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1.
Int J Dev Biol ; 63(1-2): 57-65, 2019.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-30919916

RESUMEN

The transplantation of primordial germ cells (PGCs) is a valuable tool for gene-banking and reconstitution by means of a germline chimera. For this technology, studies regarding developmental stages and traceability of PGCs are necessary. The objective of this study was to develop a micromanipulation procedure for the future establishment of cryobanks of PGCs in migratory characins. Incubation temperatures were evaluated at 22 ° C, 26 ° C, and 30 ° C in order to synchronize developmental stages. The highest hatching rates and the lowest abnormality rate arose at 26° C, which was considered to be the best incubation temperature. Enzymatic removal of the chorion was determined to be best using 0.05% pronase, in which the embryos presented better survival rates. In order to visualize PGCs in vivo, artificial GFP-nos1 3'UTR mRNA was injected and the migration route was observed in vivo as PGCs were visualized firstly at the segmentation stage (6 to 13 somites). The number of GFP positive cells ranged from 8 to 20 per embryo (mean of 13.8; n = 5). After hatching, GFP-positive cells increased to 14 to 27 embryos (mean of 19.8; n = 5). Visualization of the GFP-positive cells was possible at 10 days post hatching, and at this stage, the cells were positioned in the yolk extension region. This is the first report on PGC visualization in vivo in Neotropical fish; the obtained data provide information on the identification and migration of PGCs. The information presented in this work brings new insights in gene banking in Neotropical species and subsequent reconstitution through a germinal germline chimera.


Asunto(s)
Movimiento Celular , Characiformes/embriología , Corion , Embrión no Mamífero/citología , Desarrollo Embrionario , Células Germinativas/citología , Micromanipulación , Animales , Embrión no Mamífero/fisiología , Células Germinativas/fisiología
2.
Orinoquia ; 21(1): 34-40, ene.-jun. 2017. tab
Artículo en Español | LILACS-Express | LILACS | ID: biblio-1091517

RESUMEN

Resumen El yaque Leiarius marmoratus, es una especie de siluriforme nativo con gran potencial para la diversificación de la acuicultura colombiana; sin embargo, la espermiación en cautiverio aún presenta dificultades debido al bajo volumen seminal liberado con los protocolos de inducción tradicionales. En consecuencia, el objetivo fue evaluar los efectos de cinco protocolos de inducción hormonal, basados en Extracto de Hipófisis de Carpa (EHC), sGnRHa + domperidona (OVAPRIM®) y Gonadotropina Coriónica Humana (GHC) (FERTIVET®), sobre la calidad y volumen seminal de la especie. Fueron seleccionados 18 machos sexualmente maduros de 54,4 ± 2,2 cm de longitud total y 1,6 ± 0,1 kg peso corporal. Se evaluaron 5 tratamientos, así: T1: 0,25 ml/kg (0 h) y 1 ml/kg de OVAPRIM® (12 h); T2: 1 mg/kg de EHC (0 h) y 3 mg/kg de EHC (12 h); T3: dosis única de 200 UI/kg de GCH; T4: 3 mg/kg de EHC (0 h) y 200 UI/Kg de GHC (8h); T5: 1 ml/kg de OVAPRIM® (0h) y 200 UI/kg de GHC (8h); Control: 1 ml de suero fisiológico. El semen se colecto 6 h después de aplicada la última dosis hormonal. El T1 y T5 mostraron un volumen mayor (p<0,05) (5,4 ± 1,1; 4,8 ± 1,2 ml) cuando comparados con T2 (3,1 ± 1ml), T3 (2,3 ml) T4 (2,4 ± 1,1 ml) y el control (0,2 ml). En cuanto a la movilidad y tiempo de activación, T1 y T5 presentaron los mejores resultados (90 ± 0% y 54,2 ± 7 s; 90 ± 0% y 52,9 ± 3,8 s, respectivamente). La concentración espermática fue mayor (p<0,05) en T2 y T5 (1,275 ± 322; y 1,261 ± 225 sptz x 103/µl) comparadas con los otros tratamientos. Se concluye que la inducción hormonal con OVAPRIM® combinada con HCG, son efectivas para la producción seminal en la especie.


Abstract The yaque Leiarius marmoratus is specie of native silurid, with great potential for the diversification of the colombian aquaculture; however, the spermiation in captive yet presents difficulties due to the low seminal volume released with traditional induction protocols. In consequence, the aim of this study was to evaluate the effects of five protocols of hormonal induction based on carp pituitary extract (EHC), sGnRHa + domperidone (OVAPRIM®) and human chorionic gonadotropin (GHC) (FERTIVET®) on seminal quality and volume of the specie. Were selected 18 sexually mature males of 54,4 ± 2,2 cm in total length and 1,6 ± 0,1 kg body weight. 5 treatments were evaluated so: T1 : 0,25 ml/kg (0 h) and 1 ml/kg of OVAPRIM® (12 h ); T2: 1 mg/kg of EHC (0 h) and 3 mg/kg of EHC (12 h) ; T3 : single dose of 200 UI/kg HCG; T4: 3 mg/kg of EHC (0 h) and 200 UI /kg GHC (8h) ; T5: 1 ml/kg of OVAPRIM® (0h) and 200 U.I / kg of GHC (8h) ; Control: 1 ml of saline solution. Semen was obtained 6 hours after the last dose hormone. T1 and T5 showed a larger volume (p<0.05) (5,4 ± 1,1, 4,8 ± 1,2 ml) compared to T2 (3,1 ± 1ml), T3 (2,3 ml) T4 (2,4 ± 1.1 ml) and control (0.2 ml). Regarding motility and activation time, T1 and T5 had the best results (90 ± 0 % and 54,2 ± 7 s; 90 ± 0 % and 52,9 ± 3,8 s, respectively). The sperm concentration was higher in (p<0,05) T2 and T5 (1,275 ± 322, ± 225 and 1,261 sptz x 103/ul) compared with the other treatments. In conclusion, hormonal induction with OVAPRIM® combined with HCG, are effective for the seminal production in the specie.


Resumo O yaque Leiarius marmoratus, é uma espécie siluriforme nativa com grande potencial para a diversificação da aquicultura colombiana; No entanto, a spermiação em cativeiro ainda apresenta dificuldades devido ao baixo volume seminal liberado com protocolos de indução tradicionais. Por conseguinte, o objetivo foi avaliar os efeitos de protocolos de indução de cinco hormonais base de extrato de hipófise de carpa (EHC), sGnRHa + domperidona (Ovaprim®) e Gonadotropina coriónica humana (GHC) (FERTIVET®) sobre a qualidade e volume seminal das espécies. Foram Selecionados 18 machos sexualmente maduros de 54,4 ± 2,2 cm de comprimento total e 1,6 ± 0,1 kg de peso corporal. Foram avaliados cinco tratamentos: T1: 0,25 ml / kg (0 h) e 1 ml / kg de OVAPRIM® (12 h); T2: 1 mg / kg de EHC (0 h) e 3 mg / kg de EHC (12 h); T3: dose única de 200 UI / kg de HCG; T4: 3 mg / kg de EHC (0 h) e 200 UI / kg de GHC (8h); T5: 1 ml / kg de OVAPRIM® (0h) e 200 UI / kg de GHC (8h); Controle: 1 ml de solução salina fisiológica. O sêmen foi coletado 6 h após a última dose hormonal foi aplicada. T1 e T5 mostraram um volume maior (p <0,05) (5,4 ± 1,1, 4,8 ± 1,2 ml) quando comparado com T2 (3,1 ± 1 ml), T3 (2,3 ml) T4 (2,4 ± 1,1 ml) e controle (0,2 ml). Em relação à mobilidade e ao tempo de ativação, T1 e T5 apresentaram os melhores resultados (90 ± 0% e 54,2 ± 7 s, 90 ± 0% e 52,9 ± 3,8 s, respectivamente). A concentração de esperma foi maior (p <0,05) em T2 e T5 (1275 ± 322 e 1261 ± 225 sptz x 103 / µl) em comparação com os outros tratamentos. Conclui-se que a indução hormonal com OVAPRIM® combinada com HCG, é efetiva para a produção seminal nas espécies.

3.
Int. j. morphol ; 28(2): 421-426, June 2010. ilus
Artículo en Español | LILACS | ID: lil-577132

RESUMEN

El conocimiento de la morfología y fisiología del testículo, permite generar bases para el entendimiento del comportamiento reproductivo de las especies, ya que diferencias anatómicas están relacionadas con el desempeño reproductivo. Con el fin de contribuir al conocimiento biológico y reproductivo del yaque Leiarius marmoratus, fueron analizadas las características anatómicas, morfológicas y funcionales del testículo en animales durante el estado de madurez reproductiva. En L. marmoratus los testículos están ubicados ventralmente a la vejiga gaseosa y presentan numerosas y largas digitaciones que terminan en un conducto espermático. Microscópicamente se encontró que el testículo es espermatogonial irrestricto de tipo tubular, donde la porción anterior presenta actividad espermatogénica, que disminuye en la porción media y desaparece en la región distal, dando paso a tejido glandular con actividad secretora, que actúa como vesícula seminal. Al interior de cada túbulo testicular, se observan cistos que contienen células espermáticas en el mismo estadio de desarrollo. Basados en las características microscópicas, fueron identificados espermatocitos, espermátides y gran cantidad de espermatozoides libres en el lumen. También fueron identificadas células glandulares, tejido muscular liso y tejido epitelial. En el ducto espermático (región media y distal), se encontró abundante secreción acidofílica que en algunas regiones estaba acompañada de espermatozoides libres.


Knowledge of the morphology and physiology of the testis, leads to generate bases for understanding the reproductive behavior of species, because the anatomical differences are related to reproductive performance. To contribute to biologic and reproductive knowledge of Yaque Leiarius marmoratus, anatomic, morphologic and functional characteristics of the testis in animals in a state of reproductive maturity were analyzed. In L. marmoratus, the testicles are located ventrally to the gas bladder and have many long finger-like structures that finish in spermatic duct. Microscopically it was found that the testis is espermatogonial unrestricted and tubular type, where the anterior portion presented spermatogenic activity, which diminishes in the medium portion and disappears in the caudal portion, leading to tissue with glandular secretory activity serving as a seminal vesicle. Inside each tubule of the testis, there are cysts containing sperm cells within the same stage of development. Based on microscopic features, were identified spermatocytes, spermatids and a large amount of free sperm into the lumen. Glandular cells were also identified, as well as smooth muscle tissue and epithelial tissue. In the spermatic duct (medium and distal portion), acidophilous secretion was abundant and in some regions were accompanied by free spermatozoa.


Asunto(s)
Animales , Bagres , Reproducción , Testículo/anatomía & histología , Testículo/fisiología , Espermatozoides/ultraestructura , Vesículas Seminales/anatomía & histología
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