The modified method of luxol fast blue for paraffin-embedded myelin sheath staining / El método modificado de luxol fast blue para la tinción de mielina fijada en parafina

SUMMARY: Histological techniques are the study of animal and human tissues through staining and examining them under a microscope. To demonstrate the axonal degeneration and demyelination in histological studies, the Luxol Fast Blue staining is gold standard techniques. In this study, a new histochemical method based on modified Luxol Fast Blue for the staining of the myelin sheath in sciatic nerve tissues described. The sciatic nerves of rats were removed and then the sciatic nerve was immersed in 10 % formaldehyde for one week and embedded in paraffin block. Next, thin sections (5 µm) were cut, using a microtome and stained with conventional and modified Luxol Fast Blue. Our results showed that a new method of modified Luxol Fast Blue staining can accurately identify the myelin in the sciatic nerve fibers. The current study showed that the Luxol Fast Blue combination with Light Green has a good effect on myelin coloration, and the results of this study are comparable to LFB combination with Sirius red.

RESUMEN: Las técnicas histológicas son el estudio de tejidos animales y humanos mediante tinción y examen bajo un microscopio. Para demostrar la degeneración axonal y la desmielinización en estudios histológicos, la tinción Luxol Fast Blue es una técnica estándar de oro. En este estudio, se describe un nuevo método histoquímico basado en Luxol Fast Blue modificado para la tinción de mielina en los tejidos del nervio ciático. Se seccionaron los nervios ciáticos de ratas y luego el nervio ciático se sumergió en formaldehído al 10 % durante una semana y se fijó en bloque de parafina. Posteriormente, se cortaron secciones delgadas (5 µm) usando un microtomo y se tiñeron con Luxol Fast Blue convencional y modificado. Nuestros resultados mostraron que un nuevo método de tinción Luxol Fast Blue modificado puede identificar con precisión la mielina en las fibras del nervio ciático. El estudio actual mostró que la combinación Luxol Fast Blue con Light Green es un buen efecto sobre la coloración de mielina, y los resultados de este estudio son comparables a la combinación LFB con Sirius red.

Impairment induction by axotomy in motor functional and histological anterior horn of spinal cord structure / Inducción del deterioro por axotomía en la estructura motora funcional e histológica del asta anterior de la médula espinal

We have surveyed the motor changes in rats subjected to sciatic nerve axotomy. The rats were divided into two groups, each one consisting of ten animals, which underwent the following intervention: The first group (control): healthy rats without any injuries and experimental group: rats with injured sciatic nerve without treatment. at 12 weeks, the L4 and L5 spinal cord segments were removed. We evaluated nerve function using muscle electromyography (EMG) activity and sciatic function index (SFI) simultaneously with histological spinal cord analyses by stereological methods at 12 week. After nerve injury presented gross locomotor deficits at week 12. We also found that the volume of the anterior horn of spinal cord and total number of motor neurons were decreased after nerve axotomy (p<0.05). In conjunction, these results indicate that peripheral nerve injuries have more severe consequences on hind limb motor output.

En este estudio se examinaron los cambios motores en ratas sometidas a axotomía del nervio ciático. Las ratas se dividieron en dos grupos diez animales. El primer grupo (control) eran ratas sanas sin lesiones, y el grupo experimental consistió en ratas con nervio ciático lesionado sin tratamiento. A las 12 semanas, los segmentos de la médula espinal L4 y L5 fueron removidos. Se evaluó la función nerviosa mediante electromiografía muscular (EMG) y el índice de función ciática (IFC), simultáneamente con análisis histológicos de la médula espinal mediante métodos estereológicos. A las 12 semanas de la lesión nerviosa presentó déficit locomotor grueso. Además, se observó que el volumen del asta anterior y el número total de neuronas motoras disminuyeron después de la axotomía nerviosa (P <0,05). En conjunto, estos resultados indican que las lesiones de los nervios periféricos determinan graves consecuencias de la función motora de los miembros posteriores.

Tribulus terrestris hydroalcoholic extract effect on cisplatin-induced apoptosis in mice kidney / Efecto del extracto hidroalcohólico de Tribulus terrestris sobre la apoptosis Inducida por cisplatino en el riñón de ratones

Cisplatin (EBEWE Pharma, Unterach, Austria) is an anti-cancer drug used in chemotherapy. One of the limiting major side effects of cisplatin is nephrotoxicity. Tribulus terrestris (TT) has been used as an synthetic or herbal protective agents for kidney disorders. The present study amid to investigate the Tribulus terrestris Hydroalcoholic extract effect on cisplatin-induced apoptosis in mice kidney. Male adult mice (n= 30) were divided into control group and 4 experimental groups (n= 6). Control group received saline, the first experimental group received cisplatin (5.5 mg/kg) and other three experimental groups received cisplatin (5.5 mg/kg) and different doses of hydroalcoholic extact of TT (100, 300 and 500 mg/kg i.p) respectively. The kidneys were removed after 4 days of injections, and TUNEL assay on mice's kidneys were performed. Weights of body and kidneys and apoptotic index were assessed. Data analysis was performed using one-way ANOVA followed by Tukey's post hoc test. The results showed that cisplatin lead to a reduction in the weight of body and kidney (P <0.01), and increased apoptotic index significantly compared to the control group (P <0.001), while in treated groups with TT, the weights of body and kidney were significantly higher compared with cisplatin group, but apoptotic index did not show significant differences. These parameters reached normal range after administration of fruit extracts of TT for 4 days. The study demonstrates that extract of TT could have protective effect on cisplatin- induced apoptosis of kidney. This may be related to the presence of antioxidant components acting via a multitude of central and peripheral mechanisms.

El cisplatino (EBEWE Pharma, Unterach, Austria) es un medicamento contra el cáncer utilizado en quimioterapia. Uno de los principales efectos secundarios limitantes del cisplatino es la nefrotoxicidad. Tribulus terrestris (TT) ha sido utilizado como agente protector sintético o herbal para los trastornos renales. El objetivo fue investigar el efecto del extracto hidroalcohólico de TT sobre la apoptosis inducida por cisplatino en el riñón de ratones. Se utilizaron ratones adultos machos (n= 30), que fueron divididos en 4 grupos, un control y tres grupos experimentales (n= 6). El grupo control recibió solución salina; el primer grupo experimental recibió cisplatino (5,5 mg/kg) y los otros tres grupos experimentales recibieron cisplatino (5,5 mg/kg) con diferentes dosis de extracto hidroalcohólico de TT (100, 300 y 500 mg/kg vía ip) respectivamente. Los riñones fueron retirados después de 4 días de aplicadas las inyecciones, y se realizó el ensayo TUNEL en los riñones. Se evaluó el peso corporal de los ratones, el peso de los riñones y el índice de apoptosis. El análisis de datos se realizó mediante ANOVA de un factor seguido por la prueba post hoc de Tukey. Los resultados mostraron que el cisplatino con plomo provocó una reducción en el peso corporal y el riñón (P <0,01) y un aumento significativo del índice de apoptosis en comparación con el grupo control (P <0,001), mientras que en los grupos tratados con TT, los pesos corporales y de los riñones fueron significativamente mayores en comparación con el grupo de cisplatino, pero el índice de apoptosis no mostró diferencias significativas. Estos parámetros alcanzaron niveles normales después de la administración de extracto de TT durante 4 días. El estudio demuestra que el extracto de TT podría tener un efecto protector sobre la apoptosis inducida por cisplatino en el riñón, que podría estar relacionado con la presencia de componentes antioxidantes que actúan a través de múltiples mecanismos centrales y periféricos.

Tribulus terrestris hydroalcoholic extract administration effects on reproductive parameters and serum level of glucose in diabetic male rats / Efectos de la administración del extracto hidroalcohólico tribulus terrestris sobre los parámetros reproductivos y el nivel sérico de glucosa en ratas macho diabéticas

Usage of medicinal plants for the treatment of diseases is a remarkable strategy considered in both clinical and experimental studies. This study was conducted to evaluate the effect of Tribulus terrestris hydroalcoholic extract administration on the serum level of glucose and reproductive parameters in diabetic male rats. In this experimental study, 30 adult male Wistar rats (200­250 g) were divided into 5 groups (n= 6). Diabetes was induced by a single intraperitoneal injection of 50 mg/kg streptozotocin. Experimental groups received daily Intraperitoneal injection of the extract (100, 250 and 500 mg/kg) since one week after inducing diabetes for two weeks. At the end of the experiment, the serum levels of testosterone and glucose were examined by ELISA and Glucodr devices respectively. Sperm parameters including morphology, count and motility were evaluated from the cauda epididymis. The diameters of seminiferous tubules were assessed based on 5 µm paraffin section of H&E stained section of testes. The data were evaluated by One Way ANOVA followed by post-hoc test using SPSS software. In T. terrestris extract groups, there were significant reductions in the levels of blood glucose while increased sperm motility, sperm count and seminiferous tubules diameter, percentage of sperms with normal morphology, level of testosterone hormone and final body weight compared with diabetic group (p <0.001). In conclusion, T. terrestris hydroalcoholic extract decreases serum level of glucose and diminishes the side effects of diabetes on male reproductive system showing by increasing in the serum level of testosterone, improving sperm parameters and returning the seminiferous tubules to normal diameter by a dose dependent manner.

El uso de plantas medicinales para el tratamiento de enfermedades es una importante estrategia considerada en estudios clínicos y experimentales. El objetivo fue evaluar el efecto de la administración de extracto de Tribulus terrestris hidroalcohólico en el nivel sérico de glucosa y los parámetros reproductivos en ratas macho diabéticas. En este estudio experimental, se dividieron 30 ratas Wistar (200­250 g) macho adultas, en 5 grupos (n= 6). Se indujo diabetes por una sola inyección intraperitoneal (i.p.) de 50 mg/kg de estreptozotocina. Los grupos experimentales recibieron inyección i.p diaria del extracto (100, 250 y 500 mg/kg) una semana después de la inducción de la diabetes durante dos semanas. Al final del experimento, los niveles séricos de testosterona y de glucosa se examinaron por ELISA y el dispositivos Glucodr, respectivamente. Además, fueron evaluados los parámetros de morfología, conteo y motilidad espermática. Los diámetros de los túbulos seminíferos de los testículos se evaluaron sobre la base de secciones de parafina de 5 mm teñidos con H&E. Los datos fueron evaluados por ANOVA de una vía seguido de prueba post-hoc utilizando el programa SPSS (versión 20). En los grupos tratados con extracto de T. terrestris hubo una reducción significativa en los niveles de glucosa en la sangre, mientras que se observó un aumento en el recuento y motilidad espermática, el diámetro de los túbulos seminíferos, el porcentaje de espermatozoides con morfología normal, el nivel de testosterona y el peso corporal final de las ratas en comparación con el grupo de ratas diabéticas (p <0,001). En conclusión, el extracto de T. terrestris hidroalcohólico disminuye los niveles séricos de glucosa y los efectos secundarios de la diabetes en el sistema reproductivo mediante el aumento de los niveles séricos de testosterona, mejorando los parámetros de los espermatozoides y la restitución a diámetro normal de los túbulos seminíferos dependiendo de la dosis.

The effects of age and sex on brain volume / Efectos de la edad y del sexo en el volumen del cerebro

Age is associated with substantial macrostructural brain changes. While some recent CT scan studies have reported larger age affects in men than women, others find no sex differences, as brain morphometry is a potentially important tool in diagnosis and monitoring of age-related neurological diseases. A study was conducted on 147 Arakian healthy aged participants in the Department of Radiology, Valie asr Hospital, Arak city. Gray matter (GM), white matter (WM) and CSF was evaluated based on cranial CT scan images. Both males and females subjects were divided into four age groups. In this study, the subjects were 51.7% (76) male and 48.3% (71) female. Frequency of groups showed that the common types were in the 4th group of ages (65.1­80 years) with 44%. Although, in 147cases, all parameters were greater in male than female but no significant differences were seen. The significant differences between the two sexes were in length of cranium and width of cranium. There was significant difference between age groups in male and female. In male groups no significant difference was shown between them, but these were considered statistically significant in female groups in width of cranium (p=0.017), width of gray matter (p=0.008), length of cranium (p=0.052), length of white matter (P=0.024), distance of bicorn anterior (p=0.013), width of white matter in bicoronal Anterior (p=0.046), but in male age groups showed no statistically significant difference. We found changing in brain volume relationship with ageing in population, but this change in female is greater than male.

La edad se asocia con cambios cerebrales sustanciales. Mientras que algunos estudios recientes han reportado que la edad afecta a hombres más que a mujeres, otros no encuentran diferencias sexuales. La morfometría cerebral es una herramienta potencialmente importante en el diagnóstico y seguimiento de enfermedades neurológicas relacionadas con la edad. Se realizó un estudio en 147 participantes sanos de edad avanzada en el Departamento de Radiología, Hospital de Valie asr, ciudad de Arak. La sustancia gris (SG), sustancia blanca (SB) y líquido cerebro-espina (LCR) fueron evaluados en base a imágenes craneales de escáner CT. Los sujetos, hombres y mujeres fueron divididos en cuatro grupos etarios. De los sujetos incluidos en el estudio, 51,7% (76) fueron hombres y 48,3% (71) mujeres. La frecuencia de los grupos mostró que los tipos más comunes estaban en el cuarto grupo etario de (65,1 a 80 años) con un 44%. En 147 casos todos los parámetros fueron mayores en hombres que en mujeres, sin embargo, no se observaron diferencias significativas. Entre los dos sexos las diferencias significativas estaban en longitud de cráneo y ancho del cráneo. No hubo diferencias significativas entre los grupos etarios. En los grupos de hombres, no se demostró ninguna diferencia significativa, pero éstos fueron considerados estadísticamente significativos en ancho de cráneo (p=0,017), ancho de cráneo de las mujeres, la sustancia gris (p=0,008), longitud del cráneo (p=0,052), longitud de la sustancia blanca (P=0,024), distancia anterior del bicornio (p=0,013) y el ancho de la sustancia blanca bicoronal anterior (p=0,046). Sin embargo en los grupos de edad de sexo masculino no se observaron diferencias estadísticamente significativas. Encontramos cambios en relación al volumen cerebral con el envejecimiento de la población; este cambio en el sexo femenino es mayor que el masculino.

Characterization of occipital condyle and comparison of its dimensions with head and foramen magnum circumferences in dry skulls of Iran / Caracterización del cóndilo occipital y comparación de sus dimensiones con la circunferencia de la cabeza y foramen magno en cráneos secos de Irán

The occipital condyle (OC) is an important area in craniovertebral surgery, but its anatomical features and the procedures concerning the OC have not been studied in detail yet. The aim of this study was to revisit the anatomy of the occipital condyle region and assess variations of the surrounding structures. Observations, on fifty dry skulls (dried specimens, 100 sides) and determined of condyle measurements. The mean length, width and height of occipital condyle were found to be 19.43±3.27 (right), 19.28±3.57 (left), 9.21±1.97 (right) 9.40±1.87 (left), 7.21±1.9 (right) and 7.33±2.74 mm (left), respectively. There were significant differences between right and left occipital condyles. The mean anterior intercondylar distance and posterior intercondylar distance were measured as 15.39±7 and 35.60±8.4 mm, respectively. Variations of occipital condyle shapes were kidney like (34.4%), S-like (25.6), triangular (13.3%) oval (10.0%), ring like (7.8%), eight like (6.7%) and deformed (2.2%) respectively. The condylar fossa presented in 60% of dry skull, 24% in right side and 36% in left side and also the condylar foramen was found in 60% of the specimens studied. There was no relation between the circumference of the head and the length of OC but we found relation between the circumference of the head and the width of OC (0.527) and foramen magnum circumference (0.433). The OC and FM are the main bony structures obstructing the surround of the brainstem. The differences in the size and the shape of occipital condyle have some differences and also similarities among racial subgroups. The posterior condylar vein may act asymmetrically. The correlation of the size of foramen magnum with the width of occipital condyles shows the importance of occipital condyle for lateral movements besides antero-posterior movements.

El cóndilo occipital (CO) es una estructura relevante en la cirugía craneovertebral, pero sus características anatómicas y procedimientos quirúrgicos relativos al CO no se han estudiado detalladamente. El objetivo fue revisar la anatomía de la región del CO y evaluar las variaciones de sus estructuras circundantes. Fueron observados 50 cráneos secos (100 lados) y se determinaron las mediciones del CO. La longitud media según lado fue 19,43±3,27 mm (derecho) y 19,28 ± 3,57 mm (izquierdo), el ancho medio fue 9,21±1,97 mm (derecho) y 9,40±1,87 mm (izquierda) y la altura media fue 7,21±1,9 mm (derecho) y 7,33±2,74 mm (izquierdo). Hubo diferencias significativas entre los CO derechos e izquierdos. La distancia intercondílea anterior y posterior media fue de 15,39±7 mm y 35,60±8,4 mm, respectivamente. La variación de formas del CO fue de riñon (34,4%), de S (25,6%), triangular (13,3%), oval (10,0%), de anillo (7,8%), de ocho (6,7%) y deformada (2,2%). La fosa condilar se observó en el 60% de los casos, 24% en lado derecho y 36% en el izquierdo; también el foramen condilar se encontró en el 60% de los casos. No se encontró relación entre la circunferencia de la cabeza y la longitud del CO, pero encontramos relación entre la circunferencia de la cabeza y el ancho del CO (0,527) y circunferencia del foramen magno (0,433). El CO y foramen magno son las principales estructuras óseas que constribuyen a rodear y proteger el tronco cerebral. Las diferencias en el tamaño y forma del CO tiene algunas diferencias y similitudes entre subgrupos raciales. La vena condilar posterior puede presentarse de manera asimétrica. La correlación del tamaño de foramen magno con el ancho de los CO muestra su relevancia en movimientos laterales y anteroposteriores.