Expression of BCL-2 and bax proteins in breast cancer after in vivo tamoxifen administration / Expressão das proteínas BCL-2 e BAX no câncer de mama após administração in vivo de tamoxifeno

Apesar de apresentarem receptores estrogênicos nas células tumorais, algumas pacientes com câncer de mama não se beneficiam do tratamento com tamoxifeno, medicamento conhecido por interferir no ciclo celular e promover apoptose. Sabendo-se que as proteínas BCL-2 e BAx estão diretamente relacionadas a este processo, é importante compreender quais os caminhos que levam à morte celular que sofrem interferência do tamoxifeno. Amostras pareadas de câncer de mama foram obtidas antes e após tratamento de pacientes previamente, assim randomizadas: grupo controle e grupo de tratamento com tamoxifeno. O grupo de tratamento recebeu tamoxifeno (20 mg/dia) por 14 dias. A identificação imunoistoquímica da expressão de BAX e BCL-2 foi analizada de forma semiquantitativa, considerando o número de células coradas e a intensidade da coloração. Os escores de cada reação foram comparados pré e pós-tratamento, e também em relação ao grupo controle. Das 25 pacientes estudadas, considerando nenhuma exposição ao medicamento, foram encontradas 36 (9/25) e 72% (18/25) de casos positivos para BCL-2 e Bax, respectivamente. Este estudo não encontrou mudanças significativas sobre a expressão das proteínas BCL-2 e BAX, após 14 dias de tratamento com tamoxifeno (p>0,05), comparado ao grupo controle. A expressão das proteínas BCL-2 e BAX também não sofreu mudanças significativas após 14 dias de exposição ao tamoxifeno. Este é um dos poucos trabalhos prospectivos randomizados de estudo in vivo dos efeitos do tamoxifeno na apoptose.

Despite the presence of estrogen receptor in breast cancer cells, some patients do not show benefits on their treatmentwith tamoxifen, which is a medication that interferes on cell cycle promoting apoptosis. Since BCL-2 and BAX proteins are directly linked to this process, it is important to understand which pathways for cell death are related to and interfered by tamoxifen. Paired samples of breast cancer tumors, which were previously obtained before and after tamoxifen therapy were randomly divided in the Control and Treated Patients Groups. The Treated Group received tamoxifen for 14 days (20 mg/day). The immunohistochemical identification of BAX and BCL-2 expression was analyzed in a semi-quantitative scale consideraing the number of positive cells and intensity of staining. The scores of each reaction were compared pre and post-treatment and to the Control Group. Over the 25 patients studied, considering no exposure to the drug, there were 36 (9/25) and 72% (18/25) of positive cases for BCL-2 and BAX, respectively. This study showed no significant changes over BCL-2 and BAX proteins expressions after 14 days of tretament with tamoxifen (p>0,05) compared to the control patients. Expression of BCL-2 and BAX proteins did not suffer statistically significant changes after a 14-day exposure to tamoxifen. This is one of a few prospective randomized double-blind studies about in vivo effects of tamoxifen in apoptosis.

Protein profile of the luteal phase endometrium by tissue microarray assessment.

To investigate the luteal phase endometrial expression of leukemia inhibitor factor (LIF), insulin-like growth factor 1 (IGF-1), progesterone receptor (PR), claudin 4 (CLDN4), vascular-endothelial growth factor receptor 3 (VEGFR-3), bone morphogenetic protein 4 (BMP-4) and citokeratin 7 (CK-7), we obtained luteal phase endometrial samples from 52 women. Samples were dated and integrated using a tissue microarray (TMA). Samples were immunostained for LIF, IGF-1, PR, CLDN4, VEGFR-3, BMP-4 and CK-7. Frequencies of positive expressions at the early, mid and late luteal phases were compared by two proportions test. Concomitant expression of these proteins was assessed with Chi-square or Fischer's test. The frequency of LIF was positively correlated to the frequency of IGF-1 (r = 0.99; p < 0.05) and PR (r = 0.99; p < 0.05), and the correlation between IGF-1 and PR tended to be significant (r = 0.98; p < 0.1). The expression of PR was associated with the absence of CLDN4 (p < 0.001). Thus, expression of LIF, IGF-1 and PR are correlated during the luteal phase, and immunohistochemistry for these proteins might be used to assist in the assessment of endometrial maturation. In addition, the expression of CLDN4 and PR was not concomitant, warranting further investigation on the relationship of their endometrial expression.

Correlação entre COX-2 e ciclina D-1 após administração de tamoxifeno neoadjuvante em curto prazo no tratamento de carcinoma de mama / Correlation of COX-2 and ciclyn D-1 after short-time neoadjuvant tamoxifen on breast cancer

Introdução: O tamoxifeno é a droga utilizada há mais tempo na terapia hormonal do câncer de mama. A superexpressão da ciclina D-1 interfere negativamente no tratamento com tamoxifeno e pode contribuir para predição da falha terapêutica observada em algumas pacientes. COX-2 induz a oxidação de estrogênio a dietilestilbestrol e importante ação genotóxica na mama. Ciclina D-1 e COX-2 ainda não foram descritos associados em relação ao tratamento com tamoxifeno em curto período (14 dias). Objetivo: Avaliar os efeitos da administração neoadjuvante de tamoxifeno em curto prazo (14 dias) sobre a expressão de COX-2 e ciclina D -1 no tratamento do câncer de mama. Métodos: Estudo prospectivo randomizado realizado na disciplina de Mastologia da Unifesp. Vinte e cinco pacientes com carcinoma de mama nos estádios II e III, subdivididas em grupos (controle, n=13, e tratamento, n=12). As amostras de ciclina D-1 e COX-2 foram avaliadas antes e após o tratamento. A avaliação imuno-histoquímica foi realizada por meio de anticorpos policlonais para COX-2 (Novo castra - Clone 4H12) e ciclina D-1 (Novocastra - Clone DCS-6). Os resultados foram classificados de acordo com a fração e intensidade de coloração das células marcadas. Resultados: Observou-se positividade da COX-2 em 56% dos tumores, sem diferença significativa nos dois momentos da amostra (p = 0,39 - Mann Whitney test*1). A expressão da COX-2 não apresentou diferença significativa nas amostras pré e pós nos grupos controle e tratamento. Na amostra total do estudo, observou-se alteração da expressão da ciclina D-1 entre os dois momentos da amostra (teste de McNemar - Diferença = 36.00% (p = 0,06). Entre os grupos controle e tratamento, observou-se que a diferença das medianas de ciclina D-1 entre as amostras pós e pré (pós - pré) demonstrou tendência à significância estatística pelo teste de Mann-Whitney (p = 0,08). Conclusão: O tratamento neoadjuvante com tamoxifeno em curto prazo (14 dias) não foi capaz de modificar...

Introduction: Tamoxifen is the most used drug in the hormonal therapy of the breast cancer. Ciclyn D-J, one CCNDJ gene product's (PRADJ), is essential for the normal lobule-alveolar mammary development and acts in the cellular cycle control. Ciclyn D-I superexpression act negatively in tamoxifen treatment, and may contribute to predict the failure observed in some patients. COX-2 activity induces oestrogen oxidation to dietilstilbestrol and promotes genotoxics effects on the breast. Ciclyn D-1 and COX-2 association had not been described yet to short time tamoxifen treatment. Objective: Evaluate short time (14 days) neoadjuvant tamoxifen effects on COX-2 and ciclyn D-1 expression in breast cancer patients. Methods: Randomized prospective study in the Federal University of Sao Paulo. Twenty five patients with stage II and III breast cancer were included. The groups were control (n = 13) and treatment (n = 12). Ciclyn D-1 and COX-2 samples were evaluated before and after treatment. Imunohistochemistry was performed on the tissue sections using a polyclonal antibody to COX-2 (Novocastra - Clone 4H12) and cyclin D-1 (Novocastra - Clone DCS-6). The results were classified according Already score, based on the intensity and fraction marked cells. Results: COX-2 was positive in 56% of tumors. No significant difference was observed between the two groups (p = 0.39 Mann Whitney test). The Difference of cyclin D-1 medium (post - pre) in the control group was 5, while in the tamoxifen group was 0.5. (p=0.08, Mann Whitney test). Correlation between COX-2 and ciclyn D-1 was expressed by Pearson index (r). In treatment group moderate linear and positive correlation was observed (r = 0.51 - Pearson's index) (p = 0.08). It wasn't observed in control group (r = 0.42) (p = 0.12). Conclusion: Tamoxifen treatment in short time period (14 days) wasn't modified significantly COX-2 and ciclyn D-1 expression.

Endometrial leukemia inhibitory factor as a predictor of pregnancy after in vitro fertilization.

OBJECTIVE: To determine whether there is an association between endometrial expression of leukemia inhibitory factor (LIF) in the luteal phase of the menstrual cycle preceding in vitro fertilization (IVF) and treatment outcome. METHODS: Biopsy specimens from the endometria of 52 women in the luteal phase were immunostained against LIF. Embryo culture and transfer were done according to standard procedures. RESULTS: Clinical pregnancy occurred in 39% of the women following IVF, and strong endometrial immunohistochemical staining for LIF was associated with pregnancy (P=0.01). The women with a strong LIF expression had a 6.4-fold higher chance of becoming pregnant than those with weaker intensities (P=0.005). CONCLUSION: Endometrial expression of LIF during the luteal phase can be used as a predictor of IVF success.

Estudo anatomoclínico do carcinoma de Paget da mama / Anatomicoclinical study of Paget´s carcinoma of the breast

O objetivo deste trabalho foi estudar os múltiplos aspectos do carcinoma de Paget da mama. Patologia especial e rara, foi abordada dos pontos de vista clínico, anatomopatológico e terapêutico, chamando a atenção dos oncologistas. Foram estudados retrospectivamente 98 pacientes no período de janeiro de 1980 a dezembro de 1998. Avaliamos incidência, idade, estadiamento clínico,diagnóstico, anatomia patológica e tratamento.Dos 6.303 casos de câncer de mama tratados, a incidência do carcinoma de Paget foi de 1,55 por cento, sendo 97 do sexo feminino e um do sexo masculino. A idade variou entre 20 e 90 anos, com média de 56,9 anos; o pico mais alto de freqüência foi observado na faixa etária de 50 a 60 anos(32,6 por cento). O estadiamento clínico adotado foi baseado no sistema TNM, de acordo com a presença ou a ausência de lesão cutânea e com o tamanho do tumor quando presente. O diagnóstico foi sempre feito atavés de biópsia das lesões do complexo areolomamilar. A célula de Paget é descrita como célula grande de origem glandular, citoplasma abundante, vacuolizado, descorado e pálido; o núcleo é grande, vesicular, hipercromático, proeminente e irregular em forma e tamanho, com variável número de mitoses, achados que evidenciam o caráter maligno dessas células. Dos 98 casos estudados, 77(78,57 por cento)evidenciam a doença e 21 pacientes(21,42 por cento) eram portadoras de carcinoma de Paget subclínico. Apresentavam somente lesão cutânea no complexo areolomamilar 31 casos (31,63 por cento) e 67(68,37 por cento)apresentavam tumor palpável. A metástase axilar foi observada em dois casos(2,04 por cento)no grupo que apresentava só lesão cutânea. No grupo com tumor, foi observada em 53,73 por cento dos casos. Quanto ao tratamento, a cirurgia é a melhor terapêutica, sendo a mastectomia do tipo Patey-Merola a preferida pela maioria dos autores. Radioterapia, quimioterapia e hormonoterapia são utilizadas como tratamento complementar, quando a opção é a cirúrgica conservadora e nos casos avançados. A extensão da cirurgia depende de cada situação clínica e estadiamento, sendo a presença ou a ausência de tumor palpável o parâmetro discriminador. O carcinoma de Paget da mama, embora de baixa incidência, possui grande importância na oncologia mamária. Apesar da exuberância dos sinais clínicos, há inaceitável retardamento no diagnóstico. A maioria das lesões está sempre associada ao carcinoma ductal infiltrativo

Estudos das técnicas para pesquisa do linfonodo sentinela no câncer de mama / Study of the techniques for the sentinel limph node in breast cancer

A linfadenectomia axilar no carcinoma de mama é válida, somente se houver comprometimento linfonodal. Os métodos para se predizer o "status" linfonodal eram, na maioria dos casos, invasivos. A pesquisa do linfonodo sentinela tem apresentado alto valor preditivo negativo (VPN). Conhecer sua resprodutividade e limitaçöes é importante para sua aplicabilidade. O objetivo: estudo de várias técnicas para a pesquisa do linfonodo sentinela (LS). Metodologia: foram estudados 81 casos de carcinoma de mama com axila clinicamente negativa, e em 36 casos foi usada a técnica com corante, em 6 casos a técnica "probe" e em 39 a asscociaçäo das duas técnicas. Realizou-se linfadenectomia axilar (LA) em todos os casos, menos em 2. Resultados: "o LS foi encontrado em 74 casos e destes 35 apresentaram-se com metástase axiliares. Houve 2 casos de falso-negativo. Dos 36 casos estudados pelo método com corante, encontrou-se o LS em 32, dos quais 21 apresentavam metástase axiliares; houve um caso falso-negativo. Dos 6 casos com método do "probe", encontrou-se o LS em todos, havia dois com comprometimento axiliar e näo houve falso-negativo. Dos 39 casos estudados com associaçäo dos 2 métodos, encontrou-se o LS em 36. Em 34 destes, näo houve caso falso-negativo. Nos outros 2 casos, houve discordância dos 2 métodos; destes, um era falso-negativo (estes 2 casos emcontravam-se nos primeiros 6 com o uso do "probe"). Conclusäo: o VPN do LS é muito alto nas diversas técnicas e será usado como método para se evitar a LA em determinados casos