RESUMEN
OBJETIVO: Adaptación de un método de ultracentrifugaciónen gradiente de densidad isopícnico para la separación analíticade de las tres principales lipoproteínas de interés clínico.MATERIAL Y MÉTODOS: Se procesaron 337 muestras, enuna ultracentrífuga Beckman L-80 con un rotor Vti 65.2, a416.000g durante 55 minutos a 10ºC. Los tubos de ultracentrifugación(5.1ml), se prepararon introduciendo 1ml de suero,previamente ajustado a una densidad de 1.210 Kg/l con BrK, yse rellenaron con una solución de BrK de densidad 1.006Kg/l.RESULTADOS: La fracción de HDL se recogió en los primeros1.7 ml, la de LDL en los siguientes 2.5 ml y la de VLDL enlos últimos 0.9 ml del volumen total. Los CV intraensayo oscilaronentre 0.71 y 11.41% y los CV interensayo entre 1.53 y11.11%. Los coeficientes de correlación fluctuaron entre0.707 y 0.982.CONCLUSIONES: El método de ultracentrifugación en gradientede densidad isopícnico propuesto es sencillo y fiable,permite separar las tres principales lipoproteínas (HDL, LDL yVLDL) y cuantificar independientemente en cada una de ellascolesterol y triglicéridos, en un único paso, en sólo 55 minutosy con un volumen de muestra mínimo (1ml). Lo consideramosun método útil cuando los métodos directos no son suficientementeexactos y cuando se necesita cuantificar los triglicéridos
OBJECTIVE, Adaptation of the ultracentrifugation metodologyin isopicnic density gradient with a vertical rotor to get theanalytical isolation of the three main lipoproteins for clinicaluse.DESIGN AND METHOD, Blood samples were obtained from337 subjects admitted at our Hospital. Sera were adjusted to1.210 kg/L density with KBr and filled with a 1.006 kg/L densityKBr solution. Tubes were processed in L-80 Beckman ultracentrifugeusing a VTi 65.2 rotor at 416 000g for 55 min at10ºC. RESULTS, HDL fraction was collected from initial until upto 1.7 mL, LDL fraction in the following 2.5 mL and VLDL fractionin the last 0.9 mL.The intraassay CVw were 0.71-11.41% and the interassayCVb, 1.53-11.11%. The correlation coefficients fluctuatedbetween 0.707-0.982.CONCLUSIONS, We propose a modified isopicnic densitygradient ultracentrifugation method that is both an easy and reliable technique, which separates and quantifies cholesteroland triglycerides in the three main lipoproteins (HDL, LDL andVLDL) independently, in one step, in a short time (55 min) andwith a minimal sample volume (1 mL).Therefore it is an useful method when direct methods are notaccurate enough and when quantification of triglycerides is needed
