Its diagnosis is relatively easy in the hands of trained personnel.

Estudio de casos de paracoccidioidomicosis infantil diagnosticados en el área de la Gran Caracas Venezuela / Study paracoccidioidomycosis diagnosed cases of childhood in the area of Greater Caracas Venezuela

La paracoccidioidomicosis pocas veces afecta niños y no es de denuncia obligatoria. Su verdadero impacto en la población infantil es desconocido. El objetivo fue determinar en número de casos de paracoccidioidomicosis infantil diagnosticados en centros de salud de la Gran Caracas, en niños con edades entre 0-15 años. Se evaluaron historias de niños con paracoccidioidomicosis, provenientes de hospitales de la Gran Caracas. Se revisaron 420 historias con diagnóstico de paracoccidioidomicosis, de las cuales 33 (7,9%) fueron niños menores de 15 años, siendo la media de edad 7,97 años. El género masculino predominó (69,7%), la razón masculino-femenino fue 1,5:1 en niños con edades de 0-7 años y 5,5:1 entre 8-15 años. La mayoría procedían del estado Miranda, 11 (35,5%) seguido del Distrito Capital 9 (29,1%). En 26 casos se clasificó la enfermedad, encontrando que 24 (92,3%) desarrollaron la forma aguda. Las principales manifestaciones clínicas precisadas en 25 historias fueron: fiebre 18 (72%) adenomegalias 16 (64%), hepatomegalia 12 (48,0%) y esplenomegalia 11 (44%). De 24 casos que tenían datos de laboratorio se observó que la eosinofilia y la anemia fueron los principales hallazgos. El diagnóstico micológico se realizó por serología en 24 (72,7%) casos, biopsia 11 (45,8%), examen directo 3 (12,5%) y cultivo 1 (4,2%). La paracoccidioidomicosis infantil es una entidad infrecuente, la cual se observa en 7,9% de los casos. Las manifestaciones más frecuentes son fiebre, adenomegalias y hepatoesplenomegalia. El diagnóstico de la paracoccidioidomicosis aguda infantil, siempre debe ser considerado en niños con edades de 0-15 años, en Venezuela.

Paracoccidioidomycosis rarely affects children, and it is not a notifiable disease. Its real impact in the child population is unknown. The aim of the study was to determine the number of paracoccidioidomycosis cases diagnosed in various health centers in Great Caracas, in children between 0-15 years. We reviewed 420 records with diagnosis of paracoccidioidomycosis from Hospital of Caracas. 33 (7,9%) were from children less than 15 years old. Age average 7,97 years. Male gender accounted for 69.7%, with a male: female relation of 1.5:1 in children between 0-7 years and 5,5:1 between 8-15 years. Most of the patients 11 (35,5%) came from Miranda state, followed bu Distrito Capital 9 (29,1%). In 26 patients the disease could be classified, from which 24 (92,3%) developed the acute form. Clinical manifestations, recorded in 25 cases were: fever 18 (72%), enlarged lymph nodes 16 (64%), hepatomegaly 12 (48,0%) and splenomegaly 11 (44%). From 24 cases in which laboratory data was recorded, eosinophilia and anemia were the most relevent findings. Mycological diagnosis was performed by serology in 24 (72,7%) cases, biopsy 11 (45,8%), direct examination 3 (12,5%) and culture 1 (4,2%). Child paracoccidioidomycosis is a rare disease, observed in 7, )% of cases. Most relevant clinical manifestations are fever, enlarged lymph nodes and hepatosplenomegaly. Acute paracoccidioidomycosis must be considered as a possible diagnosis in children between 0-15 years, in endemic countries such as Venezuela.

Estudio clínico-epidemiológico de la criptococosis en Venezuela: años 1994-2003 / Clinical-epidemological study of cryptococcosis in Venezuela: 1994-2003

La criptococosis es una enfermedad oportunista de distribución mundial. Frecuentemente es una infección definitoria de SIDA. El tratamiento antirretroviral ha disminuido su frecuencia. El impacto de esta entidad en Venezuela es desconocido. El objetivo de este trabajo es describir las características más relevantes de la criptococosis en nuestro país. Se revisaron 110 historias clínicas de pacientes hospitalizados con el diagnostico de criptococosis, entre 1994 y 2003, en 6 hospitales. Los datos recolectados incluyeron: características demográficas, clínicas, diagnósticas, terapéuticas y la evolución de los pacientes. Para el análisis se utilizaron los programas SPSS 10.0 y EpiInfo 6.04 (2001). Dentro de los 110 pacientes evaluados se incluyeron 17 protocolos de autopsia. Uno solo de los pacientes tenia 8 años de edad, el resto era mayor de 15 años. 91 eran del sexo masculino y 19 femenino. 91 (82,73 por ciento) tenían SIDA y 19 (17,27 por ciento) eran VIH negativo. En los pacientes con SIDA el valor promedio de CD4+ fue < 200 cel/mm³ y la carga viral era > 30000 copias/mL; 52 (57,14 por ciento) de los casos no tenían otra infección oportunista y 39 (42,86 por ciento) tenían otras condiciones asociadas, tales como tuberculosis (30,97 por ciento), neumocistosis (28,21 por ciento), y toxoplasmosis (20,51 por ciento). En los pacientes VIH negativo, el uso de esteroides (25 por ciento) fue el factor de riesgo predominante. Dos pacientes eran embarazadas. En 107 (57,27 por ciento) se encontró infección del SNC. 12 (13,19 por ciento) de los pacientes con SIDA tenían alteración de pares craneales. Se encontró afectación pulmonar en 4 (3,77 por ciento) pacientes, 1 de ellos con SIDA. La criptococosis fue la enfermedad definitoria de SIDA en el 61,54 por ciento de los casos. 33 (30 por ciento) de los pacientes fallecieron. En la mayoría de los pacientes la criptococosis se asoció a SIDA. A pesar de la eficacia del tratamiento antirretrovial, esta micosis es todavia ...

Cryptococcosis is an opportunistic disease of worldwide distribution. It is frequently an AIDS-defining infection. Antiretroviral treatment has reduced its occurrence. In Venezuela, the impact of this disease is unknown. The aim of this study is to describe the most relevant features of cryptococcosis in our country. 110 clinical records with a diagnosis of cryptococcosis hospitalized between 1994 and 2003 in 6 Venezuelan hospitals were analyzed. Data collected included demographic, clinical, diagnostic, therapeutic and outcome information. SPSS 10.0 software and EpiInfo 6, version 6.04 (2001) were used. 110 patients with cryptococcosis were enrolled, including 17 autopsy protocols. One was 8 years old, the rest were over 15. Nineteen were female and 91 male; 91 (82.73 percent) had AIDS, 19 (17.27 percent) were HIV negative. Among the AIDS patients, average CD4+ count was < 200 cel/mm3 and viral load was > 30000 copies/ml; 52 (57.14 percent) did not have other opportunistic infections or AIDS-related disease, and 39 (42.86 percent) had other associated conditions, such as tuberculosis (30.97 percent), PCP (28.21 percent) and toxoplasmosis (20.51 percent). In HIV negative patients, use of steroids (25 percent) was the predominant risk factor. Two patients were pregnant. 107 (57.27 percent) presented CNS infection; 12 (13.19 percent) with AIDS had cranial nerve alterations. Pulmonary disease was found in 4 (3.77 percent), of which one had AIDS. Cryptococcosis was an AIDS-defining infection in 61.54 percent of cases; 33 (30 percent) of the patients died. In most of the patients, cryptococcosis was associated with AIDS. In spite of the efficacy of antiretroviral treatment, this mycosis is still significant in Venezuela, perhaps due to late HIV infection diagnosis

Humoral response of paracoccidioidomycosis sera in hamsters with different Venezuelan isolates.

Humoral response of paracoccidioidomycosis sera in hamsters with different Venezuelan isolates. Paracoccidioidomycosis (PCM) is a progressive systemic mycosis caused by the fungus Paraccocidioides brasiliensis (Pb), endemic to Venezuela and Latin America. In this study, eight different Venezuelan isolates obtained from patients with PCM, were inoculated intraperitoneally in Syrian hamsters (Cricetus auratus) and studied by immune-serum. Each strain was collected by gently scraping the surface of the culture medium (Sabouraud Dextrose Agar) and suspended in 3 ml of 0.15 M phosphate-buffered saline. The antigen obtained was called Paraccocidioides brasiliensis Crude Antigen (CAP). Immunoblotting results showed that the immune-sera from hamsters recognized at least 3 bands: one over 200 kDa, and two of 80 and 15-20 kDa. This study suggests that IgG anti-CAP can reveal a significant variability in the eight Venezuelan isolates. Sera from 88 infected hamsters were evaluated by ELISA with eight different CAPs and Western blot with CAP 37383. ELISA results showed that, the antigen of the virulent isolate 37383 had the highest percentage (38%) of positivity, while the nonvirulent isolate 1458 had the lowest one (13.6%). Furthermore, scanning densitometry revealed that the isolate 37383 had less bands than the non-virulent isolates. These results suggest that the ELISA test with CAP 37383 can detect circulating antibodies, and that this virulent isolate may be useful for the diagnosis of PCM, and to monitor disease responses to treatments.

Humoral response of paracoccidioidomycosis sera in hamsters with different Venezuelan isolates

Humoral response of paracoccidioidomycosis sera in hamsters with different Venezuelan isolates. Paracoccidioidomycosis (PCM) is a progressive systemic mycosis caused by the fungus Paraccocidioides brasiliensis (Pb), endemic to Venezuela and Latin America. In this study, eight different Venezuelan isolates obtained from patients with PCM, were inoculated intraperitoneally in Syrian hamsters (Cricetus auratus) and studied by immune-serum. Each strain was collected by gently scraping the surface of the culture medium (Sabouraud Dextrose Agar) and suspended in 3ml of 0.15 M phosphate-buffered saline. The antigen obtained was called Paraccocidioides brasiliensis Crude Antigen (CAP). Immunoblotting results showed that the immune-sera from hamsters recognized at least 3 bands: one over 200 kDa, and two of 80 and 15-20 kDa. This study suggests that IgG anti-CAP can reveal a significant variability in the eight Venezuelan isolates. Sera from 88 infected hamsters were evaluated by ELISA with eight different CAPs and Western blot with CAP 37383. ELISA results showed that, the antigen of the virulent isolate 37383 had the highest percentage (38%) of positivity, while the non-virulent isolate 1458 had the lowest one (13.6%). Furthermore, scanning densitometry revealed that the isolate 37383 had less bands than the non-virulent isolates. These results suggest that the ELISA test with CAP 37383 can detect circulating antibodies, and that this virulent isolate may be useful for the diagnosis of PCM, and to monitor disease responses to treatments. Rev. Biol. Trop. 57 (3): 505-513. Epub 2009 September 30.

La Paracoccidioidomicosis (PCM), es una micosis sistémica causada por el hongo Paraccocidioides brasiliensis (Pb), endémica en Venezuela y Latino América. En este estudio ocho diferentes aislados venezolanos, obtenidos de pacientes con PCM, fueron inoculados intraperitonealmente en hámsteres y fueron estudiados por ELISA e inmunoblotting. Los antígenos obtenidos de P. brasiliensis fueron llamados, Antígeno Crudo (CAP). Los resultados del immunoblotting mostraron que los sueros inmunes de hámsteres reconocieron al menos tres bandas: una sobre 200, y otras de 80, y 15-20 kDa. Este estudio sugiere que la IgG anti-CAP muestra una variabilidad en los ocho aislados Venezolanos. Sueros de 88 hámsteres infectados fueron evaluados usando ELISA, el antígeno del aislado virulento 37383 mostró el más alto porcentaje de positividad (38%) en los sueros de los hámsteres estudiados. El aislado novirulento 1458 mostró un porcentaje bajo de positividad (13.6%). Además, un escaneo densitométrico reveló que el aislado 37383 tiene menos bandas que el otro aislado no-virulento. Por lo tanto, estos resultados sugieren que el ensayo de ELISA con CAP 37383 puede detectar anticuerpos circulantes y este aislado virulento puede ser útil para el diagnostico de PCM, y para el monitoreo de la respuesta al tratamiento de la enfermedad.

Histoplasmosis: a study of 158 cases in Venezuela, 2000-2005.

Histoplasmosis, a granulomatous disease caused by Histoplasma capsulatum, is endemic in Venezuela. We conducted the current study to appraise retrospectively the demographic data, clinical features, diagnostic methods, and treatment of patients with histoplasmosis from January 2000 to December 2005. We reviewed the medical records of outpatient cases with a diagnosis of histoplasmosis and considered clinical samples processed at our laboratory. We collected demographic, epidemiologic, and clinical data from each case as available, including results of any mycologic examinations performed. Treatment and outcome data were available for some patients. We assessed 158 cases of histoplasmosis: 103 (65.2%) patients came from the Caracas metropolitan area; 53 were associated with acquired immunodeficiency syndrome (AIDS), 14 with tuberculosis, and 8 with paracoccidioidomycosis. Six pediatric patients were malnourished. Epidemiologic data suggested histoplasmosis in most cases. Patients received treatment with itraconazole and/or amphotericin B. Our results may reflect changes in the epidemiology occurring in Venezuela, perhaps due to environmental changes and the presence of AIDS. Several mycologic exams are necessary to ensure a proper diagnosis. More reliable data and statistics on this infection are necessary to monitor outbreaks closely and to establish if there is an epidemic pattern.

Determinación de un medio de cultivo apropiado para acelerar el crecimiento de paracoccidioides brasiliensis / Determination of an appropriate culture medium to accelerate the growth of paracoccidioides brasiliensis

A pesar de los avances de la tecnología en los últimos años, en una infección micótica la "prueba de oro" para realizar el diagnóstico definitivo, es el aislamiento del agente causal mediante la práctica del cultivo de una muestra clínica; por lo que a través de los años han sido elaborados numerosos medios de cultivo, en los cuales se han utilizado desde sustancias naturales, hasta otras artificiales de composición más compleja. El problema más importante al cual se enfrentan los laboratorios de micología médica, es que los hongos productores de micosis profundas en Venezuela, tienen la propiedad de ser de lento y difícil crecimiento, inclusive hasta 8 semanas son necesarias para poder visualizar estructuras características del agente investigado. Es por ello que es importante desarrollar un medio de cultivo que aumente la sensibilidad de recuperación de hongos dimorfos, como el P. brasiliensis, a partir de muestras clínicas y provenientes de la micoteca; y que a su vez pueda ser utilizado para la obtención de la fase de levadura en forma eficaz. Se procesaron dos muestras clínicas y dos cepas provenientes de la Micoteca de la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical, los cuales fueron sembrados en: Sabouraud, agar cerebro corazón (brain heat), agar Kelley y agar Kelley Modificado a temperatura ambiente para obtener la fase micelial y a 37° C para incluir la transformación térmica y así recuperar la fase de levadura. En relación al crecimiento a temperatura ambiente, de las muestras clínicas se observó el crecimiento de una colonia característica de P. brasiliensis entre el séptimo día y la sexta semana en el siguiente orden: agar Kelley, agar Kelley modificado, agar brain heart y Sabouraud. En el caso de dos cepas provenientes de la micoteca a su desarrollo fue casi similar en Agar Kelley y Brain heart. Para la transformación a fase de levadura ésta se obtuvo antes de los 7 días con el agar Kelley Modificado y el agar Kelley.

El embarazo como única condición subyacente de una criptococosis: a propósito de 2 casos / The pregnancy like only underlying condition of a criptococosis: a purpose of 2 cases

Rara vez el embarazo ha sido asociado con criptococosis. Se presentan 2 pacientes VIH seronegativas, hospitalizadas en el Hospital Universitario de Caracas por presentar criptococosis meníngea, en las cuales la única condición subyacente fue el embarazo. Se hace una revisión de la literatura.

Susceptibilidad antifúngica en dermatofitos / Antifungal susceptibility of dermatophytes

No existe hasta los momentos una prueba estandarizada para realizar la susceptibilidad antifúngica de los dermatofitos. El objetivo de este estudio fue implementar la técnica de los pozos de difusión para el estudio de la susceptibilidad de los dermatofitos. Se utilizaron un total de 100 aislados de dermatofitos (74 Trichophyton rubrum, 18 Trichophyton mentagrophytes, 1 Trichophyton tonsurans, 5 Microsporum canis y 2 Epidermophyton floccosum) provenientes de muestras clínicas aisladas e identificadas en la Sección de Micología Médica, IMT. Se empleó la técnica de los pozos de difusión con los siguientes antimicóticos: Griseofulvina, Terbinafina, Fluconazol e Itraconazol. Se aplicaron los criterios de interpretación acordados por la NCCLS. El inóculo, se estandarizó utilizando el peso como unidad. El medio Agar Staib demostró ser el más adecuado, al obtenerse un mejor crecimiento de los aislados en un 97%. Esta es la primera vez, que se utiliza el peso como medida para cuantificar el inóculo en los dermatofitos. La mayor sensibilidad se evidenció ante Terbinafina seguido de Griseofulvina e Itraconazol. No se demostró sensibilidad alguna ante el Fluconazol. Sin embargo se requieren más estudios en los cuales se relacione la susceptibilidad "in vitro" con los resultados "in vivo".

Respiratory allergies in Venezuela: are fungi responsible?

Exposure to fungi in the indoor environment may trigger hypersensitivity to a variety of fungi and is known to be an influencing factor in allergic rhinitis and asthma. A wide list of airborne fungal spores and dust containing fungi have been described for different environments; however, their clinical relevance is seldom clear. In this survey we measure levels of fungi indoor and outdoor of domestic dwellings of 10 patients with known chronic allergic respiratory disease to fungi. To measure hypersensitivity to fungi, Prick (sensitivity to fungi), RAST (specific serum IgE levels) and PAR (persistent allergic rhinitis) severity are assessed in relation to fungal load in the environment. Only association of PAR and indoor fungal load were found to be significant (P = 0.1648). No direct causality with sensitivity to the amount of exposure, or a hypersensitivity to a specific fungal genus could be established. There is still no consensus on the most relevant methods for measuring personal exposure and 'no safe levels' have been established yet.

Estudio de 40 casos de Histoplasmosis en niños y revisión de la literatura / Study of 40 cases of histoplasmosis in children and literature review

En niños, la histoplasmosis es la micosis profunda más frecuente en nuestro país. No es de denuncia obligatoria, por lo que existe un gran subregistro. El objetivo de este trabajo es reportar los casos de histoplasmosis diagnosticados en niños en la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical (IMT). Universidad Central de Venezuela (UCV), entre julio 2004 y julio 2005, con la finalidad de dar a conocer los principales aspectos de esta entidad a la población médica, en especial a los pediatras. Se evaluaron los pacientes en edad pediátrica (0-18 años) que fueron traídos a la consulta de la Sección y las muestras biológicas que se recibieron en el lapso antes mencionado. Se realizó examen mitológico y se siguió la evolución con el tratamiento. Se encontraron 40 casos de histoplasmosis con edades comprendidas entre 14 días y 16 años, 15 del genero femenino y 25 del genero masculino. Seis eran menores de 1 año, la mayoría (25 casos) provenientes del Distrito capital. Dieciocho presentaron la forma de histoplasmosis diseminada de los cuales 4 fallecieron. Quince presentaron la forma pulmonar aguda y 5 meningitis crónica. Seis pacientes estaban desnutridos, 4 presentaron VIH y 4 tenían tuberculosis. En 18 pacientes se desconoce comorbilidad. Nueve pacientes tenían aumento de la VSG, 7 anemia, 5 leucopenia y 2 pancitopenia. Los datos epidemiológicos fueron sugestivos de histoplasmosis en todos los casos. Se reportaron 40 casos de histoplasmosis en niños, diagnósticados en la Sección de Micología Médica del IMT-UCV. La forma clínica más frecuente fue la histoplasmosis diseminada. Ante la presencia de niños con las características descritas, debe pensarse en histoplasmosis como diagnóstico diferencial, relacionando la epidemiología, clínica, radiología y exámenes de laboratorio. Es necesario practicar mitológico para confirmar la presencia de esta enfermedad.