MR1 blockade drives differential impact on integrative signatures based on circuits of circulating immune cells and soluble mediators in visceral leishmaniasis.

Introduction: Visceral leishmaniasis (VL) is an important tropical and neglected disease and represents a serious global health problem. The initial interaction between the phagocytes and the parasite is crucial to determine the pathogen's capacity to initiate infection and it shapes the subsequent immune response that will develop. While type-1 T-cells induce IL-6, IL-1ß, TNF-α, and IL-12 production by monocytes/macrophages to fight the infection, type-2 T-cells are associated with a regulatory phenotype (IL-10 and TGF-ß) and successful infection establishment. Recently, our group demonstrated the role of an important Th1/Th17 T-cell population, the mucosal-associated invariant T (MAIT) cells, in VL. MAIT cells can respond to L. infantum by producing TNF-α and IFN-γ upon MR1-dependent activation. Objective and methods: Here, we describe the impact of the MR1-blockage on L. infantum internalization on the functional profile of circulating neutrophils and monocytes as well as the impact of the MR1-blockage on the soluble mediator signatures of in vitro whole blood cultures. Results: Overall, our data showed that VL patients presents higher percentage of activated neutrophils than asymptomatic and non-infected controls. In addition, MR1 blockade led to lower TNF-α and TGF-ß production by non-activated neutrophils from asymptomatic individuals. Moreover, TNF-α and IL-10 production by monocytes was higher in VL patients. In the analysis of soluble mediators produced in vitro, MR1-blockade induced a decrease of IFN-γ and an increase of IL-10, IL-27 and IL-33 in the cell cultures of AS group, a cytokine pattern associated with type 2 deleterious response. Discussion and conclusion: These data corroborate the hypothesis that MR1-restricted responses are associated to a protective role during Leishmania infection.

The role of mucosal-associated invariant T cells in visceral leishmaniasis.

Mucosal-associated invariant T (MAIT) cells are restricted by MR1 and are known to protect against bacterial and viral infections. Our understanding of the role of MAIT cells in parasitic infections, such as visceral leishmaniasis (VL) caused by protozoan parasites of Leishmania donovani, is limited. This study showed that in response to L. infantum, human peripheral blood MAIT cells from children with leishmaniasis produced TNF and IFN-γ in an MR1-dependent manner. The overall frequency of MAIT cells was inversely correlated with alanine aminotransferase levels, a specific marker of liver damage strongly associated with severe hepatic involvement in VL. In addition, there was a positive correlation between total protein levels and the frequency of IL-17A+ CD8+ MAIT cells, whereby reduced total protein levels are a marker of liver and kidney damage. Furthermore, the frequencies of IFN-γ+ and IL-10+ MAIT cells were inversely correlated with hemoglobin levels, a marker of severe anemia. In asymptomatic individuals and VL patients after treatment, MAIT cells also produced IL-17A, a cytokine signature associated with resistance to visceral leishmaniasis, suggesting that MAIT cells play important role in protecting against VL. In summary, these results broaden our understanding of MAIT-cell immunity to include protection against parasitic infections, with implications for MAIT-cell-based therapeutics and vaccines. At last, this study paves the way for the investigation of putative MAIT cell antigens that could exist in the context of Leishmania infection.

Parasite load and risk factors for poor outcome among children with visceral leishmaniasis. A cohort study in Belo Horizonte, Brazil, 2010-2011

Clinical and laboratory risk factors for death from visceral leishmaniasis (VL) are relatively known, but quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) might assess the role of parasite load in determining clinical outcome. The aim of this study was to identify risk factors, including parasite load in peripheral blood, for VL poor outcome among children. This prospective cohort study evaluated children aged ≤ 12 years old with VL diagnosis at three times: pre-treatment (T0), during treatment (T1) and post-treatment (T2). Forty-eight patients were included and 16 (33.3%) met the criteria for poor outcome. Age ≤ 12 months [relative risk (RR) 3.51; 95% confidence interval (CI) 1.89-6.52], tachydyspnoea (RR 3.46; 95% CI 2.19-5.47), bacterial infection (RR 3.08; 95% CI 1.27-7.48), liver enlargement (RR 3.00; 95% CI 1.44-6.23) and low serum albumin (RR 7.00; 95% CI 1.80-27.24) were identified as risk factors. qPCR was positive in all patients at T0 and the parasite DNA was undetectable in 76.1% of them at T1 and in 90.7% at T2. There was no statistical association between parasite load at T0 and poor outcome.

Parasite load and risk factors for poor outcome among children with visceral leishmaniasis. A cohort study in Belo Horizonte, Brazil, 2010-2011.

Clinical and laboratory risk factors for death from visceral leishmaniasis (VL) are relatively known, but quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) might assess the role of parasite load in determining clinical outcome. The aim of this study was to identify risk factors, including parasite load in peripheral blood, for VL poor outcome among children. This prospective cohort study evaluated children aged ≤ 12 years old with VL diagnosis at three times: pre-treatment (T0), during treatment (T1) and post-treatment (T2). Forty-eight patients were included and 16 (33.3%) met the criteria for poor outcome. Age ≤ 12 months [relative risk (RR) 3.51; 95% confidence interval (CI) 1.89-6.52], tachydyspnoea (RR 3.46; 95% CI 2.19-5.47), bacterial infection (RR 3.08; 95% CI 1.27-7.48), liver enlargement (RR 3.00; 95% CI 1.44-6.23) and low serum albumin (RR 7.00; 95% CI 1.80-27.24) were identified as risk factors. qPCR was positive in all patients at T0 and the parasite DNA was undetectable in 76.1% of them at T1 and in 90.7% at T2. There was no statistical association between parasite load at T0 and poor outcome.

Performance of a rapid diagnostic test for the detection of visceral leishmaniasis in a large urban setting.

INTRODUCTION: Rapid diagnostic tests (RDTs) may improve the early detection of visceral leishmaniasis (VL), but their real-world performance requires additional study. Therefore, we evaluated the performance of an rK39-based RDT (Kalazar Detect™) for the detection of VL in an endemic, large urban area. METHODS: Data were collected from a registry of rK39 RDT performed at 11 emergency care units in Belo Horizonte, Brazil, and from a national database of reportable communicable diseases of the Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN). RESULTS: The rapid rK39 test was performed in 476 patients, with 114 (23.9%) positive results. The analysis of rK39 RDT performance was based on 381 (80%) cases reported to the SINAN database, of which 145 (38.1%) were confirmed cases. Estimates for sensitivity and specificity were 72.4% (95% CI: 64.6-79%) and 99.6% (95%CI: 97.6-99.9%), respectively. Positive and negative predictive values were estimated at 99.1% (95%CI: 94.9-99.8%) and 85.5% (95%CI: 80.8-89.1%), respectively. In addition, close agreement between the rK39 RDT and indirect immunofluorescence was observed. CONCLUSIONS: In summary, the rK39 RDT showed a high specificity but only moderate sensitivity. In endemic areas for VL, treatment may be considered in cases with clinical manifestations and a positive rK39 RDT, but those with a negative test should be subjected to further investigation.

Performance of a rapid diagnostic test for the detection of visceral leishmaniasis in a large urban setting

Introduction Rapid diagnostic tests (RDTs) may improve the early detection of visceral leishmaniasis (VL), but their real-world performance requires additional study. Therefore, we evaluated the performance of an rK39-based RDT (Kalazar Detect™) for the detection of VL in an endemic, large urban area. Methods Data were collected from a registry of rK39 RDT performed at 11 emergency care units in Belo Horizonte, Brazil, and from a national database of reportable communicable diseases of the Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN). Results The rapid rK39 test was performed in 476 patients, with 114 (23.9%) positive results. The analysis of rK39 RDT performance was based on 381 (80%) cases reported to the SINAN database, of which 145 (38.1%) were confirmed cases. Estimates for sensitivity and specificity were 72.4% (95% CI: 64.6-79%) and 99.6% (95%CI: 97.6-99.9%), respectively. Positive and negative predictive values were estimated at 99.1% (95%CI: 94.9-99.8%) and 85.5% (95%CI: 80.8-89.1%), respectively. In addition, close agreement between the rK39 RDT and indirect immunofluorescence was observed. Conclusions In summary, the rK39 RDT showed a high specificity but only moderate sensitivity. In endemic areas for VL, treatment may be considered in cases with clinical manifestations and a positive rK39 RDT, but those with a negative test should be subjected to further investigation. .

[Notification of healthcare associated infections based on international criteria performed in a reference neonatal progressive care unity in Belo Horizonte, MG]. / Infecções relacionadas à assistência a saúde baseada em critérios internacionais, realizada em unidade neonatal de cuidados progressivos de referência de Belo Horizonte, MG.

OBJECTIVE: To describe occurrence of Healthcare Related Infections in a neonatal unit of public reference service in Belo Horizonte-MG, based on international criteria. METHODS: This is a descriptive study, performed by active searching, in the Progressive Care Unit Neonatal Hospital das Clinicas, Federal University of Minas Gerais (HC / UFMG), from 2008 to 2009. Notification of infections was based on National Healthcare Safety Network (NHSN) criteria. The database and analysis were performed in a internal program. RESULTS: A total of 325 episodes of infection in newborns were notified and overall incidence density of infections was 22.8/1,000 patient-days, with a rate of 36.7% of newborns. Sepsis was the main infection (62.5%) reported. The incidence density of infections was higher in neonates weighing lower than 750g (42.4/1,000 patient-days). There were 18.15 episodes of central venous catheter related sepsis/1,000 central venous catheter-day and 19.29 umbilical catheter related sepsis /1,000 umbilical catheter-days. Microorganisms were isolated in 122 (37.5%) cases of reported infections, mainly defined as Staphylococcus coagulase negative and Staphylococcus aureus (51 cases). Mortality and lethality rates were 4.3% and 17,12%, respectively. CONCLUSION: The use of standardized criteria for reporting infections is necessary for the construction of indicators in neonatology, which are scarce in the country and highlight the need for evaluation of national criteria proposed by National Agency of Sanitary Surveillance (ANVISA).

Infecções relacionadas à assistência a saúde baseada em critérios internacionais, realizada em unidade neonatal de cuidados progressivos de referência de Belo Horizonte, MG / Notification of healthcare associated infections based on international criteria performed in a reference neonatal progressive care unity in Belo Horizonte, MG

OBJETIVO: Descrever a ocorrência de infecções relacionadas à assistência à saúde em uma unidade neonatal de serviço público de referência em Belo Horizonte, MG, baseando-se em critérios internacionais. MÉTODOS: Trata-se de estudo descritivo, realizado por busca ativa, na Unidade Neonatal de Cuidados Progressivos do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais (HC/UFMG), de 2008 a 2009. A notificação de infecções baseou-se nos critérios do National Healthcare Safety Network (NHSN). O banco de dados e análise foi realizado em programa interno do serviço. RESULTADOS: Foram notificados 325 episódios de infecção nos recém-nascidos, com densidade de incidência de 22,8/1.000 pacientes-dia e incidência proporcional geral de infecção de 36,7%. A sepse foi a principal infecção (62,5%) notificada. A densidade de incidência de infecções foi maior em neonatos com peso menor que 750g (42,4/1.000 pacientes-dia). Observou-se 18,15 episódios de Sepse Relacionada a Cateter/1.000 Cateter Venoso Central-dia e 19,29/1.000 episódios de Sepse Relacionada a Cateter Umbilical/1.000 Cateter umbilical-dia. Em 122 (37,5%) casos de infecção notificada houve isolamento de microorganismos, predominando Staphylococcus coagulase negativo e Staphylococcus aureus (51 casos). A mortalidade e letalidade foram 4,3% e 17,12%, respectivamente. CONCLUSÃO: A utilização de critérios padronizados para notificação de infecções é necessária para a construção de indicadores em neonatologia, que são escassos no país e ressaltam a necessidade de avaliação dos critérios nacionais propostos pela Agencia Nacional de Vigilância ...

OBJECTIVE: To describe occurence of Healthcare Related Infections in a neonatal unit of public reference service in Belo Horizonte-MG, based on international criteria. METHODS: This is a descriptive study, performed by active searching, in the Progressive Care Unit Neonatal Hospital das Clinicas, Federal University of Minas Gerais (HC / UFMG), from 2008 to 2009. Notification of infections was based on National Healthcare Safety Network (NHSN) criteria. The database and analysis were performed in a internal program. RESULTS: A total of 325 episodes of infection in newborns were notified and overall incidence density of infections was 22.8/1,000 patient-days, with a rate of 36.7% of newborns. Sepsis was the main infection (62.5%) reported. The incidence density of infections was higher in neonates weighing lower than 750g (42.4/1,000 patient-days). There were 18.15 episodes of central venous catheter related sepsis/1,000 central venous catheter-day and 19.29 umbilical catheter related sepsis /1,000 umbilical catheter-days. Microorganisms were isolated in 122 (37.5%) cases of reported infections, mainly defined as Staphylococcus coagulase negative and Staphylococcus aureus (51 cases). Mortality and lethality rates were 4.3% and 17,12%, respectively. CONCLUSION: The use of standardized criteria for reporting infections is necessary for the construction of indicators in neonatology, which are scarce in the country and highlight the need for evaluation of national criteria proposed by National Agency of Sanitary Surveillance (ANVISA). .

Evolução de parâmetros clínicos e da carga parasitária em sangue periférico de crianças hospitalizadas por leishmaniose visceral

No Brasil, observa-se aumento dos casos de leishmaniose visceral (LV) nos últimos anos, associado à alta letalidade. É necessária a identificação de indicadores sensíveis e específicos que reconheçam precocemente a gravidade e possibilitem intervenção imediata e adequada. O objetivo do presente estudo prospectivo foi correlacionar parâmetros clínicos e laboratoriais e carga parasitária à evolução da LV em crianças. Foram incluídas 48 crianças com diagnóstico de LV, internadas no Hospital Infantil João Paulo II, em Belo Horizonte, de junho de 2010 a junho de 2011.Os pacientes foram avaliados clinicamente e tiveram amostras de sangue periférico coletadas antes (T0), entre 10 e 15 dias (T1) e entre 40 e 60 dias (T2) após início do tratamento. Nestas amostras, a carga parasitária foi quantificada por PCR quantitativa em tempo real (qPCR), sendo o gene alvo a SSU rRNA de Leishmania. Evolução grave foi definida como internação em UTI ou administração de amina vasoativa, ventilação mecânica ou hemotransfusão. As manifestações clínicas mais observadas à admissão foram febre, palidez e hepatosplenomegalia, associado à pancitopenia, elevação das aminotransferases hepáticas e hipoalbuminemia. Apositividade da RIFI e dos testes rápidos Kalazar Detect® e Diamed-IT Leish® foi de 66,7%, 85,4% e 100%, respectivamente.

Observou-se elevada positividade (100%)em exames de PCR convencional em sangue periférico e aspirado de medula óssea. Como tratamento específico, administrou-se Glucantime® em 45,8%,anfotericina B desoxicolato em 35,5%, anfotericina B lipossomal em 8,3% e associação de anfotericina B lipossomal e Glucantime® em 10,4% dos pacientes.Considerou-se que 56,2% das crianças apresentaram evolução grave, mas sem nenhum óbito. Em T2, todos apresentavam melhora clínica. A classificação por critérios de gravidade proposta pelo Ministério da Saúde em 2006 foi aplicada à admissão, não apresentando boa acurácia para detecção de casos com evolução grave. O qPCR apresentou bom desempenho e foi positivo em todas as crianças em T0. Observou-se variação ampla da carga parasitária em T0, não correlacionada a características clínicas e laboratoriais, a critérios de gravidade e escores preditores de óbito à admissão e à evolução grave durante a internação. Redução significativa do número de cópias do fragmento gênico foi constatada em T1 e T2, que não variou de acordo com a medicação usada. Identificaram-se como fatores de risco para evolução grave idade menor do que 12 meses, taquidispneia, infecção,hepatomegalia volumosa, anemia, plaquetopenia e hipoalbuminemia à admissão.

Evolução de parâmetros clínicos e da carga parasitária em sangue periférico de crianças hospitalizadas por leishmaniose visceral / Evolution of clinical parameters and load parasites in the peripheral blood of children hospitalized for visceral leishmaniasis

No Brasil, observa-se aumento dos casos de leishmaniose visceral (LV) nos últimos anos, associado à alta letalidade. É necessária a identificação de indicadores sensíveis e específicos que reconheçam precocemente a gravidade e possibilitem intervenção imediata e adequada. O objetivo do presente estudo prospectivo foi correlacionar parâmetros clínicos e laboratoriais e carga parasitária à evolução da LV em crianças. Foram incluídas 48 crianças com diagnóstico de LV, internadas no Hospital Infantil João Paulo II, em Belo Horizonte, de junho de 2010 a junho de 2011.Os pacientes foram avaliados clinicamente e tiveram amostras de sangue periférico coletadas antes (T0), entre 10 e 15 dias (T1) e entre 40 e 60 dias (T2) após início do tratamento. Nestas amostras, a carga parasitária foi quantificada por PCR quantitativa em tempo real (qPCR), sendo o gene alvo a SSU rRNA de Leishmania. Evolução grave foi definida como internação em UTI ou administração de amina vasoativa, ventilação mecânica ou hemotransfusão. As manifestações clínicas mais observadas à admissão foram febre, palidez e hepatosplenomegalia, associado à pancitopenia, elevação das aminotransferases hepáticas e hipoalbuminemia. Apositividade da RIFI e dos testes rápidos Kalazar Detect® e Diamed-IT Leish® foi de 66,7%, 85,4% e 100%, respectivamente...

Observou-se elevada positividade (100%)em exames de PCR convencional em sangue periférico e aspirado de medula óssea. Como tratamento específico, administrou-se Glucantime® em 45,8%,anfotericina B desoxicolato em 35,5%, anfotericina B lipossomal em 8,3% e associação de anfotericina B lipossomal e Glucantime® em 10,4% dos pacientes.Considerou-se que 56,2% das crianças apresentaram evolução grave, mas sem nenhum óbito. Em T2, todos apresentavam melhora clínica. A classificação por critérios de gravidade proposta pelo Ministério da Saúde em 2006 foi aplicada à admissão, não apresentando boa acurácia para detecção de casos com evolução grave. O qPCR apresentou bom desempenho e foi positivo em todas as crianças em T0. Observou-se variação ampla da carga parasitária em T0, não correlacionada a características clínicas e laboratoriais, a critérios de gravidade e escores preditores de óbito à admissão e à evolução grave durante a internação. Redução significativa do número de cópias do fragmento gênico foi constatada em T1 e T2, que não variou de acordo com a medicação usada. Identificaram-se como fatores de risco para evolução grave idade menor do que 12 meses, taquidispneia, infecção,hepatomegalia volumosa, anemia, plaquetopenia e hipoalbuminemia à admissão...

Pandemia do vírus influenza A H1N1: experiência da abordagem pediátrica no Hospital das Clínicas da UFMG / Pandemic Influenza A H1N1 virus: pediatric experience in the Clinical Hospital of UFMG

Introdução: apresenta-se revisão histórica com as características do vírus influenza A H1N1 e a evolução da pandemia. Objetivos: observar o comportamento da população pediátrica e comparar temporalmente as ações e as recomendações dos protocolos do Ministério da Saúde vigentes em cada momento. Métodos: trata-se de estudo descritivo das ações tomadas pelo Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas para atendimento hospitalar e ambulatorial pediátrico dos casos suspeitos ou confirmados de infecção pelo novo vírus. Resultados: nas publicações mundiais atuais, a infecção pelo vírus influenza A H1N1 na faixa pediátrica mostrou ter mais gravidade nos pacientes com comorbidades. A evolução das crianças que não apresentavam comorbidades foi semelhante à da influenza sazonal. Conclusões: é importante o levantamento de dados brasileiros no preparo para uma possível segunda onda de infecção por esse vírus ou outro mutante. (AU)

Introduction: This is a historical review of the influenza A vírus H1N1 subtype and the pandemic evolution. Objectives: To observe the behavior of the pediatric population and to compare over time the actions and recommendations of the protocols of the Ministério da Saúde in effect at any time. Methods: This is a descriptive study of the actions taken by the Hospital das Clinicas, Federal University of Minas Gerais for hospital and outpatient pediatric cases of suspected or confirmed infection by this new virus. Results: The current publications worldwide show that the infection with influenza A H1N1 in pediatric patients was shown to be more serious in patients with comorbidities. The development of children who had no comorbidities was similar to seasonal influenza. Conclusions: Data collection in Brazil is important in preparation for a possible second infection stage by this virus or other mutants. (AU)

Caso clínico Laura: suspeita de dengue em gestantes

Os médicos Alexandre Moura e Maria Vitória Mourão discutem nesse vídeo sobre o Caso Laura do Curso Atualização do Manejo Clínico da Dengue. Laura é uma gestante que apresenta sinais e sintomas compatíveis com dengue, o que a coloca em um grau de maior risco de evolução desfavorável. Por ser gestante, apresentar quadro ferbil e dor abdominal, Laura já se encaixa no grupo C. Nesses casos, a orientação é a realização de uma anamnese completa e o exame físico. O exame físico deve ser realizado delicadamente, e uma atenção redobrada deve ser dada ao aumento da frequência cardíaca e redução PA, naturais da gravidez mas que também podem indicar sinais de dengue. Nesse recurso, os médicos discutem sobre a conduta e dão dicas de procedimentos e tratamentos para melhor atender situações como esse caso bem como revelam a evolução do quadro e destino de Laura.

Caso clínico Pedro [discussão]

Os médicos Alexandre Moura e Maria Vitória Mourão discutem nesse vídeo sobre o Caso Pedro do Curso Atualização do Manejo Clínico da Dengue. Pedro, uma criança de 3 anos que apresenta quadro de febre, hipoatividade, tosse esporádica e recusa a se alimentar. Os médicos orientam que a anamese completa é de extrema importância nesse caso. O exame físico deve ser realizado e a medida de PA feita em duas posições distintas para que se possa identificar a hipotensão postural. Os médicos destacam a importância do diagnóstico diferencial pois os sintomas da dengue se confundem, por vezes, com outras viroses.